鹭鸶咯口服液对小鼠巨噬细胞活化作用的研究

我们采用噻唑蓝（ＭＴＴ）比色法和小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞实验观察了鹭鸶咯口服液对小鼠巨噬细胞的活化作用和吞噬功能的影响。结果表明，在８％（ｇ／１００ｍｌ）和１６％两个药物浓度，该药物对小鼠巨噬细胞均无毒性，且刺激其大量增生。对于巨噬细胞活性的影响，在体内外作用均显著。在８％、１６％、３２％三个药物浓度上，该药物对提高巨噬细胞吞噬功能均有显著作用。     

抗CD28＋B7．1单抗共刺激T细胞诱导肝癌细胞凋亡的第二信使系统研究

目的：探讨T淋巴细胞活化、增殖、诱导肝癌细胞凋亡过程中第二信使系统的调控机制。方法：用CD28＋B7．1（CD80）单克隆抗体共刺激T淋巴细胞诱导肝癌细胞（BLE－7402）凋亡,测定不同诱导时间T细胞内cAMP,cGMP和Ca^2 的浓度改变及肝癌细胞凋亡情况。结果：活化的T淋巴细胞中,cAMP浓度在初期短暂升高,继而快速下降,作用于肝癌细胞后逐步回升至1－2倍,而细胞内cGMP的浓度急剧升高6－7倍,Ca^2 浓度也显著增加2－3倍,且均在第4天达最高值,与癌细胞的凋亡呈正相关,结论：T淋巴细胞内第二信使系统cAMP、cGMP和Ca^2 的水平与细胞的活化增殖、杀伤效应密切相关。     

血清淀粉样P成分的DNA结合特性

目的 检测血清淀粉样P成分(SAP)与不同DNA的结合活性并研究SAP与DNA的结合是否有利于此类抗原的清除，探讨它在SLE发生发展中的作用及意义。方法 用亲和层析和凝胶过滤方法自小鼠和人血清中纯化SAP，分别提取来自细菌、质粒、酵母、小鼠淋巴细胞等不同DNA，用DOT-EIA方法检测SAP与它们的结合活性，用巨噬细胞吞噬实验观察SAP与DNA结合后对DNA清除的影响。结果 人和小鼠SAP均与细菌DNA结合最强，其次为质粒、酵母DNA，与淋巴细胞DNA和小牛胸腺DNA的结合较弱，与单链λDNA结合最弱；与来源于活化状态小鼠淋巴细胞DNA的结合力高于非活化状态；SAP与活化淋巴细胞DNA结合后可促进巨噬细胞对DNA的吞噬。结论 SAP与不同DNA结合活性各异。     

人参皂甙对小鼠腹腔巨噬细胞活性的影响及其作用机制初步探讨

目的:观察人参皂甙(GS)对巨噬细胞的免疫激活作用,探讨GS活化巨噬细胞及免疫调节机制。方法:在体外培养的小鼠腹腔巨噬细胞中加入不同浓度的GS后,观察巨噬细胞一氧化氮(NO)合成及MTT比色法检测活化后的巨噬细胞对肿瘤细胞杀伤活性的影响;扫描电子显微镜(SEM)观察巨噬细胞的超微结构改变;激光扫描共聚焦显微镜(LSCM)观察巨噬细胞表面组织相容性复合体Ⅱ(MHCⅡ)的变化;以特异性荧光探针Fluo-3/AM负载细胞,应用LSCM检测巨噬细胞内Ca2+浓度。结果:小鼠腹腔巨噬细胞经GS作用后,细胞形态发生活化性改变,杀瘤活性增强,细胞表面MHCⅡ表达增加并增强对H22细胞杀伤活性;GS作用细胞4小时后,25~200 mg/L GS细胞内Ca2+浓度升高,并与药物浓度呈正相关。结论:GS在体外能激活小鼠巨噬细胞,促进其发挥免疫防御功能,其免疫调节机制可能与细胞内Ca2+浓度升高有关。     

三七提取物对小鼠淋巴细胞活化、增殖和腹腔巨噬细胞产生NO的影响

目的 分析三七提取物（SE）对小鼠淋巴细胞体外活化、增殖以及对巨噬细胞产生NO的影响，探讨其免疫抑制作用的机制。方法 以多克隆刺激剂刀豆蛋白A（ConA）刺激淋巴细胞活化和增殖，利用荧光标记的单克隆抗体双染技术和流式细胞术检测SE对小鼠CD3^＋T细胞CD69表达的影响；通过CFSE染色流式细胞术检测SE对淋巴细胞增殖的影响；用脂多糖（LPS）或淋巴细胞培养上清液（lymphocytes culture supernate，LCS）体外诱导小鼠腹腔巨噬细胞分泌NO，采用Griess试剂盒检测NO的水平。结果 在ConA刺激6h后小鼠T细胞活化率为59．79％，50、100μg／ml的SE可显著降低其活化率，分别为46．50％和37．73％（P〈0．01）。在培养72h后，不同浓度SE能明显抑制ConA诱导T细胞的增殖。SE在12．5～100μg／ml的浓度范围内对淋巴细胞培养上清和LPS诱导小鼠腹腔巨噬细胞NO的释放具有抑制作用（P〈0．01）。结论 三七提取物对小鼠淋巴细胞的活化、增殖有明显抑制作用，并能抑制巨噬细胞产生NO（P〈0．01）。     

戴氏虫草和粉被虫草多糖对巨噬细胞等活性的影响

目的 研究虫草属新种-戴氏虫草菌丝体胞外水溶性多糖（CDP1）和粉被虫草菌丝体多糖（CPP1）在体外对小鼠腹腔巨噬细胞（Mφ）吞噬功能和脾细胞免疫功能的影响。方法 MTT比色法测定淋巴细胞增殖,孔雀绿比色法测定小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能,中性红比色法测定细胞毒淋巴细胞（CTL）活性,结果 CDP1在正常情况下不能促进小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬功能,而CPP1却有促进作用;在免疫抑制的情况下,一定浓度的戴氏虫草菌丝体胞外水溶性多糖和粉被虫草多糖能恢复提高吞噬细胞的吞噬功能,而CPP1却有促进作用;在免疫抑制的情况下,一定浓度的戴氏虫草菌丝体细外水溶性多糖和粉被虫草多糖能恢复提高吞噬功能,它们不仅能促进正常脾活化T淋巴细胞的增殖,而且能恢复环磷酰胺和氢化可的松抑制免疫小鼠脾活化T淋巴细胞的增殖,在合适的浓度下能增高小鼠脾CTL活性,同时在一定浓度下能恢复免疫抑制小鼠脾CTL活性。结论 两者具有增强免疫功能的作用。     

一株植物乳杆菌内化于小鼠回肠派伊尔结及其免疫调节作用的研究

目的 探讨决定Lactobacillus plantarum Lp6 在小鼠小肠派伊尔结 (PP)内化的细菌源因素,并分析该菌株的免疫调节作用.方法 FITC标记不同处理的细菌,分析在含PPs的回肠结扎段内化的情况.给小鼠灌胃活或灭活细菌,研究其对小鼠脾、PP细胞增殖和腹腔巨噬细胞吞噬活性的影响.结果 甘露糖可以强烈的抑制细菌内化,灭活和四甲基脲处理可以较明显的减低细菌内化.活菌和灭活菌可以特异性的调节腹腔巨噬细胞、PP细胞和脾淋巴细胞的活性.结论 细菌表面甘露糖糖凝集素是影响细菌PP内化的最主要因素.细菌活力、表面疏水性也有一定的作用.活菌和灭活可以不同程度的增强小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬活性并抑制脾和PP淋巴细胞增殖.     

淋巴细胞化学发光的研究进展

淋巴细胞化学发光(Ly-CL)是淋巴细胞活化的早期事件之一。本文系统阐述了Ly-CL 的细胞学和生物化学基础;Ly-CL 与淋巴细胞活化的关系;归纳总结了Ly-CL 的理论和实际意义。Ly-CL 反映了淋巴细胞活化早期的氧化代谢活性及活性氧自由基的生成,并依赖于胞浆游离Ca~(2+)浓度的增加。Ly-CL 测定法可为研究淋巴细胞分化、活化和巨噬细胞、病毒、药物等对淋巴细胞的作用以及NK 细胞的功能提供一种简便、快速的有效手段。     

磷酸化丝/苏氨酸蛋白激酶B在小鼠过敏性气道反应肺组织炎性细胞中的差异表达

目的:探讨丝/苏氨酸蛋白激酶B(Akt)在过敏性小鼠肺组织不同炎性细胞中的活化状况.方法:应用卵蛋白致敏激发BALB/c小鼠制备过敏性气道炎症反应模型,抽取肺泡灌洗液(BALF)进行细胞总数计数和不同炎性细胞分类计数,应用免疫组织化学检测磷酸化Akt(p-Akt)在过敏性小鼠肺组织中不同炎性细胞的表达.结果:过敏性小鼠BALF中总细胞数明显高于正常鼠;分类细胞计数中,正常组以巨噬细胞为主,而过敏性小鼠的嗜酸性粒细胞、淋巴细胞百分比明显升高;免疫组织化学显示p-Akt在过敏性小鼠气道中嗜酸性粒细胞中表达明显高于淋巴细胞和巨噬细胞,而在淋巴细胞中表达明显高于巨噬细胞.结论:Akt在过敏性小鼠的气道炎症中的作用与炎性细胞的种类密切相关,发挥不同的诱导嗜酸性粒细胞和巨噬细胞增多、趋化、释放炎性细胞因子和对抗淋巴细胞凋亡等重要的作用.     

橙皮素对小鼠T淋巴细胞体外活化与增殖的影响

目的:研究橙皮素(Hes)对小鼠T细胞体外活化和增殖的影响,并探讨其作用机制.方法:用ConA刺激小鼠淋巴结来源的淋巴细胞,以不同终浓度Hes与T细胞共培养,利用荧光标记抗体双染色结合流式细胞术(FCM),检测各药物浓度Hes对ConA诱导的小鼠T细胞表达早期活化抗原CD69的作用;以酶标仪结合MTT比色法检测Hes药物的细胞毒性和对ConA诱导的小鼠淋巴结来源的淋巴细胞增殖的影响;以羧基荧光素乙酰乙酸(CFDA-SE)染色结合FCM检测Hes对ConA诱导的小鼠T细胞增殖的作用,并应用ModFit软件分析其增殖指数(PI).结果:淋巴细胞的存活率说明0.2 mL/L DMSO和25～75 μmol/L范围内的Hes对小鼠T淋巴细胞无毒副作用;MTT法、CFDA-SE法、双抗体染色法检测Hes对ConA诱导的小鼠T淋巴细胞的增殖和活化结果均显示,终浓度为25、50、75 μmol/L的Hes对ConA诱导的小鼠T淋巴细胞的增殖和活化均有抑制作用且呈剂量依赖关系.结论:有望通过进一步的研究将Hes发展为免疫抑制药物.