不同效力糖皮质激素对HaCaT细胞糖皮质激素受体调节的比较

临床上皮肤科医生常根据患者不同的皮损状况选用不同效力的糖皮质激素(glucocorticoid,GC)外用制剂,以达到理想的治疗效果.本课题组前期研究已发现,GC具有下调角质形成细胞糖皮质激素受体(glucocorticoid receptor,GR)α的表达和上调GRβ表达的作用,从而导致外用GC制剂皮肤耐受,疗效降低[1-2].对GC效力等级的判定主要依据其收缩血管作用的强弱而定,那么不同效力的GC外用制剂对角质形成细胞GR表达的调节作用有何差异呢?针对这一问题,本研究以人角质形成细胞为研究对象.观察并比较经不同效力GC作用后人角质形成细胞HaCaT GRα和GRβ的表达情况,希望为临床合理地使用不同效力GC外用制剂提供理论和实验依据.     

地塞米松对HaCaT细胞糖皮质激素受体α表达的影响

目的:探讨糖皮质激素(GC)对角质形成细胞的糖皮质激素受体α(GRα)表达的影响.方法:采用反转录(RT)PCR和Western blotting,观察在不同浓度及不同时间的地塞米松作用下,培养的人角质形成细胞株(HaCaT细胞)GRα mRNA和蛋白质的表达情况.结果:地塞米松可下调HaCaT细胞GRα的表达,作用呈时间依赖性.结论:Gc对HaCaT细胞GRα的表达呈时间依赖性下调,可以部分解释持续外用GC制剂皮肤耐受现象以及对GC治疗的抵抗.     

3种糖皮质激素对HaCaT细胞核因子-κB/抑制蛋白IκBα调节的比较

目的:比较3种不同糖皮质激素对角质形成细胞的核因子(NF)-kB/IkBα调节效应的差异.方法:将培养的人角质形成细胞HaCaT细胞分为空白对照组、氢化可的松组、地塞米松组、倍他米松组,采用反转录(RT)-PCR和蛋白印迹试验检测各组HaCaT细胞的IkBα mRNA和蛋白质表达,用蛋白印迹试验检测NF-kB核蛋白的表达情况.结果:3种糖皮质激素均具有诱导HaCaT细胞IkBα的表达而抑制NF-kB核转位的作用,其中氢化可的松作用最弱,地塞米松与倍他米松无明显差异.结论:不同效力的糖皮质激素对角质形成细胞NF-kB/IkBα的调节效力不同.提示临床上正确选用不同效力糖皮质激素外用制剂的必要性.     

不同效力糖皮质激素对HaCaT细胞糖皮质激素受体调节的比较

【摘要】目的 比较三种不同的糖皮质激素对角质形成细胞的糖皮质激素受体调节效应的差异。 方法 将培养的人角质形成细胞HaCaT细胞分为空白对照组、氢化可的松作用组、地塞米松作用组、倍他米松作用组,采用反转录Real-Time PCR和Western blotting法检测各组HaCaT细胞的GRα、GRβ mRNA和蛋白质表达。 结果 三种激素均具有下调HaCaT细胞GRα表达的作用,其中氢化可的松作用最弱,而地塞米松与倍他米松作用之间无明显差异;三种激素均具有上调HaCaT细胞GRβ表达的作用,但此作用之间无明显差异。 结论 不同效力的糖皮质激素对角质形成细胞GRα和GRβ的调节效力不同,可指导临床上正确应用不同效力糖皮质激素外用制剂。     

肿瘤坏死因子-α对角质形成细胞株HaCaT细胞糖皮质激素受体表达的影响

目的:研究肿瘤坏死因子(TNr)-α对角质形成细胞糖皮质激素受体(GR)表达的影响.方法:采用反转录实时定量PCR和Western blotting观察经TNF-α作用后,培养的人角质形成细胞株HaCaT细胞的GRα、Cnβ mRNA和蛋白质的表达情况.结果:TNF-α对HacaT细胞GRα的表达无明显影响,但可上调HacaT细胞GRB的表达,并且呈剂量和时间依赖.结论:TNF-α可增加GRβ的表达,可能是炎性细胞因子参与诱发糖皮质激素皮肤耐受现象的内在机制之一.     

慢性湿疹皮损中糖皮质激素受体-α表达下调

目的 探讨糖皮质激素受体-α(glucocorticoid receptor α, GRα)在慢性湿疹皮损中的表达.方法 采用逆转录-多聚酶链式反应(RT-PCR)和SP免疫组化染色技术检测慢性湿疹皮损中GRα的表达情况.结果 与正常对照皮肤相比,慢性湿疹皮损中GRα的mRNA和蛋白表达均显著下调.结论 慢性湿疹中GRα表达下调可能会干扰皮损局部糖皮质激素的抗炎机制,降低外用糖皮质激素的疗效.     

糖皮质激素受体-α、核因子-KB、肿瘤坏死因子-α和白介素-1β在慢性皮炎中的表达

目的：探讨糖皮质激素受体（glucocorticoid receptor，GR）-α、核因子（NF）-kB、肿瘤坏死因子（TNF）-α和白介素（IL）-1β在慢性皮炎中的表达及其意义。方法：采用SP免疫组化染色技术检测慢性皮炎与正常对照皮肤中GR—α、NF—kB、TNF—α及IL-1β的表达及其分布。结果：GR—α在慢性皮炎组与正常对照组皮肤中阳性表达的分布情况一致，GR—α不但在表皮呈弥漫性表达，还可表达于汗腺及汗管、真皮成纤维细胞、微血管内皮细胞及其周围的一些细胞成分。然而，与正常对照皮肤相比，GR—α在慢性皮炎皮损角质形成细胞及真皮血管内皮细胞的表达明显减弱。NF—kB在慢性皮炎组与正常对照组皮肤中阳性表达主要分布在表皮角质形成细胞中，在正常对照组皮肤中均为胞质表达，而在慢性皮炎组中为胞质表达和（或）胞核均有表达。TNF—α及IL-1β在慢性皮炎与正常对照皮肤角质形成细胞胞质中的表达无明显差异，为弱阳性反应。结论：慢性皮炎皮损区角质形成细胞中GR—α的表达下调有可能会影响皮损局部的抗炎机制。     

慢性湿疹皮损中糖皮质激素受体-α表达下调

目的：探讨糖皮质激素受体-α（glucocorticoid receptor α，GRα）在慢性湿疹皮损中的表达。方法：采用逆转录-多聚酶链式反应（RT—PCR）和SP免疫组化染色技术检测慢性湿疹皮损中GRα的表达情况。结果：与正常对照皮肤相比，慢性湿疹皮损中GRα的mRNA和蛋白表达均显著下调。结论：慢性湿疹中GRα表达下调可能会干扰皮损局部糖皮质激素的抗炎机制，降低外用糖皮质激素的疗效。     

他克莫司对HaCaT细胞核因子-κB和糖皮质激素受体表达的影响

目的 探讨他克莫司对TNF-α刺激的HacaT细胞核因子-κB(NF-κB)表达的影响,以及对HaCaT细胞糖皮质激素受体(GR)α和β表达的影响.方法 采用Western印迹和免疫荧光-激光共聚焦显微镜技术观察:①以TNF-α(10μg/L)单独或TNF-α(10μg/L)与他克莫司(10-8mol/L、10-7mol/L、10-6mol/L)同时作用HaCaT细胞,在24h和48h分别观察胞核NF-κB的表达;②以他克莫司(10-8mol/L、10-7mol/L、10-6mol/L)作用HaCaT细胞,在12h、24h和36h分别观察GRα和GRβ的表达.结果 未处理组HaCaT细胞的胞核有NF-κB(p65)蛋白的表达,灰度值比值为0.4988±0.03506;TNF-α作用24h和48h后,HaCaT细胞胞核NF-κB(p65)表达随时间延长而增强,灰度值比值分别为0.73±0.0316和0.8925±0.0171,与未处理组相比较.差异均有统计学意义(P<0.05).TNF-α与10-8 mol/L、10-7 mol/L、10-6mol/L他克莫司同时作用组HaCaT细胞胞核NF-κB表达灰度值比值分别为0.6825±0.0263、0.6200±0.0163和0.5575±0.0299,NF-κB表达随他克莫司浓度增加而减弱,后两组与TNF-α单独作用组相比,差异均有统计学意义(P<0.05).各浓度他克莫司作用24h和48h的NF-κB表达差异均无统计学意义(P>0.05).与未处理组相比,不同浓度他克莫司作用HaCaT细胞后,各时相点GRα和GRβ的表达差异均无统计学意义(P>0.05).结论 他克莫司能以浓度依赖方式抑制TNF-α刺激的角质形成细胞胞核NF-κB的表达,不影响角质形成细胞GRα和GRβ的表达.     

狼疮肾炎患者糖皮质激素受体亚型GRα和GRβ mRNA表达的研究

目的探讨狼疮肾炎患者对糖皮质激素(以下简称激素)治疗反应不同的分子机制.方法采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测正常对照组(10例)和狼疮肾炎组(28例,其中激素敏感组10例、激素依赖组10例、激素抵抗组8例)外周血单个核细胞(PBMCs)内GRα与GRβmRNA表达水平的变化.结果与正常对照组相比,狼疮肾炎患者三组中GRα mRNA的表达水平均降低,差异有显著性(P＜0.05);GRβmRNA在激素抵抗组中表达明显增高,差异有显著性(P＜0.01),而在激素敏感组、激素依赖组中表达无明显差异(P＞0.05).结论狼疮肾炎患者糖皮质激素受体GRα、GRβmRNA表达水平的变化,导致GRα与GRβ比例失调,使组织细胞对激素的敏感性降低,因此,导致狼疮肾炎的患者对糖皮质激素治疗反应不同,狼疮肾炎患者出现激素抵抗可能与GRβmRNA表达水平增高有关.     

糖皮质激素受体-α、核因子-κB、肿瘤坏死因子-α和白介素-1β在慢性皮炎中的表达

目的:探讨糖皮质激素受体(glucocorticoidreceptor,GR)-α、核因子(NF)-κB、肿瘤坏死因子(TNF)-α和白介素(IL)-1β在慢性皮炎中的表达及其意义。方法:采用SP免疫组化染色技术检测慢性皮炎与正常对照皮肤中GR-α、NF-κB、TNF-α及IL-1β的表达及其分布。结果:GR-α在慢性皮炎组与正常对照组皮肤中阳性表达的分布情况一致,GR-α不但在表皮呈弥漫性表达,还可表达于汗腺及汗管、真皮成纤维细胞、微血管内皮细胞及其周围的一些细胞成分。然而,与正常对照皮肤相比,GR-α在慢性皮炎皮损角质形成细胞及真皮血管内皮细胞的表达明显减弱。NF-κB在慢性皮炎组与正常对照组皮肤中阳性表达主要分布在表皮角质形成细胞中,在正常对照组皮肤中均为胞质表达,而在慢性皮炎组中为胞质表达和(或)胞核均有表达。TNF-α及IL-1β在慢性皮炎与正常对照皮肤角质形成细胞胞质中的表达无明显差异,为弱阳性反应。结论:慢性皮炎皮损区角质形成细胞中GR-α的表达下调有可能会影响皮损局部的抗炎机制。     

糖皮质激素局部治疗斑秃的疗效与皮损角质形成细胞α受体表达的关系

目的探讨糖皮质激素(GC)局部治疗斑秃的疗效与皮损角质形成细胞的糖皮质激素α受体(GR-α)表达的相关性。方法门诊确诊的斑秃患者治疗前取皮损,用ELISA法检测分离提取角质形成细胞蛋白质中的GR-α。均予卤米松乳膏外搽治疗3个月,对42例完成试验的斑秃患者按疗效分为痊愈、显效、进步及无效,痊愈加显效组为有效组,进步加无效为抵抗组。比较各组GR-α表达的差异。结果卤米松治疗斑秃的有效率为64.29%,角质形成细胞GR-α的表达显效、进步及无效组分别与痊愈组比较,差异均无显著性意义(P均>0.05),但有效组明显高于抵抗组,差异有统计学意义(P<0.05)。Spearman相关分析发现GR-α的表达与疗效无明显相关性。结论卤米松乳膏治疗斑秃时,有效组皮损GR-α的表达高于抵抗组,但GR-α的表达与疗效无明显的量效相关性。     

天疱疮患者外周血单一核细胞糖皮质激素受体mRNA的表达

目的 通过检测外周血单一核细胞(PBMC)糖皮质激素受体(GR)mRNA的表达预测天疱疮患者对糖皮质激素(简称激素)治疗的疗效。方法 用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法,对30例天疱疮患者及30例健康对照者PBMCGRα及GRβ的mRNA进行检测。结果 所有天疱疮患者及健康对照者均可检测到GRαmRNA,且天疱疮患者中GRαmRNA的表达水平显著低于正常人对照组(P=0.044),但在激素治疗控制组及未控制组之间,GRαmRNA的表达水平差异无统计学意义。GRβmRNA的检出率:激素治疗未控制组为83%(10/12),激素治疗控制组为17%(3/18),正常人对照组为30%(9/30),GRβmRNA的阳性率在激素治疗控制组与未控制组之间差异有统计学意义(P<0.001)。结论 激素治疗未控制组天疱疮患者PBMC上GRβmRNA表达增加,GRβ在决定天疱疮患者对激素治疗疗效上有一定作用。     

与皮肤病相关的糖皮质激素受体的调节作用及意义

糖皮质激素(以下简称激素)的作用主要通过糖皮质激素受体介导.糖皮质激素受体的表达水平及功能状态决定着激素作用的正常发挥.激素外用制剂是炎症性皮肤病的主要治疗药物,不同个体存在对外用激素敏感程度的差异性,长期外用激素导致的副作用也限制着疗效.深入研究皮肤相关的糖皮质激素及受体作用的调节机制对于提高激素外用制剂的疗效具有重要的指导意义.     

地塞米松对HaCaT细胞核因子-κB/IκB表达的影响

目的:探讨地塞米松对角质形成细胞核因子(NF)-κB活性及其抑制蛋白(IKB)α表达的调节作用.方法:采用反转录-荧光实时定量PCR和蛋白印迹试验.观察经不同浓度及不同时间的地塞米松作用下.培养的人角质形成细胞HaCaT细胞的IκBα mRNA和蛋白质的表达;用蛋白印迹试验检测NF-κB核蛋白的表达情况.结果:地塞米松可诱导HaCaT细胞IKBα的表达而抑制NF-κB核转位,此作用呈浓度依赖性效应,在36 h时作用最明显.结论:糖皮质激素通过调控人角质形成细胞NF-κB/IκB信号通路.可抑制皮损局部的炎症反应.     

糖皮质激素受体与褪黑素受体在斑秃皮损中的表达

目的:检测斑秃(AA)患者皮损及健康头皮标本中糖皮质激素受体(GR)和褪黑素受体(MR)的表达.方法:用免疫组化法检测15例AA患者和16例正常对照组GR-α、GR-β、MR1的表达.结果:GR-α的表达在AA组明显强于健康组(P＜0.05);在毛囊生长期和静止期细胞中AA组GR-α的表达强于健康组(P＜0.01);GR-β在AA组与健康组的表达无统计学意义(P＞0.05);MR1在AA组表皮层表达弱于健康组(P＜0.05);在真皮间质炎细胞中AA组高于健康组,并与间质炎细胞分布关系密切(P＜0.05).结论:GR-α不仅在正常毛发生长中起着重要作用,而且通过对毛囊生长期和静止期的影响参与了斑秃的发生.     

外用糖皮质激素对皮肤屏障系统的影响

短期局部外用糖皮质激素会明显降低皮肤屏障功能的恢复速度,长期使用糖皮质激素则会引起屏障结构的改变。外用糖皮质激素对皮肤屏障的破坏机制众多,其中包括抑制角质形成细胞增殖,影响角蛋白、中间丝聚合蛋白的分化、影响角化桥粒、角质形成细胞间质的形成等。因此,在糖皮质激素依赖性皮炎的治疗及使用糖皮质激素进行疾病的治疗中应适当使用皮肤屏障保护产品。     

正确外用糖皮质激素

外用糖皮质激素是治疗很多皮肤病的主要方法之一,如果使用得当,安全有效,不良反应通常较小.如果患者把不同效力的外用糖皮质激素相混淆,过分地强调外用糖皮质激素的不良反应,并将其和系统应用糖皮质激素的不良反应等同起来,可造成临床上用药量不足,疗效不理想.英国皮肤病学专家就外用糖皮质激素的使用达成共识,结合该共识,介绍正确使用外用糖皮质激素的方法,消除对该类药物的恐惧感.     

糖皮质激素受体与狼疮肾炎治疗关系的研究

目的:检测狼疮肾炎患者外周血单个核细胞糖皮质激素受体(GR)位点数及GR mRNA的表达.方法:采用放射性配基结合位点分析法及RT-PCR方法检测38例狼疮肾炎患者GR位点数及其mRNA含量.结果:狼疮肾炎患者血中糖皮质激素和促肾上腺皮质激素与正常对照组相比,差异无统计学意义(P＞0.05),外周血单个核细胞GR位点数及其GR mRNA表达水平显著降低(P<0.01).结论:狼疮肾炎患者体内存在GR数目及转录过程的异常,可能与糖皮质激素治疗的效果不同有关.     

系统性红斑狼疮糖皮质激素抵抗的研究

系统性红斑狼疮(SLE)是一种典型的自身免疫性炎症性结缔组织疾病,临床上可表现为多系统、多脏器受累。文中从GC及糖皮质激素受体(GR)作用途径,SLE耐药受体前机制、受体水平机制及受体后机制的研究阐述系统性红斑狼疮糖皮质激素抵抗的原因。