siRNA沉默HLA-A2基因表达对人脐带间充质干细胞诱导成骨的影响

目的探讨RNAi技术下调人脐带间充质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells,hUCMSCs)HLA-A2基因表达后,对HLA-A2基因诱导成骨的影响。方法利用HLA-A2靶向小分子干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)转染hUCMSCs,实验组为转染的细胞,对照组为未转染细胞。免疫细胞化学染色、Western Blot法检测两组细胞HLA-A2的表达;用诱导剂(0.1μmol/L地塞米松、10mmol/Lβ-甘油磷酸钠、50mg/L维生素C)行成骨诱导分化,茜素红矿化结节染色计数;碱性磷酸酶(ALP)染色以及比色法检测ALP活性。结果免疫细胞化学染色显示,实验组HLA-A2表达为弱阳性,对照组HLA-A2表达为阳性;Western Blot法检测HLA-A2蛋白的表达量对照组明显高于实验组。茜素红矿化结节染色显示:两组细胞均出现红色结节的阳性染色,但无差异(P0.05);两组ALP染色细胞胞浆均呈蓝色阳性反应,ALP活性检测结果显示两组无差异(P0.05)。结论应用RNAi技术下调HLA-A2基因表达后,不影响人脐带间充质干细胞的成骨诱导。     

骨髓间充质干细胞的体外扩增及其对T淋巴细胞产生IFN-γ和IL-10的影响

为了探讨骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSC)对T淋巴细胞分泌功能的免疫调节作用,从人骨髓分离培养MSC,通过其形态的均一性及流式细胞术检测表面标志以鉴定其纯度;从外周血分离获得T淋巴细胞,再将MSC分别以不同数量加入到植物血凝素(PHA)刺激的外周血T淋巴细胞和混合淋巴细胞反应(MLR)培养体系及不同浓度MSC培养上清加入混合淋巴细胞反应培养体系共培养后,分别收集上清,ELISA检测IFN-γ和IL-10水平,发现不同细胞数量的MSC对T细胞分泌细胞因子IFN-γ均有抑制,同时促进IL-10分泌,且其抑制和促进均呈剂量依赖性;MSC的不同上清浓度对IFN-γ抑制亦呈浓度依赖性,但未发现对IL-10分泌的影响。表明骨髓MSC在体外可抑制T细胞分泌IFN-γ、促进分泌IL-10,起到免疫调节作用。     

人骨髓间充质干细胞及条件培养液对异体T淋巴细胞分泌功能的影响

背景：骨髓间充质干细胞具有支持造血、多向分化及免疫调节作用,后者在异基因造血干细胞移植尤其是HLA半相合造血干细胞移植后移植物抗宿主病中具有潜在的应用价值,但其免疫调节作用的机制不清。 目的：体外观察人骨髓间充质干细胞及其条件培养液对异体外周血T淋巴细胞及其分泌功能的影响。 方法：从人骨髓中分离培养骨髓间充质干细胞,反复贴壁进行纯化;用尼龙棉柱法纯化异体外周血T淋巴细胞。观察骨髓间充质干细胞及其条件培养液体对植物血凝素刺激下T淋巴细胞增殖的影响,以ELISA方法检测γ-干扰素、白细胞介素4水平变化。 结果与结论：骨髓间充质干细胞及其条件培养液体对植物血凝素诱导的T淋巴细胞增殖均有抑制作用,并呈剂量和浓度依赖性。ELISA结果表明,骨髓间充质干细胞及其条件培养液抑制T淋巴细胞γ-干扰素的分泌;骨髓间充质干细胞可促进白细胞介素4的分泌,但其条件培养液对白细胞介素4的分泌无影响。提示骨髓间充质干细胞及其条件培养液对异体外周血T淋巴细胞的增殖有抑制作用,其作用可能与其影响T淋巴细胞分泌γ-干扰素和白细胞介素4有关。     

沉默IFN-γR表达对大鼠BMMSCs免疫调节能力的影响

目的:通过沉默大鼠骨髓间充质干细胞(BMMSCs)干扰素γ受体(IFN-γR)基因表达,研究抑制IFN-γ信号通路对大鼠BMMSCs免疫调节能力的影响。方法:根据大鼠IFN-γR基因序列,构建沉默IFN-γR基因的重组慢病毒shIFNγR-LV,并转染大鼠BMMSCs,沉默大鼠BMMSCs的IFN-γR基因表达;混合淋巴细胞培养实验分别检测对照组、BMMSCs阴性对照(BMMSC-NC)组和BMMSC-shIFNγR组淋巴细胞的活力和炎症因子浓度。结果:构建的慢病毒shIFNγR-LV能显著降低大鼠BMMSCs的IFN-γR mRNA表达;混合淋巴细胞培养实验显示,相对BMMSC-NC组,BMMSC-shIFNγR组抑制淋巴细胞活力的作用减弱(P0.05)。混合淋巴细胞培养体系中,BMMSC-NC组肿瘤坏死因子α浓度低于BMMSC-shIFNγR组,而白细胞介素10浓度高于BMMSC-shIFNγR组(P0.05)。结论:利用RNA干扰技术能有效沉默大鼠BMMSCs的IFN-γR基因表达,并能显著降低BMMSCs的调节免疫功能。     

间充质干细胞对再生障碍性贫血患者造血支持及T淋巴细胞分泌功能的影响

BACKGROUND: Recently, the role of mesenchymal stem cells in aplastic anemia has been widely explored. However, its underlying mechanism remains unclearly.OBJECTIVE:To study the effect of umbilical cord blood and bone marrow mesenchymal stem cells on hematopoietic support and secretory function of T lymphocytes in patients with aplastic anemia.METHODS:Cord blood and bone marrow samples from 48 cases of aplastic anemia and 48 healthy lying-in women to isolate mesenchymal stem cells using flow cytometry. Mesenchymal stem cells from the cord blood and bone marrow were respectively co-cultured with cord blood mononuclear cells to count burst forming units-erythroid and colony forming units-granulocyte/macrophage. Mesenchymal stem cells were co-cultured with T lymphocytes from aplastic anemia patients undergoing phytohemagglutinin stimulation, and ELISA was used to detect interleukin-2, interleukin-4 and interferon-γ levels secreted from T lymphocytes.RESULTS AND CONCLUSION: The number of burst forming units-erythroid and colony forming units-granulocyte/macrophage significantly increased in normal bone marrow or umbilical cord blood mesenchymal stem cells co-cultured with cord blood mononuclear cells (P < 0.05), but reduced remarkably in umbilical cord blood mesenchymal stem cells from aplastic anemia patients co-cultured with cord blood mononuclear cells (P < 0.05). Levels of interleukin-2, interleukin-4 and interferon-γ from T lymphocytes were inhibited significantly after co-culture with normal bone marrow mesenchymal stem cells compared with phytohemagglutinin-induced T lymphocytes (P < 0.05). There was a similar inhibitory effect after co-culture with normal umbilical cord blood mesenchymal stem cells. There was a significantly reduction in the capacity of inhibiting interleukin-2, interleukin-4 and interferon-γ levels from T lymphocytes after co-culture with bone marrow mesenchymal stem cells from aplastic anemia patients (P < 0.05). Aplastic anemia patients show some functional defects in their bone marrow mesenchymal stem cells that have a weaker inhibitory role than normal bone marrow or umbilical cord blood mesenchymal stem cells in the hematopoietic support and secretory function of T lymphocytes. These findings indicate that mesenchymal stem cells from aplastic anemia patients can influence the pathological progress through weakening hematopoietic support and secretory function of T lymphocytes.  中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞;骨髓干细胞;造血干细胞;脂肪干细胞;肿瘤干细胞;胚胎干细胞;脐带脐血干细胞;干细胞诱导;干细胞分化;组织工程     

IL-2调节人外周血T淋巴细胞CTLA-4表达

目的 探讨人外周血T淋巴细胞CTLA-4的表达情况及IL-2对其表达的调节作用。方法 采用流式细胞仪定量测定人外周血T淋巴细胞内及细胞膜上CTLA-4的水平，半定量RT-PCR检测T淋巴细胞内CTLA-4mRNA的水平，并在体外用IL-2刺激T淋巴细胞后观察CTLA-4及CTLA-4mRNA水平的变化。结果 人外周血T淋巴细胞膜表面几乎不表达CTLA-4，7．6％-18．0％的T淋巴细胞有胞内表达，CD4^ T淋巴细胞表达CTLA-4的阳性比例略高于CD8^ T淋巴细胞；人T淋巴细胞可溶性形式的CTLA-4mRNA半衰期短于全长CTLA-4mRNA；IL-2可以通过诱导人T淋巴细胞CTLA-4mRNA的转录上调CTLA-4的表达，IL-2诱导的细胞多为CD25^ T淋巴细胞。结论 CTLA4多存在于人外周血T淋巴细胞内，参与T淋巴细胞活化过程的调节。IL-2的免疫抑制作用可能与其诱导T淋巴细胞内CTLA-4mRNA转录，从而上调CTLA-4的表达有关。     

间充质干细胞体外对ITP患者T淋巴细胞分泌功能的影响

目的： 体外观察间充质干细胞（MSCs）对特发性血小板减少性紫癜（ITP）患者T淋巴细胞分泌细胞因子功能的影响。方法: 采用Ficoll分离和体外贴壁、传代培养,扩增出骨髓MSCs;通过Ficoll分离法和尼龙棉柱法获取ITP患者外周血T淋巴细胞。以经丝裂霉素（MMC）处理后不同数量（2×103、1×104、5×104 cells/well）的MSCs作为基底层细胞,接种体外分离纯化的异体ITP患者T淋巴细胞,分别于2 d、4 d、6 d后各自收集培养上清,用酶联免疫吸附试验(ELISA)法动态测定T淋巴细胞分泌白细胞介素2(IL-2)、干扰素-γ(IFN-γ)、白细胞介素4(IL-4)、白细胞介素10(IL-10)水平的变化。结果: ITP患者T淋巴细胞分泌细胞因子IL-2、IFN-γ较正常人高(P<0.05),IL-4、IL-10较正常人低(P<0.05)。MSCs可显著抑制ITP患者或正常对照组T淋巴细胞分泌IL-2、IFN-γ(P<0.05),且随MSCs数量的增加,抑制增强(P<0.05),共培养4 d、6 d时作用明显强于2 d时(P<0.05);MSCs可促进ITP患者T淋巴细胞分泌IL-4、IL-10 (P<0.05),且随MSCs量的增加,促进作用增强(P<0.05),对IL-10的作用随时间延长而增强(P<0.05),但对IL-4的作用在培养第2 d、4 d、6 d时无显著差异(P>0.05);在正常对照组,当MSCs数量>1×104可以促进T淋巴细胞分泌IL-4 与IL-10 (P<0.05),且随MSCs数量的增加,作用增强(P<0.05),共培养4 d、6 d时作用明显强于2 d时(P<0.05)。结论: MSCs能够在体外调节ITP患者辅助性T细胞1 (Thl)和辅助性T细胞2 (Th2)反应平衡,可使ITP患者Th1极化状态部分改善。     

骨髓间充质干细胞体外对T淋巴细胞分泌IL-2、IL-4功能的影响

目的探讨间充质干细胞(Mesenchymal stem cells,MSCs)对T淋巴细胞分泌功能的调节作用.方法体外分离培养、扩增人骨髓MSCs,并通过形态学特征及流式细胞术检测其表面标志加以鉴定.将不同数量的MSCs(5×103、1×104、5×104个细胞/孔)分别与PHA激活的T细胞和混合淋巴细胞反应(MLR)体系共培养,并将不同浓度(25%、50%、75%)的MSCs培养上清和MLR体系共培养.应用ELISA分别检测各培养上清液中T细胞分泌IL-2、IL-4的水平.结果骨髓MSCs能抑制PHA作用下的T细胞分泌IL-2、IL-4(P＜0.05),并呈MSCs数量相关性(P＜0.05),且对IL-2的抑制作用更显著;也可抑制MLC体系中T细胞分泌IL-2、IL-4(P＜0.05),但各数量组的MSCs的抑制作用无显著性差异(P＞0.05).不同浓度的MSCs培养上清均可抑制MLC体系中T细胞分泌IL-2、IL-4(P＜0.05),但不同浓度的MSCs培养上清组对IL-4抑制作用无显著性差异(P＞0.05).结论骨髓MSCs及其培养上清均可抑制PHA或异体抗原作用下的T细胞分泌IL-2、IL-4,提示MSCs可能是直接作用于T细胞或通过分泌可溶性因子调节 Th1/Th2反应平衡而发挥免疫调节作用的.     

人骨髓MSC对PHA活化T细胞周期以及表型和细胞因子分泌的影响

目的研究人骨髓间充质干细胞(MSC)对T细胞周期和活化的影响,探讨MSC对T细胞增殖抑制的作用机制。方法Ficoll密度梯度离心法分离纯化人骨髓MSC,体外扩增培养3代后用于实验。应用流式细胞术分析MSC对PHA作用下T细胞周期和早期表型CD25、CD69表达的影响,ELISA法检测细胞因子水平。结果人骨髓MSC体外可使PHA刺激下的T细胞滞留于细胞周期的G0/G1期,下调活化T细胞早期表型CD25、CD69的表达,抑制IL-2、IFN-r的分泌。结论人骨髓MSC体外可通过对T细胞周期的影响抑制其活化和增殖。     

胎盘源间充质干细胞对T淋巴细胞体外增殖的影响

目的从人胎盘组织中分离培养获得间充质干细胞（mesenchymal stem cells,MSCs）,并进一步研究其对T淋巴细胞体外增殖的影响。方法首先从胎盘组织中分离培养胎盘间充质干细胞（PMSCs）,在体外观测其形态,并通过细胞表面抗原表达、分化潜能等特征进行鉴定;然后将体外分离培养扩增的PMSCs,按照不同比例加入双向混合淋巴细胞培养体系（mixed lymphocyte reaction,MLR）中,共同培养6d后,测定T淋巴细胞的增殖。结果从人胎盘组织中分离培养获得问充质干细胞,具有与骨髓间充质于细胞（BMSCs）极为相似的细胞形态及细胞表面标志,表达CD29、CD44和CD105,不表达CD34、CD45、CD106和HLA—DR,并且还具有与BMSCs相似的跨胚层分化能力,能在一定条件下被诱导分化出神经元样细胞。PMSCs与同种异体混合淋巴细胞共同培养能抑制T淋巴细胞的体外增殖。结论胎盘组织是MSCs的有效来源,PMSCs具有与BMSCs相似的生物学特性及免疫调节机制。它为问充质干细胞的研究提供了又一重要的细胞来源。     

人羊膜间充质干细胞抑制异体淋巴细胞增殖并减少γ干扰素的分泌

目的观察人羊膜间充质干细胞(hAMSC)对体外培养的淋巴细胞功能的影响。方法通过酶消化法分离培养hAMSC,采用荧光团标记的小鼠抗人单克隆抗体结合流式细胞术鉴定细胞表面抗原;免疫荧光染色检测培养细胞波形蛋白(vimentin)和阶段特异表达抗原4(SSEA-4)的表达;分离培养hAMSC和外周血单个核细胞(PBMC),将刀豆蛋白(ConA)刺激的淋巴细胞与1×104、5×104、1×105个hAMSC进行共培养。CCK-8法测定淋巴细胞增殖,ELISA测定细胞上清液中IFN-γ的水平。结果5μg/mLConA能够引起淋巴细胞增殖;共培养条件下,hAMSC能够抑制ConA引起的淋巴细胞增殖,且随着hAMSC的数量增加,抑制效果更明显。培养72h后,CCK-8法结果表明,单纯ConA刺激后淋巴细胞数显著高于共培养细胞。选择抑制效果最佳的组别1×106个淋巴细胞与1×105个hAMSC共培养,ELISA测定1×105个hAMSC对淋巴细胞抑制72h后,上清液中IFN-γ分泌,共培养细胞上清液中IFN-γ水平显著低于单纯ConA刺激细胞。结论hAMSC能在体外抑制ConA引起的淋巴细胞增殖并减少IFN-γ分泌。     

人脐血间充质干细胞对T淋巴细胞旁分泌的免疫调节作用

背景：相关研究表明脐血间充质干细胞具有一定的免疫调节作用,但具体机制不详。 目的：观察脐血源间充质干细胞通过旁分泌机制对T淋巴细胞增殖的影响。 方法：分离正常分娩产妇脐血间充质干细胞和健康志愿者外周血T淋巴细胞,按不同比例建立脐血间充质干细胞与T淋巴细胞非接触共培养体系,以单独培养T淋巴细胞作为对照组。 结果与结论：脐血间充质干细胞形态学呈现成纤维梭型细胞样,呈旋涡状团集生长。流式细胞仪检测脐血间充质干细胞表面标记物：CD29(+),CD44(+),CD34(-),CD45(-),HLA-DR(-);与对照组相比,共培养组可明显抑制植物血凝素刺激T淋巴细胞的增殖作用(P < 0.05),且呈剂量依赖性;ElISA法检测共培养组分泌的白细胞介素10水平较对照组明显升高(P < 0.05);中和试验后脐血间充质干细胞对T淋巴细胞增殖的抑制作用明显减弱。结果说明脐血间充质干细胞可明显抑制异体外周血T淋巴细胞的增殖,可能是通过旁分泌白细胞介素10达到负向免疫调节作用。     

siRNA对预分化骨髓间充质干细胞β2M表达的影响

 目的：研究小干扰RNA(siRNA)对预分化骨髓间充质干细胞（BMSCs）β2-微球蛋白（β2M）基因表达的影响。方法：BMSCs成软骨诱导液预分化21 d后,将β2M siRNA用Lipofectamine 2000转染BMSCs、分为转染组、空白对照组和阴性对照组,应用实时定量PCR、Western blotting、激光共聚焦显微观察等方法检测siRNA对预分化BMSCs的β2M mRNA和蛋白的表达情况,甲苯胺蓝和Ⅱ型胶原免疫荧光检测预分化BMSC的蛋白聚糖多聚体和Ⅱ型胶原分泌情况。结果：实时定量PCR、Western blotting和激光共聚焦显微观察结果显示siRNA成功抑制β2M mRNA和蛋白的表达,甲苯胺蓝和Ⅱ型胶原免疫荧光结果显示siRNA不影响预分化BMSCs蛋白聚糖多聚体和Ⅱ型胶原蛋白的分泌。结论: RNAi干扰β2M可降低BMSCs中β2M mRNA和蛋白的表达,但不影响预分化BMSCs的软骨细胞特性。     

雌激素缺乏致骨质疏松症小鼠骨髓间充质干细胞通过分泌MCP-1影响T淋巴细胞趋化及凋亡

目的探讨卵巢摘除术(OVX)所致雌激素缺乏骨质疏松小鼠骨髓间充质干细胞(BMSC)与假手术(sham)组BMSC单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)表达的改变,并研究其对诱导T淋巴细胞趋化及凋亡的组间差异,揭示BMSC在骨质疏松症发生中的可能作用。方法建立OVX模型及sham模型,micro-CT检测证明动物模型建立成功。ELISA检测OVX组及sham组BMSC MCP-1的表达,并对OVX组来源BMSC给予梯度浓度雌激素,观察不同浓度雌激素作用下BMSC表达MCP-1的变化。两组来源BMSC分别与T淋巴细胞共培养后,检测不同组间BMSC诱导T淋巴细胞趋化能力及凋亡的改变,同时观察外源性雌激素对这一改变的扭转作用。结果在雌激素缺乏所致骨质疏松症中,BMSC MCP-1表达能力下降,同时其诱导T淋巴细胞趋化及凋亡能力随之下降。当外源性给予一定浓度雌激素后,该下降趋势得到一定程度的扭转。结论 BMSC可能通过自身MCP-1的表达从而调控T淋巴细胞的趋化及凋亡,其免疫调节特性使其在骨质疏松症发生发展中起重要作用。     

癌-睾丸抗原MAGEC2 HLA-A3限制性细胞毒性T淋巴细胞表位的鉴定

目的:预测并初步鉴定HLA-A3超型限制性MAGEC2抗原特异性细胞毒性T细胞(CTL)表位肽,为基于超型表位的MAGEC2治疗提供实验基础及新的候选靶标。方法:通过BIMAS、SYFPEITHI和IEDB软件预测打分来选取MAGEC2的HLA-A3限制性表位;结合力实验用于检测候选表位与T2A3细胞表面HLA-A3分子的结合能力,ELISPOT实验检测候选表位肽诱导的CTL分泌IFN-γ的能力,体外细胞毒实验检测侯选表位肽诱导的CTL杀伤靶细胞的能力。结果 :表位肽P147、P167、P196、P229和P251具有较好的HLA-A3结合力。ELISPOT实验结果显示表位肽P167、P196和P251诱导的CTL具有分泌IFN-γ的能力。细胞毒实验结果显示表位肽P196和P251诱导的CTL对靶细胞有一定的杀伤作用(P0.05或P0.01)。结论 :P196和P251有更高的HLA-A3分子亲和力,保留了原有的免疫原性,是优秀的MAGEC2抗原的HLA-A3限制性CTL候选表位,可以成为新的抗肿瘤多肽免疫治疗疫苗的候选表位。     

PTEN基因沉默对骨髓间充质干细胞生物学特性的影响

背景：脊髓损伤后脊髓自身的修复和再生能力有限,细胞移植治疗脊髓损伤具有很强的临床应用价值和前景。 目的：探讨PTEN基因沉默对骨髓间充质干细胞生物学特性的影响,以期为组织工程提供更优良的种子细胞。 方法：采用脂质体法转染PTEN基因特异的siRNA沉默PTEN基因,RT-PCR 检测PTEN基因的表达,通过细胞生长曲线、细胞周期、Transwell实验观察PTEN基因修饰后细胞生物学特性的变化。 结果与结论：PTEN基因在骨髓间充质干细胞中高表达并且siRNA成功干扰了PTEN基因的表达,PTEN基因沉默后的细胞具有更强的存活、增殖、迁移能力,更适合作为组织工程的种子细胞。中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞;骨髓干细胞;造血干细胞;脂肪干细胞;肿瘤干细胞;胚胎干细胞;脐带脐血干细胞;干细胞诱导;干细胞分化;组织工程     

人骨髓源和胎盘源间充质干细胞对T细胞增殖抑制作用的比较

目的:比较研究人骨髓源和胎盘源间充质干细胞介导的T细胞增殖抑制作用机制。方法:应用流式细胞术(FCM)分别检测B7H4和PDL1在人骨髓源间充质干细胞(HBMSCs)和胎盘源间充质干细胞(HPMSCs)上的表达;应用抗体阻断试验分析B7H4、PDL1分别在HBMSCs和HPMSCs对T细胞增殖及周期影响中的作用。结果:HBMSCs上高表达免疫负性调控分子B7H4,而HPMSCs上高表达免疫负性调控分子PDL1。分别应用B7H4mAb和PDL1mAb阻断,可使HBMSCs和HPMSCs对PHA激发的T细胞增殖抑制作用明显减弱;下调T细胞周期中G0/G1期细胞数量,上调S期细胞数量,明显减弱HBMSCs和HPMSCs对T细胞周期的影响。结论:HBMSCs和HPMSCs可通过表达不同的免疫负性调控分子介导T细胞的增殖抑制作用。     

脐血来源间充质干细胞可抑制异体T细胞的反应

目的 研究脐血间充质干细胞(HUCB-MSCs)对异体T细胞的抑制作用.方法 体外培养HUCB-MSCs,流式细胞术测表面标记;取正常人外周血,免疫磁珠分离CＤ３+T细胞,将分离的CD3+T与HUCB-MSCs 1:1混合培养5d,PHA刺激或不刺激,采用3H-TdR掺入法观察T细胞增殖,ELISA方法检测细胞因子,流...     

表达PD-L1/PD-L2的人胎盘间充质干细胞对外周血T细胞分泌IL-17的拮抗作用

目的 探讨程序性死亡因子配体1(PD-L1)和PD-L2在人胎盘源性间充质干细胞(hPMSCs)上表达对外周血T细胞分泌IL-17的影响.方法 应用酶消化法分离人胎盘间充质干细胞(hPMSCs),并进行表型及分化鉴定;RT-PCR、激光扫描共聚焦显微镜技术(LSCM)及流式细胞术(FCM)检测hPMSCs上PD-L1及PD-L2的表达;应用化学合成的PD-L1 siRNA、PD-L2 siRNA沉默hPMSCs上PD-L1及PD-L2表达;密度梯度离心法分离纯化人外周血T细胞;细胞胞内因子染色法分析沉默PD-L1或PD-L2后hPMSCs对PMA活化的T细胞分泌IL-17的影响.结果 除PD-L1外,hPMSCs高表达PD-L2;siRNA能够有效阻断PD-L1和PD-L2在hPMSCs上的表达;胞内染色结果显示,hPMSCs能够上调T细胞IL-17的分泌,阻断PD-L1或PD-L2后,T细胞IL-17的分泌被进一步上调,且PD-L1和PD-L2具有叠加作用.结论 PD-L1和PD-L2在hPMSCs上表达,可拮抗hPMSCs刺激外周血T细胞分泌IL-17的作用.     

脐血来源间充质干细胞可抑制异体T细胞的反应

目的研究脐血间充质干细胞(HUCB-MSCs)对异体T细胞的抑制作用。方法体外培养HUCB-MSCs,流式细胞术测表面标记;取正常人外周血,免疫磁珠分离CD3+T细胞,将分离的CD3+T与HUCB-MSCs 1∶1混合培养5 d,PHA刺激或不刺激,采用3H-TdR掺入法观察T细胞增殖,ELISA方法检测细胞因子,流式细胞术观察细胞凋亡。结果 HUCB-MSCs呈纺锤样的细胞形态,不表达CD14、CD34、CD45、HLA-DR,而表达CD29、CD44、HLA-ABC。HUCB-MSCs抑制PHA引起的T细胞增殖(5 230±550 vs 10 500±800 counts/min,P<0.001);HUCB-MSCs还能抑制异体T细胞分泌IFN-γ(510±60 vs 1 580±100 pg/mL,P<0.001)和TNF-α(590±20 vs 1 180±30 pg/mL,P<0.001),上调IL-4(16.3±8.2 vs 4.1±1.8 pg/mL,P<0.001)和IL-10(105±5 vs 17±2 pg/mL,P<0.001)分泌;HUCB-MSCs不诱导T细胞的凋亡。结论 HUCB-...