裙带菜膳食纤维的性能及毒理评价

目的:对裙带菜膳食纤维的常规成分和功能性进行分析,采用动物试验初步探讨裙带菜膳食纤维的毒理学性质。方法:实验于2003-09/2004-03在湖南农业大学动物医学院基础兽医教研室完成。①急性毒性试验选取清洁级2月龄SD大鼠60只,随机分为5组:裙带菜膳食纤维823,1727,3628,7619,16000mg/kg剂量组,12只/组。每组分别用裙带菜膳食纤维配成悬浮液喂养,各组剂量分别为823,1727,3628,7619,16000mg/kg体质量。给药后连续观察7d,未见明显的毒性反应,且无一例死亡,因受药物浓度和给药体积的限制,找不出引起大鼠死亡的剂量,无法测出裙带菜膳食纤维的半数致死量。故每天以最大耐受剂量16000mg/kg分4次灌服,灌胃后即刻观察并记录大鼠行为学活动情况,连续7d。②亚慢性毒性试验选取清洁级8周龄SD大鼠80只,随机分为4组:生理盐水对照组、裙带菜膳食纤维600,1500,3000mg/kg剂量组,20只/组。裙带菜膳食纤维各剂量组分别给予裙带菜膳食纤维配成悬浮液600,1500,3000mg/kg,生理盐水对照组给予等量生理盐水,连续灌胃12周。③裙带菜膳食纤维由湖南农业大学基础兽医教研室自行研制。④裙带菜膳食纤维制备工艺流程:裙带菜→清洗→碱液浸泡(pHl2,40℃)→过滤→漂洗至中性→酸液浸泡(pH2,60℃)→漂洗至中性→漂白→漂洗→干燥(60℃)→粉碎→成品。⑤用酶一重量法分析法检测膳食纤维含量;用常规分析方法检测裙带菜膳食纤维蛋白质,脂肪,灰分,淀粉,钙、磷含量及其膨胀力与持水力。用急性毒性试验及亚慢性毒性试验对裙带菜膳食纤维进行毒理学评估。结果:急性毒性试验选取SD大鼠60只,亚慢性毒性试验选取SD大鼠80只,全部进入结果分析。①裙带菜膳食纤维基本成分与功能性指标检测结果:裙带菜中膳食纤维含量达89.85%;裙带菜膳食纤维的蛋白质、脂肪和淀粉含量都很低,分别为0.85%,0.06%,0.57%,同时具有较高的膨胀力(23mL/g)和持水力(13.65%)。②急性毒性试验结果:裙带菜膳食纤维的半数致死量都大于1.6×104mg/kg。③亚慢性毒性试验结果:与生理盐水对照组比较,裙带菜膳食纤维600,1500,3000mg/kg组大鼠的血液学指标、血清蛋白等指标差异均无显著性意义(P>0.05),但裙带菜膳食纤维3000mg/kg组总胆固醇、三酰甘油出现明显降低趋势(P<0.05)。结论:裙带菜膳食纤维属于无毒级,未发现致突变作用,长期食用安全,具有一定的降总胆固醇、三酰甘油的作用,是一种值得开发的优质膳食纤维。     

甘草酸单铵体内毒理学研究

目的：为甘草酸单铵体内抗病毒活性研究提供基础资料。方法：全身急性毒性试验，积累毒性试验，阴道急性毒性试验及阴道刺激试验。结果：急性毒性试验LD50为400mg/kg，LD50为300mg／kd。积累毒性试验LD50为300mg/kd.d，LD50为200mg/kd．d。阴道急性毒性试验按250mg/只应用无局部毒性反应。按250mg/只日应用，阴道粘膜局部无刺激作用和毒性反应。本研究为MAG的动物体内抗病毒治疗剂量提供了安全的科学依据。     

桂皮醛对抗血小板聚集和血栓形成的特点

目的：观察桂皮醛对血小板聚集和血栓形成的影响。方法：实验于2005—07／11在第四军医大学药学系药物研究所实验室完成。④体外血小板聚集实验：制备大鼠洗涤血小板，观察0．15，0．30和0．60mmol／L桂皮醛对胶原蛋白（100mg／L）和凝血酶（3U／mL）诱导的大鼠体外血小板聚集的抑制作用。桂皮醛购自中国医药集团上海化学试剂公司，纯度〉98％。②出、凝血时间测定及胶原蛋白-肾上腺素诱发体内血栓形成实验：取BALB／c小鼠60只，随机分成6组（n=10），生理盐水组灌胃生理盐水；阿司匹林组灌胃阿司匹林100mg／kg为阳性对照；还设置桂皮醛灌胃（250，500mg／kg）和腹腔注射（50，100mg／kg）4个剂量组。所有动物每天给药1次，10μL/g，连续11d。第10天给药后1h采用断尾法和玻片法测定小鼠出血、凝血时间；第11天给药后1h观察小鼠尾静脉注射胶原蛋白（3．57mg／kg）-肾上腺素（0．143mg／kg）混合血栓诱导剂后5min内的存活率。⑧动-静脉旁路血栓形成实验：SD大鼠48只，随机分为6组（n=8）。生理盐水组灌胃生理盐水；阿司匹林组灌胃阿司匹林80mg／kg为阳性对照；桂皮醛分为灌胃200，400mg／kg组和腹腔注射40，80mg/kg4个剂量组。所有动物每天给药1次，10μL／g，连续10d。末次给药后1h测定动-静脉旁路丝线上的血栓湿质量。结果外鼠60只和大鼠48只全部进入结果分析。①桂皮醛能够明显抑制胶原蛋白和凝血酶诱导的大鼠体外血小板聚集，并呈剂量依赖性，与对照组比较差异显著（P〈0．05，0．01）。②桂皮醛显著延长小鼠出、凝血时间，与对照组比较差异非常显著（P〈0．01）。⑧胶原蛋白-肾上腺素诱发性小鼠肺动脉栓塞存活率：生理盐水组为10％，阿司匹林组为80％，桂皮醛各剂量组为70％～100％。④动-静脉旁路丝线上的血栓湿质量：阿司匹林组和桂皮醛各剂量组均低于生理盐水组（P〈0．01）；桂皮醛各剂量组对大鼠血栓的抑制率范围为30％～43．4％。结论：桂皮醛体外能够明显抑制胶原蛋白和凝血酶诱导的大鼠血浆中血小板的聚集；体内能够显著延长小鼠断尾后的出、凝血时间，减轻大鼠动-静脉旁路丝线上血栓的质量。提示桂皮醛具有明显抗血小板聚集和体内抗血栓作用。     

莫索尼定与可乐定对肾性高血压大鼠动脉压及心率作用的比较

背景：莫索尼定是高选择性的第二代中枢性降压药，而可乐定是第一代中枢降压药．用于临床治疗高血压，但副作用较多。 目的：比较莫索尼定与可乐定对肾性高血压大鼠的作用特点。 设计：随机对照动物实验。 单位：南通大学医学院药理学教研室。 材料：实验于2004-09／12在南通医学院完成。选择SD大鼠110只，鼠龄60d，体质量（180&;#177;30）g。 方法：SD大鼠左侧肾动脉用0．2mm或0．25mm内径的银夹狭窄，右侧肾脏不触及，造成二肾一夹型（two—kidney one—clip，2K—IC）肾性高血压模型。①采用尾动脉间接测压法，一次或连续口服给药，分别测定清醒肾性高血压大鼠血压及其心率变化。一次口服给药的降压实验：大鼠随机分成5组，每组10只，盐酸莫索尼定1mg／kg组、3mg／kg组、10mg／kg组、盐酸可乐定（1mg／kg）组作阳性对照、生理盐水组作阴性对照。根据盐酸奠索尼定对血压作用特点，测定给药后1,4，24，48,72h时间点的血压，分别与给药前或生理盐水作用相比较。连续每天1次口服给药降压实验：分组同上，连续给药7d，1次／d，测定每天给药前、给药后1h血压及心率的变化，停药后观察3d。人拟推荐剂量为盐酸莫索尼定0．4mg／kg左右，按动物体表面积换算，大鼠口服剂量约为0．04mg／kg左右。②采用颈动脉插管直接测压法测定麻醉肾性高血压大鼠血压及其心率变化：以0．2mg／kg的药液灌胃，大鼠随机分5组，每组10只，分别为盐酸莫索尼组、0．13mg／kg组、0．4mg／kg组、1．3mg／kg组、盐酸可乐定0．13mg／kg组及生理盐水对照组，测定给药前及给药后不同时间的平均动脉压。 主要观察指标：一次或连续口服给药情况下清醒和麻醉肾性高血压大鼠血压及其心率变化。 结果：在实验过程中，各组大鼠无脱失，全部进入结果分析。①清醒肾性高血压大鼠一次大剂量口服莫索尼定降压与心率减慢作用呈剂量依赖性，其10倍剂量与可乐定作用相近；连续小剂量口服莫索尼定降压百分率与可乐定相仿，心率减慢作用弱而短暂。②麻醉肾性高血压大鼠，一次口服莫索尼定降压作用与剂量相关；莫索尼定3～10倍剂量与可乐定降压百分率差异无显著性意义（P〉0．05）。 结论：大剂量一次口服给药，莫索尼定对清醒肾性高血压大鼠的降压作用呈剂量依赖性，其10倍剂量与可乐定作用相当；对麻醉肾性高血压大鼠莫索尼定3-10倍剂量与可乐定降压相当。小剂量连续口服给药，莫索尼定和可乐定等剂量对肾性高血压大鼠的降压作用相当。     

声诺维超声造影观察晚孕孕鼠胎盘超微结构改变的初步研究

目的探讨妊娠晚期Wister大鼠超声造影后胎盘组织超微结构的变化。方法将妊娠晚期Wister大鼠60只随机分为3组（每组20只）。对照组：经尾静脉注射生理盐水2．0ml／kg;高剂量组：注射声诺维剂量为23．6mg／kg（2．0ml／kg,11．8mg／m1）;低剂量组：注射声诺维剂量为0．236mg／kg（2．0ml／kg,0．118mg／m1）。采用Acuson Sequoia512型超声诊断仪,观察60只孕鼠注射造影剂后造影过程。于造影后即刻随机选取45只孕鼠（每组15只）剖检胎盘组织;并于造影后12h分别剖检其余15只孕鼠（每组5只）胎盘组织,电镜观察各组孕鼠胎盘超微结构变化。结果（1）60只孕鼠超声造影全程未见脐血管和胎鼠显影;电镜下见对照组及低剂量组孕鼠胎盘屏障结构完整清晰,而高剂量组胎盘合体滋养层细胞胞质内溶酶体数目增多,内质网扩张,基质内可见糖原沉积等超微结构改变;（2）注射声诺维12h后,对照组和低剂量组10只孕鼠（每组5只）胎盘组织超微结构与同组注射造影剂后即刻取检的45只孕鼠（每组15只）的胎盘组织超微形态结构比较无显著病理变化。高剂量组孕鼠胎盘组织电镜下见仅见基底膜层稍增厚。结论低剂量造影剂声诺维用于孕晚期大鼠胎盘造影是安全的,本研究为产科临床应用声诺维提供了对超微结构影响的依据。     

和厚朴酚与厚朴酚在缓解大鼠吗啡戒断反应中对β-内啡肽的影响

背景：现代药理证实和厚朴酚与厚朴酚具有中枢抑制作用和肌肉松弛作用，且有报道证实其可缓解动物吗啡依赖戒断症状。目的：探讨和厚朴酚与厚朴酚在缓解吗啡戒断反应中对β-内啡肽的影响：设计：随机对照实验。单位：湖北民族学院医学院药理学教研室。对象：实验于2003—04—13／29进行，取成年雄性SD大鼠100只，其中30只大鼠作为对照组随机分成生理盐水组、和厚朴酚组和厚朴酚组各10只，另外70只大鼠作为吗啡依赖组，随机分成生理盐水组，和厚朴酚5，40，80mg／kg组与厚朴酚5，40，80mg／kg组7组，各10只。方法：对照组中3个亚组分别腹腔注射生理盐水0．2mL、和厚朴酚与厚朴酚各80mg／kg。吗啡依赖组大鼠逐日增量皮下注射吗啡6d，建立急性吗啡依赖大鼠及吗啡自然戒断模型．在第6天9：00最后一次给吗啡后，10：30腹腔注射给药，生理盐水组给予生理盐水0．2mL，其他6组分别给予和厚朴酚、厚朴酚各5，40和80mg／kg。于11：00分别观察吗啡依赖组每只大鼠1h内各项自然戒断症状。主要观察指标：①各组大鼠脑脊液中β-内啡肽水平。②比较吗啡依赖组中7个亚组大鼠自然戒断症状评分。结果：①脑脊液中β-内啡肽水平：对照组中和厚朴酚与厚朴酚组显著高于生理盐水组（P〈0．01），而且和厚朴酚强于厚朴酚（P〈0．05）。吗啡依赖＋生理盐水组明显低于对照＋生理盐水组（P〈0．01）。吗啡依赖组中和厚朴酚与厚朴酚5，40．80mg／kg组均高于生理盐水组（P〈0．01），而且呈量效关系。②吗啡依赖组大鼠自然戒断症状评分：和厚朴酚与厚朴酚各剂量组湿狗样抖动、舔阴，逃避症状得分均低于生理盐水组（P〈0．05，0．01），且剂量越大效果越显著；和厚朴酚与厚朴酚40，80mg／kg组咬牙、扭体及体质量丢失显著低于生理盐水组（P〈0．01）。结论：和厚朴酚与厚朴酚可明显抑制吗啡戒断反应．且抑制效应呈量效关系，这一抑制效应与脑内β-内啡肽的增加有关。这种效应对吗啡依赖大鼠和厚朴酚与厚朴酚相当，对正常大鼠和厚朴酚强于厚朴酚。     

癫痫宁胶囊的毒理学试验研究

目的：观察癫痫宁胶囊的急性及长期毒性反应，为临床用药提供依据，以保证用药安全。方法：急性毒性反应以4．5g/kg的癫痫宁给小鼠一次性灌胃，连续观察一周，逐日记录毒性反应、死亡数，并作病理学检查。长期毒性试验以高剂量组45g／kg、低剂量组2．25g／kg给大鼠连续灌服12周，分别测量大鼠体重，测定血液学和血液生化指标，并作病理学检查。结果：癫痫宁急性毒性及长期毒性各剂量组动物的观察指标与对照组比较．均无显著性差异，病理检查各脏器组织均未见药物中毒性病理形态学改变。结论：癫痫宁胶囊大剂量长期用药对大鼠无明显毒性，推论临床用药是安全的。     

褪黑激素影响帕金森病模型大鼠前脑纹状体细胞的凋亡

目的：观察褪黑激素对帕金森病模型大鼠行为学和前脑纹状体细胞凋亡的影响． 方法：实验于2005-02／2006-05在江苏大学医学院基础医学中心实验室进行：①选取爬杆实验正常（O分）的SD大鼠90只，随机分为空白对照组．生理盐水组和褪黑激素l，5，10mg／kg组5组，每组18只。②除空白对照组外，其他4组大鼠连续7d腹腔注射MPTP（30mg／kg）建立帕金森病大鼠模型，造模成功后，于每日20时进行治疗，生理盐水组腹腔注射1mL生理盐水，褪黑激素1，5，10mg／kg组腹腔注射褪黑激素1，5，10mg／kg。③于用药7，14，21d采用爬杆法（0-2分，评分越高运动能力越差）和迷宫试验评价大鼠行为学和智力改变；3个时间点测试后各组分别取6只大鼠处死取脑，应用SP法Bax／Bcl-2免疫组织化学染色和Tunel法细胞凋亡染色检测前脑纹状体凋亡细胞。 结果：90只大鼠进入结果分析。①爬杆实验得分：造模各组均高于空白对照组（P〈0．01）；治疗14，21d时褪黑激素1，5，10mg／kg组低于生理盐水组LP〈0．05，0．01）。②迷宫试验错误次数：褪黑激素1，5，10mg／kg组在治疗7，14d时多于空白对照组，但少于生理盐水组（P〈0．05），至治疗21d时与空白对照组比差异不显著[（1．9&;#177;0．6），（1．9&;#177;0．6），（1．8&;#177;0．5），（1．6&;#177;0．4）次，P〉0．05]，生理盐水组仍高于空白对照组[（3．1＋0．6）次]。③Bax蛋白表达于生理盐水组最高，褪黑激素组次之，空白对照组最低；Bcl-2蛋白于褪黑激素组呈高表达，空白对照组次之，生理盐水组表达最低；Tunel阳性细胞以生理盐水组最高，褪黑激素组次之，空白对照组最低。 结论：褪黑激素能激活Bax／Bcl-2系统，调节前脑黑质纹状体通路多巴胺神经活性，抑制细胞凋亡，从而改善帕金森病症状。     

桂皮醛抗肿瘤活性及对S180荷瘤小鼠免疫功能的影响

目的：观察传统中药肉桂挥发油中桂皮醛的细胞毒作用，并以小鼠S180移植性肿瘤为模型，进行其体内外抗肿瘤活性及对S180荷瘤小鼠免疫功能影响的实验。 方法：实验于2005—03／06在解放军第四军医大学药学系药物研究所实验室完成。取BALB／c小鼠60只，雌雄各半，体质量18-22g。先设1组不接种瘤株的生理盐水正常对照组，10只，雌雄各半。余50只小鼠每只右腋皮下接种0．2mL，24h后随机分成5组，即生理盐水荷瘤对照组，卡铂阳性药对照组，桂皮醛25，50，100mg／kg3个剂量组，每组10只，雌雄各半。用四甲基偶氮唑蓝法观察桂皮醛对6种人癌细胞的体外抗肿瘤作用；对25，50，100mg／kg3个剂量组分别腹腔注射相应剂量用含0．5％土温80生理盐水溶解的桂皮醛（购自中国医药集团上海化学试剂公司），正常对照组和荷瘤空白对照组腹腔注射生理盐水，阳性药对照组腹腔注射卡铂5mg／kg。接种第2天开始全部腹腔注射给药，10mL／kg，每天1次，连续给药10d，于最后1次给药后次日处死动物，测定肿瘤抑制率、免疫器官质量、血常规、NK细胞活性、T淋巴细胞转化率，分析其对小鼠体内抗肿瘤作用及与免疫调节的关系。 结果：参加实验的动物60只全部进入结果分析，没有脱失。①桂皮醛对体外培养的6种人肿瘤细胞有直接细胞毒作用，其IC50的范围为12．3—37．1mg／L。②咎桂皮醛50，100mg／kg剂量组对S180荷瘤小鼠肿瘤生长有明显抑制作用，抑瘤率分别为33．08％和46．92％；同时能有效保护荷瘤小鼠胸腺和脾脏指数。③桂皮醛25，50mg／kg剂量组可以升高白细胞，与生理盐水荷瘤对照组比差异有显著性意义（11．13&;#177;1A9，1125&;#177;9．18，8．78&;#177;1．33。P〈0．01）。④桂皮醛25，50mg／kg剂量组的T淋巴细胞增殖能力显著或非常显著高于生理盐水荷瘤对照组（P〈0．05—0．01）；桂皮醛50mg／kg剂量组NK细胞杀伤活性明显高于生理盐水荷瘤对照组（P〈0．05）。⑤桂皮醛100mg／kg剂量组显著降低白细胞（P〈0．01）；抑制T淋巴细胞增殖能力和NK细胞杀伤活性，与荷瘤空白对照组比较差异有显著性意义（P〈0．01）。 结论：桂皮醛对体外培养的肿瘤细胞增殖具有良好的抑制作用，在适当剂量范围内可以保护和恢复荷瘤小鼠的免疫功能。     

链脲佐菌素致糖尿病性勃起功能障碍大鼠模型的建立

目的：对链脲佐菌素（STZ）致大鼠糖尿病（DM）性勃起功能障碍（ED）模型建立进行研究。方法：30只SD大鼠，随机分为5组：对照组、注射STZ40mg／kg组、注射STZ60mg／kg组、注射STZ80mg／kg组、注射缓冲液组，每组6只，分别记录4d、1周、2周、3周H的空腹血糖：阿朴吗啡（APO）诱导阴茎勃起次数及体质量。结果：空腹血糖及体质量在不同四个时间点和不同处理组间差异均有显著性（P均〈0．001），APO诱导阴茎勃起实验的勃起次数在注射STZ40mg／kg组与注射STZ60mg／kg组间差异存在显著性（P=0．043）。结论：STZ致大鼠DM模型的最佳注射剂量应为60mg／kg，APO诱导剂量以100μg／kg作为筛选ED模型的标准。