非吞噬细胞氧化酶1介导糖基化终末产物对牛视网膜周细胞凋亡的影响

视网膜毛细血管主要由血管内皮细胞和周细胞（Bovine Retinal Pericytes,BRP）组成,而毛细血管,特别是BRP的选择性丢失是糖尿病视网膜病变的早期病理改变之一。血清和组织中晚期糖基化终末产物（AGE）水平与视网膜病变等慢性并发症的程度明显相关,阻止AGE形成,可以减少或减轻并发症特别是微血管并发症,如糖尿病视网膜病变的发生与发展。     

菩人丹超微粉对糖尿病大鼠视网膜神经细胞凋亡及相关基因表达的影响

目的: 探讨菩人丹超微粉(PRD)对糖尿病大鼠视网膜神经细胞凋亡及相关基因表达的影响。方法: 36只Wistar大鼠随机分为3组,正常对照组、糖尿病模型组和PRD治疗组,每组12只。糖尿病模型组和PRD治疗组大鼠均采用链脲佐菌素连续腹腔注射建立2型糖尿病大鼠模型。模型成功建立后,PRD治疗组大鼠给予PRD灌胃3个月。采用脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(TUNEL)检测大鼠视网膜神经细胞的凋亡;SP免疫组织化学染色法检测视网膜B细胞白血病/淋巴瘤相关抗原2(Bcl-2)、B细胞白血病/淋巴瘤相关抗原相关X蛋白(bax)和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(caspase-3)蛋白的表达;逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测bcl-2、bax和caspase-3 mRNA的表达。结果: 糖尿病模型组与正常对照组比较,大鼠视网膜神经细胞凋亡指数、Bax、 caspase-3蛋白及mRNA的表达均明显升高(P＜0.01),Bcl-2蛋白及mRNA的表达、Bcl-2/Bax比值显著降低(P＜0.01);PRD治疗组与模型组比较,大鼠视网膜神经细胞凋亡指数、bax、caspase-3蛋白及mRNA的表达均明显降低,Bcl-2 蛋白及mRNA的表达、Bcl-2/Bax比值显著升高(P＜0.01)。结论: PRD可通过上调Bcl-2的表达及下调Bax及caspase-3的表达,抑制糖尿病大鼠视网膜神经细胞的凋亡,发挥对糖尿病视网膜的保护作用。     

黄芪甲苷对糖尿病大鼠视网膜Müller细胞的影响

目的探讨黄芪甲苷(AS)对糖尿病大鼠视网膜氧化应激的影响及其对Müller细胞的保护作用。方法利用链脲佐菌素诱导糖尿病大鼠模型。实验分为对照组、糖尿病组及AS治疗组,3个月后试剂盒检测视网膜丙二醛(MDA)和还原型谷胱甘肽(GSH)含量,免疫组化及Western blot检测视网膜神经胶质酸性蛋白(GFAP)变化,Western blot检测Müller细胞功能性蛋白酶——谷氨酰胺合成酶(GS)表达变化。结果与对照组相比,糖尿病组视网膜MDA含量增加,GSH含量减少,GFAP表达增加,GS表达减少(均0.01),AS治疗组视网膜MDA及GSH含量、GFAP及GS表达较糖尿病组均无明显变化(均0.05)。结论 AS抑制糖尿病大鼠视网膜氧化应激反应,恢复视网膜Müller细胞功能性蛋白酶GS的表达。     

黄芪甲苷联合葛根素对高糖诱导的H9c2细胞内质网应激及相关凋亡因子的影响

目的：探讨黄芪甲苷联合葛根素对高糖诱导的H9c2细胞内质网应激及其凋亡相关因子的影响。方法：将对数生长期的H9c2细胞随机分为对照组、甘露醇对照组、高糖组、高糖+4-苯基丁酸（4-phenylbutyric acid,4-PBA）组、毒胡萝卜素（thapsigargin,TG）组、高糖+黄芪甲苷+葛根素组;CCK-8法检测H9c2细胞活力;Western blot检测凋亡相关蛋白B淋巴细胞瘤2(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)和Bcl-2相关X蛋白（Bcl-2 associated X protein,Bax）表达。RT-qPCR及Western blot检测葡萄糖调节蛋白78(glucose-regulated protein 78,GRP78)、肌醇酶1α(inositol-requiring enzyme 1α,IRE1α)、调控X盒结合蛋白1(X-box binding protein 1,XBP1)、转录因子C/EBP同源蛋白（C/EBP homologous protein,CHOP）、p53上调凋亡调节因子（p53 up-regulate modulato...     

特异沉默周细胞的circ_0001186表达抑制糖尿病性视网膜血管病变的发生

周细胞是调控视网膜血管成熟和稳定的关键细胞,其病变是引起糖尿病视网膜病变的关键病因。环状RNA作为重要的RNA调控分子,在多种生理和病理进程中发挥作用。本研究发现,糖尿病相关的病理刺激可以特异地上调周细胞中的 circ_0001186表达水平,而对血管内皮细胞中的 circ_0001186表达水平无显著影响;细胞实验发现,circ_0001186表达沉默可以抑制高糖引起的周细胞损伤,促进周细胞的增殖和内皮细胞对周细胞的募集;动物实验发现,在糖尿病小鼠视网膜中,特异性沉默周细胞中的circ_0001186表达可以减少高糖引起的周细胞丢失,减轻视网膜血管的渗漏和炎症反应。circ_ 0001186表达沉默可以激活PDGF-PI3K-Akt信号通路进而保护周细胞的功能。本研究发现了视网膜血管病变的调控新机制, 靶向抑制周细胞内的circ_0001186表达有望为治疗该疾病提供新思路。     

沉默E2F1对高糖诱导视网膜神经节细胞的保护作用

目的:探讨E2F1对高糖诱导的视网膜神经节细胞(retinal ganglion cells,RGCs)存活和凋亡的影响及其作用机制.方法:以RGC-5细胞为研究对象,构建高糖损伤模型,将RGC-5细胞转染后分为空白对照组、高糖组、高糖+si-E2F1组、高糖+si-con组、高糖+si-E2F1+PBS组、高糖+si...     

RCS大鼠视网膜感光细胞的凋亡

为研究遗传性视网膜变性中感光细胞组织结构的时程变化及调亡，对ＲＣＳ大鼠脑ＳＤ大鼠视网膜进行光镜观察和凋亡细胞ＴＵＮＥＬ检测。结果表明，与同龄ＳＤ大鼠相比，ＲＣＳ大鼠视网膜感光细胞从出生后１５ｄ开始，出现外节膜盘堆积；２０ｄ时，内节排列紊乱，消失，３０ｄ，细胞核固缩，细胞消失，到出生后６０ｄ，仅少许感光细胞保留；１００ｄ，几乎所有感光细胞消失。ＴＵＮＥＬ检测，从出生后２５ｄ开始，ＲＣＳ大鼠视网膜有Ｔ     

黄芪多糖对STZ诱发的糖尿病大鼠早期视网膜形态学的影响

<正>目的:观察黄芪多糖(APS)对链脲佐菌素(STZ)诱发的糖尿病大鼠早期视网膜损害的形态学影响,探讨黄芪多糖防治糖尿病视网膜病变的机制。方法:采用STZ诱发的糖尿病大鼠模型。实验分为4组:正常对照组、2型糖尿病组、APS对照组、2型糖尿病+APS组。连续灌胃5周后处死大鼠,其中每只大鼠左眼做视网膜组织切片、右眼视网膜消化铺片观察。结果:正常对照组基底膜结构正常,血管无狭窄及闭塞。2型糖尿病组视网膜毛细血管周细胞明显凋亡,可见毛细血管局部扩张、膨隆、微血管瘤形成及渗透性改变,多处局灶性多形核白细胞阻塞管腔,偶见闭塞毛细血管。     

黄芪多糖对高糖所致血管平滑肌细胞增殖变化的影响

目的: 旨在观察体外高糖环境对大鼠主动脉血管平滑肌细胞(VSMCs)所致的增殖变化以及黄芪对其的影响。方法: 原代培养VSMC,分为正常对照组、25 mmol/L高糖剌激组、高糖剌激加低、中、高浓度黄芪多糖组(终浓度分别为100、200 和400 mg/L)。MTT方法分析细胞增殖率,RT-PCR检测分析MKP-1 mRNA转录及用ELISA法检测炎症因子MCP-1水平。结果: 与对照组相比高糖可以诱导VSMCs增殖(P<0.05),而中、高浓度黄芪多糖可以显著抑制该作用(P<0.05);高糖环境明显下调MKP-1 mRNA表达(P<0.05),但低浓度黄芪多糖可使MKP-1 mRNA上调,恢复到正常水平,在中、高浓度黄芪多糖时可使MKP-1 mRNA上调,显著高于对照组;高糖刺激组可促使VSMCs MCP-1分泌明显升高,低浓度黄芪即可降低高糖诱导MCP-1的水平(P<0.05),在高浓度组最明显。结论: 黄芪多糖防治糖尿病心血管并发症的作用可能与上调MKP-1 mRNA表达、抑制VSMCs增殖和MCP-1分泌相关。     

Expression of Glial Cell Line‐Derived Neurotrophic Factor and its Receptors in Cultured Retinal Müller Cells Under High Glucose Circumstance

This study aimed to explore the effect of high glucose concentration on the expression of glial cell line‐derived neurotrophic factor (GDNF) and its family ligand receptors (GFRs) GFRα1 and GFRα2 in Müller cells and the protective role of GDNF in cultured Müller cells under high glucose circumstance. Cultured Müller cells (untreated or treated with 200 ng/mL of GDNF) were exposed to high glucose conditions (20 mmol/L glucose). We found that the expression levels of GDNF and GFRα1 mRNA and protein increased gradually over time under high glucose and exogenous GDNF‐treated conditions, whereas the upregulation in GFRα2 expression was observed only in the early stage of high glucose conditions. Exogenous GDNF not only decreased apoptosis in cultured Müller cells under high glucose circumstance, but also accelerated the levels and speed of synthesis of GDNF and GFRα1 proteins in Müller cells. These results suggest that Müller cells can synthesize GDNF and GFRs under high glucose conditions, and GDNF may play important role in protecting Müller cells during the early stage of diabetic retinopathy. The difference in GFRs expression indicated that GDNF and neurturin may exert different effects on Müller cells under high glucose circumstance. Anat Rec, 2012. © 2012 Wiley Periodicals, Inc.     

不同剂量黄芪注射液对人肾小管上皮细胞黏附分子CD146表达的影响

目的:探讨不同剂量黄芪注射液对人肾小管上皮细胞(HK2)黏附分子CD146表达的干预作用。方法:将传代HK2等分为5组,进行培养处理:正常对照组(LG组,只加5.5mmol/L D-葡萄糖),高糖组(HG组,加入25mmol/L D-葡萄糖),黄芪注射液干预组:在HG组中加入不同剂量黄芪注射液,加入2μg/ml者为低剂量组(AML组)、加入20μg/ml者为中剂量组(AMM组)、加入200μg/ml为高剂量组(AMH组)。观察37℃培养24h、48h、72h后,各组HK2形态变化、分别收集各组培养细胞,用Western Blotting检测其CD146蛋白表达。结果:HG组较LG组HK2变长,呈梭形,细胞间连接疏松,间隔增大;黄芪注射液干预各组,细胞形态均较HG组变小变圆,且连接逐渐紧密,AMH组呈堆积生长。HG组CD146表达均较LG组明显增加(P0.01),干预24h、48h、72h,AMM组、AMH组与HG组比较,CD146表达均明显减少(P0.05或P0.01),AML组干预培养72h,CD146的表达亦明显减少(P0.01)。结论:黄芪注射液改善高糖引起的HK2形态改变和降低其CD146表达,对防治DN有积极作用。     

依维莫司对高糖诱导肾小球系膜细胞凋亡的保护作用

目的:观察依维莫司对高糖诱导肾小球系膜细胞(HBZY-1)凋亡的保护作用,并探讨其意义。方法:将培养HBZY-1细胞按不同葡萄糖和依维莫司浓度分组处理72h后,用磺酰罗丹明B法测量细胞OD值,计算各组细胞存活率,用Annexin V和PI双标法检测各组细胞凋亡率。结果:30mM葡萄糖处理的细胞存活率明显降低,凋亡率明显增加(均P<0.05)。不同浓度依维莫司均能提高细胞存活率(均P<0.05),其中以200ng/ml依维莫司效果最好(P<0.05);200ng/ml依维莫司具有明显抗HBZY-1细胞凋亡作用。结论:依维莫司对高糖诱导HBZY-1细胞凋亡具有保护作用,从而为其治疗糖尿病肾病提供新的研究方向。     

高良姜总黄酮对宫颈癌细胞生长和肿瘤干细胞标记物表达水平的影响及意义

目的：前期研究中,我们报道高良姜根来源的总黄酮（ general flavonoids, GFs）可抑制SiHa宫颈癌细胞增殖,诱导细胞凋亡。以往研究证明肿瘤干细胞是SiHa细胞群体的重要组成部分,故本研究探讨高良姜GFs影响细胞凋亡、细胞周期相关基因及肿瘤干细胞标记物表达调控的机理,为抗肿瘤药物研发提供依据。方法以0、100和200μg／ml剂量的高良姜GFs干预SiHa宫颈癌细胞24 h,提取细胞总RNA,采用荧光定量RT-PCR方法对CDK4、 bcl-2、 ALDH1 A1、 OCT4和Twist1等5种基因表达水平进行定量分析。结果高良姜GFs干预SiHa宫颈癌细胞后, CDK4和bcl-2基因表达水平显著下降（ P＜0.05）,呈剂量依赖性,说明该GFs可能调节细胞增殖和生存相关的基因表达调控,诱导细胞凋亡;随着药物剂量增加,肿瘤干细胞标记物ALDH1 A1、 OCT4和Twist1表达水平也梯度性下降,并有统计学差异（ P＜0.05）。结论本研究结果提示高良姜GFs可能抑制肿瘤干细胞基因表达水平,从而抑制细胞增殖,促进细胞凋亡,此为揭示宫颈癌发病机制及抗肿瘤新药研发提供重要依据。     

地菍总黄酮对糖尿病肾病大鼠胰岛素抵抗和肾损害的影响

目的 研究地菍总黄酮对糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)大鼠胰岛素抵抗和肾损害的影响.方法 在60只大鼠中随机选取10只为正常组,剩余50只均经腹腔注射链脲佐菌素STZ建立DN模型,共建模成功43只,选取40只DN大鼠随机均分为4组每组各10只,分别为模型组以及地菍总黄酮低剂量组150 mg/...     

荞麦花叶总黄酮对大鼠肠系膜微循环的影响

目的研究荞麦花叶总黄酮（TFBFL）改善微循环的作用。方法以大鼠肠系膜微血管血流速度、血管口径、血管数量和血管交叉点数为指标,观察不同剂量（0.05、0.10、0.20g/kg）TFBFL对正常大鼠肠系膜及滴注肾上腺素前后肠系膜微血管上述指标的影响。结果TFBFL可增加正常大鼠肠系膜和肾上腺素致微循环障碍的肠系膜微血管直径、血流速度、血管数和血管交叉点个数,具有剂量依赖性,中、高剂量的TFBFL与阳性对照药物复方丹参片作用相近。结论TFBFL具有改善微循环的作用。     

IL-18对SLE患者外周血淋巴细胞凋亡及相关基因表达的研究

本文研究SLE患者外周血淋巴细胞 (PBL )在IL 18刺激下细胞凋亡及凋亡相关基因表达情况。采用AnnexinV联合PI染色定量法及免疫荧光染色法。结果显示在IL 18刺激培养作用下 ,活动期SLE患者PBL凋亡发生率明显增高 (P <0 0 1) ,而静止期则无明显区别 (P >0 0 5 ) ,疾病活动性与PBL凋亡率呈正相关 (P <0 0 1)。Bcl 2表达活动期显著性升高 (P <0 0 5 ) ,静止期无明显著性差异 (P >0 0 5 )。Fas表达活动期显著升高 (P <0 0 0 1,静止期明显升高 (P <0 0 5 )。IL 18可引起SLE患者PBL凋亡率的增高 ,并导致调节紊乱 ,故在SLE发病机制中起作用     

Protective Effect of Extract of Astragalus on Learning and Memory Impairments and Neurons Apoptosis Induced by Glucocorticoids in 12‐Month Male Mice

Alzheimer's disease (AD) is a chronic neurodegenerative disorder marked by a progressive loss of memory and cognitive function. Stress‐level glucocorticoids are correlated with dementia progression in patients with AD. In this study, 12‐month male mice were chronically treated with stress‐level dexamethasone (DEX, 5 mg/kg) and extract of Astragalus (EA, 10, 20, and 40 mg/kg) or Ginsenoside Rg1 (Rg1, 6.5 mg/kg) for 21 days. We investigated the protective effect of EA against DEX injury in mice and its action mechanism. Our results indicate that DEX can induce learning and memory impairments and neuronal cell apoptosis. The mRNA levels of caspase‐3 are selectively increased after DEX administration. The results of immunohistochemistry demonstrate that caspase‐3 and cytochrome c in hippocampus (CA1, CA3) and neocortex are significantly increased. Furthermore, DEX treatment increased the activity of caspase‐9 and caspase‐3. Treatment groups with EA (20 and 40 mg/kg) or Rg1 (6.5 mg/kg) significantly improve learning and memory, downregulate the mRNA level of caspase‐3, decrease expression of caspase‐3 and cytochrome c in hippocampus (CA1, CA3) and neocortex, and inhibit activity of caspase‐9 and caspase‐3. The present findings highlight a possible mechanism by which stress level of DEX accelerates learning and memory impairments and increases neuronal apoptosis and the potential neuronal protection of EA. Anat Rec,, 2011. © 2011 Wiley‐Liss, Inc.     

碱性成纤维细胞生长因子对体外培养的乳兔软骨细胞中p53 mRNA表达的影响

目的 探讨在乳兔关节软骨细胞体外培养过程中,成纤维细胞生长因子（bFGF）对p53mRNA表达水平的影响及意义。方法 原代体外培养乳兔关节软骨细胞并传代,实验组加入10ng／ml的bFGF,光镜下观测各代细胞形态学变化,RT—PCR检测各代细胞中p53基因在mRNA水平上的表达。结果光镜观察体外培养的软骨细胞,对照组第4代培养细胞始出现凋亡细胞,bFGF组第7代出现少量凋亡细胞;RT—PCR检测bFGF组p53的目的基因指数（p53吸光光度值,β—actin吸光光度值）明显低于对照组（P〈0．05）。结论 在体外培养的兔关节软骨细胞中bFGF下调p53基因mRNA水平表达。     

PRR11在宫颈癌中的表达意义及对宫颈癌细胞增殖凋亡的影响

目的研究富含脯氨酸蛋白11(proline-rich protein 11,PRR11)在宫颈癌组织中的表达与宫颈癌患者临床病例特征及预后的关系,并探讨PRR11对宫颈癌细胞增殖凋亡的影响及作用机制。方法免疫组化检测PRR11在60例宫颈癌组织和20例正常宫颈组织中的表达水平,并分析宫颈癌组织中PRR11的表达与临床病例特征的关系及患者预后的影响。Western-blot检测PRR11蛋白在宫颈癌细胞系HeLa和人宫颈上皮永生化细胞H8中的表达;HeLa经脂质体分别转染PRR11 siRNA(si-PRR11)和对照(si-NC)48h后,采用MTS实验检测各组细胞增殖能力,流式细胞仪检测各组细胞周期阻滞和凋亡情况,Western-blot检测各组细胞中CyclinD1、caspase-3蛋白的影响。结果免疫组化结果显示宫颈癌组织中PRR11的阳性表达率显著高于正常宫颈组织中的表达,PRR11阳性表达与宫颈癌肿瘤大小及组织学分级显著相关(P均<0.05),宫颈癌组织中PRR11阳性表达患者生存期较短。PRR11在宫颈癌细胞系HeLa中的表达均显著高于人宫颈上皮永生化细胞H8(P<0.05);转染PRR11 siRNA后,HeLa细胞增殖能力下降、细胞阻滞在G1期,凋亡细胞增多,CyclinD1蛋白表达减少,caspase-3蛋白表达增加(P均<0.05)。结论PRR11在宫颈癌组织和细胞系中均高表达,且高表达与肿瘤大小、组织学分级及不良预后相关,同时PRR11可能通过调控CyclinD1、caspase-3蛋白促进宫颈癌增殖和抑制细胞凋亡,PRR11可以作为治疗子宫颈癌的潜在分子靶点。