磷酸化c-Jun氨基末端激酶和P38丝裂原活化蛋白激酶在寻常性银屑病皮损中的表达

目的 探讨磷酸化c-Jun氨基末端激酶（p-JNK）和P38丝裂原活化蛋白激酶（p-P38MAPK）在寻常性银屑病皮损中的表达。 方法 收集30例确诊的寻常性银屑病患者皮损,同时收集30例健康人皮肤组织作为对照组。采用免疫组化及Western印迹法分别检测p-JNK和p-P38MAPK蛋白在寻常性银屑病皮损组织和正常人皮肤中的表达情况。 结果 免疫组化结果显示,寻常性银屑病皮损组织p-JNK和p-P38MAPK表达的平均吸光度（AOD）值分别为0.663 ± 0.016和0.436 ± 0.011,均明显高于对照组（0.333 ± 0.009和0.306 ± 0.010）,差异有统计学意义（t = 44.869、21.913,均P < 0.001）。Western印迹法同样显示,寻常性银屑病皮损p-JNK和p-P38MAPK蛋白相对表达量均显著高于对照组,差异均有统计学意义（t值分别为20.477和165.084,均P < 0.05）。结论 JNK和P38MAPK的活化可能参与了寻常性银屑病表皮细胞的过度增殖。     

IL-36γ、p38MAPK通路和Th17细胞因子在扁平苔藓中的表达

目的:检测IL-36及p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)通路和Th17细胞因子在扁平苔藓中的表达。方法:应用Envision免疫组化法检测58例扁平苔藓及19名正常皮肤标本中IL-36γ、磷酸化-p38MAPK(p-p38)和IL-17A的表达。结果:IL-36/、p-p38和IL-17A在扁平苔藓皮损中的蛋白表达阳性率为86.21%、79.31%和94.83%,显著高于正常对照标本阳性率为68.42%、15.79%和63.16%(均P0.01)。扁平苔藓组中,IL-36γ与p-p38、IL-36/与IL-17A的表达水平存在显著正相关(P0.001),两因子表达强度有显著差异(P0.05)。结论:p38MAPK通路和Th17细胞因子可能与扁平苔藓的发病有关。     

扁平苔藓皮损中缺氧诱导因子1α、血管内皮生长因子和蛋白激酶B的表达

目的：探讨扁平苔藓皮损中缺氧诱导因子1α（HIF?1α）、血管内皮生长因子（VEGF）和蛋白激酶B（P?Akt）的表达与血管形成及凋亡的关系。方法免疫组化法和TUNEL法检测32例扁平苔藓患者皮损和20例脂肪瘤皮肤石蜡标本HIF?1α、VEGF和P?Akt表达和细胞凋亡情况，同时用CD34标记血管内皮细胞，计算微血管密度（MVD）。结果 HIF?1α、VEGF和P?Akt在32例扁平苔藓组皮损表皮角质形成细胞中均有不同程度的表达（++～+++），HIF?1α表达部位为细胞核，VEGF和P?Akt表达部位为细胞质，高于对照组HIF?1α、VEGF和P?Akt（-~++）的表达，两组比较，差异有统计学意义（均P<0.01）。扁平苔藓组皮损处MVD为（21.27±6.54）个/高倍视野（×200），对照组MVD为（10.26±1.10）个/高倍视野（×200），两组比较，差异有统计学意义（t=5.607，P<0.01）。扁平苔藓组表皮层角质形成细胞的凋亡指数（72.81%±9.234%）显著高于对照组（28.16%±3.464%），两组比较，差异有统计学意义（t=8.431，P<0.01）。扁平苔藓皮损中HIF?1α、VEGF和P?Akt的表达水平间均呈正相关（r值分别为0.625，0.453，0.455，均P<0.01）。HIF?1α、VEGF和P?Akt的表达与MVD均呈正相关（r值分别为0.721，0.646，0.671，均P<0.01）。结论 HIF?1α及其下游靶基因VEGF、P?Akt在扁平苔藓的发病中可能起一定的作用。     

扁平苔藓皮损中Caspase-9和Apaf-1的表达及其与细胞凋亡的关系

目的 探讨扁平苔藓皮损中Caspase-9、Apaf-1的表达及其与细胞凋亡的关系。方法 采用DNA末端转移酶介导的原位缺口末端标记法（TUNEL法）和免疫组化的方法检测30例扁平苔藓皮损和30例正常人皮肤组织中细胞凋亡和Caspase-9、Apaf-1的表达情况,采用RT-PCR检测10例扁平苔藓皮损和8例正常人皮肤组织中Caspase-9 mRNA的表达情况。结果 扁平苔藓组表皮层角质形成细胞的凋亡指数（AI）为75.67 ± 9.4,正常人对照组为38.15 ± 9.6,两组比较,差异有统计学意义（P ＜ 0.05）;Caspase-9和Apaf-1表达的阳性单位分别为14.45 ± 2.72和11.93 ± 3.14,明显高于正常人对照组（P ＜ 0.01）;而且Caspase-9 mRNA的表达量（2.304 ± 0.417）与正常人对照组（1.605 ± 0.381）比较,差异有统计学意义（P ＜ 0.01）。扁平苔藓皮损中Caspase-9、Apaf-1阳性表达强度均与其自身角质形成细胞的AI呈正相关（r = 0.96和0.94,P ＜ 0.01）。结论 扁平苔藓皮损中角质形成细胞凋亡亢进可能与扁平苔藓的发生有关,Caspase-9、Apaf-1与角质形成细胞的凋亡关系密切。     

神经生长因子及其高亲和受体酪氨酸激酶、低亲和公共受体p75NTR在扁平苔藓皮损中的表达及意义

【摘要】 目的 检测神经生长因子（NGF）及其受体TrkA、p75NTR在扁平苔藓皮损中的表达。 方法 应用免疫组化ABC法检测32例扁平苔藓皮损和12例健康人皮肤石蜡标本NGF及其受体TrkA、p75NTR表达状况。 结果 NGF及TrkA在32例扁平苔藓皮损表皮角质形成细胞中均有不同程度的表达（++ ～ +++）,表达部位为细胞质,高于健康人皮肤NGF（- ～ +）及TrkA（- ～ +）的表达,两组间差异均有统计学意义（P < 0.01）;而p75NTR的表达两组差异无统计学意义。扁平苔藓皮损中NGF与TrkA表达呈正相关（R2 = 0.535,P < 0.01）。NGF及其受体TrkA、p75NTR在扁平苔藓不同发病年龄、部位以及不同性别患者角质形成细胞中的表达差异均无统计学意义。 结论 NGF通过其高亲和受体TrkA在扁平苔藓的发病中可能起着一定的作用。     

扁平苔藓中HtrA2/Omi与XIAP的表达及意义

[摘要] 目的：探讨凋亡相关蛋白丝氨酸蛋白酶HtrA2/Omi和XIAP在扁平苔藓皮损中的表达及其意义。方法：用免疫组化法、原位末端标记技术（TUNEL）对30例扁平苔藓患者皮损组织和30例正常人皮肤组织中HtrA2/Omi和XIAP的表达及两种组织的凋亡情况进行检测。结果：扁平苔藓组与正常对照组相比,HtrA2/Omi表达水平明显升高, XIAP表达水平明显下降,组间比较差异均有统计学意义（P < 0. 01）,HtrA2/Omi的阳性表达强度与XIAP的阳性表达强度呈负相关（P<0.01）;扁平苔鲜组中细胞凋亡指数（AI）明显高于正常对照组（P < 0. 01）,角质形成细胞的凋亡指数与HtrA2/Omi的阳性表达强度呈正相关（P<0.01）,与XIAP的阳性表达强度呈负相关（P<0.01）。结论：HtrA2/Omi、XIAP可能通过调节扁平苔藓皮损处角质形成细胞的凋亡而参与扁平苔藓的发病。     

MAPK信号通路调控长波紫外线诱导的皮肤成纤维细胞组织蛋白酶K表达

【摘要】 目的 研究MAPK信号通路调控长波紫外线（UVA）诱导皮肤成纤维细胞组织蛋白酶K（CatK）的表达。 方法 原代培养的皮肤成纤维细胞取自儿童包皮。Western印迹检测10 J/cm2 UVA照射前及照射后0.75、1.5、3和6 h皮肤成纤维细胞中磷酸化JNK（p-JNK）、JNK、磷酸化P38（p-P38）、P38蛋白的表达。800 nmol/L SP600125（SP）、10 μmol/L SB203580（SB）分别孵育皮肤成纤维细胞,实验分为无UVA照射的对照组、SP组、SB组及10 J/cm2 UVA照射的对照（UVA）组、UVA-SP组、UVA-SB组。先以Western印迹检测各组UVA照射后1.5 h磷酸化c-Jun（p-c-Jun） 和磷酸化MAPKAPK2（p-MAPKAPK2）表达,再以RT-PCR 和Western印迹检测各组照射后48 h CatK mRNA、蛋白的表达。 结果 皮肤成纤维细胞在UVA照射后0.75、1.5 h,p-JNK表达的灰度值分别为4.77 ± 0.19和4.68 ± 0.09,p-P38分别为2.44 ± 0.13、2.30 ± 0.04,均较照射前（p-JNK为3.2 ± 0.27,p-P38为1.61 ± 0.08）显著升高（均P ＜ 0.05）;而在照射后3、6 h的表达与照射前相比差异无统计学意义（P ＞ 0.05）。p-c-Jun在UVA-SP组表达（2.55 ± 0.48）、p-MAPKAPK2在UVA-SB组表达（1.16 ± 0.12）均显著低于UVA组（分别为4.85 ± 0.96和2.46 ± 0.09）,均P ＜ 0.05。UVA-SP组、UVA-SB组CatK mRNA、蛋白的表达分别降为UVA组的38.9%、28.7%和55.7%、49.6%（P ＜ 0.05）,UVA-SP组CatK mRNA、蛋白的表达也均显著低于UVA-SB组（P ＜ 0.05）。 结论 JNK和P38信号通路在调控UVA上调的皮肤成纤维细胞CatK表达中起重要作用。     

核因子κB、细胞间黏附分子1在扁平苔藓中的表达和意义

为探讨核因子κB（NF—κB）和细胞间黏附分子-1（ICAM-1）在扁平苔藓皮损中表达的变化及其在皮损形成过程中的作用。采用免疫组织化学染色法检测核因子κB亚单位P65（NF—κBP65）和ICAM-1在32例扁平苔藓皮损中的表达，25例正常皮肤组织作为对照。结果：（1）扁平苔藓皮损中NF—κBP65和ICAM-1表达的阳性率分别为78．13％和93．75％；25例正常皮肤组织中，NF—JcBP65无一例阳性表达，ICAM-1表达的阳性率为20％；二者的表达在扁平苔藓皮损中和正常皮肤组织中之间差异显著，P〈0．01。（2）NF—κBP65和ICAM-1在扁平苔藓皮损中的表达呈正相关（r=0．722，P〈0．01）。NF-κB及ICAM-1在扁平苔藓发病中可能发挥重要作用。     

白介素6在痤疮囊肿皮损中的表达及痤疮丙酸杆菌体外对THP-1细胞白介素6水平的影响

目的 检测寻常痤疮患者囊肿皮损中白介素6（IL?6）的表达,并观察痤疮丙酸杆菌体外对人急性单核细胞白血病细胞系THP?1信号分子p38MAPK及白介素6水平的影响。方法 实时荧光定量PCR检测6例痤疮患者囊肿皮损和6例健康人皮肤组织中IL?6 mRNA表达水平。用2 × 106、2 × 107、2 × 108 CFU/ml灭活痤疮丙酸杆菌菌悬液或脂多糖（100 μg/L）刺激THP?1细胞,同时设培养基对照组和p38MAPK抑制剂SB203580组（先用20 μmol/L SB203580处理,再用2 × 108 CFU/ml痤疮丙酸杆菌刺激）,作用不同时间（1 ~ 6 h）后,实时荧光定量PCR检测IL?6 mRNA表达水平,酶联免疫吸附试验检测上清液中IL?6含量。2 × 108 CFU/ml灭活痤疮丙酸杆菌菌悬液刺激THP?1细胞15、30、60 min或脂多糖（100 μg/L）刺激30 min后,Western印迹法检测p38MAPK和磷酸化p38MAPK表达水平。结果 痤疮囊肿皮损和健康对照皮肤IL?6 mRNA水平分别为3.680 ± 0.790、1.155 ± 0.250,两组比较差异有统计学意义（t = 3.047,P < 0.05）。双因素方差分析显示,不同浓度痤疮丙酸杆菌组、脂多糖组、培养基对照组IL?6 mRNA表达水平差异有统计学意义（F = 532.3,P < 0.001,ν = 4）,痤疮丙酸杆菌刺激1、3、6 h之间差异也有统计学意义（F = 526.6,P < 0.001,ν = 2）。2 × 108 CFU/ml痤疮丙酸杆菌组、脂多糖组、培养基对照组上清液中IL?6浓度分别为（1 618.22 ± 32.23）、（3 212.06 ± 353.00）、（147.10 ± 0.53） ng/L,3组间差异有统计学意义（ν = 2,F = 102.35,P < 0.01）。2 × 108 CFU/ml痤疮丙酸杆菌作用于THP?1细胞15、30、60 min后磷酸化p38MAPK蛋白水平升高。SB203580组THP?1细胞IL?6 mRNA水平与未抑制组比较明显降低（t = 15.91,P = 0.004）。结论 寻常痤疮患者囊肿中IL?6 mRNA水平显著升高。痤疮丙酸杆菌体外可激活人THP?1细胞信号分子p38MAPK,促进其分泌IL?6。     

扁平苔藓皮损中EGR-1和IL-6的表达

目的：检测早期生长反应因子-1（EGR-1）和白介素-6（IL-6）在扁平苔藓（LP）皮损中的表达。方法：采用免疫组织化学技术检测30例扁平苔藓和30例正常皮肤组织中EGR-1和IL-6的表达。结果：EGR-1与IL-6在扁平苔藓组织中的表达明显高于正常皮肤组织，差异有统计学意义（P〈0．05），且二者在扁平苔藓皮损处的表达呈正相关（r=0．502，P=〈0．05）。结论：EGR-1和IL-6的高表达可能参与了扁平苔藓的发病。     

IL-22在扁平苔藓中的表达

目的：研究IL-22在扁平苔藓皮损中的表达,探讨其在扁平苔藓疾病中的作用。方法：免疫组化检测IL-22在30例扁平苔藓皮损和10例正常皮肤组织中的表达。结果：在扁平苔藓皮损中IL-22主要表达于表皮全层的角质形成细胞和真皮浅层浸润的淋巴细胞胞质,在正常皮肤中IL-22主要表达于基底层附近的角质形成细胞,IL-22在扁平苔藓皮损的表达水平明显高于正常皮肤（P<0.01）。结论：IL-22在扁平苔藓发病中可能起一定作用。     

CD44分子在扁平苔藓中的表达

目的：检测扁平苔藓皮损组织中粘附分子CD44的表达。方法：对30例扁平苔藓患者的皮损组织、10例正常皮肤组织、10例病理上以淋巴细胞浸润为主的皮损组织进行免疫组化染色。结果：在扁平苔藓皮损中,表皮及真皮中CD44分子的表达较正常皮肤及以淋巴细胞浸润为主的皮损组织均明显增强,差异有统计学意义（P<0.01）。结论：CD44分子可能与扁平苔藓发病相关。     

血管内皮生长因子在扁平苔藓及银屑病皮损中的表达

目的探讨扁平苔藓及银屑病患者皮损表皮血管内皮生长因子(VEGF)表达情况。方法用抗VEGF及CD34抗体行免疫组化染色,对扁平苔藓及银屑病皮损标本进行观察,计数表皮下方真皮的毛细血管密度。结果正常人表皮VEGF基本阴性,扁平苔藓及银屑病患者非病变部VEGF阴性,移行部表皮上层VEGF染色逐渐由弱到强,由间断到连续;病变部表皮VEGF阳性,以表皮上层细胞质的细颗粒状染色为主。CD34染色各部分真皮上层毛细血管密度为;扁平苔藓的非病变部(45.61±15.70)个/mm²、移行部(68.63±15.36)个/mm²、病变部(92.07±16.84)个/mm²;银屑病的非病变部(43.73±14.55)个/mm²、移行部(72.12±18.81)个/mm²、病变部(100.29±21.93)个/mm²,各病种三个部位之间比较差异均有统计学意义。结论扁平苔藓及银屑病皮损表皮分泌VEGF,并与真皮毛细血管增生扩张密切相关。     

Th17和Treg细胞与蕈样肉芽肿相关性研究

目的 探讨调节性T（Treg）细胞和Th17细胞在蕈样肉芽肿不同分期中的变化。 方法 流式细胞仪检测28例蕈样肉芽肿、13例大斑块型副银屑病、17例扁平苔藓患者及10例健康对照外周血Treg细胞和Th17细胞百分率,同时应用免疫组化法检测40例蕈样肉芽肿、13例副银屑病、17例扁平苔藓及10例健康对照蜡块组织中叉头状转录因子P3（FOXP3）和白细胞介素17（IL-17）的表达。 结果 蕈样肉芽肿、副银屑病、扁平苔藓患者外周血Treg细胞百分率分别为（8.09 ± 1.68）%,（6.53 ± 1.67）%,（2.84 ± 1.16）%较健康对照［（1.01 ± 0.35）%］升高,差异均有统计学意义。蕈样肉芽肿、副银屑病患者外周血Treg细胞百分率亦高于扁平苔藓（均P < 0.05）;蕈样肉芽肿与副银屑病患者差异无统计学意义（P > 0.05）。外周血Th17细胞百分率在蕈样肉芽肿较副银屑病、扁平苔藓患者比健康人升高［（3.22 ± 0.82）%比（2.46 ± 0.79）%,（1.38 ± 0.47）%和（0.59 ± 0.30）%,均P < 0.05］。FOXP3阳性率在蕈样肉芽肿、副银屑病及扁平苔藓均高于正常皮肤组织［（14.94 ± 4.46）%,（11.95 ± 4.72）%,（6.32 ± 2.81）%比（3.43 ± 1.79）%,均P < 0.05］,蕈样肉芽肿及副银屑病比扁平苔藓高（均P < 0.05）,蕈样肉芽肿比副银屑病差异无统计学意义（P > 0.05）。IL-17阳性率在蕈样肉芽肿、副银屑病、扁平苔藓和正常组织中分别为（15.89 ± 4.27）%,（12.02 ± 3.34）%,（4.84 ± 1.93）%和（2.62 ± 0.89）%,其中,蕈样肉芽肿均高于副银屑病、扁平苔藓组织及正常组织（均P < 0.05）。蕈样肉芽肿、副银屑病外周血Th17/Treg细胞比率比扁平苔藓、健康对照低（0.41 ± 0.11,0.39 ± 0.12比0.50 ± 0.06,0.57 ± 0.19（均P < 0.05）。早期蕈样肉芽肿Th17细胞与Treg细胞呈正相关（r = 0.423,P < 0.05）,肿瘤期蕈样肉芽肿Th17细胞有所下降,而Treg细胞继续升高,但蕈样肉芽肿各期差异无统计学意义,且二者在肿瘤期无相关性。 结论 Treg和Th17细胞失衡可能参与了蕈样肉芽肿的发生与发展。     

microRNA-125b及其相关因子Bcl-2、 MMP-2在扁平苔藓中的表达

 目的:检测microRNA-125b（miRNA-125b）及其下游靶蛋白B细胞淋巴瘤-2 (Bcl-2) 蛋白、基质金属蛋白酶-2（MMP-2）在扁平苔藓(LP）中的表达，探讨其在发病中的意义。方法：采用RT-PCR法检测miRNA-125b在LP组织及正常皮肤组织的表达水平，ELISA法检测Bcl-2、MMP-2在LP组织及正常皮肤组织的表达水平，并进行比较。使用Spearman秩相关检验评估miRNA-125b与Bcl-2表达水平之间的相关性。结果：与正常组相比，LP患者组织中Bcl-2表达明显升高(0.52±0.05比0.49±0.04，t=2.84,P=0.018)，MMP-2表达明显升高(7.48±2.88比5.78±3.82，t=2.19,P=0.032)，而miRNA-125b表达明显下调(0.54±0.62比0.93±0.93，t=2.18,P=0.033)。Spearman秩相关分析显示miRNA-125b表达与Bcl-2呈负相关(r=-0.26，P=0.027),但与MMP-2无明显相关（r=-0.22,P=0.056）。结论：miRNA-125b可能是LP治疗的潜在治疗靶点，在LP发病机制中发挥关键作用。     

扁平苔藓皮损中肿瘤坏死因子α的表达及其与浸润淋巴细胞间的关系

目的 探讨肿瘤坏死因子-α(TNF-α)在扁平苔藓中的表达及其与淋巴细胞浸润的相关性.方法 采用SP免疫组织化学技术对60例扁平苔藓皮损及20例正常皮肤中TNF-α进行检测,并记录每个视野中淋巴细胞浸润数量.结果扁平苔藓皮损中TNF-α阳性表达率为72％,阳性染色主要位于棘细胞膜、真皮浸润的淋巴细胞胞质或胞膜;20例正...