TTF-1术中快速免疫组化与术后常规免疫组化符合率的比较

<正>术中冷冻切片快速免疫组化染色技术是一项逐渐普及的临床应用，其特点为检测准确、方便、快捷，可以辅助鉴别诊断肿瘤的良恶性及是否转移等。由于实验室不同人员操作及抗体的特异性等因素导致其染色结果有一定的差异。本实验对疑似肺腺癌标本中TTF-1的表达进行检测，比较术中快速免疫组化及术后常规免疫组化TTF-1表达的符合率及差异性，现报道如下。1材料与方法1.1标本来源收集2021年9月～2022年4月中国人民解放军西部战区总医院疑似肺腺癌患者157例作为研究对象，     

灰度值、光学密度值与免疫组化片阳性表达强弱的关系

免疫组化技术已广泛应用于外科病理检查中。免疫组化片表达出的阳性强弱 ,常以半定量描述 ,即以±、+、 、 表示 ,这样的描述受主观因素影响较大。本系应用“VideoPro 32”彩色图像分析系统 ,对经过免疫组化染色 (DAB显色 )的切片进行了定量分析 ,探讨了单位灰度值 (Grey)、单位光学密度值 (Density)与免疫组化片阳性表达强弱的关系 ,兹介绍如下。1　材料与方法1 .1　材料　 4～ 5 μm厚石蜡切片 ,用不同一抗进行免疫组化染色 (DAB显色 ) ,其中选用定位胞质阳性有bFGF (1 8例 )、actin(2 4例 ) ,胞核阳性有PCNA(2 3例 ) ,胞膜和胞质…     

胎肺中生存素和相关凋亡调控基因的表达及生物学意义

检测生存素(Survivin)和Caspase-3、Bax、p53在人胎肺发育过程的表达特征，探讨它们在胎肺发育中的意义。取16-35周人胎肺15例，中性福尔马林固定，石蜡包埋，5μm厚切片，常规HE染色；免疫组化SP法检测Survivin、Caspase-3、p53和Bax在胎肺中的表达特征。结果表明胎肺发育过程中，Survivin主要表达于远端支气管上皮和原始肺泡上皮，     

高温高压处理在消除双重免疫组化染色交叉反应中的应用

双重免疫组化染色可以在同一张组织切片上清晰地观察到2种不同抗原的表达,更便于病理医生进行观察及诊断.然而,在进行双重免疫组化染色的时候,常常会因为后一种免疫染色所用的抗体系统可能与前一种染色所用的抗体系统发生交叉反应,影响观察,失去双重免疫组化染色的准确性和意义[1].     

椎管内生殖细胞肿瘤9例临床病理分析

目的 探讨椎管内生殖细胞肿瘤(IVCGCT)的临床病理特征.方法 标本采用常规石蜡切片,HE染色.另对石蜡切片采用EnVision免疫组化二步法染色和PAS特殊染色.结果 IVCGCT的组织学形态与起源于性腺和其它性腺外的生殖细胞肿瘤相同,免疫组化染色见生殖细胞瘤的肿瘤细胞主要表达PLAP+、CD117卅;卵黄囊瘤的肿瘤细胞主要表达AFP+、CK+和PLAP+.结论 中枢神经系统的生殖细胞肿瘤包括一组罕见的主要发生于儿童和青少年的肿瘤,主要发生于中线部位,80%以上发生于第三脑室,松果体区是最好发部位,而椎管内的生殖细胞肿瘤则比较罕见.     

DPX封片胶在牙组织免疫组化染色防脱片中的作用

目的:研究DPX封片胶在牙组织免疫组化染色中的防脱片效果。方法:狗上前牙EDTA脱钙、常规石蜡包埋、切片、脱蜡、水洗、干燥后,用DPX封片胶在组织边缘和玻片上涂抹一圈,37℃烤干DPX封片胶,EnVision技术观察IL-1、基质金属蛋白酶1(MMP-1)、MMP-9的表达。结果:DPX封片胶处理后的切片,经微波抗原修复后,切片上的组织完整没有边缘脱落破损现象。免疫组化染色后,组织形态基本完整,相应分子表达定位准确,染色结果清晰。结论:DPX封片胶在牙齿等含钙组织免疫组化染色中有良好的防脱片作用。     

不同染色条件对COVID-19 Nucleocapsid抗体免疫组化染色的比较

目的 探讨新型冠状病毒肺炎(coronavirus disease2019,COVID-19)Nucleocapsid抗体在不同平台、不同操作条件下的染色情况,筛选该抗体的最佳染色条件,为COVID-19的病理诊断和临床治疗提供参考。方法 将8例COVID-19尸检肺组织石蜡样本制成切片,分别使用全自动免疫组化染色仪和手工免疫组化进行染色。全自动免疫组化染色仪一抗稀释浓度分别为1:2 000、1:4 000、1:8 000;手工免疫组化修复分别采用EDTA和柠檬酸修复,经37℃孵育1 h和4℃孵育过夜,一抗稀释浓度分别为1:2 000、1:4 000、1:8 000。结果 两种染色结果均显示非特异性着色,与一抗浓度呈正相关;手工免疫组化条件下柠檬酸修复后免疫组化染色特异性较高;且经4℃孵育过夜染色特异性较高,阳性信号明确。结论 采用全自动免疫组化染色仪进行染色时,一抗稀释浓度为1:8 000时染色效果最佳;手工免疫组化染色建议采用柠檬酸修复,一抗稀释浓度为1:4 000,并经4℃孵育过夜染色效果最佳。     

环孢素A延长腺病毒基因治疗载体体内存在时间的研究

目的研究重组腺病毒载体在免疫抑制疗法应用中的安全性并探讨环孢素A对该载体在体内清除的影响。方法采取腹膜后注射纯化重组腺病毒建立动物模型,连续给予环孢素A 14 d,取不同时间点大鼠样本,HE染色观察各主要脏器病理反应,免疫组化方法检测肝、脾、肺、肾、肌肉及淋巴结腺病毒的表达情况。结果①HE染色切片,各脏器呈现一过性可逆性轻微炎性反应。②免疫组化检测,对照组中重组腺病毒逐渐减弱至阴性,实验组中重组腺病毒存在时相性明显延长(P<0.05)。③腺病毒分布呈现肝脾肺高表达而其它组织表达相对较低。结论重组腺病毒作为基因治疗载体在免疫抑制疗法应用中具有一定的安全性,环孢素A能够部分抑制实验动物体内的免疫反应从而延长重组腺病毒在体内存在的时间。     

基于冷冻切片的直接免疫组化染色法在甲状腺乳头状癌中的诊断价值

目的探讨基于冷冻切片的直接免疫组化染色法在甲状腺乳头状癌中的诊断价值。方法收集手术中送检的甲状腺良性病变组织、乳头状癌组织各30例,采用直接免疫组化染色法、石蜡切片免疫组化染色法检测CK19、Galectin-3的表达,对比两种染色法的时间、质量、阳性率及诊断准确率。结果直接免疫组化染色法耗时15 min,石蜡切片免疫组化染色法耗时280 min,前者大幅缩短了时间。两种染色结果显示,CK19、Galectin-3在甲状腺乳头状癌中的阳性率基本一致,直接免疫组化法的质量稍差。在诊断甲状腺前哨淋巴结转移癌中,冷冻切片的直接免疫组化染色法正确诊断率为100%,单纯HE染色正确诊断率为60.00%,诊断准确性显著提高。结论基于冷冻切片的直接免疫组化染色法较石蜡切片免疫组化染色法大幅缩短了染色时间,染色质量近似,阳性率一致,在判断甲状腺不典型病变性质及甲状腺前哨淋巴结转移癌中具有重要价值。     

CTGF在胃癌中的表达及其促进血管生成的机制

目的研究CTGF在人胃癌标本中表达情况及其促进血管生成的机制。方法应用Real Time PCR和免疫组织化学染色检测胃癌标本中CTGF mRNA,VEGF mRNA及其在组织中蛋白表达情况;应用pcDNA3.1质粒上调AGS细胞中CTGF的表达,并用Real Time PCR和Western blot检测VEGF mRNA水平和蛋白水平表达变化;AGS稳定株细胞接种于裸鼠,成瘤后肿瘤组织切片,免疫组化染色。结果与正常组织相比,胃癌组织中CTGF mRNA,VEGF mRNA表达水平均显著增加,免疫组化亦显示CT-GF、VEGF在胃癌的标本中显色比正常对照组织强。统计显示两者mRNA水平及免疫组化表达有相关性（P〈0.05）。转染pcD-NA3.1 CTGF质粒后,AGS细胞中CTGF蛋白的表达上调,Real Time PCR及Western blot检测显示过表达CTGF后,VEGF表达上调。与对照细胞相比,过表达CTGF的AGS的肿瘤形成和生成速度明显加快（P〈0.05）。免疫组化染色显示VEGF的染色明显强于对照组。结论在胃癌中CTGF,VEGF表达明显增加,CTGF可能通过上调VEGF表达促进肿瘤血管生成。     

细胞涂片检测乳腺癌雌激素受体的价值

应用免疫组化ABC法对30例乳腺癌染色检测雌激素受体的结果表明,针吸细胞涂片或印片阳性率为80%,冰冻切片的阳性率为86.7%,两者符合率93%;细胞涂片与组织切片的免疫组化染色积分呈正相关。(γ=0.77,P<0.01)。结果提示针吸细胞涂片或印片是一种可靠的检测雌激素状况的方法。     

肺及肺癌组织芯片PBK/TOPK蛋白表达:检测的可靠性

背景:组织芯片技术可高通量检测组织中的生物分子。但是组织芯片所用的组织很小,直径仅0.6mm,且肿瘤细胞具有异质性,所以组织芯片检测结果是否可靠尚不清楚。目的:比较石蜡组织芯片和对应组织常规石蜡切片PBK/TOPK蛋白在正常成人肺泡Ⅱ型上皮细胞、人胚胎肺泡上皮细胞、肺癌原发灶和相应的淋巴结转移灶的表达差异,探讨组织芯片检测PBK/TOPK蛋白表达的可靠性。方法:采用组织微阵列技术按照正常成人肺组织,胚胎肺组织,肺鳞癌原发灶及其相应淋巴结转移癌,肺腺癌原发灶及其相应淋巴结转移癌,肺小细胞癌原发灶及其相应淋巴结转移癌,肺大细胞癌原发灶及其相应淋巴结转移癌的顺序依次构建包含760点阵的石蜡组织芯片。应用免疫组化SP法,检测石蜡组织芯片和对应组织常规石蜡切片PBK/TOPK蛋白的表达。应用LeicaQ500MC图像分析系统分别对石蜡组织芯片和常规石蜡切片上PBK/TOPK蛋白表达的阳性单位和阳性表达率进行定量测试。结果与结论:组织芯片和对应常规切片相应细胞中PBK/TOPK的阳性强度及阳性表达率基本相同,相对偏差不足0.6%,两者比较差异无显著性意义。结果说明石蜡组织芯片和常规组织切片检测PBK/TOPK蛋白表达结果高度一致;应用组织芯片检测肺癌、胚胎肺及正常肺组织中PBK/TOPK蛋白的表达结果可靠。     

地塞米松抑制哮喘小鼠肺RANTES的表达

目的 研究地塞米松对哮喘小鼠调节激活正常T细胞表达和分泌细胞因子(RANTES)蛋白和mRNA表达的影响.方法 将30只雌性BALB/c小鼠随机分为3组(每组10只):对照组、哮喘组、激素干预组,收集支气管肺泡灌洗液(BALF),行白细胞和嗜酸粒细胞(EOS)计数;酶联免疫吸附法(ELISA)测定BALF和血清中RANTES含量;肺组织切片HE染色,光镜下计数细胞总数和EOS百分比;部分行免疫组化染色检测肺组织RANTES蛋白;用原位杂交法检测肺组织RANTES mRNA表达.结果 哮喘组白细胞总数、EOS百分比、RANTES浓度明显升高(P＜0.01),干预组明显低于哮喘组(P＜0.01);哮喘组肺组织RANTES蛋白及mRNA表达显著高于对照组(P＜0.01),主要表达于上皮细胞;干预组肺组织RANTES蛋白及mRNA表达显著低于哮喘组(P＜0.01).结论 地塞米松可抑制RANTES表达和活性而发挥抗EOS炎症作用,这可能是其控制哮喘发病的重要机制之一.     

细胞骨架蛋白在肺的表达

为探讨细胞骨架在肺抗原呈递细胞和其它细胞的表达 ,用细胞骨架的单克隆抗体对日本正常雌兔肺切片进行免疫组织化学 ABC法染色。结果表明 ,肌动蛋白 (actin)表达于血管、肺内导气部管壁的平滑肌 ;微管蛋白(tubulin)和角蛋白 - 7(cytokeration- 8)表达于 Clara细胞、肺泡 型和 型上皮细胞以及肺巨噬细胞 ;波形蛋白(vim entin)表达于肺血管内皮和肺巨噬细胞。本文对细胞骨架的意义进行了讨论     

上调RI对小鼠黑色素瘤B16-F10细胞EMT及转移的影响

目的研究核糖核酸酶抑制因子基因表达对小鼠黑色素瘤B16-F10细胞EMT及转移的影响。方法构建RI真核表达质粒p IRES2-EGFP-RI,稳定转染B16-F10细胞。RT-PCR、Western blot和免疫荧光检测RI的表达;HE染色及相差显微镜观察细胞形态;FITC标记的鬼笔环肽染色,激光共聚焦观察细胞骨架;黏附实验、划痕实验和Transwell法检测细胞黏附、迁移和侵袭能力的变化;Western blot检测EMT及转移相关蛋白的表达;分别将各组B16-F10细胞眼眶静脉注射到c57/BL小鼠,建立肺转移动物模型,注射3周后处死小鼠。取肺称重,在解剖镜下计数肺转移结节数;肺组织切片HE染色观察肿瘤细胞转移;免疫组化检测肺转移瘤组织中转移及EMT相关蛋白的表达。结果 RI表达上调后,细胞由间质型向上皮型转换,细胞骨架重排;B16-F10-RI细胞组黏附、迁移和侵袭能力下降;与对照组相比,B16-F10-RI细胞中MMP2、MMP9、snail、slug、vimentin、twist和N-cadherin的表达明显降低,而E-cadherin,nm23-H1蛋白的表达明显增加(P0.01或P0.01)。实验组与对照组比小鼠肺的转移结节明显减少,同时EMT及转移相关蛋白在瘤组织中表达与体外细胞一致。结论上调核糖核酸酶抑制因子能够显著抑制B16-F10细胞EMT及侵袭、转移,RI可望作为治疗黑色素瘤的靶蛋白。     

免疫组化与特染结合的双染法及应用

免疫组化与特染结合的双染法及应用侯景辉，程嘉骧，赵美卿免疫组化染色和特殊染色是病理诊断中重要辅助手段之一，每种方法有其特异性和适用性，通常这两种方法只能在不同切片上分别进行染色。现介绍Ⅷ因子免疫组化染色和肥大细胞特染相结合的双重染色方法如下。１材料和...     

大鼠纤维化心肌组织中神经钙黏附素蛋白的表达变化

目的　研究异丙肾上腺素致大鼠心肌纤维化中神经钙黏附素（N-cadherin）蛋白在心肌组织中的表达,为探讨心肌纤维化的信号转导机制和逆转心肌纤维化提供形态学资料。 方法　健康成年SD 大鼠注射ISO,造成心肌纤维化模型;取心肌组织,常规石蜡切片,Masson 染色,观察心肌组织胶原纤维改变;免疫组织化学和免疫荧光染色检测N-cadherin 的表达及分布;RT-PCR 方法检测大鼠心肌组织的N-cadherin 蛋白的mRNA 的表达变化;利用图像分析软件对N-cadherin 蛋白的免疫组化结果进行定量分析。 结果　免疫组化和免疫荧光结果显示,实验组与对照组相比N-cadherin 蛋白表达位置存在动态变化,表达量无显著差异;RT-PCR 方法检测大鼠心肌组织的N-cadherin mRNA 的表达与免疫组化结果具有一致性。 结论　N-cadherin 蛋白可能是维持心肌结构和生理功能所必需的。     

直接免疫组织化学染色在术中冷冻切片细支气管腺瘤辅助诊断中的应用价值

目的探讨直接免疫组织化学染色技术提高术中肺肿瘤疑难病例细支气管腺瘤(bronchiolar adenoma, BA)诊断准确性的可行性及应用价值。方法选取2021年1月至7月中国医学科学院肿瘤医院CT提示单发或多发肺磨玻璃结节或实性结节, 术中单纯依靠冷冻HE切片肺肿瘤鉴别诊断困难病例共19例, 实验组采用直接免疫组织化学染色细胞角蛋白5/6(CK5/6)和p63在冷冻切片中基底细胞的表达情况, 辅助术中肺肿瘤疑难病例BA与原位/微小浸润腺癌/腺癌/浸润性黏液腺癌鉴别;对照组为两名诊断医师对这19例病例进行常规冷冻HE切片诊断。两组均以石蜡切片诊断结果为金标准, 评价实验组与对照组BA诊断的灵敏度、特异度、与石蜡切片诊断的一致性及冷冻切片诊断耗时。结果 CK5/6、p63染色显示BA存在基底细胞;在原位/微小浸润腺癌/腺癌/浸润性黏液腺癌中不存在基底细胞。实验组中直接免疫组织化学染色对术中疑难病例BA的灵敏度为100%、特异度为86.7%, 冷冻与石蜡切片诊断的一致性Kappa值为0.732, 均显著高于对照组(P<0.05)。实验组术中冷冻切片诊断平均耗时(32.4 min)比...     

微波解冻法对冷冻组织细胞角蛋白免疫组化检测影响的实验研究

目的：揭示微波解冻对冻结组织免疫组化染色效果的影响,为用微波解冻冷冻组织进行免疫组化染色提供实验依据。方法：将清洁级大耳白家兔分为常规对照组、自然解冻组、温水解冻组、微波解冻组。用空气将家兔栓塞致死后取其肝、肺、肾组织,包埋并制成切片,进行广谱细胞角蛋白免疫组化染色并观察染色结果。结果：微波解冻对肝、肾、肺冻结组织中细胞角蛋白抗原的影响不明显,均能正常显色。结论：冻结组织微波解冻对细胞角蛋白的免疫组化检查未见明显不良影响,提示温和的微波解冻对组织中细胞角蛋白抗原影响不明显。     

双染技术在腺鳞癌鉴别诊断中的应用

近年来,应用免疫酶组化双标法在同一切片上显示两种或两种以上抗原的新技术报道甚多。本文介绍一种在同一切片上应用免疫组化中PAP法显示腺鳞癌组织中鳞癌细胞内细胞角蛋白抗原;和应用组织化学AB法(Alcain blue),粘液卡红法,PAS反应及AB—PAS染色显示腺