槲皮素对TGF-β1诱导的大鼠肾小管上皮细胞细胞外基质积聚的影响

目的：观察转化生长因子（TGF）-β₁对大鼠肾小管上皮细胞MCP-1、PAI-1和Col-Ⅰ表达的影响，并探讨槲皮素的作用。方法:以大鼠肾小管上皮细胞（NRK-52E）为研究对象，采用TGF-β₁(10 μg/L)刺激，部分实验中培养的细胞在刺激前用槲皮素(50 μmol/L)预处理90 min。MCP-1及COL-Ⅰ mRNA的表达采用RT-PCR检测。PAI-1mRNA和蛋白的表达分别采用RT-PCR和Western blotting 法检测。结果:NRK-52E 细胞在TGF-β₁刺激后MCP-1 mRNA显著上调，在2 h开始升高，8 h达高峰，呈时间依赖性；PAI-1 mRNA和蛋白的表达也显著增加；同时，TGF-β₁还显著上调Col-ⅠmRNA的表达，24 h为正常的2.4倍（P<0.05）。槲皮素预处理后，TGF-β₁诱导的MCP-1、PAI-1和Col-Ⅰ的上调表达均受到明显抑制（P<0.05）。结论:槲皮素能够通过抑制MCP-1、PAI-1和Col-Ⅰ的表达而部分逆转TGF-β₁诱导的肾小管上皮细胞细胞外基质的积聚，这可能有利于延缓肾间质纤维化的发生和发展。     

银杏叶提取物对转化生长因子β1诱导的人肾小管上皮细胞转分化的影响及其机制

目的：研究银杏叶提取物(extract of ginkgo biloba, EGB)对转化生长因子β₁(transforming growth factor-β₁ TGF-β₁)诱导的人肾小管上皮细胞HK2(human tubular epithelial cells)转分化的影响及其机制。方法:复苏并传代培养HK2细胞，应用10 μg/L TGF-β₁诱导HK2细胞向间充质的转分化，给予EGB干预。应用Western印记法检测HK2细胞E-钙黏蛋白(E-cadherin)、α- 平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin, α-SMA)、NADPH氧化酶p67phox以及超氧化物歧化酶（superoxide dismutase, SOD）的表达，检测细胞培养液上清中丙二醛（malondialdehyde, MDA）的含量。结果:EGB显著抑制TGF-β₁诱导的E-cadherin下调(P＜0.05)和α-SMA上调(P＜0.05)； EGB显著抑制TGF-β₁诱导的p67phox表达增加(P＜0.05)，显著抑制TGF-β₁诱导的SOD表达降低(P＜0.05);同时，TGF-β₁显著促进了MDA的产生(P＜0.05),EGB可以部分抑制TGF-β₁刺激的MDA浓度的升高(P＜0.05)。结论:EGB显著抑制TGF-β₁诱导的HK2细胞转分化，其机制可能是EGB 抑制了TGF-β₁诱导的p67phox上调并上调SOD的表达。     

血小板反应蛋白1在转化生长因子β1诱导的大鼠心肌成纤维细胞中的作用

目的：观察血小板反应蛋白1（TSP-1）在转化生长因子β₁(TGF-β₁)诱导大鼠心肌成纤维细胞中的作用。方法: 差速贴壁法分离新生Sprague-Dawley(SD)大鼠心肌成纤维细胞(CFs)。MTT法测CFs生长,羟脯氨酸法测CFs胶原含量,RT-PCR 法测TSP-1mRNA表达。结果: TGF-β₁诱导CFs TSP-1的表达呈浓度-时间依赖性增加(P<0.01)。TGF-β₁（20 μg/L）作用下24 h可诱导CFs增殖和胶原合成(P<0.01)。TSP-1反义寡核苷酸作用后的CFs的MTT A值、胶原含量减少(P<0.01)。结论: TGF-β₁可诱导新生大鼠CFs TSP-1表达,TSP-1反义寡核苷酸对TGF-β1诱导大鼠CFs增殖与胶原合成具有明显的抑制作用,TSP-1在TGF-β₁诱导大鼠心肌纤维化中可能具有重要的作用。     

前列腺素E2抑制转化生长因子-β1诱导的人胚肺成纤维细胞转分化及胶原合成

目的：研究前列腺素E₂（PGE₂）对转化生长因子-β₁（TGF-β₁） 诱导人胚肺成纤维细胞（HLF）转分化及促胶原(COL)合成作用的干预。方法： HLF 细胞生长至融合后分为 ①对照组、②TGF-β₁组、③TGF-β₁+PGE₂组、④TGF-β₁+吲哚美辛组，给予干预24 h后用细胞免疫荧光及Western blotting法观察发生转分化为肌成纤维细胞的标志蛋白 α-平滑肌动蛋白（α-SMA）的表达，用RT-PCR法检测结缔组织生长因子（CTGF）mRNA和Ⅰ型胶原（COLⅠ）mRNA的水平，用免疫细胞化学法检测CTGF蛋白表达，比色法检测培养上清中羟脯氨酸含量。结果: TGF-β₁ 可将HLF转分化为 α-SMA 阳性表达的肌成纤维细胞，PGE₂则能抑制这种转分化作用；PGE₂ 可显著减低TGF-β₁ 致肌成纤维细胞、CTGFmRNA与蛋白水平（P<0.05）和COLⅠmRNA 水平升高（P<0.05）； 吲哚美辛升高TGF-β₁ 致HLF肌成纤维细胞CTGF与COLⅠ的表达； 放线菌酮预处理肌成纤维细胞3 h后再加入TGF-β₁＋PGE₂，其COLⅠmRNA 水平明显低于TGF-β₁ 处理组水平（P<0.05）。结论: PGE₂可抑制TGF-β₁ 对成纤维细胞的转分化及促胶原合成作用, 且可通过依赖CTGF和非依赖2种方式下调COLⅠ的转录。     

核因子-κB对TNF-α诱导的大鼠气道平滑肌细胞增殖、凋亡及TGF-β1表达的影响

目的: 探讨核因子-κB(NF-κB)对TNF-α诱导的大鼠气道平滑肌细胞（ASMCs）增殖、凋亡和转化生长因子β₁（TGF-β₁）表达的影响。方法: 体外培养ASMCs，以肿瘤坏死因子-α（TNF-α）及NF-κB特异性抑制剂二硫代氨基甲酸吡咯烷(PDTC)作为工具药,将ASMCs分为对照组、TNF-α组和TNF-α+PDTC组。逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测TGF-β₁ mRNA表达，Western blotting检测NF-κB、TGF-β₁的表达，免疫细胞化学染色法检测PCNA、Bcl-2蛋白表达及定位，四甲基偶氮唑蓝(MTT)微量比色法测定ASMCs增殖，Annexin V/PI双标记流式细胞仪分析法检测细胞凋亡。结果: （1）TNF-α组ASMCs的NF-κB活性显著高于对照组(P<0.01),TNF-α+PDTC组NF-κB活性显著低于TNF-α组 (P<0.01)。（2）TNF-α组ASMCs增殖显著高于对照组(P<0.01),TNF-α＋PDTC组的增殖反应显著低于TNF-α组(P<0.01)；TNF-α+PDTC组细胞凋亡率显著高于TNF-α组及对照组(P<0.01)。（3）TNF-α组ASMCs的PCNA、Bcl-2蛋白表达量均显著高于对照组(P<0.01)，TNF-α+PDTC组的PCNA、Bcl-2蛋白表达量均显著低于TNF-α组(P<0.01)。（4）TNF-α组ASMCs的TGF-β₁的mRNA及蛋白表达水平均显著高于对照组及TNF-α＋PDTC组（P<0.01）。结论: NF-κB活化可能参与调控TNF-α诱导的大鼠气道平滑肌细胞的增殖、凋亡及TGF-β₁的表达和分泌。     

糖尿病大鼠心肌TGF-β1表达及细胞凋亡的实验研究

目的:研究糖尿病大鼠心肌转化生长因子β1(TGF-β₁)表达水平和细胞凋亡的变化，探讨糖尿病性心肌病的病理生理机制。方法：链脲菌素法复制不同病程的糖尿病模型。免疫组化方法测定TGF-β₁的表达。DNA断端末端标记法测定心肌细胞凋亡指数。结果：糖尿病大鼠心肌细胞TGF-β₁表达明显高于正常对照组（P<0.01）。TUNEL法测定心肌细胞的凋亡阳性细胞数量在糖尿病早期明显高于正常，晚期有所减少。结论：TGF-β₁在糖尿病的心肌中表达增加，且随病程发展而上升，可能是糖尿病心肌纤维化的重要促发因子。糖尿病心肌中细胞凋亡现象随病程延长而逐渐减弱，机制有待探讨。     

四逆汤对兔髂动脉球囊损伤病变区TGF-β1表达的影响

目的:通过球囊损伤兔髂动脉造成动脉损伤的模型，观察四逆汤对损伤后动脉内膜的保护和修复作用以及对转化生长因子β1（TGF-β₁）的影响。 方法:雄性新西兰兔24只，随机分为对照组、模型组、四逆汤治疗组（四逆汤组），每组8只。对照组给予普通饲料，模型组和四逆汤组给予高脂饮食。饲养2周后模型组、四逆汤组兔行髂动脉内膜剥脱术。术后4周处死各组实验兔，采用ELISA方法检测血清TGF-β₁水平；HE染色观察髂动脉内膜增生情况，通过免疫组化观察TGF-β₁蛋白在血管壁的表达；采用RT-PCR方法检测血管壁TGF-β₁ mRNA的表达。 结果:病理观察可见对照组兔髂动脉管腔和管壁厚度正常，管壁光滑；模型组的管壁明显增厚、管腔明显狭窄，内膜增厚；而治疗组管壁增厚较轻，管腔狭窄较轻，内膜增厚程度减轻。对照组兔血清TGF-β₁水平明显低于模型组和四逆汤组，四逆汤组又明显低于模型组（P<0.05）。免疫组化发现对照组兔髂动脉内膜TGF-β₁的染色灰度和染色阳性面积比明显小于模型组和四逆汤组，而四逆汤组TGF-β₁的染色灰度和染色阳性面积比明显小于模型组（P<0.05）。对照组兔髂动脉TGF-β₁ mRNA表达明显低于四逆汤组和模型组，而四逆汤组TGF-β₁ mRNA的表达少于模型组（P<0.05）。 结论:四逆汤可减轻兔髂动脉剥脱术后的内膜增生和血管的狭窄, 其机制可能与抑制髂动脉损伤后内膜TGF-β₁的基因和蛋白的表达，减少TGF-β₁的产生有关。     

心肌细胞结缔组织生长因子的表达及TGF-β1对其表达的影响

目的： 研究纯化的心肌细胞中结缔组织生长因子（CTGF）基因及蛋白的表达，并探讨转化生长因子β1（TGF-β₁）对其表达的影响。方法: 分离培养乳鼠心肌细胞，48 h后用流式分选方法（FACS）分选纯化心肌细胞，纯化的心肌细胞继续培养48 h。分为对照组（空白纯化心肌细胞组）和TGF-β₁刺激组，用RT-PCR方法测定两组细胞中TGF-β₁、CTGF、纤维连接蛋白（FN） mRNA的含量， 用Western blotting法检测两组细胞胞浆蛋白中CTGF、FN含量。结果: 心肌细胞中有较低水平的CTGF表达，在予以 TGF-β₁刺激后细胞内CTGF mRNA与蛋白含量分别提高 2.49 倍(P<0.01) 和3.63 倍（P<0.01），FN mRNA与蛋白含量分别提高 1倍(P<0.01)和4.18倍（P<0.01），而TGF-β1mRNA水平减少34%（P<0.01）。结论: 纯化的心肌细胞有CTGF的基础表达，并且TGF-β1可以明显上调其表达，提示心肌细胞主动参与了心肌纤维化过程。     

寡聚态β-淀粉样肽1～42可通过胶质-炎症反应损伤神经元

目的 观察寡聚态β-淀粉样肽_1～42(Oligo-Aβ_1～42)诱导的小胶质细胞条件培养液对Neuro-2A神经元细胞的影响，探讨炎症介质在胶质介导的神经元损伤中的作用。方法 以Oligo-Aβ_1～42诱导BV-2细胞，制备小胶质细胞条件培养液，四甲基偶氮唑蓝法(MTT)测定Neuro-2A神经细胞的活力，AO-EB染色荧光显微镜观察计数细胞凋亡和坏死率；酶联免疫吸附试验(ELISA法)测定小胶质细胞培养上清中的肿瘤坏死因子(TNF-α)、白介素１β(IL-1β)及前列腺素E2(PGE₂)水平；Griess法检测上清NO水平；免疫印迹法测定小胶质细胞胞质环氧合酶2(COX-2)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)蛋白表达水平。结果 Oligo-Aβ_1～42诱导的小胶质细胞条件培养液（Aβ-CM）明显引起Neuro-2A神经细胞损伤，MTT法显示神经元活力随Aβ诱导剂量的增加而逐渐下降(P<0.01)，并且浓度为1.0μmol/L和5.0μmol/L的Aβ-CM组比同浓度Aβ单纯组神经细胞的存活率更低，分别为（53.75±3.95）%和（34.61±2.72）%（Aβ-CM组与 Aβ单纯组相比P<0.05，P<0.01）；联合作用组（Aβ-CM+Aβ）神经细胞存活率下降更明显，两因素方差分析显示，Aβ诱导的小胶质细胞条件培养液与单纯Aβ（1.0μmol/L）有协同作用［F(3,39)=53.16, P<0.001］。AO-EB荧光观察计数显示,低浓度（0.2μmol/L）Oligo-Aβ_1～42诱导的小胶质细胞条件培养液可引起神经细胞发生凋亡性损伤，较高浓度（1.0～5.0μmol/L）Oligo-Aβ_1～42诱导不仅引起神经细胞凋亡，还引起细胞发生坏死性改变。进一步研究显示，低浓度（0.2～5.0μmol/L）的Oligo-Aβ_1～42明显增加小胶质细胞培养上清中TNF-α、PGE2、NO的产量及胞质COX-2和iNOS蛋白表达水平(P<0.05，P<0.01)，呈现一定的量效关系。结论 低浓度Oligo-Aβ_1～42可通过胶质-炎症反应加剧神经元损伤，其作用可能与Oligo-Aβ_1～42诱导小胶质细胞产生炎症介质及胞质内COX-2、iNOS蛋白表达水平增高有关。     

姜黄素抑制肝纤维化大鼠脂质过氧化物的生成及肝脏TGF-β1和PDGF的表达

目的： 观察姜黄素对肝纤维化过程中活性氧（ROS）、丙二醛（MDA）的生成及转化生长因子-β₁（TGF-β₁）、血小板源性生长因子（PDGF）表达的影响，探讨姜黄素预防肝纤维化的作用机制。方法: 采用四氯化碳腹腔注射方法，每周3次，共8周制作大鼠肝纤维化模型，同时每只大鼠按每100 g体重分别给予20 mg、10 mg、5 mg姜黄素灌胃处理，每周3次，共8周；设立正常组、肝纤维化组和阳性对照组。8周后处死大鼠，留取大鼠肝脏和血清。比色法检测血清ROS水平；硫代巴比妥酸（TBA）法检测肝组织匀浆中MDA含量；免疫组化方法检测各组大鼠肝组织中TGF-β₁、PDGF的表达水平。结果: 模型组大鼠血清ROS水平明显升高，姜黄素可显著降低ROS水平（P＜0.05）；姜黄素组大鼠肝组织中MDA含量明显低于模型组（P＜0.01）；模型组大鼠肝组织中TGF-β₁、PDGF大量表达，姜黄素可明显抑制上述因子的表达（P＜0.01）。结论: 姜黄素可抑制肝脏脂质过氧化物的形成以及TGF-β₁和PDGF的表达，从而发挥预防肝纤维化的作用。     

Decorin 基因转染抑制高糖培养的大鼠肾系膜细胞细胞外基质mRNA表达

目的： 观察核心蛋白聚糖Ⅱ（DCN）基因转染对高糖培养的大鼠肾系膜细胞（RMCs）细胞外基质（ECM）mRNA表达的影响。方法： 用已构建的AD-DCN腺病毒感染高糖环境培养的大鼠肾系膜细胞，采用半定量RT-PCR测定decorin、转化生长因子β₁（TGF-β₁）、纤维粘连蛋白（fibronectin）和IV型胶原（collagen IV） mRNA水平。结果： 高糖培养的RMCs感染AD-DCN后，DCN mRNA水平显著增高，24 h至第7 d，该组DCN mRNA水平始终显著高于高糖组及AD－LacZ感染组(P<0.05)，decorin mRNA水平增高后表现出对TGF-β₁ mRNA 水平的抑制作用，在mRNA水平，AD-DCN感染的RMCs细胞外基质fibronectin和collagen IV随TGF-β₁ mRNA水平下降而下降。结论： DCN重组腺病毒感染大鼠肾系膜细胞后能高效表达目的基因decorin并拮抗 TGF-β₁ 的生物活性，其下调ECM成分 mRNA水平的作用与使用TGF-β抗体的效果相似。     

上调表达Smad7显著抑制TGF-β介导的大鼠腹膜间皮细胞Smad2的表达

目的： 探讨外源性转入并上调表达抑制性信号蛋白Smad7对TGF-β₁作用下大鼠腹膜间皮细胞Smad2表达的影响。 方法： 通过脂质体介导的方法，将表达Smad7的重组质粒（PCDNA3-Smad7）转染培养的大鼠腹膜间皮细胞，分别培养于不同浓度TGF-β₁培养液(0、1.25、2.5和10 μg/L)，用RT-PCR及Western blotting的方法检测不同时间（0、5、15、30、60和120 min）Smad2、Smad7表达的水平。 结果： 正常间皮细胞Smad2 mRNA和蛋白在TGF-β₁刺激后5 min开始表达，呈时间依赖性，在30 min达到高峰，而后逐渐减弱；Smad7 mRNA和蛋白也在TGF-β₁刺激后5 min可见表达，但此后逐渐减弱，30 min达到最低，60 min又开始逐渐增强。Smad2 和Smad7 mRNA和蛋白，随TGF-β₁浓度的增高而表达增强。转染后大鼠腹膜间皮细胞可见Smad7 mRNA和蛋白表达显著上调，并可持续高表达。转染后的腹膜间皮细胞在TGF-β₁刺激下，Smad2 mRNA及蛋白的表达均低下，刺激0、5、15、30、60 和120 min后Smad2 mRNA表达分别低33%、56%、67%、71%、63%和57%（P<0.05）。Smad2蛋白表达分别低78%、89%、89%、88%和76%（P<0.05）。 结论： 上调表达抑制性信号蛋白Smad7可显著抑制腹膜间皮细胞中受体调控信号蛋白Smad2的表达和活性，提示Smad7可能对TGF-β₁起反向调控作用。     

再生障碍性贫血患者骨髓间充质干细胞转化生长因子β1及Smad3表达下调的发病学意义

 目的 研究骨髓间充质干细胞（MSC）中转化生长因子 β1（TGF-β1）与 Smad3 的表达下调与再生障碍性贫血（再障）发生的可能关系。 方法 取 20 例重型再障患者骨髓 MSC，分离制备出 Flk1+CD34–MSC 后进行以下试验：①体外定向诱导 MSC向脂肪细胞分化，倒置显微镜观察成脂分化情况，油红 O染色法鉴定脂肪细胞，用实时荧光定量 PCR 检测分化过程中脂蛋白酯酶（LPL）基因的表达；②用蛋白质印迹法检测MSC 中 TGF-β1 及 Smad3 的表达，用 ELISA 检测 MSC分泌 TGF-β1 的能力；③观察不同剂量（0、5、10、15、20 ng/ml）TGF-β1 对再障患者骨髓 MSC 成脂分化和增殖的影响。以 7 名健康成人的骨髓 MSC 相应检测为对照。 结果 再障患者骨髓 MSC 经 4 d 培养后即分化为脂肪细胞，而健康成人骨髓 MSC 中仅见少量细胞出现脂肪滴。再障患者 MSC 培养 4 和 8 d 时 LPL 基因表达水平分别为 0.091 ± 0.028、0.142 ± 0.033，均高于健康成人骨髓 MSC（分别为 0.021 ± 0.011 及 0.049 ± 0.010，均 P < 0.01）；而 TGF-β1 及 Smad3 表达水平明显低于健康成人骨髓 MSC，TGF-β1 分泌水平（3.4 μg/L ± 0.9 μg/L）也明显低于健康成人骨髓 MSC（11.6 μg/L ± 1.2 μg/L，P < 0.01）。在向脂肪细胞分化过程中，仅加入 5 ng/ml 的 TGF-β1 即可明显抑制再障患者骨髓 MSC 向脂肪细胞定向诱导分化，同时促进其增殖。 结论 再障患者骨髓 MSC 中 TGF-β1 及 Smad3 表达水平的显著下调可能参与了再障的部分发病环节。     

丹酚酸B对活化的系膜细胞TGF-β_1受体和Smad2表达的影响

目的:通过观察丹酚酸B对活化的系膜细胞转化生长因子β1(TGF-β1)受体和Sma与Mad的同源基因2(Smad2)分子表达的影响,探讨丹酚酸B拮抗系膜细胞活化及肾纤维化的机制。方法:分离纯化大鼠肾小球系膜细胞,TGF-β1刺激建立系膜细胞活化模型并检测Smad2、Smad7信号分子表达。丹酚酸B(剂量分别为10-6mol/L、10-5mol/L)进行干预,免疫荧光及蛋白印记法观察对α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的影响,蛋白免疫印迹法检测系膜细胞TGF-β1两型受体(TβRⅠ、TβRⅡ)和Smad2信号分子表达的变化。结果:5μg/L TGF-β1刺激系膜细胞24h可成功制备系膜细胞活化模型,在系膜细胞活化早期即可见Smad2分子的显著磷酸化;10-6mol/L、10-5mol/L丹酚酸B均可明显抑制其活化标志蛋白α-SMA的表达;丹酚酸B干预可致系膜细胞TGF-β1两型受体表达减少,Smad2的磷酸化状态被抑制。结论:丹酚酸B可通过抑制大鼠肾小球系膜细胞TβRⅠ、TβRⅡ表达和信号分子Smad2的磷酸化而拮抗其活化,这可能是丹酚酸B抗肾纤维化的细胞学机制之一。     

雌二醇通过调节上皮细胞系的旁分泌促进前列腺间质细胞增殖和分化

目的： 研究雌二醇通过调节上皮细胞的旁分泌对前列腺间质细胞增殖、分化和胞外基质蓄积的作用。方法： 雌二醇处理前列腺增生上皮细胞系BPH-1，用收集的条件培养液（CM）培养人前列腺间质细胞，MTT法检测细胞的增殖；用实时定量RT-PCR检测细胞中smoothelin、纤维黏连蛋白、Ⅳ型胶原和转化生长因子-β₁（TGF-β₁）mRNA的表达水平；用Western blotting检测细胞平滑肌肌球蛋白重链（SM-MHC）的表达；用放射性免疫法和ELISA分别检测Ⅳ型胶原、纤维黏连蛋白和TGF-β₁的蛋白水平。结果： 雌二醇能够上调BPH-1细胞中TGF-β₁的表达和分泌；经雌二醇刺激的BPH-1 CM能促进间质细胞的增殖；雌二醇刺激的BPH-1 CM对平滑肌细胞特异蛋白（smoothelin和SM-MHC）表达的促进作用较未经雌二醇刺激者更加明显；TGF-β₁中和抗体可以抑制BPH-1 CM对间质细胞中Ⅳ型胶原和SM-MHC的促表达作用。结论： BPH-1 可通过分泌TGF-β₁促进间质细胞的分化和胞外基质的蓄积；雌二醇可通过上调BPH-1 TGF-β₁的分泌进一步促进间质细胞的分化；雌二醇还可通过调节BPH-1分泌的某种活性因子促进间质细胞的增殖。     

CaMKⅡ抑制剂抑制AngⅡ或电场刺激诱导的心肌成纤维细胞TNF-α、TGF-β_1及collagenⅠ、Ⅲ的表达

目的:观察钙-钙调素依赖性蛋白激酶(CaMK)Ⅱ在血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)或电场刺激(EFS)诱导的大鼠心肌成纤维细胞增殖、分泌细胞因子及胶原酶表达中的作用及其机制。方法:培养新生1-3 d乳鼠心肌成纤维细胞(3代),分为正常对照组(control)、0.1μmol/L AngⅡ组、0.1μmol/L AngⅡ+0.5μmol/L CaMKⅡ抑制剂KN92组、0.1μmol/L AngⅡ+0.5μmol/L CaMKⅡ抑制剂KN93组、0.1μmol/L AngⅡ+0.5μmol/L CaMKⅡ抑制剂AIP组;10 V1.0 Hz EFS组、10 V 1.0 Hz EFS+0.5μmol/L KN92组、10 V 1.0 Hz EFS+0.5μmol/L KN93组、10 V1.0 Hz EFS+0.5μmol/L AIP组、10 V1.0 Hz EFS+0.1μmol/L AngⅡ组。MTT法测定心肌成纤维细胞增殖;ELISA法测定细胞因子(TGF-β1,TNF-α)分泌;RT-PCR检测TGF-β1、TNF-α、collagenⅠ、ⅢmRNA水平。结果:CaMKⅡ抑制剂(0.5μmol/L KN93,0.5μmol/L AIP)能预防AngⅡ或EFS诱导的心肌成纤维细胞增殖;CaMKⅡ抑制剂(0.5μmol/L KN93,0.5μmol/L AIP)可预防AngⅡ或EFS引起的细胞培养上清液TGF-β1、TNF-α含量及相应mRNA表达增加。CaMKⅡ抑制剂(0.5μmol/L AIP,1.0μmol/L AIP)预防0.1μmol/L AngⅡ引起的collagenⅠ、Ⅲ表达增加。结论:抑制CaMKⅡ对AngⅡ或EFS诱导的心肌成纤维细胞增殖具有预防作用,其机制可能与CaMKⅡ抑制剂抑制TGF-β1、TNF-α以及胶原的表达有关。