聚合物囊泡作为药物载体的研究进展

聚合物囊泡作为一类新型的药物载体,具有独特优越的结构、性质和稳定性,可包载多种亲水、疏水性药物分子,已经成为当前分子自组装纳米药物载体的研究热点.论述了聚合物囊泡的结构和特点、制备方法与形成条件,介绍了形成聚合物囊泡的两亲聚合物类型及所形成的聚合物囊泡的特性,并对聚合物囊泡作为药物载体在诊断和治疗中的研究进展作一综述.     

负载超顺磁性氧化铁颗粒聚合物纳米囊泡的制备及MR成像

目的 制备负载油性、水性超顺磁性氧化铁(SPIO)颗粒聚合物纳米囊泡,并观察其表征和MRI成像特点.方法 经多步化学反应得到共聚物聚乙二醇-聚(D,L-丙交酯)(PEG-PDLLA),通过多次乳化及溶剂挥散法使共聚物在水溶液中自组装成囊泡,并分别负载油性和水性SPIO.使用扫描电镜和透视电镜观察负载油性、水性SPIO聚合物纳米囊泡的直径、形态、分布,并用MRT2 mapping软件测量单纯SPIO水溶液、负载油性、水性SPIO聚合物纳米囊泡的T2弛豫率(1/T2).溶液浓度分别取原液、原液的1/2、1/4、1/8、1/16、1/32.结果 负载油性SPIO和水性SPIO聚合物纳米囊泡的的平均直径分别为( 182.2 ±23.9) nm、(191.7 ±28.7) nm.电镜显示油性SPIO均匀地分散于囊泡的中心膜上;水性SPIO以团簇的形式被包裹在囊泡的内腔中.负载SPIO的聚合物囊泡比单纯SPIO水溶液表现更高MRI敏感性.在相同铁离子浓度下,负载水性SPIO聚合物囊泡的T2弛豫率(1/8浓度时为4.60)高于负载油性SPIO聚合物纳米囊泡(1/8浓度时为2.85).结论 负载SPIO聚合物纳米囊泡比单纯SPIO水溶液表现出更高的MRI敏感性,负载水性SPIO聚合物囊泡的T2弛豫率高于负载油性SPIO聚合物纳米囊泡.     

pH 敏感的 PEG-PAsp（DIP）负载 miR-21-inhibitor 纳米聚合物囊泡的制备及传输在前列腺癌 PC-3细胞中的效应研究

目的：制备以生物纳米材料 pH 敏感嵌段共聚物聚乙二醇-聚天冬氨酸二异丙基氨基乙酯[PEG-PAsp (DIP)]传输 miR-21-inhibitor 聚合物囊泡,初步探讨 pH 敏感聚合物囊泡对前列腺癌细胞的毒性作用及传输效应。方法①通过静电作用,在室温条件下制备 PEG-PAsp (DIP)传输 miR-21-inhibitor 聚合物囊泡;②通过凝胶阻滞实验检测不同浓度下纳米聚合物囊泡(NPs)的复合情况;③通过 CCK-8实验检测不同浓度下 pH 敏感 NPs 对前列腺癌细胞 PC-3的毒性作用;④通过激光共聚焦实验,观察 PEG-PAsp (DIP)/ miR-21-inhibitor 纳米聚合物囊泡进入 PC-3细胞的传输效应。结果实验结果表明： N/ P 为20 PEG-PAsp (DIP)与 miR-21-inhibitor 已完全复合,粒径较小具有一定的正电荷,且对 PC-3细胞毒性较小;通过激光共聚焦实验,成功构建了纳米聚合物囊泡传输进入 PC-3前列腺癌细胞方法。结论成功制备了纳米聚合物囊泡,并初步探讨了纳米聚合物囊泡的表征、体外 PC-3细胞毒性试验与纳米聚合物囊泡结合 miRNA传输于 PC-3细胞的激光共聚焦实验,为下一步阐明反义 miR-21寡核苷酸诱导前列腺癌细胞凋亡的作用和分子机制打好基础。     

紫杉醇聚合物纳米囊泡的制备和体外释放研究

目的 以聚己内酯-b-聚乙二醇-6-聚己内酯（PCEP）两亲性三嵌段共聚物为载体研制紫杉醇聚合物纳米囊泡.方法 以不同分子量的聚乙二醇（PEG）引发合成不同亲水段、疏水段链长的PCEP并进行FT-IR、1H NMR和GPC表征,以合成的嵌段聚合物PCEP为载体,通过薄膜-超声分散法制备紫杉醇聚合物纳米囊泡,用透射电子显微镜（TEM）表征其形态和构造,用粒度分析仪测定其粒径及分布,用高效液相色谱（HPLC）法测定其载药量及包封率,用透析袋法研究药物体外释放;同时,研究不同亲水链长、疏水链长对紫杉醇聚合物囊泡载药量、包封率、粒径及体外释放紫杉醇药物的影响.结果 研制的紫杉醇聚合物囊泡呈核-壳结构球形,粒径为纳米级,随着PCEP共聚物相对分子质量的增加而增大;紫杉醇聚合物囊泡体外释放无突释现象,能稳定缓慢释放紫杉醇,且释放速率随共聚物中亲水段PEG含量增加而增大,随疏水段PCL含量增大而减小.结论 以PCEP两亲性三嵌段共聚物为载体制备的紫杉醇聚合物纳米囊泡,其粒径小且分布均匀,包封率较高,有望成为一种用于提高紫杉醇的药效且降低不良反应的新的紫杉醇缓控释剂型.     

消逝波显微镜观察“一吻即逝”的胰岛素出胞作用

目的用消逝波显微镜观察胰岛β细胞瘤来源的Ins-1细胞的胰岛素出胞作用,旨在为"一吻即逝"胰岛素分泌方式提供新的证据。方法用含囊泡相关膜蛋白2和增强型绿色荧光蛋白融合蛋白基因的质粒标记Ins-1细胞的胰岛素分泌囊泡,用含高葡萄糖和高氯化钾的溶液刺激Ins-1细胞,用基于物镜的消逝波显微镜观察胰岛素的出胞作用。结果 Ins-1细胞经高葡萄糖高氯化钾溶液刺激后,消逝波显微镜可观察到两种现象:①荧光基团(亮点)在细胞膜出现并一直或长期停留在细胞膜;②荧光基团在细胞膜出现,停留较短时间后又逐渐消失(离开细胞膜)。前者应属于传统的膜融合分泌方式,即胰岛素分泌囊泡与细胞膜融合,其内容物被释放,囊泡膜成为细胞膜的一部分。后者应属于"一吻即逝"分泌方式,即胰岛素分泌囊泡与细胞膜接触并部分融合,释放部分内容物后,囊泡离开细胞膜,囊泡膜不成为细胞膜的一部分。结论该项研究结果支持胰岛素的分泌方式,除了传统的膜融合方式外,还存在"一吻即逝"的分泌方式。     

粘连脂质囊泡的电渗透和融合

在适当的扰动激励作用下,接触到一定程度的双层脂质膜会混合和融合为一。在我们的实验中,利用膜间吸引力(如范德瓦力、非吸附聚合物和正电介质电泳存在产生的力)来建立紧密接触,使用直流脉冲使膜破裂,产生接触扰动。为了对单个脂质囊泡或单个囊泡粘连对进行实验研究.我们利用微管操作技术。囊泡中脂的成份、力学特性及粘连相互作用都非常特别。具有传递导管的双室允许囊泡从一室传到相邻的另一室,室中含有所要求的溶液并放置有平行的Pt电极。通过直接观察可分析电渗透和融合。用微导管负压吸吮法测定融合后产物     

用于小干扰RNA递送的基于超分子主客体化学组装的聚集诱导发光囊泡材料的构建及其对肿瘤细胞毒性的研究

目的:构建一种基于超分子主客体化学组装的聚集诱导发光囊泡材料(AIE-HG-Vesicle)用于递送小干扰RNA(siRNA)及实现荧光成像功能,并探究其被肿瘤细胞摄取的效果及其基于siRNA对肿瘤细胞的杀伤效果。方法:通过合成聚乙烯亚胺树型分子修饰的β-环糊精(H-β-CD-dendrimer)作为主体化合物,同时合成含有四苯乙烯AIE基团的Bola型金刚烷(G-Ada-AIE)作为客体化合物,通过超分子主客体自组装过程制备得到AIE-HG-Vesicle囊泡材料用于负载siRNA。通过透射电子显微镜及动态光散射仪测试其形貌和尺寸,通过荧光分光光度计测试其聚集诱导发光性质,通过凝胶阻滞实验测试其对siRNA的负载效果,通过激光共聚焦显微镜测试负载siRNA的AIE-HG-Vesicle囊泡材料在肿瘤细胞内的递送效果,并通过MTT实验测试负载siRNA的AIE-HG-Vesicle囊泡材料对肿瘤细胞的杀伤效果。结果:AIE-HG-Vesicle具有囊泡状形态,直径约为100 nm,壁厚约为9 nm,且表面带正电荷可有效负载siRNA。负载于AIE-HG-Vesicle的siRNA表现出良好的稳定性,且负载siRNA后的AIE-HG-Vesicle可将siRNA递送到HeLa细胞内部,并可通过聚集诱导发光现象被观测到,负载siRNA后的囊泡对HeLa细胞有明显的杀伤效果。结论:构建了AIE-HG-Vesicle可用于递送siRNA,该材料具有荧光成像和基于siRNA的肿瘤细胞毒性作用,后期有望应用于肿瘤体内治疗。     

凋亡的肿瘤细胞来源的细胞外囊泡在癌中的作用

细胞外囊泡(EVs)是由脂质双分子层包绕形成的球状膜性囊泡;凋亡的肿瘤细胞产生的囊泡(Apo-EVs)(凋亡小体)包含了众多的生物活性分子和细胞器,介导了肿瘤细胞间的信号传导,参与了肿瘤的生长过程。本文就Apo-EVs在癌的生长及转移过程中的作用作一综述;同时亦介绍了Apo-EVs在临床上的应用,包括作为诊断和预后的指标以及作为药物的输送载体。     

细胞内COP囊泡转运调控糖脂代谢的研究进展

糖脂代谢对维持细胞的物质代谢和能量代谢平衡至关重要,糖脂代谢中很多关键分子需要通过转运囊泡运送到内质网(Endoplasmic reticulum,ER)、高尔基体(Golgi apparatus,Golgi)等细胞器进行折叠、剪切、再加工,才能在相应位置发挥生理活性.作为目前研究较清楚的包被囊泡,外被体蛋白(Coated protein,COP)囊泡主要介导顺面高尔基体(Cis-Golgi apparatus,cis-Golgi)与内质网之间的转运,与糖脂代谢中关键分子的成熟和输送密切相关,可能成为肥胖、脂肪肝及2型糖尿病等相关代谢性疾病的潜在药物靶点.本文综述了COP囊泡转运和调控糖脂代谢的研究进展.     

细胞外囊泡的来龙去脉与疾病诊治

细胞外囊泡是细胞释放的核外粒体、凋亡小体、癌小体与外泌体的统称。作为一种重要的细胞间信号传导方式,其在多种生理、病理过程中发挥至关重要的作用。有关细胞外囊泡的研究近年来快速发展,基础研究与转化应用研究齐飞并进。细胞外囊泡不仅可作为液体活检的重要靶标,也为药物的传递提供了新的转化思路。本文将对细胞外囊泡的来源、生理与病理功能、纯化与检测手段和转化研究进展等进行综述,期待细胞外囊泡转化产品尽快进入临床应用,为患者带来福音。