力学刺激对大鼠成骨细胞Integrins α2、β1、β3表达和细胞增殖、合成功能的影响

探讨在成骨细胞中Integrins调节力学信号转导可能的分子机制和周期性双轴力学应变对成骨细胞增殖与合成功能的影响。将3月龄雌性SD大鼠颅顶骨分离的成骨细胞在含10％胎牛血清的F-12培养液中培养并接种在Flexercell type I dish中。当细胞生长至亚融合状态(Subconfluence)，给细胞施加力学刺激，频率为1Hz，力学刺激分别为400、1000、4000μ strain；作用时间分别为每天30min，2h，4h，和8h，共加载2d。以未受力学刺激的细胞为对照组，受力学刺激的细胞为实验组，并进行比较。采用流式细胞技术测定和分析Integrinsα2，β1，β3在成骨细胞膜上的表达量、细胞周期分布与细胞增殖变化；采用同位素标记方法检测成骨细胞骨钙素、Ⅰ型胶原C端前肽(PICP)和总蛋白的分泌量。结果表明：(1)在3月龄雌性SD大鼠成骨细胞膜表面有Integrins α2，β1，β3的表达，β1的表达最高。(2)周期性双轴力学应变对3月龄雌性SD大鼠成骨细胞膜表面Integrins α2，β1，β3的表达量有明显上调作用，但不同强度、不同作用时间的力学应变对成骨细胞膜表面Integrins α2，β1，β3表达量上调的作用亦不相同，而β3对力学刺激最敏感；在4000μ strain力学刺激下，成骨细胞膜表面Integrins α2，β1，β3表达量上调最为明显；(3)周期性双轴力学应变400、1000μ strain的力学刺激可提高成骨细胞的增殖与合成分泌功能；在4000μ strain力学刺激下，可明显增加成骨细胞的增殖功能但成骨细胞的合成分泌功能明显受抑制。在我们实验中，3月龄雌性SD大鼠成骨细胞对力学应变的这些反应提示：(1)Integrins α2，β1，β3表达量随着应变幅度值增大而增高。(2)Integrinsα2、β1、β3的表达量的变化与成骨细胞的增殖分化功能有密切的相关关系，在低应变幅度值，随Integrinsα2、β1、β3的上调，可增加成骨细胞的增殖与合成分泌功能；在高应变幅度值，随Integrinsα2、β1、β3的上调，可明显提高成骨细胞增殖功能，但明显抑制成骨细胞的合成功能。表明Integrinsα2、β1、β3在成骨细胞的力学信号转导和细胞增殖、功能活性方面具有重要的调节作用。     

力学刺激对3月龄骨质疏松大鼠成骨细胞增殖与合成功能的影响

探讨周期性双轴力学应变对成骨细胞增殖与分化合成功能的影响。将正常 3月龄雌性 SD大鼠和骨质疏松大鼠颅顶骨分离的成骨细胞分别在含 10 %胎牛血清的 F- 12培养液中培养 ,并接种在双轴力学应变装置中。当细胞生长至亚融合状态 (Subconfluence) ,给细胞施加力学刺激 ,频率为 1Hz,力学刺激分别为 4 0 0、10 0 0、4 0 0 0μ strain;作用时间分别为每天 30 m in,2、4、8h,共加载两天。以未受力学刺激的细胞为对照组 ,受力学刺激的细胞为实验组 ,并进行比较。采用流式细胞技术测定细胞增殖变化 ;采用同位素标记方法检测成骨细胞骨钙素、I型胶原 C端前肽 (PICP)和总蛋白的分泌量。结果表明 :1)在静态培养条件下 ,3ovx组与 3control组比较 ,其细胞功能活性无明显变化 ,但 3ovx组大鼠成骨细胞增殖活性明显增高 ,这与绝经后骨质疏松骨代谢的高转换率相一致。 2 )4 0 0、10 0 0 μstrain力学刺激可以促进 3control组成骨细胞 I型胶原、骨钙素和总蛋白的分泌量增加 ,促进成骨细胞的分化成熟 ;在 10 0 0μstrain力学刺激下 ,成骨细胞合成骨基质的能力增加最为明显。同时 ,在 4 0 0、10 0 0μstrain力学刺激的初期也可以促进成骨细胞的增殖 ,而促进成骨细胞的分化成熟的作用大于促进细胞增殖的作用。 3)在4 0 0 0 μ     

骨组织工程化培养中成骨细胞电学环境的影响

目的探讨电学环境对培养在聚吡咯/聚乳酸(PPy/PLA)骨组织工程材料上成骨细胞的影响.方法化学氧化法制备含有10%PPy的PPy/PLA复合膜,将3～6代原代培养的成骨细胞种植其上,使用O、12.5、25、50、75、100、125、150、175和2001μA/cm2的电流密度刺激,分别使用MTT法、碱性磷酸酶(ALP)活性和胞外钙基质的含量测定成骨细胞在复合膜上的增殖、分化和矿化情况.结果 50和75μA/cm2是促进细胞增殖的最适合电流值,50μA/cm2能显著促进细胞的分化和矿化.结论电刺激可以促进种植在电活性材料上成骨细胞的增殖,提高细胞的活性,为骨组织的重建、加速骨界面的愈合开辟一条新的道路.     

FOXO1参与高血压条件下异常张应变诱导的血管平滑肌细胞增殖

目的 探讨高血压条件下异常升高的周期性张应变刺激对血管平滑肌细胞（vascular smooth muscle cells, VSMCs）增殖的影响,以及Forkhead转录因子1（FOXO1）在其中可能的作用。方法 构建腹主动脉缩窄高血压大鼠模型,并以假手术组为对照,应用FX-4000T体外周期性张应变加载系统,分别对VSMCs施加5%的生理性张应变和15%的高血压病理性张应变。Western blot检测VSMCs的FOXO1及p-FOXO1表达水平,BrdU法检测VSMCs 增殖活性。RNA干扰技术抑制VSMCs的FOXO1表达,检测FOXO1、p-FOXO1表达以及VSMCs增殖活性变化。结果 腹主动脉缩窄术后 2和4周,大鼠血压较假手术大鼠明显增高。与假手术大鼠相比,高血压大鼠血管壁细胞增殖活性明显增高,同时 FOXO1及 p-FOXO1表达水平也显著性升高。细胞实验表明,与5%张应变组相比,15%张应变加载显著上调VSMCs的FOXO1、p-FOXO1表达水平,以及VSMCs增殖活性。静态条件下RNA干扰抑制VSMCs的FOXO1及p-FOXO1表达,VSMCs的增殖活性明显降低。结论 高血压病理条件下,异常增高的周期性张应变可能通过促进 FOXO1表达和磷酸化诱导VSMCs增殖。以动物模型观察现象,在细胞分子水平探讨机制,旨在明确FOXO1在高血压血管重建中的作用及其力学生物学机制,为阐明高血压血管重建的发病机理和药物治疗靶标的研究提供新的实验依据。     

骨组织工程中的应力与生长

力学环境是骨组织所处的重要微环境之一，应力(应变)可促进细胞增殖，引起细胞骨架重排及细胞形态的变化，加速细胞基质矿化，刺激细胞因子及骨代谢激素的分泌．从而调节骨代谢、促进骨组织的生长与重建。但体外培养时，应力(应变)水平和细胞反应程度间的关系及细胞间信号转导等的机制还不是十分清楚，而这些都是体外培养组织所必须解决的问题，因此，本综述了应力对骨组织及成骨细胞、软骨细胞的影响与机理，对今后研究应力对骨组织工程化培养的影响具有十分重的意义。     

葛根素可促进老年女性骨质疏松症患者成骨细胞的增殖

背景:近年来,葛根素作为植物雌激素其抗骨质疏松作用对实验动物及成骨细胞的研究较多,但对老年骨质疏松症患者成骨细胞作用的研究甚少,缺乏实验资料。目的:观察葛根素对体外培养老年女性骨质疏松症患者成骨细胞增殖的影响。方法:选择老年女性骨质疏松症股骨颈骨折行人工股骨头置换患者,采集术中取下的股骨颈松质骨,采用骨组织块培养法原代培养松质骨成骨细胞,将细胞传代至所需数量。对照组给予不含葛根素的培养液,0.01,0.1,1μmol/L葛根素组分别给予含相应浓度葛根素的培养液。成骨细胞与不同浓度葛根素共培养1,3,5 d,观察成骨细胞增殖情况。结果与结论:共培养不同时间点,0.01-1.00μmol/L的葛根素随浓度增加,成骨细胞增殖活性不断增强(P0.05);培养第3天,各浓度葛根素组细胞吸光度值均最高。结果提示0.01,0.1,1μmol/L的葛根素可呈浓度依赖性促进老年女性骨质疏松症患者成骨细胞增殖。     

雌激素受体在骨生长、代谢及其力学响应中的作用和机制

力学信号在骨组织的生长、重建和疾病治疗中发挥着重要的作用。近年来的研究发现雌激素受体(estrogenreceptor,ER)能介导雌激素效应调节骨组织细胞的增殖、凋亡以及功能活性,从而影响骨形成和骨吸收,在骨组织生长、骨重建中发挥重要作用;同时参与骨组织及其细胞对力学刺激的响应过程。骨组织响应力学刺激的效应要受到ER数量和(或)功能活性的影响。这些研究提示了力学刺激和雌激素可能通过一些共同的信号通路来调节骨组织细胞的功能活性。本文着重关注ER在骨组织及其力学响应中的作用和机制。     

失神经状态下胫骨骨折断端骨痂成骨的组织学变化

背景:有研究表明神经系统在骨折的修复重建中发挥重要的作用,但其具体机制尚未阐明,中枢神经及神经生长因子对骨痂中成骨的影响至今少有报道。目的:观察失神经状态下胫骨骨折断端骨痂成骨的组织学变化。方法:用SD大鼠建立左胫骨闭合骨折髓内固定大鼠模型,建模成功后随机为3组,左胫骨骨折组;T10脊髓横断组:于左胫骨骨折后,横断切除T10段脊髓约0.3cm,制成T10脊髓完全性损伤大鼠胫骨骨折模型;神经生长因子治疗组:建立T10脊髓完全性损伤大鼠胫骨骨折模型后,肌注神经生长因子。术后各组均用苏木精伊红染色法观察骨组织形态变化,骨钙素免疫组织化学法观察骨痂中成骨情况,透射电镜观察成骨细胞内微结构变化。结果与结论:T10脊髓横断组大鼠在失神经状态下,骨痂中成骨细胞的数量减少,骨钙素表达减少,成骨细胞内细胞器功能低下。神经生长因子治疗组的以上各组织学观察指标均较T10脊髓横断组均有不同程度的改善。结果显示,神经生长因子可部分改善脊髓横断失神经状态下的骨组织再生情况。     

雌激素对大鼠胚胎成骨细胞增殖及胶原合成的影响

目的 研究雌激素对大鼠胚胎成骨细胞增殖及I型胶原代谢的影响。方法 分离大鼠胚胎头盖骨成骨细胞，分别给予不同浓度雌激素培养；观察细胞增殖情况和ALP活性变化；苦味酸天狼星红及I型胶原免疫组织化学染色，从蛋白质水平观察成骨细胞中I型胶原的变化；地高辛标记的I型胶原基因探针进行原位杂交，从mBNA水平观察I型胶原的变化。结果 雌激素可降低大鼠胚胎成骨细胞增殖水平而使ALP活性以及I型胶原蛋白质和mRNA水平均升高。结论 雌激素可促进成骨细胞分化，而抑制增殖。     

锶盐与模拟失重大鼠骨细胞的凋亡

背景:模拟失重促进成骨细胞、骨细胞凋亡,而锶能降低失重状态下骨组织中成骨细胞、骨细胞凋亡率,促进骨形成。目的:观察锶盐对失重状态下骨组织中细胞凋亡的防治效应。方法:5周龄SD大鼠建立失重动物模型,在悬吊前3d或悬吊时开始以锶盐灌胃。建模后7d,使用全自动生化仪检测大鼠血清中钙、磷、碱性磷酸酶水平,放射免疫分析法测定骨钙素质量浓度,原位细胞凋亡检测技术检测骨组织中细胞凋亡,免疫组化方法检测骨组织中Fas蛋白水平。结果与结论:模型组大鼠血清中碱性磷酸酶、骨钙素水平均显著低于相应对照组(P0.05),但血钙,磷浓度均较相应对照组升高(P0.05),骨组织中成骨细胞、骨细胞及骨髓间充质细胞凋亡指数、骨组织中Fas抗原水平均高于相应对照组(P0.01)。悬吊前3d始及悬吊时始锶盐灌胃组碱性磷酸酶,骨钙素水平均显著高于模型组(P0.05),而血钙、骨组织中成骨细胞、骨细胞及骨髓间充质细胞凋亡指数、骨组织中Fas抗原水平均显著低于模型组(P0.05)。说明尾部悬吊模拟失重增加骨组织中Fas蛋白表达,从而增加大鼠骨组织中成骨细胞、骨细胞及骨髓间充质细胞凋亡,而锶盐可降低失重状态下大鼠骨组织Fas蛋白表达,从而降低成骨细胞、骨细胞及骨髓间充质细胞凋亡。     

Level of functioning of siblings and parents of probands of varying degrees of retardation

A further analysis of already published data supports the position that retardates of low ability level less frequently have retarded siblings, retarded parents, and parents low in occupational level than do retardates higher in ability level. The analysis supports the position that there are two types of retarded individuals, persons retarded as a result of gene or chromosomal anomalies, brain injury, etc., who more frequently occur in the lower-level retardate group, and persons whose retardation represents polygenic segregation, who more frequently occur in the higher-level group.     

Assessment of the efficacy of treatment of hemangiomas

Assessment of the aftereffects of cryoexposure and ultrahigh-frequency cryoexposure on hemangioma tissue of various types, cavernous and squamous, showed a higher cryogenic effect in hemangiomatous tissue preexposed to ultrahigh-frequency waves. A quantitative criterion is proposed for assessing the efficacy of the studied methods of exposure. Translated fromByulleten' Eksperimental'noi Biologii i Meditsiny, Vol. 119, N ^o 6, pp. 669–672, June, 1995     

侧脑室注射链脲佐菌素对大鼠海马神经元突触的影响

为观察链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)双侧侧脑室注射对大鼠海马神经元突触的影响,本研究将Wistar大鼠随机分为对照组和模型组,模型组大鼠分别于第1、3d双侧侧脑室重复注射STZ3mg/kg,对照组以人工脑脊液代替STZ。21d后,取大鼠海马,免疫组织化学染色及Western blotting方法观察突触素、活性调节细胞骨架相关蛋白(activity-regulated cytoskeletal-associatedprotein,Arc)的表达;电镜观察海马CA1区神经元突触超微结构的改变。结果显示:与对照组相比,模型组大鼠海马内突触素蛋白表达显著减少,而Arc蛋白表达显著增多;模型组海马CA1区神经毡内突触结构异常,突触小泡聚集增多。以上结果提示:脑室注射STZ可影响大鼠海马突触相关蛋白的表达,引起突触超微结构异常,干扰了神经元突触信号的传导。     

Effect of conditions of culture on quantitative assessment of viability of living tissues

The viability of tissue explants of mouse kidneys, estimated quantitatively by growth in plasma-free culture, was shown to depend on several factors connected with the conditions of culture. The effect of methods of treatment of the serum, pH of the medium, and the character of distribution of the tissue explant during culture, the size of the explants, and the firmness of attachment of the tissue fragments to the substrate on this index was demonstrated.Problem Laboratory, Arkhangel'sk Medical Institute. (Presented by Academician of the Academy of Medical Sciences of the USSR A. P. Avtsyn.) Translated from Byulleten' Éksperimental'noi Biologii i Meditsiny, Vol. 86, No. 11, pp. 629–631, November, 1978.     

社区精神分裂症病人照料者的生活质量研究

通过对９３名精神分裂症患者的家庭照料者与１００名对照者比较研究表明，照料者的躯体功能、心理功能、社会功能与经济状况都显著差于对照者。照料者的生活质量与被照料者的病期、病情严重度、整体功能、药物副作用有关；同时，照料者身份为患者母亲者其生活质量受影响最大。     

膝关节骨性关节炎的关节镜治疗体会

目的我科自2001～2005年4月对59例67膝的骨性关节炎（0A），进行关节镜检查及镜下清理术。方法镜检：膝关节骨性关节炎伴不同程度滑膜炎，滑膜皱壁粘连纤维片，关节软骨不同程度破坏。镜下清除增生滑膜，松解粘连，去除剥脱软骨、修复关节面。结果随访2月～4年，平均1.5年，术后综合评估2月～1年，优良率94％；1～2年，优良率79.2％；2年以上优良率54.8％。结论关节镜对膝关节骨性关节炎诊断能提供了比较全面的资料，并对骨性关节炎早期有良好疗效，具有创伤小、恢复快、并发症少和重复治疗等优点。     

Evaluation of fungicidal activity of extracellular filtrates of cyanobacteria--possible role of hydrolytic enzymes

A set of seventy axenised and unicyanobacterial isolates belonging to the genus Anabaena were evaluated for biocidal activity against a set of phytopathogenic fungi. Among them, 35 Anabaena strains showed zone of inhibition against one or more fungi. The extracellular filtrates from 4 and 8 weeks old cultures of these Anabaena strains were further evaluated in terms of hydrolytic enzymes, proteins and IAA employing standard methods. Significant differences were also observed among the strains in terms of their FPase, chitosanase and xylanase activity, while low and relatively similar values of CMCase, cellobiase and protease activity were recorded in the strains analyzed. IAA production was also observed in all the strains. Comparative evaluation of activity of hydrolytic enzymes and antifungal activity revealed that such enzymes may contribute to the fungicidal activity of the cyanobacterial strains, besides other bioactive compounds, including IAA, which are established promising traits for biocontrol agents. This study is a first time report on the production of hydrolytic enzymes by these oxygenic photosynthetic prokaryotes, which can be potential candidates for the development of biocontrol agent(s) against selected phytopathogenic fungi.     

Pathways of the realization of immunomodulating effects of neurotransmitters

Translated fromByulleten' Eksperimental'noi Biologii i Meditsiny, Vol. 115, N ^o 4, pp. 401–404, April, 1993     

Characterization of sterols of three digenetic trematodes of buffalo

Sterols of three digenetic trematodes were isolated and characterized by infrared and 1H nuclear magnetic resonance spectroscopies, and gas-liquid chromatography and gas chromatography-mass spectrometry. Sterols identified were cholesterol, cholestanol, 24-methylcholesterol, 24-methylcholestanol, 24-ethyl-22-dehydrocholesterol, 24-ethyl-22-dehydrocholestanol, 24-ethylcholesterol and 24-ethylcholestanol.     

Study of the mechanism of hemostatic effect of desmopressin

Intravenous injection of 1 μg/kg desmopressin to rabbits not only accelerated clotting of arterial blood (maximally by 59.16±8.53% after 1 h), but also increased the number of microvesicles containing the integral enzyme 5′-nucleotidase in the arterial blood from the initial level of 36.26±8.08 ncat/liter to a maximum of 99.65±15.8 ncat/liter after 15 min. __________ Translated from Byulleten’ Eksperimental’noi Biologii i Meditsiny, Vol. 144, No. 8, pp. 167–169, August, 2007