组织工程种子细胞标记示踪技术研究进展

组织工程技术的发展为器官的修复和疾病的治疗提供了新的途径,其种子细胞的研究包括细胞选择、培养、移植和示踪等方面.种子细胞的示踪技术涉及分子生物学、分子免疫学和分子影像学等多学科,为种子细胞标记物的选择带来了困难.就目前常用的种子细胞示踪技术及其研究进展作一综述.     

骨髓间充质干细胞标记及示踪技术的研究与进展

背景：骨髓间充质干细胞标记及示踪技术是干细胞移植治疗的研究热点之一。虽然近几年骨髓间充质干细胞标记及示踪技术有了很大进展,但仍存在很多问题有待进一步解决。 目的：对国内外骨髓间充质干细胞标记及示踪技术的研究与进展作一综述。 方法：应用计算机检索CNKI和Foreign Medical Journal Service数据库中1982-01/2011-10关于骨髓间充质干细胞标记及示踪技术的文章,在标题和摘要中以“骨髓间充质干细胞;标记方法;示踪技术”或“bone marrow,labeling,Tracer”为检索词进行检索。最终选择29篇文献进行综述。 结果与结论：骨髓间充质干细胞的示踪技术众多,主要有同位素示踪法、抗原标记法、荧光蛋白标记法、荧光染料标记法、核磁共振对比增强剂标记法、Lac-Z基因标记法、Y染色体标记法。每一种方法都有其优缺点,选择的标记方法应具有特异性强、灵敏度高、对细胞或机体影响小、标记和检测方法简单易行、标记时间合适等特点。种子细胞的示踪技术仍需要进一步深入研究。     

间充质干细胞标记示踪方法研究进展

间充质干细胞（MSCs）具有很强的自我更新能力和多向分化潜能,现已成为组织修复的理想种子细胞和基因治疗的靶细胞。但MSCs移植入体内的标记和示踪是当今研究的热点和难点问题。目前常用的标记示踪技术按不同的标记分类有：荧光染料标记,分子细胞标记,影像学成像技术标记等。就这些标记示踪方法的优缺点加以综述。     

恒河猴骨髓间充质干细胞的分离、培养及传代扩增

目的 建立成年恒河猴骨髓间充质干细胞(rMSC)体外分离、培养及传代扩增的有效体系,为探索新型人工生物骨替代材料提供种子细胞.方法 从恒河猴肋骨抽取骨髓,使用淋巴细胞分离液(Ficoll-Hypaque)密度梯度离心法分离骨髓细胞.用含10%胎牛血清(FCS)的低糖DMEM培养基贴壁培养、胰酶消化传代扩增.通过形态学及流式细胞技术对rMSC进行细胞周期分析及表型特征鉴定.结果 成年恒河猴骨髓来源的rMSC为成纤维样细胞群体,以梭形的成纤维样细胞为主.流式细胞技术结果 显示,rMSC表达CD29、CD44表面分子,不表达CD34、CD45等造血细胞特异性表面分子.结论 成年恒河猴骨髓来源的rMSC的分离、培养及传代扩增的细胞群中无造血系细胞污染且符合干细胞增殖特性,为探索新型人工生物骨替代材料的种子细胞提供了一个可靠来源.     

P-选择素与血栓性疾病

细胞黏附分子是介导细胞与细胞间,细胞与细胞外基质间相互接触和结合的一类分子,其通过受体-配体相互黏附作用而发挥生物学功能.黏附分子参与细胞的生长与分化、细胞间信号转导、血栓形成、创伤愈合、炎症免疫反应以及肿瘤浸润与转移等机体重要的病理生理过程[1～3].P-选择素是一类重要的细胞黏附分子,属选择素家族成员,主要表达在活化的血小板/内皮细胞表面,介导这些细胞间以及与白细胞的黏附,而有利于炎症部位白细胞招募到血栓部位[2～4],进而促进血栓的形成.本文就P-选择素及其在血栓形成中的作用作一简述.     

膀胱组织工程中平滑肌种子细胞来源的研究进展

近年来,组织工程学的蓬勃发展为膀胱替代提供了崭新的思路.其中种子细胞是组织工程膀胱构建及应用研究中的首要环节和基本要素之一.构建膀胱组织工程平滑肌的种子细胞有平滑肌细胞、平滑肌祖细胞、胚胎干细胞和各种组织来源的成体干细胞如骨髓来源干细胞、羊水来源干细胞、脂肪来源干细胞等.对膀胱组织工程学种子细胞来源的研究现状进行回顾,并对其研究前景作一展望.     

膀胱组织工程中平滑肌种子细胞来源的研究进展

近年来,组织工程学的蓬勃发展为膀胱替代提供了崭新的思路.其中种子细胞是组织工程膀胱构建及应用研究中的首要环节和基本要素之一.构建膀胱组织工程平滑肌的种子细胞有平滑肌细胞、平滑肌祖细胞、胚胎干细胞和各种组织来源的成体干细胞如骨髓来源干细胞、羊水来源干细胞、脂肪来源干细胞等.对膀胱组织工程学种子细胞来源的研究现状进行回顾,并对其研究前景作一展望.     

干细胞在工程化组织构建与再生中的应用

种子细胞是影响组织工程发展的关键因素之一,如何获得和运用理想的种子细胞是当今组织工程与再生医学研究的焦点和热点.干细胞具有很强的自我更新能力和多向分化能力,作为组织工程的种子细胞有着巨大的应用潜力.本文针对胚胎干细胞、间充质干细胞和诱导多能干细胞等组织工程潜在的种子细胞,就其最新研究进展及应用做一综述,并展望了它们作为种子细胞的前景和目前面临的困难.     

静电生物学效应及作用机理初探

介绍了静电处理作物种子的技术,对其诱发的生物学效应进行了生化分析,研究了可能的生理作用,以期在细胞和分子水平上探讨其作用机理.     

骨组织工程中的细胞外基质材料及其种子细胞

背景:目前,骨组织工程在骨再造及骨缺损修复领域方面发展迅速,其中细胞外基质材料和种子细胞的选择应用是决定骨组织工程成功的前提和基础。目的:对骨组织工程中的细胞外基质材料和种子细胞的研究现状进行综述,并分析了这些细胞外基质材料和种子细胞的优缺点及今后尚待解决的问题和发展趋势。方法:应用计算机检索Pubmed数据库和CNKI数据库中1994-01/2009-12关于骨组织工程的文章,在标题中和摘要中以"骨组织工程,种子细胞,细胞外基质材料"或"bone tissue engineering,seeded cell,extral cellular matrix materials"为检索词进行检索。选择文章内容与骨组织工程中的种子细胞和细胞外基质材料有关者,同一领域文献则选择近期发表或发表在权威杂志文章。初检得到246篇文献,根据纳入标准选择相关的30篇文献进行综述。结果与结论:细胞外基质材料尚不够完善,还存在这样或那样的缺陷。如基质材料的降解率与成骨速度不协调;基质材料在体内所引发的免疫反应等;种子细胞的来源及培养体系尚未完全确定;种子细胞与细胞外基质材料的相互作用关系,尤其是如何增加种子细胞在基质材料表面的生物活性及分化方向方面,仍需进一步深入研究。     

组织工程化肌腱种子细胞的研究

组织工程化肌腱有望成为临床肌腱缺损修复最为理想的替代物。随着种子细胞功能研究的逐步深入、新型种子细胞的不断发掘以及相关科学技术的进步,制约组织工程化肌腱发展的瓶颈之一“种子细胞”问题逐渐得到解决,组织工程化肌腱的体外构建及体内应用亦随之日趋成熟。着重就肌腱种子细胞的研究进展作一综述。     

脑胶质瘤病理切片中对细胞核轮廓化处理的研究

阐述了有关脑胶质瘤切片中的肿瘤细胞核的提取和轮廓化处理过程中的几个关键问题,处理过程中避免对采集到的图像进行灰度化处理,直接对彩色图进行区域分割和链码跟踪,充分利用和保留了原图的色彩信息.在区域分割中使用种子生长法,尽可能使细胞核和背景分开,在链码跟踪算法中引入逻辑运算的字位并行处理,实现多个样本点同时运算,提高了处理速度.     

肌腱构建与组织工程技术研究新进展

本综述组织工程化肌腱领域中取得的多项成果，如肌腱组织替代物，种子细胞，组织工程用生物材料及转基因技术应用研究等。论述建立生长，增殖可调的肌腱种子细胞系可行性。研制有利于细胞生长与粘附的生物材料及转基因等亲技术在组织工程学中的应用必将推动组织工程化 肌腱的研究。     

CFSE标记技术的研究进展

羧基荧光素乙酰乙酸(CFSE)标记细胞与流式细胞仪相结合的技术在免疫学领域应用越来越广泛。该技术已经由淋巴细胞扩展到应用于肿瘤细胞、干细胞、自然杀伤细胞(NK细胞)甚至是细菌的研究,由检测细胞增殖拓展到体内示踪等研究。此外,对于该项技术的热点还集中在对其数据的分析、与传统方法的比较以及标记的方法的研究。尤其是对细胞增殖的结果的定量分析已经成为生物数学领域的一个热点,也为机制研究提供了更丰富的信息。羧基荧光素乙酰乙酸具有动态检测细胞增殖动力学,在单细胞水平上供信息等优势,有替代传统方法(如~3H掺入法、MTT法等)的趋势。     

表皮干细胞在组织工程创面修复中的应用

背景：随着细胞生物学、分子生物学技术、组织工程学的快速发展,探寻组织工程化皮肤创面覆盖物的“种子细胞”的研究逐渐增多。 目的：总结表皮干细胞的生物学特性,探讨其在皮肤创面修复过程中的再生作用与临床应用价值。 方法：应用计算机检索CNKI和PubMed数据库中2002-07/2011-12关于表皮干细胞修复皮肤损伤研究的文章,以“表皮干细胞,创面修复,组织工程,皮肤”或“epidermal stem cells,tissue engineering skin,wound surface”为检索词进行检索。选择文章内容与表皮干细胞修复皮肤损伤研究进展有关的文章,同一领域文献则选择近期发表或发表在权威杂志文章。初检得到129篇文献,根据纳入标准选择28篇文献进行综合分析。 结果与结论：表皮干细胞是表皮发生、分化和创面修复的基础,其正常增殖分化是维持皮肤正常组织结构和细胞内环境稳定的基本要求,也是皮肤组织工程理想的种子细胞。对烧伤、创伤等大面积皮肤缺损的治疗,对皮肤疾病的细胞疗法、基因治疗等方面都有很好的应用前景。表皮细胞的体外培养是复合人工皮肤组织工程学研究的先决条件。随着对表皮干细胞分离、纯化和培养技术的不断完善,可达到迅速构建表皮层的目的。但表皮干细胞的应用研究仍需要进一步的探索。     

环境、材料、安全、可控：组织工程技术修复关节软骨的症结*

背景：传统的软骨缺损的修复方法都有其局限性,组织工程技术的出现从根本上改变了“以创伤修复创伤”的传统治疗模式。 目的：总结分析目前组织工程技术修复关节软骨的研究进展。 方法：由第一作者检索1990年至2011年 PubMed数据及中国知网数据库有关应用组织工程技术修复关节软骨方面的文献。共检索中文187 篇,英文211 篇,最终保留49篇进入结果分析。 结果与结论：软骨组织工程的主要方法就是应用工程学和生命科学原理,在体外分离、培养、扩增所需要的种子细胞,然后将之种植于合适的生物支架材料上,将细胞支架复合体植入体内组织缺损部位,并加入一定的诱导条件,逐渐形成新的有功能的软骨组织。文章在种子细胞的选择方面重点叙述了自体软骨细胞、异体软骨细胞、胚胎干细胞、骨髓间充质干细胞的研究进展;在细胞诱导及条件培养方面重点叙述了细胞因子、细胞条件培养、转基因技术的研究进展;并对生物支架材料的选择和研究进行了相关叙述。找到最理想的种子细胞,合理联合应用细胞因子,更加真实的模拟细胞生存的微环境,基因工程安全、高效、可控转染,构建理想的支架材料,将是今后组织工程研究的重点和热点。     

具有聚集诱导发光效应的荧光探针在生物医学中的应用

荧光技术的发展为人类的科学研究提供了重要的基础。荧光材料在环境检测与保护、分子识别与示踪、生物成像以及医学诊断等领域显示出重要的应用价值,因此受到广泛重视。具有聚集诱导发光效应(aggregation induced emission,AIE)的荧光探针具有毒性低、光稳定性好、生物相容性强等优点,并且能克服传统荧光物质的聚集荧光猝灭效应(aggregation-caused quenching,ACQ),是目前研究的热点。我们着眼于具有AIE效应的荧光探针在生物医学方面的应用,对其在离子探测、生物成像及临床治疗等方面的研究进展进行综述,并对其应用前景作了展望。