MTT比色法与^3H—TdR掺入法测定rhIL—3和rhEPO生物学活性的比较

本文在利用ＴＦ－１细胞检测ｒｈＩＬ－３和ｒｈＥＰＯ生物学活性中，对ＭＴＴ比色法与＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入法的测活结果进行了比较，认为两种方法的测活结果无显著差异（Ｐ〉０．０５），从而为简化这两种细胞因子的测活步骤提供了一定的理论依据。     

12－○－十四酰基咐拜醇－13－乙酸酯（TPA）诱导的NIH3T3细胞核原癌

本文采用快速印迹杂交（ｇｕｉｃｋｂｌｏｔ）和延续转录试验（ｔｕｎ－ｏｆｆｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎａｓｓａｙ）两种特异ｍＲＮＡ检测技术，在ＮＩＨ３Ｔ３细胞系观察到腺苷二磷酸核糖基转移酶（ＡＤＰＲＴ）的特异性抑制剂３－氨基苯甲酰胺（３ＡＢ）并不能阻断促癌物１２－Ｏ－十四酰基咐醇－１３－乙酸酯（ＴＰＡ）诱发的细胞周期依赖性的核原癌基因ｃ－ｆｏｓ、ｃ－ｍｙｃ和ｃ－ｍｙｂ的表达。这一结果直接表明，核原癌基因的表达和ＡＤＰ核糖化作用这两种核内生化事件在细胞周期中的时序是不相同的。     

OKT3＋rhIL－2激活胎儿脾细胞的研究

观察了１８～２８周龄胎儿脾单个核细胞（ＦＳＭＣ）在体外对ＯＫＴ３＋ｒｈＩＬ－２联合刺激的反应性，结果发现：ＯＫＴ３单独能活化ＦＳＭＣ，最适浓度ＯＫＴ３与ｒｈＩＬ－２联合对ＦＳＭＣ有强协同刺激作用。ＯＫＴ３刺激ＦＳＭＣ后明显促进ＩＬ－２Ｒ表达，表明ＯＫＴ３对ＦＳＭＣ的括化作用与ＩＬ－２／ＩＬ－２Ｒ途径相关。ＯＫＴ３＋ｒｈＩＬ－２协同诱导的ＦＳＭｃ能产生ＮＫ和ＬＡＫ活性，且ＬＭ活住较单用ｒｈＩＬ－２诱导者强，间接免疫荧光染色ＦＡＣＳ分析显示，ＯＫＴ３＋ｒｈｌＬ－２协同激活的ＦＳＭＣ主要是ＣＤ８￣＋Ｔ细胞。结果表明ＦＳＭＣ与成人ＰＢＭＣ－样能被ＯＫＴ３活化。     

人重组IL-3受体α链片段的表达及其对TF-1细胞的刺激活性

ＩＬ－３是一种造血生长因子，通过其受体α和β两条链向细胞内传递信号。为研究ＩＬ－３，ＩＬ－３Ｒα，β三者之间的相互作用模式，利用大肠杆菌系统表达了４种ＩＬ－３Ｒα胞外片段：ＩＬ－３Ｒ－Ｐ（氨基酸１～３０７），ＩＬ－３Ｒ－２（１～２６３），ｎＩＬ－３Ｒ－２（１～７５），ｃＩＬ－３Ｒ（１０５～２６３）。活性研究发现，除ｎＩＬ－３Ｒ－２外，其余３个片段对ＩＬ－３依赖性细胞株ＴＦ－１有不同程度的刺激活性，并且ＦＩＴＣ标记的ＩＬ－３Ｒ－Ｐ可与ＴＦ－１细胞结合，βｃ真核表达质粒转染ＣＴＬＬ细胞后，ＦＩＴＣ标记的ＩＬ－３Ｒ－Ｐ可与之结合。实验结果提示ＩＬ－３Ｒα链存在潜在的β链结合位点，一旦暴露可以激活β链传递信号。     

新的结肠癌相关抗原MC3－Ag的纯化及鉴定

作者利用饱和硫酸铵沉淀和ＤＥＡＥ５２离子层析柱纯化本中心自制结肠癌单克隆抗体ＭＣ３，以此为配基与Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ４Ｂ偶联，经免疫亲和层析从自制可溶性结肠癌抽提液中纯化出一种新的肠癌肿瘤相关抗原ＭＣ３－Ａｇ。其特性分析表明，ＭＣ３－Ａｇ可为高碘酸氧化或强硷水解，而对胰蛋白酶、神经氨酸酶、去糖酯混合液及弱硷处理不敏感，提示其决定簇可能位于Ｎ糖苷键型糖蛋白糖链上。ＳＤＳ－ＰＡＣＥ及免疫印迹分析表明ＭＣ３－Ａｇ的分子量为２８．８ｋＤ。免疫反应分析ＭＣ３－Ａｇ不与ＣＥＡ、ＡＦＰ等已知结肠癌相关抗原的单克隆抗体反应。     

人重组IL—3受体α链片段的表达及其对TF—1细胞的…

ＩＬ－３是一种造血生长因子，通过其受体α和β两条链向细胞内传递信号。为研究ＩＬ－３，ＩＬ－３Ｒα，β三者之间的相互作用模式，利用大肠杆菌系统表达了４种ＩＬ－３Ｒα胞外片段：ＩＬ－３Ｒ－Ｐ，ＩＬ３－Ｒ－２，ｎＩＬ－３Ｒ－２，ｃＩＬ－３Ｒ。活性研究发现，除ｎＩＬ－３Ｒ－２外，其余３个片段对ＩＬ－３依赖性细胞株ＴＦ－１有不同程度的刺激活性，并且ＦＩＴＣ标记的ＩＬ－３Ｒ－Ｐ可与ＴＦ－１细胞结合，βｃ真核表     

柯萨基B3病毒感染鼠NK细胞活性和表面β－内啡肽受体的关系

系统观察了柯萨基Ｂ３病毒诱导员心肌炎病理过程中，ＮＫ细胞活性和表面β－内啡肽（β－ＥＰ）受体改变的关系。在感染后３～１０天，ＮＫ细胞活性升高；血浆β－ＥＰ浓度亦显著升高；ＮＫ细胞表面β－ＥＰ受体的结合容量及解离常数均下降。提示受染鼠ＮＫ细胞膜β－ＥＰ受体的变化及血浆β－ＥＰ浓度的升高，有利于增强ＮＫ细胞的活性，减少心肌组织中感染性病毒的滴度。     

12—O—十四酰基咐辞拜醇—13—乙酸酯（TPA）诱导的NIH3T3细胞…

本文采用快速印迹杂交和延续转录试验两种特异ｍＲＮＡ检测技术，在ＮＩＨ３Ｔ３细胞系观察到腺苷二磷酸核糖基转移酶的特异性抑制剂３－氨基苯甲酰胺并不能阻断促癌物１２－Ｏ－十四酰基咐拜醇－１３－乙酸酯诱发的细胞周期依赖性的核原癌基因ｃ－ｆｏｓ，ｃ－ｍｙｃ和ｃ－ｍｙｂ的表达，这一结果直接表明，核原癌基因的表达和ＡＤＰ核糖化作用这两种核内生化事件在细胞周期中的时序是不相同的。     

5－bromo－2－deoxyuridine标记法

以５－ｂｒｏｍｏ－２－ｄｅｏｘｙｕｒｉｄｉｎｅ标记法检测了ＳＰ２／０细胞的增殖动力学，并与３Ｈ－ＴｄＲ掺入法作了比较，结果表明本法是可靠的，且有很高的特异性。该法较３Ｈ－ＴｄＲ掺入的传统方法简便、敏感、精确，可广泛应用于细胞增殖动力学、肿瘤生物学、遗传学、分子生物学等多个领域。     

大鼠认知电位(类P3)的研究

目的：探讨引导参数对动物认知电位（类Ｐ３）的潜伏期、波形和时程的影响，并将类Ｐ３电位与动物行为检测相对比，以阐明动物认知电位与行为活动的相关性，为老年痴呆提供诊疗基础。方法：采用正常大鼠测定听觉类Ｐ３、电迷宫条件反射，观察３种导联、两种声强、两种平均叠加次数对Ｐ３的影响，比较类Ｐ３与电迷宫结果的关系。结果：不同的引导参数对类Ｐ３的潜伏期无显著影响。正常大鼠类Ｐ３与电迷宫条件反射有相关性。结论：应用类Ｐ３评大鼠认知、记忆功能有重要参考价值，对临床检测Ｐ３时选择引导参数有一定参考意义。     

rHuIL－3McAb在rHuIL－3促人骨髓干细胞集落形成中的中和作用

本文在应用ｒＨｕＩＬ－３刺激健康人骨髓干细胞半固体培养中的集落形成的实验系统，发现了ｒＨｕＩＬ－３ＭｃＡｂＩＢ９对ｒＨｕＩＬ－３刺激集落形成活性的中和作用，当在培养系统中加入１：１０００稀释的ＭｃＡｂ腹水时其抑制率达到８２．５％。本结果对由于ＩＬ－３分泌过高时所引起的某些造血系和非造血系肿瘤等疾病的治疗提供了有价值的实验依据。     

AC－cAMP－PKA途径对淋巴细胞DNA合成的调节作用

以ＣＤ３ＭｃＡｂ为激动剂，以淋巴细胞体外ＤＮＡ合成为研究手段，探讨了ＡＣ－ｃＡＭＰ－ＰＫＡ信号途径在ＣＤ３ＭｃＡｂ诱导的淋巴细胞活化中的意义。研究结果表明ＡＣ、ｃＡＭＰ和ＰＫＡ在决定细胞对外界刺激的反应中起着重要作用。在淋巴细胞活化早期细胞内ｃＡＭＰ出现一过性升高，随着细胞活化增殖，ｃＡＭＰ降至正常水平以下。活化ＡＣ、升高细胞内ｃＡＭＰ水平可显著降低ＣＤ３ＭｃＡｂ诱导的淋巴细胞ＤＮＡ合成，而ＰＫＩ却能在一定程度上促进淋巴细胞活化增殖。     

小鼠IL－3 cDNA转化细胞移植体内表达的初步研究

随着基因治疗技术的发展和多个细胞因子基因的克隆，人们提出了供细胞因子的基因治疗的设想，以期为肿瘤、老年性痴呆、严重的造血功能障碍等这样一类难治疾病的治疗另辟蹊径。为改善放射损伤小鼠受抑制的造血功能，我们采用基因治疗的方法，将小鼠ＩＬ－３基因ｃＤＮＡ与逆转录病毒载体重组，转染包装细胞ＰＡ３１７，用其分泌的含ＩＬ－３ｃＤＮＡ的复制缺陷逆转录病毒感染、转化ＮＩＨ３Ｔ３细胞，从中筛选可在体外分泌ＩＬ－３的克隆，将可分泌ＩＬ－３的细胞种植到放射损伤小鼠体内后发现：受体小鼠血清中检出了ＩＬ－３的活性；其外周血白细胞计数升至５５万／ｍｍ３，以成熟中性粒细胞为主；肝、脾脏内有大量各个分化阶段的中性粒细胞。这些结果表明：可以利用基因治疗技术，在体内表达ＩＬ－３，改善机体的造血功能。     

超氧阴离子自由基对NIH3T3细胞的转化作用

首次选取ＮＩＨ３Ｔ３细胞，对比检测外源性Ｏ＾－２和致癌，促癌剂争生转化的能力。结果表明，Ｏ＾－２单独作用组较正常对照组和启动剂量Ｂ（ａ）Ｐ单独作用组之转化率提高了近３倍；当Ｏ＾－２与启动剂量Ｂ（ａ）Ｐ协同作用时，转化率上述两组分别提高约１１倍和１０倍；而用ＳＯＤ和ＣＡＴ清除胞外Ｏ＾－２时，转化率下降８２％。     

病毒性肝炎受体导向药物L－HSA－Ara AMP的导向性实验

选用乳糖化人血清白蛋白（Ｌ－ＨＳＡ）为载体，与单磷酸阿糖腺苷（Ａｒａ－ＡＭＰ）交联成乳糖化人血清白蛋白单磷酸阿糖腺苷（Ｌ－ＨＳＡ－Ａｒａ－ＡＭＰ）交联物，观察了１２５Ｉ标记的该交联物在小鼠体内的分布。结果，１２５Ｉ－Ｌ－ＨＳＡ－ＨＳＡ及１２５Ｉ－Ｌ－ＨＳＡ－ＡｒａＡＭＰ在肝脏内的含量明显高于其他各脏器，前者在肝脏含量最高为第３ｄ，后者为第１ｄ，在第７ｄ仍有一定浓度，二者次于肝脏含量的组织均为肾脏和血液。     

CoxsackieB＿3病毒对小鼠高频心电图时域值的作用研究

以Ｂａｌｂ／ｃ小鼠为实验动物，观察了ｃｏｘｓａｃｋｉｅＢ＿３病毒对小鼠高频心电图（ＨＦ－ＥＣＧ）的影响。实验组小鼠腹腔注射０．２ｍｌｃｏｘｓａｃｋｉｅＢ＿３病毒后，分别于第１、３、５、７天记录高频心电图，结果表明：从种毒１天后开始，心率显著增加，分别增加了２４．４％（Ｐ＜０．０１）、１６．３％（Ｐ＜０．０１）、１９．９％（Ｐ＜０．０１）、２９．３％（Ｐ＜０．０１）。从种毒３天后开始，Ｑ－Ｔ间期、Ｔ波时程较种毒前明显延长，Ｑ－Ｔ间期较种毒前分别延长了２４．２％（Ｐ＜０．０１）、１７．５％（Ｐ＜０．０５）、２４．０％（Ｐ＜０．０１）；Ｔ波时程较种毒前分别延长了３０．７％（Ｐ＜０．０１）、２９．１％（Ｐ＜０．０５）、３６．４％（Ｐ＜０．０１）。对照组无此变化。结果提示，病毒可能对窦房结自律细胞的自律性、心室肌细胞的复极化过程产生影响。     

rhIL－6、rhGM－CSF和rhEPO对人骨髓造血干细胞的调节作用

重组人白细胞介素６（ｒｈＩＬ－６）和重组人粒—单细胞集落刺激因子（ｒｈＧＭ－ＣＳＦ）与正常人造血干细胞培养１周后，ｒｈＩＬ－６组干细胞数增至４．７±０．７倍；ｒｈＧＭ－ＣＳＦ组增至９．３±１．０倍；ｒｈＩＬ－６＋ＧＭ—ＣＳＦ组增至１３．４±３．３倍。与对照组比较，Ｐ均＜０．０１．造血干细胞ＣＦＵ－Ｅ集落分析：ｒｈＩＬ－６组未见ＣＦＵ－Ｅ集落形成；ｒｈＩＬ－６＋ＥＰＯ组则ＣＦＵ－Ｅ集落明显高于ｒｈＥＰＯ组，ｐ＜０．０１．造血干细胞ＣＦＵ－Ｍｉｘ集落分析：ｒｈＩＬ－６组和ｒｈＧＭ－ＣＳＦ组可见ＣＦＵ－ＧＭ浆落，无ＣＦＵ＋Ｍｉｘ集落形成；ｒｈＩＬ－６＋ＧＭ－ＣＳＦ组有ＣＦＵ－Ｍｉｘ集落形成；ｒｂＩＬ－６＋ＧＭ－ＣＳＦ＋ＥＰＯ联合应用，有ＣＦＵ－ｎ，ｍ，Ｍ，Ｅ混合集落数增多。实验结果提示ｒｈＩＬ－６对造血干细胞有直接的刺激作用，主要刺激粒—单系组细胞增殖。ｒｈＩＬ－６与ｒｈＥＰＯ有协同作用，能促进ｒｈＥＰＯ刺激红系祖细胞的作用。ｒｈＩＬ－６与ｒｈＧＭ－ＣＳＦ亦有协同作用，可以刺激多能干细胞形成混合集落。     

顺铂对LLC－PK_1细胞增殖的影响及硒的保护效应

本研究观察了顺铂（ＣＤＤＰ）对猪肾近曲小管上皮细胞（ＬＬＣ－ｐＫ＿１）增殖与ＤＮＡ合成代谢的影响以及亚硒酸钠与硒代蛋氨酸的保护作用。结果表明，ＣＤＤＰ对ＬＬＣ－ｐｋ＿１细胞具有明显的毒性作用，在５～１５０μｍｏｌ／Ｌ范围内，ＣＤＤＰ与ＬＬＣ－ｐＫ＿１细胞作用１２ｈ，对细胞增殖已呈明显的抑制作用，其ＩＣ＿（５０）为１０９．５μｍｏｌ／Ｌ；作用２４ｈ时，其抑制效应更加明显，并存在剂量效应关系。ＬＬＣ－ｐｋ＿１细胞ＤＮＡ合成代谢对ＣＤＤＰ更为敏感，作用３ｈ，ＤＮＡ合成就受到明显的抑制，其ＩＣ＿（５０）为１２０．５μｍｏｌ／Ｌ。ＣＤＤＰ与ＬＩＣ－Ｐｋ＿１细胞作用３ｈ，对ＲＮＡ及蛋白质合成也具有明显的抑制作用。Ｎａ２ＳｅＯ３与Ｄ，Ｌ－ＳｅＭｅｔ两种不同硒化合物，当硒与ＣＤＤＰ的浓度比为１：１０时，Ｎａ２ＳｅＯ３未显示对ＣＤＤＰ的ＤＮＡ合成抑制作用有何保护作用，而Ｄ，Ｌ－ＳｅＭｅｔ则在一定程度上能减轻ＣＤＤＰ对ＬＬＣ－ｐｋ＿１细胞ＤＮＡ合成的抑制作用，但Ｄ，Ｌ－ＳｅＭｅｔ提前或与ＣＤＤＰ同时加入，其保护作用没有明显差异。     

早产,窒息和低出生体重对小儿智能发育影响的研究

采用ＤＤＳＴ、Ｇｅｓｃ１１ 两种智测方法对头位经产道分娩的１１６ 名０３ 岁小儿进行了回顾性研究。结果：（１）ＤＤＳＴ法的结果４ 组间具有差异（ Ｐ＜０－０５）；进一步检验发现早产组与对照组的智能发育差异无显著性（Ｐ＞０－０５），而窒息组、低体重组与对照组的差异有显著性（０－０１ ＜ Ｐ＜０－０５）；（２）Ｇｅｓｅｌｌ 测试４ 组内小儿的智能发育呈显著差异（Ｐ＜ ０－０５） ；而早产组、窒息组及低体重组与对照组进一步分析得Ｐ值依次小于０－０５、０－０１ 和０－０１；（３）各病例组内的统计学处理发现：早产、窒息和体重的程度不同，其对小儿的智能发育的影响亦不同（Ｐ值分别为０－０１ ＜ Ｐ＜ ０－０５ 和Ｐ＜０－０１）。结论：早产、窒息及低体重仅在一定条件下才能起消极作用。     

~3H－TdR掺入法选择肿瘤化疗方案的研究

本文用３Ｈ－ＴｄＲ（氚－胸腺嘧啶核苷）掺入的方法，检测了６８例大肠癌、２４例乳腺癌、２０例卵巢癌肿瘤细胞的体外药物敏感性。结果显示，对大肠癌和乳腺癌以５－氟脲嘧啶（５－ＦＵ），丝裂霉素（ＭＭＣ），环磷酰胺（ＣＴＸ）的抑制率为高。且两药合用效果比单一药物效果好，三种以上药物联合使用可进一步提高疗效。卵巢癌的病例中，我们对每一组药物都作了亚甲蓝增敏试验，结果亚甲蓝增敏组的抑制率全部大于相应药物无亚甲蓝增敏组（Ｐ＜０．０１），提示亚甲蓝可以用作增敏剂提高化疗药的疗效。用本方法可筛选出对特定病人肿瘤灵敏的药物，具有简便、快速、有效、价廉的特点。