超声背向散射积分技术评价诊断超声结合微泡造影剂助溶静脉血栓的实验研究

目的应用超声背向散射积分技术（integrated backscatter,IBS）对兔股静脉溶栓后血栓状态进行检测,评价诊断超声结合微泡造影剂的助溶作用。方法健康家兔32只,建立兔右股静脉完全梗阻型血栓模型,将其分为单纯尿激酶组（UK组）8只,超声结合微泡造影剂组（US＋MC组）8只,超声结合微泡造影剂＋尿激酶组（US＋MC＋UK组）8只,对照组8只。使用HP5500型彩色超声诊断仪,检测溶栓后管腔内不同回声血栓块超声背向散射积分（IBS）值及管腔外膜IBS值,并计算管腔内血栓块IBS值与管腔外膜IBS值比值,即校正IBS值（IBS%）。并进行组间比较。取各组溶栓后的兔股静脉标本进行免疫组化检测,观察管腔内血栓溶解情况。结果溶栓后,US＋MC＋UK组管腔回声为无回声,其IBS%值0.29±0.05;UK组以弱回声为主的混合回声,IBS%值为0.58±0.03;US＋MC组以中等回声为主的混合回声,IBS%值为0.89±0.06;对照组管腔呈强回声,其IBS%值1.23±0.17;US＋MC＋UK组IBS%值显著低于各组（P〈0.05）;UK组、US＋MC组均低于对照组（P〈0.05）,两组间亦有统计学差异。结论IBS技术可以对溶栓后管腔内的不同回声进行定量分析,其结果表明诊断超声结合自制微泡造影剂对兔股静脉血栓有很好的助溶效应。     

双氢青蒿素和顺铂对人肺腺癌A549细胞及其耐顺铂细胞株A549／CDDP的体外作用

目的：观察双氢青蒿素和顺铂在体外对A549及A549／CDDP细胞的作用，分析双氢青蒿素抗肺癌和逆转耐药效果。 方法：①实验于2003—01／2003-09在解放军第四军医大学口腔医院临床药理基地实验室完成。②人肺腺癌A549细胞系亲代及耐顺铂细胞系A549／CDDP在含100以小牛血清，含青链霉素各1×10^5U／L的RPMI-1640培养液中，37℃，体积分数0．05CO2饱和湿度条件下培养．2．5g／L胰蛋白酶消化传代。③细胞增殖及增殖抑制实验采用四甲基偶氮唑盐检测法：取对数生长期A549和A549／CDDP细胞接种于96孔培养板中，每孔细胞数2×1护培养12h后加入适当浓度药物，顺铂浓度0．032-10.000mg／L，单药组双氢青蒿素浓度3.2～1000nmol／L,联用组双氢青蒿素取100，320nmol／L2个浓度与顺铂联用，序贯治疗组先用双氢青蒿素100nmol／L处理24h后换液加顺铂，每组样本5个复孔，对照组加入等体积磷酸盐缓冲溶液，每孔中加入四甲基偶氮唑盐溶液（5g／L）20μL，在酶联免疫检测仪上测定各孔吸光度似值），采用直线回归法计算药物的半数抑制浓度。④计量资料差异性比较采用方差分析。 结果：①双氢青蒿素对A549细胞和A549／CDDP细胞的药物半数抑制浓度分别为（0.230±0.011）和（0．321±0．018）μmoL／L；顺铂对A549细胞和A549／CDDP细胞药物半数抑制浓度分别为（0．270±0.014），（5．703±0.026）mg／L。②双氢青蒿素100，300nmol／L联合用药组顺铂对A549／CDDP细胞的顺铂半数抑制浓度明显低于对照组[（2.255±0.114），（5.703±0.126）mg／L,P〈0.01]。③序贯治疗组对A549／CDDP细胞的顺铂半数抑制浓度明显低于对照组[（2.523±0.115），（5.703±0.126）mg/L,P〈0.01]。 结论：①双氢青蒿素具有抗癌作用，并与顺铂有协同作用。②体外实验条件下，双氢青蒿素可抑制肺癌细胞生长，并且逆转A549／CDDP细胞对顺铂的耐药。     

高强度超声治疗对荷U14宫颈癌小鼠脾细胞Th1、Th2亚群细胞因子mRNA表达水平的影响

目的探讨高强度超声治疗对荷U14宫颈癌小鼠脾细胞Th1、Th2亚群细胞因子mRNA表达水平的影响。 方法实验分为4组：HIU治疗组（A）、手术治疗组（B）、荷瘤对照组（C）及正常对照组（D）。于种植肿瘤后7 d,分别接受相应治疗;17 d,制备并培养小鼠脾淋巴细胞,应用逆转录多聚酶链式反应（RT-PCR）技术检测A、B、C、D各组小鼠脾淋巴细胞细胞因子mRNA的表达水平。 结果A组小鼠脾淋巴细胞IL-2 mRNA相对含量（0.752±0.101）较B（0.430±0.064）、C（0.188±0.049）、D（0.392±0.053）各组明显增高（P〈0.05）。A组小鼠脾淋巴细胞IFN-γmRNA相对含量（0.507±0.076）较B（0.233±0.045）、C（0.087±0.010）、D（0.218±0.049）各组明显增高（P〈0.05）;A组小鼠脾淋巴细胞IL-4 mRNA相对含量（0.213±0.049）较C（0.745±0.067）、D（0.310±0.064）各组明显降低（P〈0.05）;A组小鼠脾淋巴细胞IL-10 mRNA相对含量（0.093±0.032）较B（0.231±0.053）、C（0.657±0.111）、D（0.308±0.086）各组明显降低（P〈0.05）。 结论HIU固化的U14肿瘤细胞可能激活机体免疫功能,促使Th2占优势向Th1占优势逆转,从而提高小鼠抗肿瘤免疫功能,抑制肿瘤生长。     

卵巢癌患者手术前后外周血Th1/Th2细胞因子表达

目的评价卵巢癌患者外周血Th1/Th2细胞因子表达水平。方法流式细胞微球阵列检测42例卵巢癌患者手术前后和20例健康女性外周血Th1类细胞因子（IFN-γ,IL-2）和Th2类细胞因子（IL-4,5,10）的表达水平。结果与正常对照组相比,卵巢癌Th2类细胞因子（IL-4,5,10）均高于正常对照组,尤其是IL-10明显高于正常对照组（6.09±4.01vs.3.26±1.38,t=4.34,P〈0.05）。术后卵巢癌Th1类细胞因子（IFN-γ,IL-2）均较术前有所下降,但差异无统计学意义（t分别=-0.82、0.54,P均〉0.05）;术后Th2类细胞因子（IL-4,5,10）均较术前有所下降,尤其是术后IL-10水平明显低于术前水平（4.84±2.75vs.6.09±4.01,t=4.83,P〈0.05）。结论卵巢癌患者Th1细胞向Th2细胞漂移,手术治疗能逆转其漂移状态。Th1/Th2细胞因子检测可为卵巢癌的免疫治疗提供参考依据。     

Evn一50增强人卵巢癌顺铂耐药株COCl／DDP对顺铂敏感性的研究

目的 观察黄荆子乙酸乙酯提取物（Evn-50）和顺铂（DDP）在体外对人卵巢癌耐顺铂细胞株COC1/DDP凋亡的影响,探讨Evn-50提高人卵巢癌耐顺铂细胞株COC1/DDP对DDP敏感性的机制.方法 运用MTT、FCM、Hoechst33258染色法、Western blot等方法,观察Evn-50增强DDP抑制COC1/DDP细胞增殖作用和此过程中COC1/DDP细胞凋亡,caspase-3蛋白、增殖细胞核抗原（PCNA）及其泛素化修饰蛋白（Ubi-PCNA）表达的改变.结果 Evn-50不仅增强DDP对COC1/DDP细胞的抑制增殖作用,也增强DDP对COC1/DDP细胞的凋亡作用,同时caspase-3蛋白表达增加（P〈0.05）;而Evn-50（20 μg/ml）组与空白对照组相比PCNA蛋白表达下调（P〈0.05）,Evn-50与DDP合用组与DDP单药组均出现了Ubi-PCNA蛋白表达,Evn-50与DDP合用组与DDP组比较,Ubi-PCNA蛋白表达下调（P〈0.05）.结论 Evn-50可能通过减少PCNA表达,使DDP诱导的PCNA泛素化水平下降,从而逆转DDP耐药,最终通过激活caspase-3蛋白高表达,启动caspase级联反应,增强DDP对人卵巢癌DDP耐药细胞株COC1/DDP的凋亡作用.     

慢性再生障碍性贫血患者T淋巴细胞亚群和粒-单核细胞集落形成单位的检测

目的探讨慢性再生障碍性贫血（CAA）发病的免疫因素，为CAA的临床治疗提供依据。方法采用骨髓细胞半固体集落培养法检测粒一单核细胞集落形成单位（GM—CFU），同时用流式细胞仪检测T淋巴细胞亚群。结果CAA骨髓细胞培养GM—CFU产率明显少于正常对照组，（7．9±0．5）个／ml vs （88．7±2．7）个／ml（P〈0．01）；CAA骨髓细胞加正常血清培养GM-CFU的产率与正常对照组比较差异无统计学意义，（82．4±2．6）个／ml vs （88．7±2．7）个／ml（P〈0．05），其中有21例的GM-CFU的产率（60．1±2．1）个／ml与对照相比较明显减少；CAA血清与正常骨髓细胞培养的GM—CFU为（105．6±3．2）个／ml，显著高于正常组。CAA组的CD3^＋、CD4^＋和CD4^＋／CD8^＋均比对照组降低，分别为（49．8±0．6）％ vs （64．3±0．9）％、（29．7±0．4）％ vs （38．6±0．3）％和（1．2±0．1）％ vs （1．7±0．1）％（均P〈0．01）；CD8^＋细胞明显高于正常，（28．9±0．3）％ vs （24．5±0．3）％（P〈0．01）。结论CAA患者普遍存在着T细胞亚群失衡的免疫异常；CAA患者骨髓细胞中可能有抑制患者GM—CFU形成的因素，而血清中存在着升高的粒一单核细胞集落刺激因子等，其临床意义尚需进一步观察。GM-CFU体外培养联合T细胞亚群检测，可作为CAA异常免疫机制的诊断指标。     

精神分裂症患者社会技能训练模式的临床研究

目的评定程式化社会技能训练模式对精神分裂症患者的临床疗效。方法对204例门诊缓解期患者随机分为药物维持治疗合并程式化社会技能康复训练（观察组）和单纯药物维持治疗（对照组）进行临床对照,采用阳性与阴性症状量表（PAN-SS）、社会功能缺陷筛选表（SDSS）以及认知功能等纵向测评,随访研究24个月。结果观察组复发率（17.7%）比对照组（37.0%）低（P〈0.01）;两组PANSS阳性症状分（7.66±0.97vs8.34±2.04）、阴性症状分（8.13±1.15vs9.15±1.97）、总分（34.79±3.64vs37.64±5.58）及SDSS分（2.07±1.47vs2.81±1.90）,观察组均明显低于对照组（P〈0.01）,认知功能测查改善优于对照组（P〈0.05）。结论程式化社会技能训练操作性好,对降低精神分裂症患者复发,改善社会适应功能有明显临床效果。     

运动对大鼠骨矿盐含量的影响

目的：分析运动对正常成年大鼠和切除双侧卵巢后的大鼠骨矿盐代谢的影响。 方法：本实验于2002—10／2003—05在广东医学院生理学教研室完成。普通级4月龄SD雌性大鼠30只。随机分成5组：正常对照组；正常大鼠＋运动组；假去卵巢组；去卵巢组；去卵巢＋运动组。然后重复，每组6只。正常大鼠＋运动组和去卵巢＋运动组大鼠于术后第7天开始进行运动训练．5d／周．45min／d．16m／min．跑道倾角0°．持续10周。第10周末．麻醉状态下动脉放血处死各组大鼠，观察骨干重、骨干重／体质量、骨灰重、骨灰重／体质量、骨灰重／骨干重（％）代谢变化。 结果：30只大鼠均进入结果分析。大鼠骨干重、骨干重／体质量、骨灰重、骨灰重／体质量、骨灰重／骨干重（％）各指标代谢变化：正常大鼠＋运动组各指标均显著高于正常对照组[（645±48），（567±32）mg；（1．97±0．06），（1．73±0．10）g／kg；（440±30），（374±91）mg；（135±0.04），（1．14±0.06）g／kg；（68．2±0．7）％，（65．9±0．9）％，t=3．46-6．92，P〈0.01]；去卵巢组各指标均明显低于假去卵巢组[（504±24），（569±40）mg；（1．55±0．61），（1．83±0．19）g／kg；（293±14），（381±23）mg；（0．90±0．04），（1．21±0．14）g／kg；（58．6±0．8）％，（66．3±1．5）％，t=3．64-15．58，P〈0．01]；去卵巢＋运动组各指标均较去卵巢组明显增加（627±70），（504±24）mg；（1．76±0．11），（155±0．61）g／kg；（409±43），（293±14）mg；（1.15±0．08），（0．90±0．04）g／kg；（65．2±1．2）%，（58．6±0．8）％。t=3．90-11．21。P〈0．01）。 结论：中等强度运动是增加成年大鼠骨矿盐含量和预防去卵巢大鼠骨矿盐丢失的有效措施。     

胎牛血清对脐血干细胞体外增殖和分化为内皮细胞的影响

目的：观察不同浓度胎牛血清（FBS）体外培养对脐血单个核细胞（MNC）形成集落能力和分化为内皮细胞ECs的影响。方法：自脐带血中分离MNC，给予不同FBS浓度（5%，10%，20%）＋DMEM培养条件，倒置相差显微镜下比较d7形成的集落和d16细胞分化比例，3周后进行Dil-AcLDL染色、4周后用免疫荧光测定VIII因子相关抗原（vWF），鉴定其向（ECs）分化情况。结果：（标化到每10^5个接种细胞）：FBS浓度为5%、10%和20%时，集落形成数目分别为0±0、0.1172±0.37058和1.1149±1.21314（P〈0.05）；分化细胞比例为0±0（P〈0.05）、0.0524±0.05167和0.0104±0.00905；Dil-AcLDL染色结果分别为“-”、“＋”、“＋”，免疫荧光测得其表面均有vWF表达。结论：提高培基中FBS浓度到一定程度有助于MNC向EC分化。     

不同妊娠期妇女血微量元素水平变化分析

目的探讨不同妊娠期妇女血液微量元素变化情况。方法用原子吸收光谱分析法分别测定294例孕妇和47例健康妇女（对照组）Se、Mn、Fe、Cu、Zn水平。结果Se，与对照组（79．524±10．55μg／L）比较，早孕组（72．16±9．48μg／L）、中孕组（72．40±11.58μg／L），P〉0．05，晚孕组（56．76±13．85μg／L），P〈0．01；Mn，与对照组（15．00±3．25μg／L）比较，早孕组（14．10±3．73μg／L）、中孕组（15．57±3．49μg／L），P〉0．05，晚孕组（24．24±5．43μg／L），P〈0．01；Fe，与对照组（18．64±3．76μmol／L）比较，早孕组（22．20±4．68μmol／L）、晚孕组（12．68±4．31μmol／L），P〈0．01，中孕组（17．76±6．13μmol／L），P〉0．05；Cu，与对照组（16．28±2．69μmol／L）比较，早孕组（23．28±5．62μmol／L）、中孕组（25．48±3．45μmol／L）、晚孕组（28．82±4．36μmol／L），P〈0．01；Zn，与对照组（12．83±1．16μmol／L）比较，早孕组（10．85±2．17μmol／L）、中孕组（9．71±1.70μmol／L）、晚孕组（7．81±1．36μmol／L）；P〈0．01。结论健康孕妇微量元素水平反映了微量元素之间协同、拮抗作用。随着妊娠期的推移，Fe的下降导致Mn的水平上升，Se的水平下降；而Cu的水平不断上升导致Zn水平不断下降，妊娠晚期各元素水平上升或下降尤为显著。