负向调节树突状细胞对心脏移植大鼠调节性T细胞的影响

目的:探讨受者树突状细胞(DC)与体外光化学法(PUVA)处理的供者脾淋巴细胞共培养,对心脏移植受者CD4+CD25+调节性T细胞(Treg)及移植心存活时间的影响。方法:以DA大鼠为供者,Lewis大鼠为受者,SD大鼠为无关供者,建立大鼠腹部异位心脏移植模型。分离正常的供者脾淋巴细胞(SP),制备经PUVA处理的供者脾淋巴细胞(PU-VA-SP)。在体外将DA大鼠PUVA-SP或SP与受者骨髓来源的DC共同培养,收集经上述处理后受者DC,流式细胞术(FCM)检测其表面分子CD80、CD86以及OX6的表达状况。根据受者术前静脉输注的成分将实验动物随机分为3组:①Control组:单纯输注PBS,n=7;②SPDC组:输注加载供者SP的受者大鼠DC,n=8;③PUVA-SPDC组:输注加载PUVA处理的供者SP的受者大鼠DC,n=8。移植术前7d,经外周静脉给受者输注与PUVA-SP共培养后的DC(PUVA-SPDC组)、正常受者DC(DC组)或只输注PBS(Control组),移植术后观察受者移植物的存活时间,检测受者外周血中CD4+CD25+T细胞、CD4+CD25highT细胞的比例及其Foxp3表达状况。过继转移PUVA-SPDC组受者大鼠的T细胞后,检测正常LEW大鼠对供者抗原或无关抗原的DTH反应。结果:受者DC与供者未经处理的脾淋巴细胞(SP)混合培养后,其表面分子CD80、CD86以及OX6的表达分别为16.6%±0.72%、36.5%±0.87%及65.6%±1.45%,明显高于未处理DC组(3.53%±0.27%、13.0%±0.57%及27.7%±1.23%)(P0.01);而受者DC与PUVA处理过的供者脾淋巴细胞(PUVA-SP)混合培养后,其表面分子的表达仍保持较低的水平,CD80、CD86以及OX6的表达分别为3.9%±0.12%、13.4%±0.59%及28.0%±1.73%,与未经任何处理的受者DC无统计学差异(P0.05)。移植术后,PUVA-SPDC组受者,外周血CD4+CD25+T、CD4+CD25highT细胞占CD4+T的比例分别是18.97%和3.81%,明显高于输注DC组(4.40%和0.81%)和Control组(3.11%和0.09%)的大鼠(P0.01)。PUVA-SPDC组大鼠外周血CD4+CD25+T细胞中Foxp3表达率为29%±1.73%,CD4+CD25highT细胞中Foxp3阳性率高达95%±1.67%,均明显高于对照组(12%±0.58%和19.3%±2.03%)及DC(16.3%±0.88%和52.0%±1.73%)组(P0.01)。PUVA-SPDC组大鼠移植心存活时间为(27.3±0.98)d,与Control组(6.7±0.29)d及DC组(11.0±0.32)d相比,明显延长(P0.01)。过继转移实验显示,接受PUVA-SPDC组受者T细胞的正常LEW大鼠对DA大鼠抗原的刺激呈特异性免疫低应答状态。结论:PUVA-SPDC能够在移植受者体内诱生CD4+CD25+Foxp3+Treg,同时诱导抗原特异性免疫低反应,进而延长异基因移植物的存活时间。     

脱氢表雄酮对狼疮性BXSB小鼠脾脏淋巴细胞凋亡的影响

目的 研究脱氢表雄酮(DHEA)对BXSB狼疮性小鼠脾脏淋巴细胞凋亡的影响,并探讨其作用机理.方法 运用流式细胞术、免疫双荧光染色法检测脾脏淋巴细胞凋亡.结果 当DHEA的浓度为10-8mol/L时,淋巴细胞凋亡率降低,与对照组比较有差异有统计学意义(P＜0.05),细胞坏死率差异无统计学意义(P＞0.05);DHEA与西药组或中药组联合应用对淋巴细胞凋亡抑制作用更加显著,差异有统计学意义(P＜0.01).结论 脱氢表雄酮可明显抑制BXSB小鼠脾脏淋巴细胞凋亡率.     

早期自然流产患者淋巴细胞FAS/FASL的表达

目的探讨外周血和蜕膜淋巴细胞凋亡在早期自然流产中的作用.方法采用流式细胞技术检测外周血淋巴细胞FAS/FASL、Annexin-Ⅴ及蜕膜组织淋巴细胞FAS/FASL的表达.结果正常妊娠组Annexin-Ⅴ,FAS和FASL分别是(1.19±1.39)%,(56.64±11.19)%,(4.37±2.65)%;自然流产组分别是(1.96±2.43)%,(57.47±10.41)%,(4.45±2.10)%,两组差异均无统计学意义,P值分别为 0.262;0.710;0.596.正常妊娠组蜕膜组织淋巴细胞表达FAS,FASL分别为(30.88±16.13)%,(2.24±0.62)%,自然流产组分别是(32.63±13.45)%,(3.91±1.90)%,两组FAS表达差异无统计学意义,P值为0.515;两组FASL表达差异有统计学意义,P值为0.001.结论蜕膜淋巴细胞FASL表达上调可能是早期自然流产发生的原因之一.     

羧胺三唑增强小鼠脾脏淋巴细胞促进结肠癌细胞系MC38和C26凋亡

目的探讨羧胺三唑(CAI)直接或通过小鼠脾脏淋巴细胞间接对小鼠结肠癌细胞系(MC38和C26)存活和凋亡的影响。方法体外培养结肠癌细胞系MC38和C26细胞,分离小鼠脾脏淋巴细胞,MC38和C26细胞分别与小鼠脾脏淋巴细胞共培养,不同浓度CAI处理细胞。CCK-8法检测细胞存活,流式细胞测量术检测细胞凋亡以及小鼠脾脏淋巴细胞中CD4~+CD3~+ T细胞和CD8~+CD3~+ T细胞的比例。结果不同浓度CAI处理MC38和C26细胞后,活细胞数目减少(P0.05、P0.01和P0.001),凋亡率升高(P0.01和P0.001);MC38和C26细胞分别与小鼠脾脏淋巴细胞共培养48 h后,MC38和C26细胞数目减少(P0.001),凋亡率升高(P0.001);不同浓度CAI处理小鼠脾脏淋巴细胞共培养条件下的MC38和C26细胞48 h,与单独小鼠脾脏淋巴细胞处理相比,MC38和C26细胞数目进一步减少(P0.001),凋亡率进一步升高(P0.05和P0.001);不同浓度CAI处理小鼠脾脏淋巴细胞48 h后,小鼠脾脏淋巴细胞中CD4~+CD3~+ T细胞和CD8~+CD3~+ T细胞的比例显著升高(P0.05和P0.01)。结论 CAI抑制MC38和C26细胞存活、促进细胞凋亡,并可能通过升高小鼠脾脏淋巴细胞中CD4~+CD3~+ T细胞和CD8~+CD3~+ T细胞的比例增强小鼠脾脏淋巴细胞抑制MC38和C26细胞存活、促进细胞凋亡。     

LED窄谱长波紫外线+红外线双波长照射联合8-MOP外搽治疗白癜风的临床效果

目的:探究LED窄谱长波紫外线(UVA)+红外线(IR)双波长照射联合甲氧沙林溶液(8-MOP)外搽治疗白癜风的临床效果.方法:我院于 2021 年 1 月-2023 年 6 月收治的白癜风患者 68 例,通过随机数表法分为对照组与实验组,每组各 34 例.对照组于白癜风皮损处涂抹 8-MOP,后行UVB照射治疗.实验组涂抹 8-MOP后,给予IR照射和UVA照射治疗.治疗结束前后记录患者皮损面积,治疗结束后评价两组疗效,并观察记录两组治疗期间皮肤灼烧感、刺痛感、红肿、水泡.结果:实验组总有效率为 85.29%,显著高于对照组总有效率 64.71%(P＜0.05).经过干预后两组治疗后皮损面积明显减少(P＜0.05),且实验组明显小于对照组(P＜0.05).两组治疗期间皮肤灼烧感、刺痛感、红肿、水泡发生率差异无统计意义(P＞0.05).结论:LEDUVA+IR双波长照射联合8-MOP外搽治疗白癜风患者临床效果明确,安全可靠.     

Granulysin及Perforin在早期自然流产蜕膜组织中的表达

目的观察早期自然流产患者蜕膜组织中Granulysin、Perforin的表达及其在介导细胞凋亡中的相关性。方法采用免疫组织化学SP法检测30例早期自然流产(流产组)和30例人工流产(对照组)蜕膜组织中Granulysin、Perforin的表达情况,应用TUNEL法检测两组细胞凋亡指数。结果①流产组中Granulysin及Perforin的阳性表达均显著高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。②Granulysin与Perforin在流产组蜕膜组织中的阳性表达呈正相关(r=0.592,P<0.05)。③流产组的平均细胞凋亡指数[(7.39±3.13)%]高于对照组[(3.45±1.35)%],差异有统计学意义(P<0.05)。④流产组中,Granulysin、Perforin阳性表达组的平均细胞凋亡指数[(8.48±3.08)%,(8.15±3.02)%]均高于阴性表达组[(4.83±1.17)%,(5.00±1.93)%],差异有统计学意义(P<0.05)。结论 Granulysin、Perforin与早期自然流产有关,且两者在早期自然流产的发病过程中有协同作用。     

支气管哮喘患者血清IL-10、IL-5和ECP的变化及其意义

目的 通过对支气管哮喘患者和正常对照组的血清IL-10, IL-5和 ECP水平的测定以及相互关系的研究,探讨它们在支气管发病中的作用.方法 应用Pharmacia UniCAP系统和ELISA方法分别测定支气管哮喘患者和正常对照组的血清E CP和IL-10、IL-5水平.结果 正常对照组和发作期的支气管哮喘患者的 ECP水平分别为(3.97±2.13) μg/L和(21.76±12.08) μg/L.正常对照组,支气管哮喘ECP 升高组和支气管哮喘ECP正常组的血清IL-5水平分别为(10.90±4.41) pg/mL,(20.62± 15.7 4) pg/mL和(9.24±7.16) pg/mL.正常对照组和支气管哮喘ECP升高组之间IL-5水平有显著差异(P＜0.01),正常对照组和支气管哮喘ECP正常组之间IL-5水平无差异(P＞0.05) ,支气管哮喘ECP正常组和ECP升高组之间IL-5水平有显著差异(P＜0.01),ECP与IL-5 明显相关 ,两者之间的相关系数r=0.465(P＜0.01).正常对照组,支气管哮喘ECP升高组和支气管哮喘ECP正常组的血清IL-10水平分别为(38.28±15.17) pg/mL,(22.76±15.25) pg/mL 和(42.32±14.61) pg/mL,支气管哮喘ECP正常组和ECP升高组之间IL-10水平有显著差异( P＜0. 01).结论 支气管哮喘的发生与嗜酸粒细胞有密切的关系,ECP和IL-5可反映嗜酸粒细胞的活化程度,在支气管哮喘发作时嗜酸粒细胞处于激活状态,易于释放蛋白颗粒;IL-5对嗜酸粒细胞有调控作用.支气管哮喘组的血清IL-10水平较正常对照组低,提示支气管哮喘患者IL-10分泌减少,不能有效抑制炎症或促炎症细胞因子的合成及释放,亦即不能有效抑制炎症反应,可能是导致或加重气道炎症的原因之一.     

类风湿关节炎患者外周血淋巴细胞的凋亡及其意义

目的 研究类风湿关节炎(RA)患者外周血淋巴细胞的凋亡及其意义.方法 采用流式细胞术和激光共聚焦显微镜,检测35例RA患者和30例健康志愿者的外周血淋巴细胞抵抗凋亡的能力,包括分析新鲜分离和培养的淋巴细胞凋亡率及其与临床病情严重度的相关性.结果 两组间新鲜分离的淋巴细胞凋亡率差异无统计学意义[(2.63±1.47)%比(3.53±2.04)%,P＞0.05].活化淋巴细胞检测的结果显示,RA组的凋亡率明显低于对照组[(12.08±6.06)%比(18.66±7.27)%,P＜0.05],并与DAS28评分呈负相关(r=-0.617,P=0.008).结论 RA患者活化的外周血淋巴细胞出现凋亡缺陷,并与RA病情活动度相关.提示这些细胞募集到组织损害和自身免疫炎性反应进程异常的部位并对炎性反应进程的发展和维持起重要作用.     

早期细胞凋亡引起活动期狼疮小鼠的B 细胞比例下降

目的:探索活动期MRL/lpr狼疮小鼠中B细胞数量的变化及其调节机制。方法:利用流式细胞仪,首先分析了18周龄活动期MRL/lpr狼疮小鼠与正常C57/B6小鼠脾脏中B细胞的周期和B细胞占脾脏淋巴细胞的百分比;用Annexin V和PI标记方法检测了B细胞及其亚类凋亡情况;进一步磁珠分选纯化小鼠脾脏B细胞,实时定量PCR方法检测相关凋亡基因的表达变化。结果:与C57/B6小鼠相比,活动期MRL/lpr狼疮小鼠的B细胞比例明显减少(P0.01),而凋亡比例显著增加(P0.01),其中B细胞的早期凋亡比例增加(P0.01),而晚期凋亡未改变;凋亡的B细胞包括未成熟和成熟B细胞。进一步发现,活动期狼疮小鼠B细胞中抗凋亡蛋白BIRC3明显降低(P0.01),而促凋亡蛋白BCL2L1和BBC3(PUMA)明显增加(P0.01)。结论:活动期狼疮小鼠B细胞的数目减少及早期凋亡的增加可能归功于抗凋亡与促凋亡蛋白的平衡改变,提示活动期SLE患者B细胞的减少可能与其早期凋亡相关。     

转染FasL基因树突状细胞诱导异基因小鼠脾脏T细胞凋亡的研究

目的 制备稳定表达FasL蛋白的小鼠骨髓源树突状细胞(dendritic cell,DC)并探讨其诱导异基因小鼠脾脏T细胞凋亡的机理.方法 采用培养基选择法体外培养小鼠骨髓源DC,脂质体法转染FasL基因至小鼠成熟DC,实时定量PCR检测转染前后FasL mRNA的表达,流式细胞仪和免疫蛋白印迹检测转染前后FasL蛋白的表达.异系小鼠静脉分别输注未转染DC、转染空质粒DC和转染FasL的DC,7 d后TdT介导的原位末端标记法(TUNEL)和流式细胞仪检测脾脏中T淋巴细胞凋亡.结果 体外培养可获得成熟的小鼠骨髓源DC,转染FasL基因的DC较未转染DC FasL mRNA和FasL蛋白表达明显升高.对脾脏中T淋巴细胞凋亡的检测发现,转染FasL的DC组凋亡指数(11.67±1.53)明显高于未转染DC组(2.67±0.58)和转染空质粒组(3.33±0.58),P＜0.01.结论 培养基选择法可收获大量骨髓源DC,脂质体转染FasL基因至小鼠骨髓源DC,可以使DC高表达FasL蛋白.转染FasL的DC输注能明显诱导异系小鼠脾脏T淋巴细胞凋亡.     

白术多糖对肺癌模型大鼠免疫功能的调节作用及机制研究

目的研究白术多糖对肺癌模型大鼠免疫相关因子及癌细胞增殖凋亡的影响,探讨其肿瘤抑制机制。方法观察记录不同给药剂量20、50、80mg/(kg·d)白术多糖对肺癌模型大鼠肺指数、脾脏指数、胸腺指数的影响。全自动血细胞分析仪检测大鼠外周血中白细胞和溶菌酶含量。ELISA法检测大鼠血清中IgG、IgA、Ig M水平。流式细胞仪分析T淋巴细胞亚群CD3~+、CD4~+、CD8~+比例。MTT法和Annexin V-FITC/PI双染法分别检测癌细胞增殖和凋亡。结果与模型组相比,白术多糖各剂量组大鼠肺指数均下降(P 0.01),脾脏和胸腺指数上升(P 0.01),大鼠外周血中白细胞和溶菌酶含量升高(P 0.01),且均呈剂量依赖性。ELISA法和流式细胞仪分析结果显示,白术多糖给药组大鼠血清免疫球蛋白IgG、IgA、Ig M水平和T淋巴细胞亚群CD3~+、CD4~+、CD4~+/CD8~+水平呈剂量依赖性升高(P 0.01)。MTT法和AnnexinV-FITC/PI双染法检测结果表明,对比模型组,白术多糖各剂量组肺癌模型大鼠癌细胞增殖率降低(P 0.01),细胞凋亡率增大(P 0.01)。结论白术多糖能够增强肺癌模型大鼠机体免疫功能,抑制癌细胞增殖并诱导凋亡。     

P物质对成纤维细胞Rac-1/JNK通路及糖尿病创面愈合的影响

目的研究外源性P物质(SP)对成纤维细胞迁移的影响及糖尿病小鼠创面愈合的作用。方法利用Transwell细胞迁移试验、划痕试验检测SP对小鼠成纤维细胞迁移能力的影响。筛选建模成功的糖尿病小鼠20只,随机分为对照组和SP组。分别于皮肤损伤后4、8、12、16、20 d,观察创面愈合情况并计算创面愈合率,并于7、14、21 d苏木精-伊红(HE)染色观察组织中炎症细胞聚集和肉芽组织形成情况,免疫组化检测Rac-1、JNK的表达水平。结果一定浓度SP可明显促进成纤维细胞迁移。损伤后第12天,SP组创面愈合率明显高于对照组(分别为(82.62±1.49)%、(57.24±1.3)%,差异有统计学意义(P<0.01);HE染色发现损伤后7 d,SP炎症细胞趋化明显;SP组创面Rac-1、JNK的阳性细胞(分别为28.3±2.5、36.2±1.6)均明显多于对照组(分别为11±3.2、24.4±3.2),差异有统计学意义(P<0.01)。结论SP可促进小鼠成纤维细胞迁移,促进创面愈合早期炎症细胞趋化和肉芽组织形成,从而加速创面愈合。     

RNA干扰组蛋白去乙酰化酶4诱导骨肉瘤细胞凋亡

目的探讨沉默组蛋白去乙酰化酶4(HDAC4)对骨肉瘤细胞HOS,U2OS生物学行为的影响。方法用脂质体瞬时转染法将化学合成HDAC4-siRNA转染至骨肉瘤HOS及U2OS细胞中,实时荧光定量PCR(q-PCR)法检测细胞中HDAC4 mRNA的表达;蛋白质免疫印迹法(Western blot)检测细胞HDAC4及其下游基因HIF-1α的蛋白表达;CCK-8法检测细胞的增殖能力;流式细胞仪检测细胞凋亡;Transwell小室法检测细胞的侵袭能力。结果转染后HOS及U2OS细胞中HDAC4 mRNA表达明显降低(P0.01)。沉默HDAC4后HOS细胞早期凋亡率为(16.8±2.1)%,较si-control组(10.2±2.5)%明显增加(P0.05);U2OS细胞早期凋亡率为(21.4±3.1)%,较si-control组(12.5±2.3)%明显增加(P0.05);HOS细胞si-con组及si-HDAC4组细胞的穿膜细胞数分别为(146±34)个、(45±20)个,U2OS细胞为(207±35)个、(121±23)个,分别显著低于si-con组(P0.05)。si-HDAC4能够明显降低HDAC4以及下游基因HIF-1α的表达。结论针对HDAC4基因的特异性RNA小干扰片段能够下调HDAC4mRNA及蛋白的表达,并抑制骨肉瘤细胞的增殖和侵袭,诱导细胞凋亡。     

胃癌术前小剂量化疗与细胞凋亡、bcl-2和p53蛋白表达及其关系探讨

研究胃癌术前小剂量化疗中细胞凋亡、bcl-2和p53蛋白的表达及其关系.120例胃低分化腺癌患者,分为观察组62例和对照组58例,观察组术前静脉注射5-氟脲嘧啶(5-FU)500mg/天,共3天.用TUNEL方法检测细胞凋亡,用免疫组化方法(S-P法)检测bcl-2和p53蛋白的表达.观察组于24、48、72h的凋亡指数(AI)分别为0.11±0.02、0.14±0.02和0.16±0.03,三者比较差异有显著性(P《0.01);对照组相应时间的AI则为0.08±0.01、0.07±0.01和0.07±0.01,三者之间比较均无显著差异(P》0.05).观察组和对照组于24、48和72h,bcl-2蛋白阳性过度表达率分别为50.0%/53.3%、23.3%/50.0%和9.7%/48.3%;而观察组和对照组于24、48和72h,p53蛋白阳性过度表达率分别为25.0%/21.4%、33.3%/23.3%和25.8%/20.7%.观察组和对照组相比bcl-2的表达有显著性差异(P《0.05);而p53表达则无显著差异(P》0.05).5-FU与胃癌细胞的凋亡有相关性,随治疗时间的延长能使bcl-2蛋白表达逐步下调.p53蛋白高表达与胃癌的恶性程度和预后差有关.     

长波紫外线联合补骨脂素诱导人脾脏淋巴细胞凋亡

<正>长波紫外线即紫外线A(ultraviolet A,UVA)联合8-甲氧基补骨脂素(8-methoxypsoralen,8-MOP)的诱导方法被应用于治疗许多疾病,如皮肤T细胞淋巴瘤、移植物抗宿主病、器官移植排斥反应和多种自身免疫性疾病[1]。8-MOP是一种从植物中提取出的化合物,400~320 nm UVA照射后激活的8-MOP可以与细胞DNA发生共价交联,抑制DNA的合成,进     

流式细胞术检测细胞凋亡比较研究

从三方面探讨检测细胞凋亡流式细胞术的方法.选用大鼠皮质神经元细胞,同时使用碘化丙锭(PI)An-nexin V/PI.JC-1法检测细胞凋亡率.结果显示三种方法的凋亡率分别是:2.60%,6.52%和18.56%,两两之间有显著性差异(P＜0.01).JC-1法最敏感,AV/PI次之,PI单染法不适合检测早期细胞凋亡.     

特发性血小板减少性紫癜淋巴细胞凋亡及凋亡蛋白表达的研究

目的 :探讨淋巴细胞凋亡及凋亡蛋白表达的变化与特发性血小板减少性紫癜 (ITP)的关系。方法 :采用流式细胞仪检测 2 5例ITP患儿治疗前后外周血淋巴细胞凋亡率和Fas、FasL蛋白表达 ;采用酶联免疫夹心法 (ELISA)测定ITP患儿血清sFas、sFasL的水平。结果 :治疗后血小板恢复正常的患儿淋巴细胞凋亡率 (3 35± 1 4 3)、Fas(32 17± 6 5 4 )和FasL(41 14±6 76 )蛋白表达增加 ,与正常对照组 (0 85± 0 15、2 2 0 4± 4 5 4、2 0 83± 3 75 )和治疗前 (0 92± 0 17、2 3 0 3± 5 95、18 88± 4 5 7)相比差异有显著性意义 (P <0 0 0 1) ;治疗前ITP患者血清sFas含量为 15 5 4± 5 2 6 ,sFasL含量为 0 6 8± 0 2 3,均显著高于正常对照 (5 92± 1 78、0 33± 0 11,P <0 0 0 1)和治疗后组 (6 3± 1 92、0 36± 0 12 ,P <0 0 0 1)。结论 :ITP患者治疗后淋巴细胞凋亡增加可能与其治疗转归有关 ,sFas、sFasL的异常可能参与了ITP的免疫病理过程。     

血管紧张素Ⅱ1型受体自身抗体对厄贝沙坦抑制糖尿病肾病大鼠CHOP-JNK-Caspase-12信号通路的影响

目的:探讨血管紧张素Ⅱ1型受体自身抗体(AT1-AA)对厄贝沙坦(Irb)抑制糖尿病肾病(DN)大鼠肾脏内质网应激相关凋亡信号通路的影响。方法:将自建DN模型大鼠随机分为DN组和厄贝沙坦干预(Irb+DN)组,并设正常大鼠对照(NC)组。ELISA法测定DN组和Irb+DN组大鼠血清AT1-AA水平。4周后平行检测相关各组有关指标变化:TUNEL法检测肾脏细胞凋亡,Western Bloting测定肾脏内质网应激(ERS)标志蛋白GRP78及凋亡蛋白CHOP、p-JNK和Caspase-12表达水平。统计学比较各组间各指标差异。结果:(1)DN组大鼠肾脏细胞凋亡率及GRP78、CHOP、p-JNK及Caspase-12蛋白表达水平(16.65%±5.01%、0.751±0.030、0.757±0.056、0.603±0.048、0.709±0.047)均较NC组(0.38%±0.24%、0.334±0.001、0.249±0.026、0.209±0.003、0.348±0.004)显著增加(P0.01),Irb+DN组均明显降低(9.14%±5.98%、0.528±0.022、0.551±0.027、0.410±0.038、0.520±0.001,P0.01)。(2)DN组AT1-AA阳性大鼠肾脏细胞凋亡率及前述蛋白水平(20.05%±1.71%、0.774±0.026、0.809±0.014、0.643±0.026、0.748±0.025)均高于AT1-AA阴性大鼠(13.24%±4.93%、0.728±0.003、0.705±0.010、0.562±0.018、0.670±0.022,P0.01或P0.05)。(3)Irb+DN组中AT1-AA阳性大鼠肾脏细胞凋亡率及ERS相关蛋白表达(7.27%±3.97%、0.511±0.018、0.530±0.023、0.378±0.012、0.500±0.012)均较AT1-AA阴性大鼠(11.02%±7.21%、0.545±0.002、0.572±0.006、0.443±0.020、0.540±0.021)减少更明显(P0.01或P0.05)。结论:AT1-AA对DN大鼠肾脏ERS反应及ERS介导的肾脏细胞凋亡有影响,并在Irb抑制ERS相关的CHOP-JNK-Caspase-12凋亡途径、减少细胞凋亡、保护肾脏功能过程中起到一定作用。     

内质网应激诱导人乳腺癌MDA-MB-231细胞系凋亡

目的探讨内质网应激(ERS)致雌激素受体阴性(ER-)人乳腺癌MDA-MB-231细胞系凋亡及钙激活中性蛋白酶2(calpain2)在凋亡效应中的作用。方法实验设空白对照组(DMEM)、对照组(DMEM+DMSO)和实验组,用不同浓度衣霉素(TM)诱导乳腺癌细胞不同时间,MTT法和流式细胞术检测细胞增殖抑制率及凋亡率;Western blot法检测葡萄糖调节蛋白78(GRP78)表达量,以GRP78表达最高点确定ERS模型建立,检测凋亡相关蛋白caspase4和CHOP表达以及calpain及其内源性抑制酶calpastatin的表达,用ERS抑制剂(4-PBA)和calpain抑制剂(calpeptin)分别预处理细胞2 h,观察对上述效应的影响。结果 9、12和18μmol/L TM诱导ERS对该细胞增殖有明显抑制效应,抑制率分别为33.88%±1.32%、51.51%±8.85%和55.77%±2.61%,细胞凋亡率分别为9μmol/L TM组16.70%±0.46%和12μmol/L TM组28.1%±1.09%,与对照组相比有明显差异(P0.05);9μmol/L TM诱导细胞24 h的GRP78表达上调最高(P0.01);ERS还可明显上调caspase4、CHOP和calpain表达,下调calpastatin表达(P0.01或P0.05),上述效应均能被4-PBA和calpeptin减弱或阻断(P0.05)。结论 ERS可诱导MDA-MB-231细胞凋亡,calpain2参与调控凋亡发生。     

原发性失眠患者与有失眠症状抑郁症患者的血清神经肽Y和P物质水平

目的:探讨原发性失眠症与伴有失眠症状的抑郁症患者血清神经肽Y(NPY)和P物质(SP)水平的变化及差异。方法:选取符合美国精神障碍诊断与统计手册第4版(DSM-Ⅳ)之相应诊断标准的原发性失眠症患者42例、伴有失眠症状的抑郁症患者35例及38例正常对照,以酶联免疫吸附法测定血清NPY及SP水平,以汉密尔顿抑郁量表(HAMD)、汉密尔顿焦虑量表(HAMA)及匹茨堡睡眠质量指数量表(PSQI)评定抑郁、焦虑症状和主观睡眠质量状况。结果:原发性失眠症组与伴有失眠症状的抑郁症组血清NPY水平均低于对照组[(5.6±3.9)ug/mL,(5.8±1.8)ug/mL vs.(8.7±5.0)ug/mL,P0.05],血清SP水平均高于对照组[(5.0±1.5)ug/mL,(6.3±2.0)ug/mL vs.(3.7±1.2)ug/mL,均P0.05],且伴有失眠症状的抑郁症组血清SP水平高于原发性失眠组(P0.05),但两病例组间血清NPY水平差异无统计学意义。血清SP水平与病种、病程、性别、HAM A总分、HAM D总分、PSQI总分及各因子分无明显相关(r=0.01～0.15,均P0.05),NPY水平仅与PSQI中的主观睡眠质量因子呈负相关(r=-0.24,P0.05)。结论:原发性失眠症与伴有失眠症状的抑郁症患者均可能存在外周NPY及SP能神经元功能紊乱,伴有失眠症状的抑郁症患者的SP能神经功能紊乱可能更显著。