极低密度脂蛋白受体在糖尿病患者脂肪组织中的分布和表达

目的观察极低密度脂蛋白受体 (VLDL-R)的两种亚型在糖尿病患者脂肪组织中的分布和表达,以探讨其变化及意义. 方法选择 10例正常人及 9例糖尿病患者,手术中采集其腹壁及肠脂垂脂肪组织,从脂肪组织提取的 mRNA用半定量-PCR方法扩增. 结果①正常腹壁及肠脂垂脂肪组织 VLDLⅠ,Ⅱ型受体均有表达,两部位各亚型受体比较,差异无显著性意义(腹壁 t=- 0.454, P=0.6499;肠脂垂 t=0.870, P=0.3843).②糖尿病患者腹壁及肠脂垂脂肪组织中,Ⅰ型受体的分布和表达量与正常相比无明显变化,差异无显著性意义(腹壁 t=- 0.082, P=0.9349;肠脂垂 t=- 0.327, P=0.7439).但Ⅱ型受体表达明显减少甚至丢失 ,与正常相比差异有显著性意义 (腹壁 t=3.576, P=0.0003;肠脂垂 t=2.597, P=0.0094). 结论糖尿病代谢紊乱影响 VLDL-R表达及亚型分布.     

中国汉族人群维生素D受体基因多态性与糖尿病肾病的易感性

目的：将维生素D受体基因作为糖尿病肾病候选基因，探讨维生素D受体基因Fok Ⅰ酶切位点多态性与中国汉族人群糖尿病肾病之间的关系。方法：①选择2003—06／2004—08在南京医科大学第二附属医院内分泌科及常州市第二人民医院内分泌科住院2型糖尿病患者94例为糖尿病组，男30例，女64例。②根据3次晨尿尿白蛋白与肌肝比值将2型糖尿病患者分为3组：尿白蛋白与肌肝比值〈30mg／g为正常白蛋白尿组（n=55），30mg／g≤尿白蛋白与肌肝比值〈300mg／g者为微量白蛋白尿组（n=32），尿白蛋白与肌肝比值≥300mg／g为大量白蛋白尿组fn=7）。微量白蛋白尿组和大量白蛋白尿组合称为异常白蛋白尿组。病程≥5年未合并糖尿病肾病3l例为迟发／未发糖尿病肾病组，病程≤1年伴有肾病患者20例为早发糖尿病肾病组。选择同期本院健康体检者77人为对照组，男35人，女42人。纳入对象均为汉族人，均对实验目的知情同意。（9采用多聚酶链反应一限制性片段长度多态性方法检测维生素D受体基因多态性等位基因频率和基因型频率。㈤对数据先进行正态分布检验，若符合正态分布，两组间计量资料均数的比较，用t检验，多组间比较用F检验。计算维生素D受体基因多态性的基因型频率，确认符合Hardy—Weinberg平衡，计算等位基因频率。等位基因频率和基因型频率分布比较采用x^2检验。基因型分布作Hardy—Weinberg吻合度检验。相对风险率（RR）表示疾病与标志性状关联的强度。结果：健康者77例和2型糖尿病患者94例均进入结果分析。（1）中国汉族人群维生素D受体基因Fok Ⅰ酶切位点有2种等位基因F，f；存在3种基因型FF，Ff，ff。（2）对照组、正常白蛋白尿组、微量白蛋白尿组和大量白蛋白尿组间维生素D受体基因型频率分布具有显著性差异（x^2=21．137，P=0．002）；等位基因频率分布差异具有显著性（x^2=-366．924，P〈0．001）。（3）正常白蛋白尿组和异常白蛋白尿组维生素D受体基因型频率分布差异有显著性（x^2=-12．131，p=0．002），等位基因频率分布差异也有显著性（x^2=13．884，p=0．000）。（4）等位基因f与异常白蛋白尿的发生相关联（RR=3．57，P〈0．005），具有显著性意义，表明具有等位基因f的2型糖尿病患者发生糖尿病肾病的可能性是没有等位基因f的糖尿病患者的3．57倍。等位基因F与异常白蛋白尿的发生呈负关联（RR=0．2l，P〈0．005）。结论：维生素D受体基因多态性与糖尿病肾病易感性相关联，等位基因f是糖尿病肾病的易感基因，是早发糖尿病肾病的危险因素。     

北京社区人群脂联素和过氧化物酶增殖物活化受体γ2基因多态性及其交互作用与2型糖尿病的关系

目的：分析中国北京社区人群脂联素基因＋45T／G和过氧化物酶增殖物活化受体γ2基因Pro12Ala多态性及其交互作用与2型糖尿病的关系。 方法：自2001年解放军总医院老年医学研究所“对万寿路等社区的流行病学调查”人群中选出无亲缘关系2型糖尿病患者（糖尿病组）195例，非糖尿病对照（非糖尿病组）139例。应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性方法分析两组受试者脂联素＋45T／G与过氧化物酶增殖物活化受体γ2 Pro12Ala多态性各基因型分布频率，用Logistic回归分析了解基因间的交互作用。 结果：334例全部进入结果分析。（旦）脂联素＋45T／G多态性各基因型分布频率为：糖尿病组，TT52.8％，TG35．4％，GG11.8％；非糖尿病组，TT56．1％，TG41．0％，GG2．9％，糖尿病组GG型明显多于非糖尿病组（P〈0．01）。②过氧化物酶增殖物活化受体γ2 Pro12Ala多态性各基因型分布频率为：糖尿病组PP90-8％，PA9．2％；非糖尿病组PP89．9％，PA9.4％，AA0．7％，两组间各基因型频率分布差异无显著性（P〉0．05）。③两位点交互作用组间比较，具有脂联素＋45 TG＋GG型和过氧化物酶增殖物活化受体γ2 PA＋AA型者患2型糖尿病的风险较高（P〈0．05）。 结论：脂联素＋45T／G多态性与2型糖尿病存在相关性，其纯和突变型GG型罹患率较高；未发现过氧化物酶增殖物活化受体γ2 Pro12Ala多态性与2型糖尿病有关；上述两位点存在交互作用，携带脂联素＋45G等位基因和过氧化物酶增殖物活化受体γ2 Ala12等位基因者易患2型糖尿病。     

大蒜素对2型糖尿病大鼠血糖的干预效应

目的：观察百合科植物大蒜球茎中分离出的一种化合物大蒜索对2型糖尿病大鼠血糖的影响及高血脂对糖代谢的影响。方法：实验于2004-10／2005-02在哈尔滨医科大学第一临床医学院实验动物中心完成。选择健康的雄性Wistar大鼠70只，将大鼠按随机数字表法分成2组：对照组10只，糖尿病造模组60只，糖尿病造模组大鼠以高脂高糖饲料（配方：20％蔗糖、2．5％胆固醇、10％猪油、1．0％胆盐、66．5％基础饲料）诱导4周加链脲佐菌素注射进行造模，空腹血糖≥11．1mmol／L为造模成功。将造模成功糖尿病大鼠56只纳入实验，随机数字表法分为5组，即阳性对照组12只，2型糖尿病模型组、大蒜素60，40，30mg／（kg&;#183;d）剂量组各11只。2型糖尿病模型组喂基础饲料；阳性对照组喂高脂高糖饲料加大蒜素60mg／（ks&;#183;d）；大蒜素60，40，30mg／（kg&;#183;d）剂量组喂基础饲料加大蒜素60，40，30mg／（kg&;#183;d）；连续喂养3周。观察不同剂量大蒜素对2型糖尿病、高脂糖尿病和正常大鼠血糖及尿量的影响。结果：对照组10只全部进入结果分析，糖尿病造模组大鼠56只造模成功，进入结果分析。④高脂高糖饲料喂养4周后，糖尿病2型糖尿病模型组大鼠血脂增高、空腹血糖和胰岛素水平升高，胰岛素敏感指数下降，与空白对照组比较，差异有显著性意义（t=5．63～14．22，P〈0．01）。②分组施加大蒜素等干预3周后空白对照组、阳性对照组、2型糖尿病模型组大鼠实验前后血糖无明显变化（t=0．180,P〉0．05）；大蒜素60，40，30mg／（kg&;#183;d）剂量组实验前后血糖均有所下降（t=9．48，7．70，2．35，P〈0．01～0．05）；实验后大蒜素60mg／（kg&;#183;d）剂量组血糖与阳性对照组比较，差异有非常显著性意义（P〈0．01）。③实验后大蒜素60，40，30mg／（kg&;#183;d）剂量组糖尿病大鼠的尿量显著降低（P〈0．01）；阳性对照组大鼠尿量也略有降低，但是实验前后比较差异不大（P〉0．05）；大蒜素60mg／（kg&;#183;d）剂量组大鼠尿量与阳性对照组比较差异有显著性意义（P〈0.01）。结论：大蒜素能够降低2型糖尿病大鼠的血糖，降糖效果与给药剂量呈正相关，高血脂影响血糖的代谢。     

老年原发性高血压患者外周血淋巴细胞β受体密度的变化及与心功能的关系

目的：观察各期老年原发性高血压患者外周血淋巴细胞β受体密度的变化特征及与心功能的关系，寻找进行药物及非药物干预的可能性。方法：选择老年高血压Ⅰ，Ⅱ，Ⅲ期患者(n=16，20，17)及正常体检老年人作为对照组(n=18)，采用放射性配基结合法(^125I-碘氰化心得静)分别测定其外周血淋巴细胞β受体密度。结果：①与对照组比较，各期患者外周血淋巴细胞β受体密度(pmol／g)分别为Ⅰ期(7．02&;#177;2．58)无明显改变(t=0．32，P&;gt;0．05)；Ⅱ期(12．76&;#177;3．24)显著增高(t=4．18。P&;lt;0．05)；Ⅲ期(3．66&;#177;2．08)显著降低(t=3．75，P&;lt;0．05)。②原发性高血压Ⅱ期患者LVMI(g／m^2)(196．5&;#177;39．6)较对照组(89．4&;#177;17．6)及Ⅰ期患者(102．6&;#177;15．3)增高，差异有显著性意义(t=3．22，2．84；P均&;lt;0．01)，与Ⅲ期患者(184．7&;#177;41．2)比较，差异无显著性意义(t=0．18，P&;gt;0．05)。③Ⅲ期患者E／A值(O．71&;#177;0．18)及射血分数(％)(38．4&;#177;7．83)较Ⅱ期患者E／A(0．88&;#177;0．21)、射血分数(55．4&;#177;9．62)％降低，差异有显著性意义(t=2．04，2．26，P均&;lt;0．05)。结论：各期老年高血压患者外周血淋巴细胞p受体密度变化不同，母受体密度随心肌的肥厚有逐渐增加趋势，β受体密度降低则合并有心脏舒缩功能的明显下降。     

室间隔缺损儿童心房肌Ⅰ以及Ⅲ型胶原蛋白的变化

背景：心脏间质主要由Ⅰ，Ⅲ型胶原组成，对心肌细胞起支持、保护和制约的作用，是维持心脏正常的形态和功能不可缺少的成分。目的：观察室间隔缺损儿童心房Ⅰ型和Ⅲ型胶原蛋白表达的变化，探讨其对心功能的影响。设计：病例分析。单位：新乡医学院细胞生物学教研室。对象：选择2003—01／08新乡医学院第一附属医院儿科6例事故死亡的儿童．家属知情同意．男4例，女2例；年龄1-15岁，大体解剖证明无先天性心脏病，取右心房组织。同期选择新乡医学院第一附属医院心胸外科21例室间隔缺损患儿，男12例，女9例；年龄1～17岁。方法：从右心房手术切缘处取少许新鲜组织。采用过氧化物酶标记的链霉卵白素免疫组化观察心脏胶原Ⅰ型和Ⅲ型蛋白表达，用数字图像分析方法测量心脏胶原Ⅰ型和Ⅲ型蛋白面积构成比（代表胶原蛋白表达的相对面积含量），面积百分比（代表胶原蛋白表达的百分含量）。主要观察指标：心房肌细胞Ⅰ，Ⅲ型胶原蛋白表达。结果：6例死亡儿童和21例室间隔缺损患儿的心房组织均进入结果分析。①正常心房Ⅰ型胶原为粗、细不等的条状纤维，彼此连接成网；Ⅲ型胶原纤维呈散在的斑片状分布。②室间隔缺损心房Ⅰ和Ⅲ型胶原表达，大多区域属于正常。仅部分区域发生极度重排，即Ⅰ型胶原呈现大斑块状增加、断裂或消失，Ⅲ型胶原呈条束状增加。③Ⅰ型和Ⅲ型胶原面积百分比和面积构成比：正常心肌Ⅰ型胶原含量较Ⅲ型胶原多[面积百分比：（48．82&;#177;12．35）％，（40．02&;#177;13．53）％，t=2．173,P〈0．05；面积构成比（15．87&;#177;6．03）μm^2，（13．62&;#177;6．94）μm^2，t=2．221，P〈0．05]。室间隔缺损儿童心肌Ⅰ型胶原含量较Ⅲ型胶原多[面积百分比：（55．37&;#177;10．42）％，（50．27&;#177;14．36）％，t=2．173，P〈0．05；面积构成比（24．93&;#177;9．62）μm^2，（19．22&;#177;12．03）μm^2，t=2．221，P〈0．05]。室间隔缺损儿童心肌Ⅰ型，Ⅲ型胶原含量较正常心肌明显增多（t=2．153-2．234，P〈0．05）。结论：室间隔缺损儿童心房部分区域Ⅰ和Ⅲ型胶原纤维形态上出现重构，含量增加，可能是室间隔缺损儿童心功能异常出现的心脏间质代偿。     

2型糖尿病大鼠大网膜和皮下脂肪组织抵抗素基因的表达

目的：观察实验性2型糖尿病大鼠大网膜与皮下脂肪组织抵抗素基因的表达，探讨抵抗素与胰岛素抵抗的关系。 方法：实验于2003-09／2004-06在郑州大学第一附属医院内分泌实验室完成．选择雌性Wistar大鼠30只，随机抽签法分为普通饲料组（8只）和高脂饲料组（22只），高脂饲料组大鼠采用0．1mol／L链脲佐菌素尾静脉注射加高脂喂养的方法建立2型糖尿病模型15只，随机抽取8只作为糖尿病组，普通饲料组为正常对照组，检测两组大鼠的空腹血糖、胰岛素、胰岛素敏感性指数、血清胆固醇及三酰甘油。采用反转录-聚合酶链反应检测两组大鼠大网膜和皮下脂肪组织中抵抗素基因的表达。 结果：纳入动物16只，均进入结果分析。①糖尿病组大鼠胰岛素敏感性指数与正常对照组大鼠相比明显降低（分别为-4．89&;#177;0，20．-2．63&;#177;0．42，P〈0．01），空腹血糖．胰岛素，三酰甘油和胆固醇明显升高[空腹血糖分别为（12.89&;#177;1．18）．（4．86&;#177;0．68）mmol／l；胰岛素分别为（10．51&;#177;1．93），（3．07&;#177;1．15）μU／L；三酰甘油分别为（2．63&;#177;0．71），（1．13&;#177;0．17）mmol／L：胆固醇分别为（1．73&;#177;0．15），（1．25&;#177;0．17）mmol／L，P〈0．011。②以A值比表示，糖尿病组大网膜脂肪组织的抵抗索基因表达与正常对照组皮下和大网膜脂肪组织、糖尿病组皮下脂畴组织比较明显升高（分别为0．27&;#177;0．03，0．15&;#177;0．02，0．15&;#177;0．03．0．17&;#177;0．02，P〈0．01），而后三者间相比差异无显著性（P〉0．01）。 结论：抵抗素基因在2型糖尿病大鼠大网膜脂肪组织中表达升高，可能是腹型肥胖更易导敛胰岛素抵抗的重要原因之一。     

单耳堵塞对沙土鼠中脑下丘神经元谷氨酸受体密度的影响

目的 考察单耳堵塞对沙土鼠中脑下丘(IC)背侧核(ICd)、外侧核(ICx)和中央核(ICc)部位谷氨酸(Glu)受体密度的影响。方法 实验在30只沙土鼠上进行，雌雄不拘。分别在沙土鼠出生后3周龄(21dpn)、6周龄(42dpn)和成年(70dpn)实施单耳堵塞，4周后以体外受体标记放射自显影方法，考察比较IC左右侧各部位的银粒密度变化，并以此为相对指标，分析动物IC的神经元Glu受体密度的变化。结果 成年组两侧IC神经元Glu受体密度没有显著性差异；3周龄和6周龄组呈现堵耳对侧的Glu受体密度明显少于堵耳同侧的不均衡分布(ICd部位：t=2．53,P=0．0186．t=1．77,P=0．0443；ICx部位：t=1．90，P=0．0359，t=2．03,P=0．0367；ICc部位：t=1．07，P=0．0332；t=2．35，P=00208)。并且3周龄组ICc部位的两侧Glu受体密度比值最小(0．61&;#177;0．03)。结论 出生后6周前单耳堵塞对沙土鼠IC的神经元Glu受体发育具有明显影响，与Glu受体相关的下丘听觉功能发育将延续到出生后6周。     

高脂喂养对糖尿病大鼠视网膜转化生长因子-β2及其Ⅱ型受体mRNA表达的影响

目的：探讨高脂喂养的糖尿病大鼠视网膜中转化生长因子β2（TGF-β2）及其Ⅱ型受体（TβRⅡ）mRNA的表达。方法：应用RT-PCR方法检测高脂喂养的糖尿病大鼠中TGF-β2及TβRⅡmRNA的表达水平。结果：糖尿病大鼠TGF-β2mRNA的表达高于非糖尿病大鼠（P〈0．01）；高脂喂养的糖尿病大鼠TGF-β2mRNA的表达高于普通喂养的糖尿病大鼠（P〈0．01）；TβRⅡmRNA的表达水平在非糖尿病大鼠与糖尿病大鼠间，高脂喂养大鼠与普通喂养大鼠间无明显差异。结论：高脂喂养的糖尿病大鼠视网膜中TGFβ2mRNA的表达水平升高。脂代谢紊乱在糖尿病视网膜病变的发生中起作用，其部分机制可能是通过增加TGF-β2的表达来实现的。     

谷氨酸脱羧酶抗体检测在糖尿病诊断中的应用探讨

目的：探讨糖尿病患者血清谷氨酸脱羧酶抗体检测在临床中的重要意义。方法：采用酶联免疫分析方法。结果：Ⅰ型糖尿病组的血清GAD-Ab阳性率显著高于正常对照组（P＜0．01），Ⅱ型糖尿病GAD-Ab阳性率高于正常对照组，但差异不显著（P＞0．05）。Ⅰ、Ⅱ型糖尿病相互比较，GAm—AbI阳性率差异显著（P＜0.01）。结论：测定血清中特异性的GAD-Ab，对Ⅰ型糖尿病的早期诊断，Ⅰ、Ⅱ型糖尿病的鉴别诊断及对Ⅰ型糖尿病的预后观测等方面有着重要意义。