重型β-地中海贫血患儿及其父母基因突变类型和临床分析

目的检测四川泸州地区重型β-地中海贫血患儿及其父母地中海贫血基因,寻找其主要致病基因突变位点。方法收集18例重型β-地中海贫血患儿及其父母外周血液,首先进行血常规、红细胞渗透脆性试验、血红蛋白电泳分析等血液学检查,然后再提取外周血DNA,采用寡核苷酸探针反向斑点杂交法进行β-地中海贫血基因突变位点分析。结果 18例重型β-地中海贫血患儿及其父母共检测出4种基因突变类型,其中以CD17（A→T）、CD41/42（-TTCT）和IVS-Ⅱ-654（C→T）最多见。18例重型患儿中,CD41/42（-TTCT）突变纯合子5例,CD17（A→T）突变纯合子3例,IVS-Ⅱ-654（C→T）和CD17（A→T）位点突变双重杂合子4例,CD41/42（-TTCT）和IVS-Ⅱ-654（C→T）位点突变双重杂合子3例,IVS-Ⅱ-654（C→T）和-28M（A→G）位点突变双重杂合子2例,CD41/42（-TTCT）和-28M（A→G）位点突变双重杂合子1例,其父母均为杂合子。结论重型β-地中海贫血的分子遗传学机制有高度的异质性;患儿基因型为纯合子或双重杂合子,其发病年龄早,输血间隔时间短,输血量大。     

广西京族硫嘌呤甲基转移酶突变基因研究

目的 对广西京族硫嘌呤甲基转移酶(thiopurine S—methyltransferase，TPMT)突变基因进行研究。方法 用聚合酶链反应—单链构象多态性技术对京族标本TPMT基因第5、7、10外显子进行检测。结果 在103名京族中发现了两例TPMT*3C(A719G)杂合子，没有发现TPMT*2(G238C)、TPMT*3A(A719G／G460A)、TPMT*3B(G460A)和其他有害突变基因；发现了27例沉默突变TPMT*1S(T474C)，其中纯合子5例、杂合子22例。结论 建立的聚合酶链反应—单链构象多态性技术灵敏可靠，可以用予TPMT突变基因多态性的检测；TPMT*3C突变基因在广西京族中的发生频率较低(1.0％)，它可能是京族唯一的TPMT基因有害突变类型。     

新疆维吾尔族家系中PAH基因R111X纯合子突变研究

目的鉴定维吾尔族苯丙酮尿症（PKU）家系的苯丙氨酸羟化酶（PAH）基因突变,并讨论突变基因的分布和频率。方法采用单链构象多态性（SSCP）分析技术和PCR产物直接测序方法确定PAH基因突变类型。结果对患者及其父母PAH基因第3、5、6、7、11、12外显子分别进行了SSCP实验筛检,在外显子3中,发现患者SSCP电泳行为既与正常对照不同,又与父母双亲相异。测序结果显示,患者的PAHcDNA第331位发生了C→T突变,是R111X突变型纯合子,其父母也分别在同一位点发生了相同突变,但为R111X突变型杂合子。结论国内在少数民族中报道R111X纯合子突变尚属首次。根据新疆维吾尔族PKU患者与汉族患者的比例,以及形成纯合子的几率,估计R111X突变基因在维吾尔族群体中会有较高的发生频率。综合分析国内外R111X突变基因的分布及频次位置,本文认为R111X突变基因频率的高处在我国北方地区。并推测,以我国天津为中心的北方地区是R111X突变基因的建立者（founder）。     

β-珠蛋白生成障碍性贫血基因分析

本文分析了宜昌地区3个家系8例β-珠蛋白基因突变类型，发现以IVS-2-654(C→T)占多数6/8，次为41-42(-4bp)2／8．3例先证者分别为41-42(-4bp)／IVS-2-654(C→T)双重杂合子；IVS-2-654(C→T)纯合子；IVS-2-654(C→T)杂合子．β-珠蛋白生成障碍性贫血治疗困难，脾切除对于双重杂合子及纯合子患者疗效差于杂合子患者，目前进行产前诊断能达优生目的．     

糖尿病视网膜病MTHFR基因多态性及其与血浆同型半胱氨酸水平的关系

目的：研究亚甲基四氢叶酸还原酶（methylenetetrahydrofolate reductase,MTHFR）基因多态性及血浆同型半胱氨酸水平与2型糖尿病视网膜病的关系。方法：应用聚合酶链反应－限制性内切酶片段长度多态性技术检测208例2型糖尿病患者（其中110例伴视网膜病）及57名正常对照的MTHFR C677T基因型，采用高效液相色谱法测定血浆同型半胱氨酸水平。结果：糖尿病视网膜病组MTHFR基因TT纯合基因型、CT杂合基因型及T等位基因频率（分别为28．18％、41．82％、49．09％）均明显高于糖尿病不伴视网膜病组（分别为18．37％、29．59％、33．16％）及正常对照组（分别为17．54％、28．07％、31．58％），基因型和等位基因频率分布差异均有显著性（P＜0．01），而MTHFR基因多态性在糖尿病不伴视网膜病组与正常对照组之间差异无显著性（P＞0．05），T等位基因与糖尿病视网膜病的发生密切相关（OR＝1．94，95％CI；1．31－2．88）。糖尿病视网膜病组、糖尿病不伴视网膜病组及正常对照组中，MTHFR基因有C677T突变者血浆同型半胱氨酸水平均显著高于无基因突变者。结论：MTHFR基因C677T位碱基突变致血浆同型半胱氨酸水平升高可能是糖尿病视网膜病发病的重要遗传因素。     

线粒体DNA变异与2型糖尿病易感性的关联研究

目的研究湖北地区2型糖尿病（type 2 diabetes mellitus，T2DM）中线粒体基因突变的发生率及其相关性。方法采用聚合酶链反应一限制性片段长度多态性及DNA测序技术，对184例2型糖尿病患者和210名糖耐量正常的健康对照进行检测，并用mfold和tRNAscan-SE软件对检出的突变位点进行二级结构分析。结果MIND1 3316（G→A）、MIND1 3394（T→C）、D环区16189（T→C）变异率分别为3．26％、2．72％、36．9％，并首次在T2DM中发现4例MTTE14693（A→G）突变（2．17％）；对照组检出3316（G→A）突变2例（0．99％）、16189（T→C）变异56例（26．6％），朱检出3394、14693的点突变；两组间3394（T→C）、14693（A→G）、16189（T→C）变异率差别均有统计学意义（P〈0．05）；且T2DM组中16189（T→C）变异阳性者的胰岛素抵抗指数（HOMA→IR）值较16189（T→C）变异阴性组升高，差异有统计学意义（P=0．028）：多元回归分析显示该变异为参与HOMA→IR的独立变量（R2=0．043，P=0．037）。RNA二级结构预测发现，3394（T→C）和14693（A→G）突变使其相应的二级结构发生变化。结论3394（T→C）、14693（A→G）突变与T2DM的易感性有一定关联，16189（T→C）变异与湖北地区汉族人T2DM胰岛素抵抗相关。     

凝血因子V基因点突变1691A在不同种族人群中的分布

凝血因子Ｖ（ｃｏａｇｕｌａｔｉｏｎｆａｃｔｏｒＶ）在凝血过程中是一种重要的辅因子，其基因中一个点突变１６９１（Ｇ→Ａ），使它对抗凝血系统中的一种血浆蛋白质Ｃ（ＡＰＣ）的失活作用产生抗性，从而使血栓发生风险增大。本文在５３例美国白人，９６例美国黑人，４２５例墨西哥人和１０２例中国人群体中进行了检测，发现突变基因１６９１Ａ的杂合子，其中美国白人１例，墨西哥人８例，中国人２例。有发现突变纯合子。     

亚甲基四氢叶酸还原酶基因C677T突变与山东汉族人群深静脉血栓形成的相关性

目的 研究亚甲基四氢叶酸还原酶（methylenetetrahydrofolate reductase,MTHFR）基因C677T突变与中国人深静脉血栓形成的关系。方法 采用聚合酶链反应－限制性片段长度多态性方法对山东汉族63例深静脉血栓形成患者和80名正常对照进行了MTHFR基因C677T突变检测，计算患者组与对照组的基因型频率，以及该突变与深静脉血栓形成的相关性。结果 患者组与对照组C／T杂合子频率分别为41.27%和43.75%；T／T纯合子频率分别为52.38%和36.25%。患者组突变频率较高（x^2＝6.372，P＜0.01，ORT／T＝4.552,95%可信区间：1.440-14.398;x^2=6.742,P=0.009）。结论 MTHFR基因C677T突变与山东汉族人群深静脉血栓形成有相关性。     

胆固醇酯转运蛋白基因突变及其与冠状动脉粥样硬化性心脏病易感性的关联研究

目的：确定胆固醇酯转运蛋白（cholesteryl ester transfer protein,CETP)基因4种突变在中国人群中的频率，并探讨这些突变与脂代谢和冠状动脉粥样硬化性心脏病（coronary atherosclerotic heart disease,CHD)易感性的关系。方法：对209名正常人和203例CHD患者CETP基因相应片段进行了限制性片段长度多态性分析，用HWE软件和SPSS软件分别进行遗传平衡检验和统计学分析。结果：在正常对照组和CHD患者组中均未检出IVS14A和451Q突变基因。405V突变基因频率在正常人和CHD患者中分别为0．443和0．413，442G突变基因频率在两组中分别为0．007和0．025，I405V和D442G突变的等位基因频率分布符合Hardy-Weinberg平衡。CHD患者组442G突变基因频率显著高于正常人群（P＝0．043）。与无D442G突变的CHD患者相比，442G突变杂合子CHD患者的总胆固醇和低密度脂蛋白胆固醇显著升高（P＝0．017；P＝0．041）。结论：CETP基因IVS14A和451Q突变在中国人群中非常罕见，442G突变基因可能是中国人CHD的易感因子之一。     

广东地区汉族人MBL基因点突变的研究

目的：研究我国汉族人群甘露聚糖结合凝集素（MBL）结构基因外显子1第52、54、57位密码点突变（CGT52TGT、GGC54GAC和GGA57GAA）。方法：收集广东地区汉族普通人群的血标本，提取白细胞基因组DNA，以PCR扩增目的基冈片段，应用荧光探针杂交可视技术检测其MBL基因的点突变。结果：从202份样本中，检出GGC54GAC点突变纯合子6例和杂合子44例（等位基因频率为0．139），GGA57GAA点突变杂合子1例（频率为0．002），未发现CGT52TGT点突变（频率为0）。结论：广东地区汉族人群MBL基因点突变的频率较高，为防治MBL缺损病提供了一定的实验依据。     

147例脑梗死患者24小时动态脑电图监测

目的：探讨不同类型脑梗死患者动态脑电图（AEEG）变化的特点及对临床诊断的指导价值。方法：147例均应用24小时便携式磁带记录脑电图仪进行监测,并对比分析脑腔隙性梗死组与脑梗死组的AEEG异常程度。结果：AEEG总异常率为88.4％,腔隙性梗死组轻度异常60％,中、重度异常20％;脑梗死组轻度异常23％,中、重度异常77％,两组间存在显著差异（P＜0．01）。腔隙性脑梗死组痫样波检出率3％,脑梗死组痫样波检出率25％,两组间也有显著性差异（P＜0．01）。结论：脑腔隙性梗死以正常和轻度异常AEEG改变多见、痫样波出现率低;脑梗死以中、重度异常AEEG改变明显,痫样波出现率高。AEEG监测对脑梗死的诊断及病情变化均有重要价值。     

缺血性脑卒中患者急性期血清C反应蛋白水平与预后的关系

目的 探讨急性脑梗死患者血清C反应蛋白（CRP）水平与疾病预后的相关性方法。方法 对80例脑梗死患者（脑梗死组）、20例腔隙性脑梗死患者（腔梗组）和40名健康体检者（对照组）血清CRP含量进行测定，计算其异常率并进行比较。按脑卒中患者临床神经功能缺损程度评分（NHISS）标准对患者进行评分。结果 脑梗死组CRP含量高于腔梗组，腔梗组高于对照组（均P〈0.01）；脑梗死组中，CRP异常率高于腔梗组（P〈0．05）；CRP异常的患者NHISS的评分的改善低于CRP正常组，且CRP异常者预后中无变化和死亡明显高于正常对照者（均P〈0．01）。结论 CRP水平是临床评价脑梗死严重程度和预后的一个重要的生物学指标。     

老年高血压合并腔隙性脑梗塞患者胰岛素抵抗的临床研究

目的 :研究胰岛素抵抗 (IR)与高血压合并腔隙性脑梗塞患者之间的关系。方法 :选取 2 8例高血压合并腔隙性脑梗塞患者作为研究对象 ,测定血糖(FPG)、胰岛素水平 (FINS)、C 肽、总胆固醇 (CH)、甘油三酯 (TG)。另 2 8例正常健康老年人作为对照组。同时计算胰岛素敏感指数 (ISI)。结果 :高血压合并腔隙性脑梗塞患者FINS、C 肽水平显著高于对照组 (P <0 .0 1) ,其ISI较对照组显著降低 (P <0 .0 1)、脑梗死组FINS显著高于正常对照组 (P <0 .0 5) ,其ISI较正常对照组显著降低 (P <0 .0 5)。结论 :老年高血压合并腔隙性脑梗塞患者存在IR ,IR作为腔隙性脑便塞独立危险因素应引起高度重视。     

A DNA polymorphism at the angiotensin II type 1 receptor (AT1R) locus and myocardial infarction

Two hundred and thirty-five survivors of myocardial infarction (MI) were compared to 384 controls with respect to distribution of genotypes and gene frequencies in the A1166C polymorphism at the angiotensin II type 1 receptor (AT1R) locus. No differences in allele frequencies or genotype distribution were observed when all patients were compared with all controls. When comparing CC homozygotes with the combined group of CA heterozygotes and AA homozygotes (CA/AA), a difference in borderline significance between the MI group and controls was observed (p = 0.05). In males alone, this difference was much more pronounced because of the larger proportion of males with the CC genotype in MI cases than in male controls (p = 0.01). No significant differences were observed between female cases and controls. No interaction between the insertion/deletion (I/D) polymorphism at the angiotensin I-converting enzyme (ACE) locus and the polymorphism at the AT1R locus was detected. When subdividing the subjects into a "low-risk" and a "high-risk" group, based on levels of apolipoprotein B (apoB) and body mass index (BMI), and whether or not the person used lipid-lowering drugs, the frequency of CC homozygotes in male cases of the "low-risk" group differed significantly compared to the frequency in male controls of the "low-risk" group (p < 0.001). No differences were observed in females, but the number of "low-risk" group female cases was low (n = 3). Thus, CC homozygosity appears to be associated with MI in Norwegian males, especially among those with a "low-risk" phenotype.     

腔隙性脑梗塞患者的高粘血症与高凝状态

研究腔隙性脑梗塞病人是否并发高粘血症和高凝血症。方法：检测３２例腔隙性脑梗塞患者的血液流变性和血液凝固性。结果：血液流变性指标加、Ｐ、ＥＰＴ、ＨＣＴ、ＥＳＲ和Ｆｉｂ腔隙性脑梗塞病人较对照组有非常显著的差异（Ｐ＜０．０５～０．０１），另外其ＰＡｇＴ、ＶＷＦ：ＡＧ、Ｆｎ增高，ＡＴⅢ：Ａ和ＰＬＧ降低均表现血液有高凝状态。结论：腔隙性脑梗塞患者多伴有高粘血症与高凝血症，因此组织灌注不足，这在腔隙性脑梗塞发病和进程中是一个危险因素。     

Short stature in carriers of recessive mutation causing familial isolated growth hormone deficiency

Isolated growth hormone deficiency (IGHD) IB is an autosomal recessive disorder characterized by a good response to exogenous growth hormone (GH) treatment without development of anti-GH antibodies. Patients with IGHD IB were found to be compound heterozygotes for deletion and frameshift mutations as well as homozygotes for splicing mutations in the GH-1 gene. Recently, a novel splicing mutation in the GH-1 gene was identified in an extended, consanguineous Arab-Bedouin family from Israel with IGHD IB. Prior to the identification of this mutation, a considerable number of children with short stature in this family were found normal on pharmacological stimulation for GH release. This observation prompted a genotype/phenotype correlation of potential heterozygotes in the family. Carriers of the mutant GH-1 allele were found as a group to have a significantly shorter stature than normal homozygote (mean standard deviation scores, 1.67 and -0.40, respectively, P<0.05). Moreover, 11 of 33 (33%) heterozygotes, but only 1 of 17 (5.9%) normal homozygotes, had their height at 2 or more SD below the mean. Overall, 48.5% of studied heterozygotes were found to be of appreciably short stature with height at or lower than the 5th centile (> or = -1.7 SD), whereas only 5.9% of the normal homozygotes did (P<0.004). This phenomenon of heterozygotes for a recessive mutation in the GH-1 gene manifesting short stature, might imply that some such mutations may account for non-GH deficiency reduced height in the general population.     

脑梗死急性期患者血小板膜糖蛋白Ia C807T基因多态性和血小板功能

目的:探讨血小板膜糖蛋白(GP)Ia C807T基因多态性及与脑梗死急性期患者血小板功能的关系。方法:应用聚合酶链反应限制性片段长度多态性(PCR-RELP)方法检测97例急性期脑梗死患者(脑梗死组)及99例正常对照者(对照组)的GPIa C807T基因型,采用全血流式细胞术检测血小板P选择素(CD62P)表达率,采用比浊法检测花生四烯酸、二磷酸腺苷诱导的血小板最大聚集率(MARAA、MARADP)。结果:脑梗死组GPIa T等位基因频率高于对照组,差异有统计学意义(χ2=5.369,P<0.05);脑梗死组CD62P表达率、血小板MARAA、MARADP高于对照组(P<0.05)。对照组TT+CT基因型CD62P表达率和MARADP高于CC基因型(P<0.05);脑梗死组TT+CT基因型CD62P表达率和MARAA、MARADP与CC基因型差异无统计学意义(P>0.05)。结论:GPIaC807T可能是脑梗死发病的遗传危险因素。血小板活化和聚集功能增强可能是T等位基因促进脑梗死发病的机制之一。     

急性脑卒中患者血清IGF-1的动态变化及其临床意义

目的：了解脑卒中患者急性期血清胰岛素样生长因子-1（IGF-1）水平的动态变化及其临床意义。方法：采用放免法测定40例脑梗死、20例腔隙性梗死、40例脑出血患者起病后3d内、2周时血清IGF-1的含量，并与30例健康者对照比较。结果：脑卒中患者血清IGF-1水平明显低于对照组，脑梗死组明显低于腔隙性梗死组，相比较均有显著差异（P〈0．01），2周时血清IGF-1水平有恢复；脑出血与脑梗死患者血清IGF-1水平无统计学差异（P〉0．05）。结论：脑卒中患者急性期血清IGF-1水平可帮助判断病情轻重和预后。IGF-1可能参与了脑出血的病理过程或脑出血周边组织可能存在缺血性损害。IGF-1在急性脑卒中时也许能通过血脑屏障而产生神经保护，具有潜在的临床应用价值。     

载脂蛋白A5基因多态性与动脉粥样硬化性脑梗死的关联研究

目的探讨载脂蛋白A5基因(apolipoprotein A5 gene,APOA5)多态性与动脉粥样硬化性脑梗死(atherosclerotic cerebral infarction,ACI)的关联性及与血脂的关系。方法用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性分析170例ACI患者和171名健康对照-12238T>C位点多态性。结果T/C多态位点等位基因T、C频率在ACI组和正常对照组分别为0.588、0.412和0.424、0.576,等位基因T、C频率在两组间差异有统计学意义(P<0.05),且TT基因型的ACI患者其血浆甘油三酯(triglyceride,TG)水平明显高于CC型患者(P<0.05)。结论-12238T>C位点多态性可能与ACI存在关联,ACI组TT基因型可能与血浆TG水平密切相关。     

Xbal polymorphism in DNA at the apolipoprotein B locus is associated with myocardial infarction (MI)

Bøhn M, Bakken A, Erikssen J, Berg K. Xbal polymorphism in DNA at the apolipoprotein B locus is associated with myocardial infarction (MI). Clin Genet 1993: 44: 241–248. © Munksgaard, 1993 High levels of low density lipoprotein (LDL) and its apolipoprotein B (apoB) are risk factors for atherosclerosis and myocardial infarction (MI). There is rich genetic polymorphism in apoB, first detected as the Ag allotypes of LDL, but today mostly examined at the DNA level. Genes contribute to the population variation in LDL and apoB levels and alleles in polymorphisms at the apoB locus are candidate genes with respect to control of lipid levels and susceptibility to atherosclerosis and MI. The Xbal polymorphism at the apoB locus, which involves the third base of threonin codon 2488 (ACC→ACT) without changing the amino acid sequence was examined in a case-control study comprising 238 survivors of myocardial infarction (MI) and 621 controls. In univariate analysis, frequencies of genotypes in this polymorphism were not statistically different between patients and controls of either sex. However, in multivariate logistic regression analysis, the odds ratio X - X - homozygotes (homozygotes for absence of restriction site) for having MI compared to the pooled group of heterozygotes and X + X + homozygotes (homozygotes for presence of restriction site) was 2.16 (p = 0.007), after adjustments for age, sex, and levels of apoB, high density lipoprotein (HDL) cholesterol (HDLC) and Lp(a) lipoprotein. It appeared that heterozygotes do not have increased risk, compared to the X + X + homozygotes. Stratification according to low or high levels of apoB, HDLC and Lp(a) lipoprotein, showed that the X - X - genotype was more common in patients than controls, in all subgroups. We conclude that the X - allele in double (but not in single) dose most probably increases the risk of MI. The increased risk is apparently not conferred by higher levels of total cholesterol, LDL or apoB, but through some variable or mechanism not closely related to traditional risk factors.