TNFα引起的微血管内皮细胞功能障碍及其分子机制

血管内皮细胞是肿瘤坏死因子 (ＴＮＦα)作用的靶细胞之一。由ＴＮＦα 引起的血管内皮细胞损伤在很多心脑血管疾病和血栓性疾病的发病中具有重要意义。本工作主要研究不同浓度的ｍＴＮＦα(简称ＴＮＦ)引起微血管内皮细胞的功能、代谢的早期损伤以及其与微血管内皮细胞中原癌基因和凋亡相关基因表达的关系 ,试图从中说明ＴＮＦ引起微血管内皮细胞功能障碍的部分分子机制。1 细胞增殖动力学　在体外培养的肺微血管内皮细胞 (ＰＭＶＥＣ)中发现 ,加入ＴＮＦ( 2 0ｎｇ/ｍＬ)后 ,细胞形态从圆形、多角形变成梭形 ,细胞的纵轴拉长 ,横轴缩小 ,…     

TNF-α引起的微血管内皮细胞功能障碍及其细胞分子机制

血管内皮细胞是肿瘤坏死因子 (ＴＮＦ α)作用的靶细胞之一。由ＴＮＦ α引起的血管内皮细胞损伤在很多心脑血管疾病和血栓性疾病的发病中具有重要意义。本工作主要研究不同浓度的ｒｈＴＮＦ α(简称ＴＮＦ)引起微血管内皮细胞功能、代谢的早期损伤以及其与微血管内皮细胞中原癌基因和凋亡相关基因表达的关系 ,试图从中说明ＴＮＦ引起微血管内皮细胞功能障碍的表现及其部分细胞分子机制。实验是在体外培养的第二代大鼠肺微血管内皮细胞(ＲＰＭＶＥＣ ,简称内皮细胞 )中进行的。细胞经光镜、电镜的形态观察 ,ｖＷＦ免疫组化阳性 ,ＣＤ3 1免疫…     

TNF-α引起的微血管内皮细胞功能障碍及其细胞分子机制1

血管内皮细胞是肿瘤坏死因子(TNF-α)作用的靶细胞之一. 由TNF-α引起的血管内皮细胞损伤在很多心脑血管疾病和血栓性疾病的发病中具有重要意义. 本工作主要研究不同浓度的rhTNF-α(简称TNF)引起微血管内皮细胞功能、代谢的早期损伤以及其与微血管内皮细胞中原癌基因和凋亡相关基因表达的关系, 试图从中说明TNF引起微血管内皮细胞功能障碍的表现及其部分细胞分子机制.     

TNFα对培养的脐静脉内皮细胞的损伤作用

目的 :探讨肿瘤坏死因子α(TNFα)对脐静脉内皮细胞的损伤作用。方法 :将培养的内皮细胞分为对照组和实验组 ,实验组培养液中含有TNFα(4× 10 5U/L) ;通过普通光镜、扫描电镜、透射电镜观察TNFα对内皮细胞形态和超微结构的影响 ,并运用免疫组化染色来观察TNFα对内皮细胞表达细胞间粘附分子 (ICAM 1)的影响。结果 :(1)光镜、电镜观察结果显示 :实验组内皮细胞拉长 ,由原来的多边形变为成纤维状 ,细胞间距不均且变大 ;微绒毛变短甚至呈泡状 ,个别拉长 ,有些部位细胞膜有缺损以及内质网扩张、线粒体凝聚等改变。并且这些改变有时间依赖性。 (2 )实验组内皮细胞ICAM 1表达明显增强。结论 :TNFα(4× 10 5U/L)对内皮细胞有明显的损伤作用     

膜结合型 TNF-α与T细胞功能

膜结合型 Ｔ Ｎ Ｆ α（ｍ Ｔ Ｎ Ｆ α） 不仅是分泌型 Ｔ Ｎ Ｆ α（ｓ Ｔ Ｎ Ｆ α） 的前体， 也是一种重要的膜结合型细胞因子。ｍ Ｔ Ｎ Ｆ α是 Ｔ Ｎ Ｆ Ｒ８０ 的生理活化物， 且可通过同时激活 Ｔ Ｎ Ｆ Ｒ６０ 和 Ｔ Ｎ Ｆ Ｒ８０ 使靶细胞应答增强。ｍ Ｔ Ｎ Ｆ α可以表达于 Ｔ 细胞表面并参与其增殖、分泌、凋亡、免疫调节和细胞毒等多种功能。     

稳定高效表达TNF—α基因及其突变体的H22肿瘤细胞株的建立

目的 建立转染3种TNF－α基因（分泌型TNF－α突变体、跨膜型TNF－α突变体和野生型TNF－α的H22细胞株,以比较不同类型TNF－α的杀瘤效应。方法 采用逆转录病毒载体,将3种TNF－α基因导入小鼠H22肿瘤细胞中,用Southern印迹、RT－PCR、流式细胞术和生物学活性检测等方法,从基因的整合、RNA转录、蛋白的表达及其生物学活性4个方面,对转染细胞进行检测鉴定。结果 3种TNF－α基因匀在H22名得到有效表达,并具有生物学活性。结论 获得3种稳定高效表达TNF－α的H22肿瘤细胞株,为进一步研究跨膜型和分泌型TNF－α体内的抑瘤效应建立了良好的实验模型。     

TNF—α与原发性肝癌病人体内胶原代谢的关系

原发性肝癌亦有肝细胞损伤、坏死、增殖和纤维化,这些改变及肝细胞的恶变与许多细胞因子有关,其中TNF—α与原发性肝癌胶原代谢的关系,报道不一。我们测定了原发性肝细胞性肝癌(HepatocellularCarcinoma,HCC)病人外周血中肿瘤坏死因子α(TNF—α)、人Ⅲ型前胶原(hPcⅢ)、透明质酸(HA)、ALT、γ—GT的水平的变化,并分析了它们之间的相互关系,试图了解HCC患者的细胞因子与肝纤维化的关系。     

微血管通透性调节的内皮细胞机制

炎症时血管通透性升高的防治一直是医学界的一个难题。在大面积烧伤时，微血管通透性升高导致大量液体和血浆蛋白渗出丢失，在组织中聚集，造成水肿。治疗方法只有根据烧伤的面积和深度大量补液来弥补液体的丢失。虽然这不失为一有效疗法，但往往不能从根本上防治水肿的发生，其主要原因是发生机理未完全阐明。影响微血管通透性的因素有很多，可分为物理性调节和化学性调节两种。影响大分子物质通过血管壁的主要物理因素包括微血管跨壁压和胶体渗透压。血流量通过改变微血管的压力间接地调节微血管通透性，血流速度本身可能因为其产生的切应…     

碘化钠对人甲状腺细胞IL—6，IFN—γ和TNF—α基因表达的影响

本研究以10^-4M碘化钠（NaI)刺激单层培养的人Graves病（GD）甲状腺滤泡上皮细胞（TEC）,采用定性及半定量PCR技术检测刺激前后白介素-6（IL-6）、γ-干扰素（IFN-γ）和肿瘤坏死因子-α（TNF-α）在细胞中的表达水平。结果表明：（1）3例GD组织均含有IL-6及IFN-γmRNA,2例检测到TNF-α基因表达;（2）基础状态下,3例TEC均表达IL-6基础,2例表达TNF-α,而所有样本均无IFN-γmRNA;（3）NaI不能诱导TEC产生IFN-γmRNA,对IL-6mRNA的表达亦无明显影响;（4）1例TNF-α阴性的TEC样本,经NaI刺激后,可表达mRNA,2例原含有TNF-α的TEC经刺激后,其mRNA的表达水平显著增加。提示碘可通过诱导或增强TEC表达TNF-α,导致自身免疫性甲状腺疾病的发生与发展。     

5‘上游序列对TNFα诱导内皮细胞血小板源生长因子—B链基因…

目的和方法：为探讨人血小板源生长因子（ＰＤＧＦ）－Ｂ链基因５‘上游序列在ＴＮＦα诱导内皮细胞该基因转录中的调控作用,本研究将构建的一系列含人ＰＤＧＦ－Ｂ链基因不同上游序列荧光素酶报告基因质粒,与内参照质粒ｐＳＶ－β－Ｇａｌ共转染培养的人脐静脉内皮细胞,分别检测了不同浓度和不同持续时间ＴＮＦα作用下转染内皮细胞荧光素酶比活性,观察了５’上游序列的定向删切对ＴＮＦα诱导内皮细胞ＰＤＧＦ－Ｂ链基因转录的     

秋水仙碱对LPS诱导巨噬细胞TNF—α基因表达的抑制作用

细胞微管聚合抑制剂秋水仙碱（Ｃｏｌｃｈｉｃｉｎｅ，Ｃｏｌ．，１０μｍｏｌ／Ｌ）可抑制ＬＰＳ激活的小鼠巨噬细胞株ＰＵ５－１．８产生ＴＮＦ－α及减少其基因表达，而Ｃｏｌ．衍生物β－Ｌｕｍｉｃｏｌｃｈｉｃｉｎｅ对微管无作用，对ＴＮＦ－α ｍＲＮＡ积累亦无影响，其它微管聚合抑制剂长春新碱、长春花碱等则有类似Ｃｏｌ．的抑制作用。用ｒｕｎ ｏｎ核转录试验和ｍＲＮＡ半寿期检测证实Ｃｏｌ．ＴＮＦ－α ｍＲＮＡ积累     

TNF—α诱导中性粒细胞呼吸爆发的信号传导

中性粒细胞是重要的炎性细胞,而ＴＮＦ－α则是一关键的促炎症细胞因子,可激活中性粒细胞,促使其粘附、吞噬、脱颗粒、呼吸爆发等。本文主要综述参与ＴＮＦ－α诱导中性粒细胞呼吸爆发的信号传递分子,包括ＰＫＡ、ｐ３８ＭＡＰＫ、ＰＴＫ等。     

LPS和TNF—α诱导血管内皮细胞ICAM—1蛋白表达的比较

目的和方法 采用细胞间免疫荧光染色和激光共聚焦显微镜扫描技术,研究脂多糖（LPS）和肿瘤坏死因子α（TNF－α）对人脐静脉内皮细胞（HUVEC）表面细胞间粘附分子－1（ICAM－1）表达的诱导作用。结果 与内皮细胞表明ICAM－1的基础表达相比,LPS可诱导内皮细胞表面ICAM－1表达在第8－24h显著增加,但第36h有较明显的下降;TNF－α也可诱导内皮细胞表面ICAM－1表达在第8－24h显著增加,并在36h仍维持在较高水平。LPS和TNF－α与内皮细胞ICAM－1表达之间存在剂量反应关系。结论 LPS和TNF－α可诱导血管内皮细胞ICAM－1的表达,但内皮细胞在表达ICAM－1时对LPS的长期刺激可能产生耐受性。     

兔肾微血管内皮细胞体外培养及其细胞表型的初步研究

目的 探索肾微血管内皮细胞的体外培养方法，并对其进行鉴定和表型研究，拟为骨组织工程再血管化提供理想的种子细胞。方法采用三步梯度筛网法，先获得较高纯度的。肾血管球，再应用肾血管球外植法体外培养肾微血管内皮细胞。进一步对。肾微血管内皮细胞进行免疫组化法的Ⅷ因子相关抗原鉴定，用透射电镜观察细胞浆Weibel-Palade小体，以及采用间接免疫荧光法检测CD31、CD34及CD44表达。结果体外培养出纯度很高的血管内皮细胞并培养了11代。此外，免疫组化显示Ⅷ因子相关抗原阳性，电镜下观察到Weibel-Palade小体，以及间接免疫荧光检出CD31、CD34表达阳性，而CD44阴性。结论本实验方法可成功培养出肾微血管内皮细胞，且后者表达CD31、CD34细胞表型。