人脐带间充质干细胞的快速分离、纯化及冻存

目的:建立在一般实验条件下快速分离、纯化及冻存人脐带间充质干细胞(UC-MSCs)的简便有效方法并研究其冻存复苏后的增殖及多向分化能力。方法:用胶原酶Ⅱ、胰蛋白酶次序消化及二步离心法从人的完整脐带中快速分离UC-MSCs,通过把握传代时的消化程度及酸化培养基来快速纯化UC-MSCs,以流式细胞仪检测表面抗原进行鉴定;用简易二步法(-4℃停留30 min,-20℃存放2 h,-80℃长期保存)冻存UC-MSCs,半年后复苏,扩增、传代,检测其胚胎干细胞特异性抗原Oct4、SSEA-4和人端粒酶逆转录酶hTERT的表达情况,并诱导其向神经元样细胞、成肌细胞和肝细胞样细胞分化。结果:通过双酶次序消化结合二步离心法,2 h可提取全脐带中的MSCs,原代培养7 d即可传代,通过适度消化传代和选用弱酸性培养基培养,第3代即可得到纯化的UC-MSCs,UC-MSCs表达CD29和CD44,不表达CD34和CD45,极低表达HLA-DR、CD80、CD86和CD106。简易法冻存半年后复苏的UC-MSCs表达Oct4、SSEA-4和hTERT,可向三个胚层来源的细胞分化。结论:双酶次序消化结合二步离心法是从人的完整脐带中快速分离UC-MSCs的一种简便有效方法,偏酸性环境有利于UC-MSCs的扩增及纯化;简易二步法冻存对UC-MSCs增殖和多向分化能力没有明显影响。     

人眼Tenon氏囊成纤维细胞的体外培养

目的 探讨人眼Tenon氏囊成纤维细胞的体外培养方法,为防治眼部纤维增殖性疾病提供理想的细胞模型.方法 应用组织块和混合消化液培养法,取人角膜移植供体眼Tenon氏囊进行体外培养,并对培养的传代细胞进行液氮冻存复苏和形态学的鉴定.结果 人眼Tenon氏囊成纤维细胞体外生长良好,经HE染色和免疫组化观察证明该细胞为成纤维细胞.冻存复苏后的细胞能继续传代生长,其形态学特点与冻存前基本一致.结论 人眼Tenon氏囊成纤维细胞在体外生长良好,并可长期液氮冻存.     

简便高效的原代HUVECs培养

 目的 建立简便高效的人脐静脉内皮细胞（HUVECs）体外分离、培养、冻存方法,以获得大量HUVECs为相关医学基础研究及组织工程学提供良好细胞来源。方法 新鲜脐静脉内灌注0.25%胰蛋白酶消化,获得HUVECs,内皮细胞培养基(ECM)进行培养。倒置显微镜观察细胞形态,免疫细胞化学、RT-PCR检测VWF、CD144的表达。HUVECs加入10 %甘油的冻存液, 置于液氮保存4周,冻存复苏后Western blot检测VWF、CD144蛋白水平的表达。结果HUVECs体外生长2~3 d可铺满单层,细胞呈梭形,漩涡状排列生长,传代后可见管腔样结构;高表达VWF和CD144;冻存后复苏的细胞分裂增殖旺盛,蛋白水平高表达VWF、CD144。结论 脐静脉灌注胰蛋白酶消化法配合ECM培养可获取大量高纯度的内皮细胞,可作为相关研究良好的细胞来源。     

低温保存脂肪间充质干细胞的生物学特性评价

目的 探讨低温保存对小鼠脂肪间充质干细胞（ADMSCs)体外培养的生物学特性和分化潜能的影响。方法 分离、培养小鼠ADMSCs,取第3代细胞置于液氮深低温（-196℃）冻存 12个月后复苏。MTT 法测定ADMSCs的增殖活性;β-半乳糖苷酶(SA-β-Gal)染色检测衰老;免疫细胞化学方法检测细胞表面分子CD73、CD90和CD105;条件培养基诱导后,免疫荧光法检测心肌特异性肌钙蛋白（cTnT）,茜素红、碱性磷酸酶和油红 O 染色检测成骨、成脂诱导分化潜能,Real time-PCR检测cTnT、Gata4、Ost和Runx2。未经低温保存的第3代ADMSCs为对照。 结果 低温保存的ADMSCs其增殖活性、衰老率与未冻存细胞比较差异无显著性（P>0.05）。诱导后ADMSCs的cTnT阳性表达、茜素红、碱性磷酸酶和油红O染色呈阳性反应,冻存组与对照组比较差异无显著性(P>0.05）。结论 低温保存对ADMSCs体外生长特性和成心肌、成脂肪细胞、成骨细胞的分化潜能差异无显著性。     

体外培养羊骨髓来源间充质干细胞的生物学特性观察

背景:目前关于鼠、兔等小动物骨髓来源间充质干细胞的研究较多,但涉及大动物骨髓来源间充质干细胞的报道甚少。目的:体外培养羊骨髓来源间充质干细胞,并了解其生物学特性。方法:取健康10月龄中国山羊1只,麻醉后于髂后上棘穿刺抽取骨髓5mL,采用全骨髓培养法接种于无菌塑料培养瓶中,加入含体积分数为10%胎牛血清的DMEM/F12培养基。待细胞达80%～90%融合后,胰蛋白酶消化传代。取P3代处于对数生长期的细胞予以冻存,然后进行复苏。倒置显微镜下观察细胞形态变化,MTT法测定细胞生长曲线,VonKossa’s染色检测成骨诱导分化潜能。结果与结论:原代培养羊骨髓来源间充质干细胞贴壁生长,呈梭形;P3代后细胞形态基本一致,均为长梭状;冻存复苏后细胞贴壁较传代细胞稍慢,细胞形态和活性与传代细胞没有明显差别。P3～P5代细胞生长周期基本一致,接种后两三天为生长迟滞期,3d后进入对数生长期,六七天为生长平台期,其后生长速度减缓。羊骨髓来源间充质干细胞成骨诱导3周后,VonKossa’s矿化结节染色呈阳性。证实所培养的羊骨髓来源间充质干细胞具有较强的遗传稳定性和增殖能力,可向成骨细胞定向分化。     

冻存对CM-Dil标记脐带间充质干细胞的影响

目的 考察用氯甲基苯甲酰氨（CM-Dil）标记人脐带间充质干细胞（hUCMSCs）的可行性及冻存对CM-Dil标记的hUCMSCs的影响.方法 采用组织块法体外培养hUCMSCs,观察细胞形态及生长情况,通过流式细胞仪检测细胞免疫表型来鉴定该细胞.将第3代hUCMSCs用CM-Dil标记,观察细胞形态及生长情况,用荧光显微镜观察体外标记情况,并将细胞冻存、复苏,观察细胞复苏后的生长情况及荧光标记情况.结果 hUCMSCs形态类似成纤维细胞,呈梭形、多角形.第3代hUCMSCs强表达CD44、CD29、CD90和CD73,不表达CD34和CD45.CM-Dil标记hUCMSCs的细胞标记率达90％以上,染料主要存在于细胞膜;标记后细胞生长状态良好,冻存及复苏后细胞仍有较强荧光表达,且细胞生长状态良好.结论 CM-Dil标记hUCMSCs示踪方法简单易行,冻存对CM-Dil标记的hUCMSCs的生长无明显影响.     

大鼠脂肪来源血管内皮细胞的改良式培养与观察

目的对目前常用的大鼠脂肪血管内皮细胞(VECs)的原代培养方法进行改良,建立一种操作更为简单、更经济的VECs的原代培养方法。方法取SD大鼠睾丸囊脂肪组织,采用胶原酶消化法,在保留血管及脂肪组织、缩短消化时间的条件下分离、获取细胞,普通高糖培养基培养,光镜下观察细胞形态及生长情况,CD29、CD31与Ⅷ因子相关抗原流式鉴定及Ⅷ因子相关抗原免疫荧光鉴定,MTT比色法检测细胞冻存前后增生率,并讨论改良培养法较传统培养法的优越性。结果体外培养的原代VECs在光镜下初始呈偏圆不规则多角形,细胞融合后呈铺路石样生长;流式鉴定CD31阳性和CD29、Ⅷ因子相关抗原弱阳性,Ⅷ因子相关抗原荧光染色阳性;细胞传至第20代后,仍未见贴壁困难、生长停滞等迹象,平均传代时间为5～7d;液氮中冻存12个月复苏后细胞形态及生长情况无明显改变。结论改良的大鼠脂肪来源VECs的分离和培养方法,较传统方法更简单、经济,培养时间更短,可长期传代,是一种较为理想的培养方法。     

人脐血非造血干细胞免疫原性的实验研究

目的 探讨人脐血非造血干细胞免疫原性,为脐血非造血干细胞的应用提供依据.方法 通过流式细胞术检测人脐血非造血干细胞的免疫表型;体外混合淋巴细胞培养观察人脐血非造血干细胞原代、P1代、诱导分化细胞及干扰素-γ(IFN-γ)刺激异种T淋巴细胞增殖活化作用.结果 人脐血非造血于细胞表达HLA-ABC,微弱表达HLA-DR,经IFN-γ处理后,未明显改变HLA-ABC、HLA-DR的表达水平.混合淋巴细胞培养未见各处理组人脐血非造血干细胞明显刺激T淋巴细胞的增殖.结论 人脐血非造血干细胞无论原代、传代细胞、分化细胞及IFN-γ处理的细胞免疫原性均较弱.     

HBeAg真核表达质粒在293T细胞中表达的研究

目的:观察构建的真核表达质粒pJW4303/HBe在人胚肾细胞(293T)中的表达。方法:将构建好的质粒pJW4303/HBe经脂质体导入293T细胞中,分别在转染后3d、6d、9d及12d收集上清,同时对转染的细胞进行传代和冻存,传代的细胞收集上清,冻存的细胞复苏后收集上清。运用ELISA检测表达量的变化。结果:转染后3d、6d、9d及12d细胞上清液1 8稀释后HBeAg检测的OD值分别为1.047±0.093、1.494±0.112、0.998±0.087、0.678±0.124;不同时间转染传代3d后细胞上清液1 8稀释后HBeAg检测的OD值分别为0.943±0.135、1.378±0.127、0.791±0.145、0.505±0.098,不同时间转染冻存复苏3d后细胞上清液HBeAg检测的OD值分别为0.523±0.113、0.742±0.093、0.41±0.106、0.261±0.089。结论:质粒pJW4303/HBe转染293T细胞6d后HBeAg抗原表达量最高,经传代和冻存复苏后的转染细胞仍然能够表达抗原。     

人胚胎干细胞体外培养、传代及冻存、复苏研究

目的建立人胚胎干细胞体外培养模式，并对其进行冻存及复苏。方法将人胚胎干细胞置于小鼠胚胎成纤维细胞饲养层上培养，细胞接近融合状态时进行传代，程序降温法冻存，速溶方法复苏，确定解冻后细胞复苏率、克隆生长与分化情况，并对其生物学特性进行鉴定。结果人胚胎干细胞稳定增殖了5个月，传至20代；细胞在小鼠胚胎成纤维细胞饲养层上呈集落生长，核大，核仁明显。程序降温法冻存后复苏，细胞复苏率达到78．3％；解冻后第12代细胞仍具有稳定的46，XX核型；TRA-1—81阳性，表达Nanog基因，流式细胞术检测SSEA-4阳性表达率为89．38％。结论成功建立了人胚胎干细胞体外培养模式，为研究人胚胎干细胞及相关疾病的防治提供细胞模型和细胞来源。     

施万细胞诱导共培养骨髓基质细胞向多巴胺能神经元分化

观察施万细胞(SCs)对骨髓基质细胞(BMSCs)的诱导分化作用。分离和体外培养SD大鼠SCs和BMSCs,分为SCs+BMSCs共培养(实验组)和BMSCs单独培养(对照组)。用流式细胞仪(FCM),S100、Brdu/nestin、Brdu/TH免疫荧光法分别鉴定BMSCs、SCs和BMSCs的分化情况。第2代SCs呈S100阳性,第3代BMSCs呈CD29和CD90阳性,CD45阴性。二者共培养3d后,可见Brdu/nestin免疫荧光双标细胞,阳性率达28.3±1.3%,与对照组比较,P<0.05。7d后,Brdu/nestin双标细胞减少,出现Brdu/TH免疫荧光双标细胞,阳性率为19.2±1.6%,与对照组比较,P<0.05。而对照组始终只见Brdu单标细胞。上述结果表明SCs可诱导共培养的BMSCs分化为DA能神经元。     

间充质干细胞对混合淋巴细胞反应体系中T淋巴细胞的免疫调节作用

目的:探讨间充质干细胞(MSC)在体外对T淋巴细胞免疫调节作用的特点。方法:通过Ficoll梯度密度离心法分离出正常人骨髓单个核细胞,体外培养扩增MSC,获取第3代细胞。将其按照不同的比例加入双向混合淋巴细胞培养(MLC)体系中,在第3、5天,采用MTT比色法检测各组MLC中的T淋巴细胞的增殖情况,再用流式细胞术分析其与MSC共孵育前后细胞表面标记的变化情况。结果:加入了MSC的MLC体系中,MSC对T淋巴细胞的增殖抑制具有剂量依赖性,且随着时间延长,抑制程度增强;其中,CD4 T细胞亚群受抑不如CD8 T细胞亚群显著;另外,T淋巴细胞表面CD25的表达虽然较对照组有所下降,但是CD4、CD25共表达的细胞却较对照组有明显的上升趋势。T淋巴细胞表面活化抗原HLA-DR的表达较对照组有轻度减低。结论:MSC在体外能够明显抑制T淋巴细胞的增殖,其主要是针对CD8 T细胞(CTL)。另外,它还能下调活化T淋巴细胞上一些较特异的表面标记CD25和HLA-DR的表达。     

体外传代培养成体大鼠骨髓间充质干细胞生物学特性的观察

目的观察成体大鼠骨髓间充质干细胞（MSC）体外培养过程中生物学特性的改变,为骨髓间充质干细胞的应用研究提供实验依据。方法成体大鼠骨髓MSC的分离培养,流式细胞仪观察MSC免疫表型及细胞周期,检测细胞的诱导分化能力以及细胞的生长曲线,TRAP—ELISA方法检测其端粒酶活性。结果体外培养的成体大鼠MSC,随着传代次数的增加,长梭形细胞的体积逐渐增大。第4代时免疫表型阳性细胞率分别为CD29：（94．75±3．68）％,CD71：（95．43±2．23）％,CD90：（98．08±3．88）％;当传到第7代时,阳性细胞率仅为CD29：（50．00±3．35）％,CD71：（50．70±2．43）％,CD90：（48．60±2．83）％;第9代时MSC检测不到任何阳性免疫表型。前5代MSC增殖较快,第3代时处于S期和G2／M期的细胞比例为（38．36±2．01）％,处于G0／G1期细胞为（61．64±2．13）％;第7代以后细胞增殖能力明显降低,第12代时处于S期和G2／M期的细胞为（10．83±1．63）％,而G0／G1期的细胞为（89．17±1．96）％,此时MSC已经基本停止增长。当体外培养的MSC传到第9代以后,在成骨和成脂肪诱导体系作用下,细胞丧失了分化为Von Kossa法染色和油红O染色阳性细胞的能力;同时其端粒酶活性也随着传代次数的增多由最初的（52．7±0．78）％逐渐降低为阴性。结论体外培养的成体大鼠骨髓MSC随着传代次数的增加,其生物学特性发生明显改变。     

人胚胎脐血间质干细胞生物学特性研究

目的:研究人中期胚胎脐血间质干细胞生物学特性,探讨其在自体宫内基因转移/治疗(IUGT)领域的应用前景。方法: 采用L-DMEM完全培养液培养中期胚胎脐血间质干细胞(MSC);流式细胞仪技术检测细胞表面标记;地塞米松/胰岛素等作为脂肪细胞诱导液,β-甘油磷酸钠/抗坏血酸等作为成骨细胞诱导液分别诱导细胞分化;将携带有绿色荧光蛋白的重组腺病毒转染MSC,荧光显微镜下检测MSC表达转基因特性;F344新生大鼠肝内注射MSC,免疫荧光检测6周后不同组织器官中人MSC存在;非肥胖型糖尿病/重症联合免疫缺陷性小鼠(NOD/SCID)皮下注射MSC,病理切片检测第30 d细胞体内成瘤性。 结果:3 mL人中期胚胎脐血可以分离、培养出MSC,细胞均一地表达CD29、CD44、CD59、CD105、CD166,不表达CD34、CD45、CD80、CD86、CD42a、HLA-DR分子,体外培养中具有成脂、成骨能力;细胞表达转基因产物绿色荧光蛋白阳性率高达56.32%±3.28%;在新生大鼠体内,人中期胚胎脐血来源的MSC能向多个不同组织器官迁移,在NOD/SCID小鼠内不具有成瘤性。结论:人中期胚胎脐血MSC适合中、晚期胚胎自体IUGT靶细胞。     

人胎盘血间质干细胞分离培养

目的：分离培养人胎盘血间质干细胞（hMSC），为hMSC探寻新来源。方法：采用羟乙基淀粉（HES）方法分离、富集胎盘血有核细胞；DMEM培养液体外培养、纯化、扩增hMSC；流式细胞仪检测细胞表面标记；地塞米松、IBMX、胰岛素和吲哚美辛定向诱导hMSC样细胞向脂肪细胞分化。结果：胎盘血来源有核细胞,在DMEM体外培养条件下，生长出具有塑料粘附特性的梭形细胞，阳性获得率29.17%（7/24），该细胞传代培养达6个月以上；流式细胞仪检测结果显示CD29、CD44、CD59、CD90、CD105、CD166表达阳性，CD14、CD34、CD45、CD80、CD86表达阴性；加入脂肪细胞诱导剂，细胞在形态上向脂肪细胞转化，胞内出现脂滴、脂泡，油红O阳性。结论：人胎盘血可以分离培养出hMSC，是hMSC的重要来源。     

Presence of murine fetal liver cells capable of being induced to differentiate in vitro into T cell receptor-positive cells.

Mouse fetal liver cells were analyzed for the surface expression of T cell markers. Fetal liver cells prepared from mouse embryos at 14.5 days of gestation contained a small number of CD4+ cells (1.4%), but virtually no cells positive for any other T cell markers such as CD8, CD3 and T cell receptor (TcR). When a fetal liver cell suspension prepared from BALB/c(male) x AKR(female) F1 embryos at 14.5 days of gestation was cultured in medium supplemented with culture supernatants of both WEHI-3 and concanavalin A-stimulated rat spleen cells, TcR alpha beta+ and CD4+ cells were generated, whereas CD8+ and TcR gamma delta+ cells were hardly detectable. Most of TcR alpha beta+ and CD4+ cells were H-2d+, thus clearly showing their fetal origin. Treatment with anti-CD4, anti-CD3 or anti-TcR alpha beta antibodies plus complement or electronic sorting to remove cells expressing these markers failed to inhibit the generation of T cell marker-positive cells following culture in vitro. On the other hand, depletion of Thy-1.2+ cells reduced their generation. These findings indicate the presence of some progenitor T cells in fetal liver with the Thy-1+, CD3-, CD4-, CD8-, TcR- phenotype, which can be induced to differentiate into TcR alpha beta+ cells in the presence of specific humoral supplements without the influence of the thymus.     

小鼠心肌微血管内皮细胞的原代培养及生物学特性

 目的：探讨一种高效、稳定的从小鼠心肌组织中分离培养心肌微血管内皮细胞的方法并观察细胞的生物学特性。方法：以多聚赖氨酸对培养皿作预包被, 采用Ⅱ型胶原酶消化、差速贴壁分离法，结合内皮细胞专用培养基，分离培养微血管内皮细胞并进行扩增。利用倒置显微镜观察细胞生长情况；台盼蓝法、绘制生长曲线和MTT法分别测定心肌微血管内皮细胞传代成活率、不同代生长及增殖特征；以DiI-ac-LDL和FITC-UEA-1荧光双标，结合CD31、vWF和CD34 免疫荧光鉴定细胞表面特异性抗原；体外血管形成实验检测心肌微血管内皮细胞的功能。结果：酶消化、差速贴壁法分离培养2 d后，细胞呈散在的、小簇状聚集性生长，4~5 d迅速生长呈单层排列，细胞为梭形、三角形或多角形，7～8 d后呈铺路石样即可传代；传代细胞经台盼蓝法检测成活率均为95%以上；第1、3代细胞生长曲线近似“S”形，MTT法显示第1、3代细胞在第2～4 d吸光度变化较明显（P<0.05）；随传代次数的增加，第5代细胞生长曲线近似平缓，吸光度无明显变化，细胞逐渐衰老； DiI-ac-LDL和FITC-UEA-1 荧光双标阳性率为(89.2±3.5)%，相关特异性抗原CD31、vWF和CD34 免疫荧光鉴定阳性率为(56.7±3.7)%、(78.5±2.6)%和(67.8±4.2)%；体外血管形成实验显示，6～12 h后出现明显的管腔结构。结论：以多聚赖氨酸作预包被，采用Ⅱ型胶原酶消化、差速贴壁法并结合内皮细胞专用培养基，可获得纯度较高的小鼠心肌微血管内皮细胞，为心脏疾病的研究提供种子细胞。     

人脂肪源性干细胞的分离及生物学性状的鉴定

目的 建立从人脂肪抽吸物中分离培养脂肪来源干细胞(ASCs)的方法,并从形态学、生长动力学、表面标记物和分化能力等方面进行鉴定.方法从4例行腹部脂肪抽吸术的健康成年女性患者获得脂肪组织,通过酶消化法分离和培养脂肪干细胞,并传代培养至20代,观察细胞形态;四甲基偶氮唑盐(MTT)法测定和比较第3、9、15和20代细胞生长...     

γ干扰素联合脂多糖诱导人脐带间充质干细胞向MSC2极化

文题释义： γ干扰素联合脂多糖模拟炎症微环境：间充质干细胞的免疫抑制能力不是内在的,而是由促炎细胞因子诱导的。间充质干细胞暴露于炎症信号可显著增强其对T细胞、单核细胞/巨噬细胞和树突状细胞的免疫抑制作用。γ干扰素由活化T细胞和NK细胞产生,激活抗原提呈细胞,上调转录因子T-bet 而促进Th1细胞分化;脂多糖是革兰阴性细菌细胞壁外壁的组成成分,是免疫反应的强烈刺激剂,具有通过信号转导途径促进各种炎性细胞因子分泌的作用。 间充质干细胞可极化为MSC1和MSC2两种类型：间充质干细胞既可以抑制免疫应答,也可以促进免疫应答,不同的炎症递质会诱导间充质干细胞极化分型并表现出截然相反的免疫调节作用,这一特性称为间充质干细胞免疫调节的可塑性。间充质干细胞可以通过下游Toll样受体信号极化成2种类型：MSC1和MSC2。文献报道Toll样受体4引发的MSC1主要发挥促炎功能,而Toll样受体3引发的MSC2主要发挥免疫抑制功能。 背景：间充质干细胞的免疫调节特性已被临床广泛应用于自身免疫性疾病和移植物抗宿主病,但是其免疫调节的可塑性导致间充质干细胞临床治疗效果出现异质性和不稳定性。 目的：探索γ干扰素联合脂多糖模拟炎症微环境诱导人脐带间充质干细胞向MSC2极化的作用。 方法：体外分离培养人脐带间充质干细胞,进行形态学、表面标志物、成脂及成骨诱导分化能力鉴定。分别用γ干扰素(10 μg/L)、脂多糖(100 μg/L)及二者联合刺激人脐带间充质干细胞24 h,与植物凝集素刺激的外周血单个核细胞直接共培养或Transwell间接共培养5 d。流式细胞术检测共培养不同时间点调节性T细胞和Th1细胞比例,荧光定量PCR检测人脐带间充质干细胞的Toll样受体2,3,4 mRNA表达水平。 结果与结论：①人脐带间充质干细胞呈梭形或成纤维形,高表达CD73、CD90、CD105,低表达CD34、CD45、HLA-DR;②在直接与间接共培养条件下,γ干扰素联合脂多糖刺激人脐带间充质干细胞均可增加调节性T细胞的比例,优于γ干扰素或脂多糖单独刺激组、未刺激组及外周血单个核细胞对照组(P < 0.05);③Th1细胞比例随共培养时间的延长呈逐渐下降的趋势;④在间接共培养的条件下,γ干扰素联合脂多糖刺激人脐带间充质干细胞更早向免疫抑制型MSC2极化,Toll样受体3表达显著增高(P < 0.05);⑤以上结果表明间接共培养体系下γ干扰素(10 μg/L)联合脂多糖(100 μg/L)是诱导人脐带间充质干细胞向MSC2极化的高效组合,并且MSC2的免疫抑制作用不依赖于细胞间的直接接触,为MSC2来源外泌体将来应用于临床研究奠定实验基础。 ORCID: 0000-0001-7335-2558(黄恬) 中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞;骨髓干细胞;造血干细胞;脂肪干细胞;肿瘤干细胞;胚胎干细胞;脐带脐血干细胞;干细胞诱导;干细胞分化;组织工程