熊果酸促进K562细胞凋亡

本研究旨在探讨熊果酸在体外对人红白血病K562细胞系的作和机制。采用MTT法和流式细胞术检测熊果酸对K562细胞的增殖抑制和杀伤效应；用慧星电泳分析熊果酸对K562细胞DNA的损伤；Hoechst33258荧光染色观察DNA片段化：细胞免疫化学染色检测Bcl-2和Bax的表达；Western blotting检测K562细胞内Caspase-3和磷酸化酪氨酸的表达和活性。结果显示熊果酸存在体外对K562细胞具有中度增殖抑制效应，并呈浓度和时间依赖性。在熊果酸作用下K562细胞呈现凋亡征象，同时细胞内Bcl-2表达下降，Bax表达升高，Caspase-3被激活，磷酸化酪氨酸表达下降，说明熊果酸存体外对K562细胞有诱导凋亡作用，而提高Bax的表达、诱导Caspase-3活化及降低BCR／ABL的酪氨酸激酶活性可能足其作用机制之一。     

NPM1基因突变表达对THP-1白血病细胞增殖和凋亡的作用探讨

 摘要：目的 探讨核仁磷酸蛋白（NPM1）基因突变对白血病细胞增殖潜能和凋亡发生的影响。方法 将携带NPM1 A型突变（NPM1 mA）的重组质粒载体pEGFPC1-NPM1 mA转染白血病THP-1细胞系,构建稳定表达NPM1 A型突变蛋白的白血病细胞株(THP-1 mA),同时设立未处理组（THP-1）和空载体转染组（THP-1 C1）作为对照。通过MTT试验观察细胞体外增殖能力,流式细胞术分析细胞周期分布及凋亡发生率的改变;采用RT-PCR和Western blot分别检测细胞凋亡相关蛋白（Bax和Bcl-2）mRNA及蛋白表达水平。结果 与未处理组和空载体转染组细胞相比较,携NPM1突变体的THP-1 mA细胞体外增殖能力明显增强,S期细胞比例明显增高,G1期细胞比例显著减低;而NPM1突变体转染后THP-1细胞的凋亡率没有显著变化,同时细胞凋亡相关蛋白Bax, Bcl-2的mRNA和蛋白表达以及Bax/Bcl-2比值亦未见明显改变。结论 NPM1突变基因能够促进白血病细胞的体外增殖能力,而对白血病细胞凋亡无显著影响,这为进一步阐明NPM1突变与AML的关系提供了新的科学依据。     

Effects of overexpression nucleophosmin (NPM1) mutations on the proliferation and apoptosis of THP-1 leukemic cells

目的 探讨核仁磷酸蛋白基因(NPM1)突变对白血病细胞增殖和凋亡的影响.方法 将携带NPM1 A型突变(NPM1 mA)的重组质粒载体pEGFPC1-NPMI mA转染白血病THP-1细胞系,构建稳定表达NPM1mA蛋白的细胞株(THP-1mA),同时设立空载体转染组(THP-1C1)和未处理组(THP-1)为对照.MTT实验观察细胞增殖;流式细胞术分析细胞周期和凋亡;RT-PCR和Western blot分别检测细胞凋亡相关蛋白(BAX和BCL-2)mRNA及蛋白表达水平.结果 与对照组相比较,实验组THP-1mA细胞体外增殖能力明显增强(P＜0.05),S期细胞比例明显增高(P＜0.05),G1期细胞比例显著减低(P＜0.05);而3组细胞凋亡率无显著差异,BAX,BCL-2的mRNA和蛋白表达以及BAX/BCL-2比值亦未见明显改变.结论 NPMI突变基因能够促进白血病细胞的体外增殖能力,而对白血病细胞凋亡无显著影响.     

槲皮素对U937细胞系抑制增殖和诱导凋亡作用的研究

目的 探讨黄酮类化合物槲皮素（Que）对人类单核细胞白血病U937细胞系的抑制增殖和诱导凋亡的作用。方法 应用MTT法检测不同浓度槲皮素对U937细胞的增殖抑制作用；AO／PI荧光染色后倒置荧光显微镜下观察细胞形态学变化；琼脂糖凝胶电泳测定细胞DNA的片段化；应用流式细胞仪检测细胞凋亡率及细胞周期分布。结果槲皮素能明显抑制U937细胞增殖，并存在剂量-效应关系和时间-效应关系；诱导U937细胞出现凋亡所具有的形态学和生化特征；随着槲皮素浓度升高，凋亡细胞和坏死细胞比例增加；将细胞特异性地阻滞在S期，出现凋亡峰。结论 槲皮素能抑制U937细胞增殖，诱导细胞凋亡，并具有细胞周期特异性。     

锌对THP-1细胞自噬、NF-κB通路活化及产生白细胞介素23的影响

目的从调节自噬、NF-κB和IL-23的角度研究锌对炎症的影响及机制。方法检测锌对静息及LPS刺激的THP-1的增殖及凋亡、自噬相关蛋白水平、NF-κB p65及其磷酸化水平以及IL-23表达的影响,并探讨各指标间的关联。结果锌可轻度促进THP-1细胞凋亡、抑制其增殖,效应与浓度有关;总体上增强THP-1自噬,但在LPS刺激时、高浓度锌抑制自噬。锌可提高NF-κB p65磷酸化;可增高IL-23、但高浓度时抑制IL-23。结论锌可活化THP-1的NF-κB通路、并以剂量依赖的方式调节自噬、增殖、凋亡及IL-23的产生且各指标密切关联。提示锌的作用机制复杂,对其临床适用症及剂量应认真控制。     

肺炎嗜衣原体CPAF诱导THP-1细胞产生前炎症细胞因子和凋亡

目的 研究肺炎嗜衣原体(Chlamydophila pneumoniae,Cpn)衣原体蛋白酶样活性因子(Chlamydial protease-like activity factor,CPAF)能否在体外诱导人单核细胞THP-1产生前炎症细胞因子和凋亡,为进一步探索Cpn感染宿主致病的分子机制提供实验依据.方法 将Cpn CPAF全基因克隆于pGEX6p-2载体上,在大肠杆菌(E coli)中诱导表达重组蛋白,经去内毒素纯化柱和琼脂糖凝胶FF获得纯化且无脂多糖(LPS)污染的重组蛋白GST-CPAF.以不同浓度的该蛋白作用于THP-1,ELISA检测TNF-α吨和IL-6水平.MTT法检测经该蛋白处理后THP-1的增生或抑制作用,用Hoechst33258荧光染色、DNA片段化分析、Armexin V-FITC-PI染色法检测细胞凋亡情况.结果 制备的莺组蛋白GST-CPAF以时间和剂量依赖方式刺激THP-1分泌TNF-α和IL-6,并以剂量依赖方式抑制THP-1增殖;当GST-CPAF刺激THP-1细胞24 h后,能诱导细胞调亡.结论 制备的Cpn重组蛋白GST-CPAF能诱导THP-1产生前炎症细胞因子和凋亡,可能是Cpn致病机制中的一个因素.     

黄芪多糖在体外巨噬细胞-乳腺癌细胞共培养体系中的作用

目的探索黄芪多糖(Astragalus polysaccharides,APS)对人源性巨噬细胞THP-1—乳腺癌细胞株共培养体系中乳腺癌细胞株细胞功能的影响以及对巨噬细胞的激活作用。方法 CCK-8比色法分别检测APS对THP-1、MDA-MB-231和MCF-7细胞增殖能力的影响。建立THP-1—MDA-MB-231共培养体系,分为231组、231+APS组、231+ADM组、231+THP-1组和231+THP-1+APS组,处理24 h,收集231细胞,流式细胞仪检测各组231细胞周期和凋亡;显微镜下计数评价各组231细胞迁移和侵袭能力。单独培养THP-1细胞,Greiss法和ELISA法分别检测NO和细胞因子分泌情况。结果不同质量浓度的APS对MDA-MB-231和MCF-7细胞增殖能力均无明显作用(P0.05),300μg/ml的APS可以显著促进THP-1细胞的增殖活性(P0.05);在231+THP-1+APS组中,相对于231组和231+THP-1组,231细胞的S期细胞明显减少,凋亡率明显增加,迁移和侵袭能力明显抑制(P0.05)。单独培养THP-1细胞,APS显著促进THP-1细胞NO、IL-1β、IL-6和TNF-α的分泌(P0.05),而对IL-12无显著影响(P0.05)。结论在共培养体系中APS可以抑制MDA-MB-231细胞的生物学行为,其作用机制可能与活化巨噬细胞产生效应因子有关。     

AR-A014418对γδT细胞增殖、凋亡及杀伤功能的影响

目的:观察糖原合酶激酶-3β(GSK-3β)选择性抑制剂AR-A014418对体外扩增的γδT细胞的细胞活性包括增殖、凋亡和杀伤功能的影响。方法:采用人淋巴细胞分离液分离健康人外周血中单个核细胞,在γδT细胞完全培养基中培养获得γδT细胞。用不同浓度的AR-A014418诱导培养γδT细胞72 h后,用流式细胞术检测各诱导处理组γδT细胞的增殖、凋亡和杀伤能力;用Western blot检测γδT细胞凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax和Caspase-3表达情况。结果:AR-A014418浓度在0. 3～10μmol/L时能促进γδT细胞的增殖并抑制其凋亡。同时促凋亡蛋白Cleaved caspase-3和Bax表达逐渐减弱,而抗凋亡蛋白Bcl-2表达逐渐增强。尤其是在3μmol/L时,γδT细胞增殖活性最强,而且体外杀伤人肝癌HepG2细胞和人胃癌SGC-7901细胞活性也显著提高。结论:GSK-3β抑制剂AR-A014418在3μmol/L浓度时,可以抑制体外扩增γδT细胞的凋亡,并能增强其体外增殖和杀伤肿瘤活性,提示AR-A014418具有一定的免疫调节功能,为今后用于体外扩增γδT细胞提供实验依据。     

单核细胞巨噬细胞对伤寒沙门氏菌应答的特性

目的探讨人类单核细胞巨噬细胞对伤寒沙门氏菌应答的特性。方法采用体外培养的THP-1细胞和PMA诱导分化的THP-1细胞，测定其内在化和杀伤伤寒沙门氏菌的活性，以及以伤寒沙门氏菌诱导的上述两种细胞产生TNFα和IL-12的情况。结果PMA诱导的THP-1细胞可分化成巨噬细胞；THP-1细胞和PMA诱导分化的THP-1细胞的内在化，杀伤伤寒沙门氏菌的能力及其产生细胞因子的能力显箸不同。结论人类巨噬细胞可能是机体抗御伤寒沙门氏菌感染的重要细胞。     

去甲斑蝥素抑制乳腺癌SKBR3细胞增殖及侵袭转移的体外研究

目的： 探讨去甲斑蝥素（norcantharidin,NCTD）抑制乳腺癌细胞SKBR3增殖及侵袭转移的机制。方法： 体外培养人乳腺癌SKBR3细胞株，采用MTT法检测NCTD对乳腺癌细胞SKBR3增殖抑制能力；流式细胞术测NCTD对SKBR3细胞周期和凋亡的影响；应用肿瘤细胞体外黏附实验、迁移实验和Transwell体外侵袭转移模型检测NCTD对SKBR3细胞黏附、运动、侵袭转移的抑制作用。结果： NCTD可抑制人乳腺癌SKBR3细胞增殖，具有明显量效和时间依赖性，24 h的IC₅₀为12.5 mg/L；10 mg/L NCTD 作用SKBR3细胞24 h、48 h后，特异地使SKBR3细胞发生G₂/M期阻滞，G2/M期细胞百分比分别为35.82%、38.70%，G₁期和S期细胞较对照组明显减少，亚G₁和G₀峰DNA含量逐渐增加, 24 h、48 h的凋亡率分别为3.44%和6.17%；SKBR3细胞的体外黏附、运动、侵袭转移能力随NCTD药物浓度提高而下降，表现在黏附抑制率增加，过河时间延长，过膜细胞数减少(P<0.05)。结论： NCTD可通过抑制乳腺癌细胞增殖，阻滞细胞周期，诱导细胞凋亡，抑制肿瘤细胞对基质黏附、迁移运动、侵袭转移等途径抑制癌症的发展。     

国外关于自我设阻行为的研究综述

文章对国外 2 0多年来有关自我设阻的研究进行了系统综述。从自我设阻的行为表现及分类、引发条件、内在动机、影响因素、效果和测量等 7个方面总结了具体研究领域的最新进展。在此基础上 ,指出自我设阻研究领域中存在的问题和将来的研究方向     

Effects on M-protein on laboratory data

We describe two patients with abnormal immunoglobulins: Case 1 was a non-diabetic patient with IgA-kappa type M-protein whose serum fructosamine(FRA) value was markedly elevated; and Case 2 was a patient with pseudo-leukocytosis induced by the interaction of etylenediaminetetraacetic acid(EDTA) and IgG-kappa type M-protein. The M-protein in Case 1 was found to be conjugated to serum albumin by immunoelectrophoresis. By gel filtration, the FRA peak of the patient's serum was shown in the high molecule weight fraction. The glycation of IgA-kappa type M-protein was clearly demonstrated by FRA staining after fractionation by serum protein electrophoresis. Although serum FRA values of other non-diabetic patients with IgA type M-protein were elevated, patients with IgG type M-protein and IgM type M-protein had low or normal serum FRA values. In Case 2, the white blood cell count of the patient's blood anti-coagulated with EDTA was 52,300/microliter as determined using an automated counter, but was within normal limits when counted manually by light microscopy using a hemacytometer. The white precipitates were formed by the interaction of the patient's serum with EDTA. Immunofixation electrophoresis revealed that the precipitates were IgG2-kappa type M-protein.     

胎儿血红蛋白持续综合征的实验研究

目的采用电泳技术对地中海贫血进行诊断,研究血红蛋白电泳技术在诊断HbF持续综合征应用中的准确性、可靠性。方法在地中海贫血筛查中,对脆性低者进行血红蛋白电泳,HbF定量分析,丽春红染色。结果在182例地贫筛查者的电泳结果中,有7例HbF持续综合征电泳只出现一条颜色较深的HbF带,含量均在65%以上。结论电泳技术在诊断地中海贫血疾病中是一项不可缺少的重要技术,对HbF持续综合征的正确诊断率为100%。     

巨噬细胞乙酰LDL受体的研究

本实验将人血清LDL乙酰化后用真~(125)I标记做成放射性配基,对小鼠腹腔巨噬细胞表面的乙酰LDL受体进行了研究。结果表明:培养的小鼠腹腔巨噬细胞表面存在有能与乙酰LDL特异性,高亲和性和可饱和性结合的受体。它们不能识别天然LDL,主要功能是加速被结合的脂蛋白被巨噬细胞摄取并将其送至溶酶体进一步降解。该受体不受细胞内胆固醇含量的反馈调节。当巨噬细胞与乙酰LDL共同孵育时,可通过该受体大量摄取乙酰LDL使细胞蓄积胆固醇变成泡沫状细胞。经细胞内胆固醇含量测定、苏丹Ⅳ染色、透射电镜观察等方法鉴定,与动脉粥样硬化病灶中巨噬细胞源的泡沫细胞相似。     

国外关于复原力的研究综述

复原力是指个体从创伤经历以及压力性情景中成功成对并良好适应的一种能力。文章对国外有关复原力的研究进行了系统综述，从复原力的概念、结构、测量等三个办衙总结了具体研究领域的最新进展。在此基础上，指出复原力研究领域中存在的问题和将来的研究方向。     

超声造影方法的再探讨

目的探讨造影剂（Sono Vue）和与之相匹配的对比脉冲系列成像技术（CPS）在超声造影（contrast—enhanced uhrasonography）中的方法。方法对不同的造影部位及不同造影目的采用了不同的造影参数设置。结果84例患者除1例注射时刺破血管造成造影剂外渗影响造影效果外，其余83例效果满意。超声造影检查对肿块定性诊断的准确率优于CT、MRI，心肌灌注检查为临床提供方便、可靠的无创方法。结论应根据使用的造影剂和成像技术及造影目的设置相应的造影参数。     

基于小波变换的听觉脑机接口技术研究

基于听觉的脑机接口系统为视力减退或者无法控制眼球运动的闭锁综合症患者提供了一种新的交流通道,使其可以与外界环境进行简单的交流.为了实现在线二分类听觉脑机接口系统,采用包含两种靶刺激、一种非靶刺激的三音oddball范式作为听觉刺激,通过一维离散小波变换对所得脑电数据进行单次样本特征提取,选取低频的特征向量,并采用支持向量机(SVM)进行目标与非目标的识别.结果表明,利用小波变换可以有效地单次提取特征向量P300,相当于20次靶刺激响应的叠加结果,最终目标识别正确率可高达80％以上,达到与视觉诱发的BCI模式可比的效果,可以用于二分类的脑机接口系统.     

罗夏测验攻击变量的研究

文章对国外有关罗夏测验攻击变量的研究进行了综述。从攻击变量的定义和分类、信度和效度等方面总结了具体研究领域的研究进展。在此基础上，指出罗夏攻击变量研究领域中存在的问题。     

Possible influence on heart rate on tinnitus

Assuming the possibility of the inner ear damage due to a hemodynamic imbalance essentially due to an abnormal vasomotor regulatory response, the possibility that heart rate (HR) has a correlation with the onset and/or the enhancement of tinnitus is hypothesized. In fact, recent studies have drawn the influence of other factors than blood pressure, in normotensive subjects, in taking part to the regulation of peripheral resistance, outlining the importance of both cardiac output (CO) - which is a function of heart rate (HR) and stroke volume (SV) and SV itself as a dynamic component to baroreflex control of muscle sympathetic nerve activity (MSNA). From this point of view, it could be possible that a condition of bradycardia can enhance tinnitus regardless of its cause, and conversely that a more elevated HR can be related to a relief of this symptom.     

基于脑微刺激的智能动物的研究

本研究应用自动控制科学和微电子技术，研制开发了适合于自由活动动物的遥控导航系统，并借助于神经生物学和电生理学知识成功的应用于大鼠，使其成为受控于人的“智能动物”。本研究的开展推动了电子信息技术和神经科学的交叉融合，在智能动物的研究方面迈出了成功的一步。