M1型巨噬细胞对小鼠膀胱癌MB49细胞活力、迁移、侵袭及凋亡的影响

目的:探究共培养体系下M1型巨噬细胞对小鼠膀胱癌MB49细胞活力、迁移、侵袭及凋亡的影响.方法:分别以0、50、100和200μg/L的脂多糖(LPS)刺激小鼠RAW264.7巨噬细胞24 h后,采用免疫荧光技术、Western blot及流式细胞术检测M1型巨噬细胞标志物CD86和诱导型一氧化氮合酶的表达情况.建立R...     

大蒜素对人膀胱癌细胞BIU-87增殖和凋亡影响

目的:观察大蒜素对人膀胱癌细胞BIU-87增殖和凋亡的影响。方法:采用细胞计数法(Cell counting kit-8,CCK-8)检测不同浓度的大蒜素对BIU-87细胞生长的影响;流式细胞仪AnnexinV/PI双染法检测BIU-87细胞的凋亡率。结果:大蒜素作用于BIU-87细胞后,对其增值表现出了明显的抑制作用,且呈浓度依赖性;AnnexinV/PI双染法检测显示,不同浓度的大蒜素均可诱导BIU-87细胞凋亡,与阴性对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:大蒜素可抑制BIU-87细胞的增殖,诱导其凋亡。     

MDSCs诱导调节性T细胞改善CVB3诱导的病毒性心肌炎

目的探讨骨髓来源抑制性细胞(myeloid-derived suppressor cells,MDSCs)在CVB3诱导的病毒性心肌炎(viral myocarditis,VMC)中的保护作用。方法通过流式细胞术分选获得足量MDSCs,体外证实具有免疫抑制功能后行体内转输实验,观察疗效及免疫机制。结果与对照PBS组相比,MDSCs处理组体质量呈上升趋势,肌酸激酶(CK)活性明显降低(P<0.001),心脏局部炎症浸润及坏死病灶显著减少,7天生存率高达70%(P<0.01),而心肌病毒滴度无明显改变,却上调了CD4+FoxP3+调节性T细胞比例。结论 MDSCs可显著改善CVB3诱导的病毒性心肌炎,有望成为心肌炎防治的新型策略和手段。     

青蒿素对人膀胱癌T24细胞增殖、凋亡、迁移与侵袭的影响

目的探讨青蒿素对人膀胱癌T24细胞增殖、凋亡、迁移与侵袭的影响及可能机制。方法将人膀胱癌T24细胞分为空白对照组与青蒿素组(50、100、200μmol/L)。不同浓度青蒿素干预48h后,MTT方法检测T24细胞的增殖活力,流式细胞术检测T24细胞的凋亡率。200μmol/L青蒿素干预48 h后,划痕实验与Transwell侵袭实验检测青蒿素对T24细胞迁移与侵袭能力的影响;Western blot实验检测T24细胞中PI3K、p-Akt与pmTOR的表达。结果不同浓度青蒿素均能显著抑制T24细胞增殖,并促进细胞凋亡,且呈浓度依赖性(P0.01)。200μmol/L青蒿素干预48 h后,T24细胞迁移与侵袭能力显著降低,T24细胞中PI3K的表达以及Akt和mTOR的磷酸化水平降低(P0.01)。结论青蒿素能够通过抑制PI3K/Akt/mTOR信号通路抑制膀胱癌T24细胞增殖、迁移与侵袭,并促进凋亡。     

白藜芦醇对小鼠T细胞活化、增殖及细胞因子分泌的影响

目的：研究白藜芦醇（RSV）对小鼠T淋巴细胞增殖及细胞因子分泌的影响，为阐明其免疫抑制作用提供实验依据。方法：无菌分离小鼠淋巴结细胞．加入不同浓度的RSV预先孵育1h，用多克隆刺激剂佛波醇酯和离子霉素刺激T细胞活化增殖。采用^3H—TdR掺入法检测RSV对T细胞增殖的影响；用RT-PCR检测IL-2及IFN-γ mRNA的表达；用胞内细胞因子染色法分析IL-2和IFN-γ的分泌。结果：RSV能抑制T细胞增殖，也能在mRNA水平及蛋向水平上抑制IL-2及IFN-γ的分泌。结论：RSV对T细胞的免疫抑制作用，可能与其抑制T细胞的活化、增殖和细胞因子的分泌有关。     

49例钬激光治疗表浅膀胱癌的护理体会

膀胱癌发病率在泌尿系统肿瘤中占首位，且常为多发性，复发率高。膀胱癌具有多中心生长特点，任何保留膀胱的手术治疗都会有一定的复发率，不用药物灌注治疗复发率可高达30％-90％。我科自2001年以来采用钬激光治疗表浅膀胱癌，术后使用羟基喜树碱膀胱灌注以防止复发，取得较好疗效。现报告如下。     

紫草素对人膀胱癌T24细胞增殖、凋亡、迁移与侵袭的影响

目的探讨紫草素对人膀胱癌T24细胞增殖、凋亡、迁移与侵袭的影响及可能机制。方法将人膀胱癌T24细胞分为空白对照组与紫草素组(10、20、40μmol/L)。不同浓度紫草素干预48h后,MTT方法检测T24细胞的增殖活力,流式细胞术检测T24细胞的凋亡率。40μmol/L紫草素干预48 h后,Transwell实验检测紫草素对T24细胞迁移与侵袭能力的影响;Western blot实验检测T24细胞中半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶3/9(Caspase-3/Caspase-9)与基质金属蛋白酶2/9(MMP-2/MMP-9)的表达。结果不同浓度紫草素均能显著抑制T24细胞增殖,并促进细胞凋亡,且呈浓度依赖性(P0.01)。40μmol/L紫草素干预48 h后,T24细胞迁移与侵袭能力显著降低,T24细胞中Caspase-3、Caspase-9、MMP-2与MMP-9的蛋白表达水平均显著升高(P0.01)。结论紫草素能够抑制膀胱癌T24细胞增殖、迁移与侵袭,并促进凋亡。     

miRNA-451在膀胱癌细胞中的表达及对其生物学功能的影响

目的：检测微小RNA(microRNA,miRNA)在膀胱癌细胞中的表达及探讨其对膀胱癌细胞迁移、侵袭、黏附及增殖能力的影响。方法：采用实时荧光定量PCR(quantitative Real-time PCR,qPCR)检测miR-451在不同转移潜能膀胱癌细胞株T24、5637、J82中的表达;使用Lipo-2000脂质体将miR-451拟似物(miR-451 mimics)转染入5637细胞,qPCR验证其转染效率,采用划痕愈伤实验、Transwell实验、细胞黏附及MTT增殖实验分别检测细胞二维迁移、侵袭、黏附及增殖能力的变化。结果：miR-451在T24、5637及J82中的相对表达量分别为0.06±0.001、0.13±0.024、1(将J82细胞中其表达量标准化为1),差异显著,具有统计学意义(P<0.01);miR-451过表达后,5637细胞的迁移、侵袭、黏附能力及增殖率显著降低,具有统计学意义(P<0.05)。结论：miR-451在不同膀胱癌细胞中差异表达,其表达异常可影响癌细胞生物学功能,这为膀胱癌靶向分子治疗提供了新的切入点。     

青蒿琥酯对膀胱癌T-24细胞生长的影响

目的：探讨青蒿琥酯(artesunate,Art)对人膀胱癌T-24细胞的抑制作用及机制。方法用不同浓度的Art干预人膀胱癌T-24细胞,采用MTT法检测用药后细胞增殖的改变;划痕实验检测鱼藤素对细胞迁移能力的影响;流式细胞术(FCM)检测细胞周期的改变和凋亡率。结果与对照组比较,Art可显著抑制人膀胱癌T-24细胞株增殖(<0.01);划痕实验结果显示,鱼藤素可降低T-24细胞的迁移能力;FCM结果显示Art可使人膀胱癌T-24细胞周期阻滞在G0/G1期,并可诱导T-24细胞的凋亡(<0.01)。结论 Art可显著抑制T-24细胞的增殖以及降低其迁移能力,其机制可能与Art使T-24细胞生长周期阻滞在G0/G1期并诱导其凋亡相关。     

肝癌衍生生长因子与膀胱癌转移的相关性及其对细胞侵袭能力影响

目的探讨肝癌衍生生长因子(HDGF)基因与膀胱癌转移的相关性,及其稳定表达对膀胱癌细胞侵袭能力的影响。方法应用荧光定量PCR检测原发未转移膀胱癌和原发伴转移膀胱癌组织中HDGF mRNA的表达。设计并合成HDGF特异性的siRNA,转染膀胱癌T24细胞系,检测转染后细胞侵袭能力的变化。结果原发伴转移膀胱癌组织中HDGF mRNA表达较原发未转移膀胱癌中明显上调(P0.05)。RNA干扰后,HDGF蛋白明显降低,细胞侵袭能力也随之明显降低(P0.05)。结论 HDGF基因与膀胱癌的转移相关,其表达下调能够抑制T24细胞的侵袭能力。     

米酵菌酸对培养人膀胱癌细胞超微结构的影响

目的：探讨米酵菌酸对人膀胱癌细胞毒性、杀伤作用及其超微结构的影响。方法：将不同浓度的米酵菌酸加入培养的人膀胱癌细胞，24h后，用光镜、透射电子显微镜分析其形态学改变。结果：光镜下可见米酵菌酸低浓度组细胞体积变小，核浆比增大，培养液中死亡细胞增多；高浓度组细胞体积进一步变小，核浆比进一步增大，细胞生长受到显著抑制。电镜下多数线粒体嵴断裂、空泡样变和髓样变;核染色质边集，核周隙增宽；粗面内质网脱颗粒。结论：米酵菌酸对人膀胱癌细胞形态及超微结构有显著影响。     

UNC5A基因过表达对膀胱癌T24细胞增殖、转移的影响及其机制探讨

【摘要】　目的　探究UNC5A 基因过表达对膀胱癌T24 细胞增殖、转移及Wnt/ β-catenin 信号通路的影响。方法　选取T24 细胞, 转染UNC5A-pcDNA 和pcDNA-NC, 将细胞随机分为Control 组、pcDNA-NC 组和UNC5A-pcDNA 组。RT-PCR 检测UNC5A mRNA 表达水平; 克隆形成实验检测细胞克隆形成率; 流式细胞术检测细胞凋亡率; Transwell 检测细胞侵袭细胞数; Western 印迹检测UNC5A、Wnt1、β-catenin 蛋白表达水平; 加入Wnt/ β-catenin 信号通路激活剂LiCl 检测各组细胞增殖、凋亡、侵袭情况。结果　与Control 组比较, UNC5A-pcDNA 组UNC5A mRNA 和蛋白表达水平升高(P< 0. 05), 克隆形成率降低(P< 0. 05), 细胞凋亡率升高(P<0. 05), 侵袭细胞数降低(P<0. 05), Wnt1、β-catenin 蛋白表达水平降低(P< 0. 05)。加入Wnt/ β-catenin 信号通路激活剂LiCl 则能逆转过表达UNC5A 对T24 细胞增殖、侵袭的抑制作用, 凋亡促进作用。结论UNC5A 基因过表达可能通过抑制Wnt/ β-catenin 信号通路的活化抑制T24 细胞增殖、侵袭, 并诱导细胞凋亡。     

异氟醚对膀胱癌 5637 细胞恶性生物学行为及化疗敏感性的影响

目的 探究异氟醚对膀胱癌 5637 细胞恶性生物学行为及化疗敏感性的影响。 方法 单独或联合 给予异氟醚及顺铂处理膀胱癌 5637 细胞, 将细胞随机分为 4 组: 对照组、 异氟醚组、 顺铂组和异氟醚 + 顺 铂联合处理组。 BrdU 染色检测 BrdU 阳性细胞数; 流式细胞仪检测细胞凋亡率和细胞周期分布; Transwell 检测侵袭细胞数; 划痕愈合实验检测划痕愈合率; Western 印迹检测 Ki67、 PCNA、 Bax、 Bcl-2、 cleaved caspase-3 和 caspase-3 蛋白表达; 结果 与顺铂组相比较, 异氟醚 + 顺铂联合处理组 BrdU 阳性细胞数和 Ki67、 PCNA 蛋白表达降低, G0 / G1期比率和 S 期细胞数降低, G2 / M 期比率升高, 细胞凋亡率和 Bax / Bcl-2、 cleaved caspase-3 / caspase-3 比值升高, 侵袭细胞数、 划痕愈合率降低, 均有显著性差异 (P< 0. 05)。 结论 异氟醚可通过抑制细胞增殖、 侵袭、 迁移, 诱导细胞凋亡, 提高 5637 细胞对顺铂的敏感性。     

MTSS1基因在膀胱癌组织中的表达及对膀胱癌细胞增殖和凋亡的影响

目的研究MTSS1基因在膀胱癌中组织的表达及其对膀胱癌EJ138细胞增殖和凋亡的影响。方法荧光定量PCR检测41例膀胱癌及相应癌旁正常组织中MTSS1基因的表达。将MTSS1基因特异性的siRNA转染EJ138细胞。转染后,Western Blot检测转染后MTSS1蛋白的表达,MTT法测定细胞生长抑制率,流式细胞法检测细胞凋亡率。结果与癌旁正常组织相比,MTSS1 mRNA在膀胱癌组织中表达明显下调。RNA干扰能够显著抑制EJ138细胞中MTSS1蛋白的表达;MTSS1基因表达降低后,EJ138细胞的生长抑制率明显降低,细胞增殖活力明显增加,而且凋亡率明显降低。结论 MTSS1基因在膀胱癌低表达,促进膀胱癌细胞增殖并抑制细胞凋亡。     

靶向沉默膀胱癌T24细胞系VEGF对树突状细胞分化成熟及免疫功能的影响

目的观察靶向沉默膀胱癌T24细胞系VEGF对树突状细胞(DC)分化成熟及免疫功能的影响。方法构建VEGF慢病毒干扰载体LV-VEGFA-RNAi(实验组)及慢病毒阴性对照载体LV-CON(阴性对照组),分别感染各组T24细胞,空白对照组不采取任何干预措施。分别用RT-PCR和ELISA检测各组T24细胞VEGF mRNA和蛋白的表达。各组T24上清分别与PBMC来源的未成熟DC共培养,用流式细胞仪检测DC分化成熟指标CD1a、CD83及免疫功能指标CD86。结果与空白对照组和阴性对照组相比,实验组T24细胞VEGF mRNA及蛋白的表达均受到显著抑制(P<0.05)。实验组DC表型CD1a、CD83和CD86较空白对照组明显增高(P<0.05),较阴性对照组亦明显增高(P<0.05)。结论靶向沉默膀胱癌T24细胞VEGF的表达,有利于微环境中DC的成熟及其免疫功能的发挥,可能通过修复DC被损害的免疫监视功能,增加DC的抗肿瘤能力。     

抗人膀胱癌免疫毫微球的制备及活性检测

人膀胱癌单克隆抗体ＢＤＩ－１通过异型双功能交联剂ＳＰＤＰ与载阿霉素人血清白蛋白毫微球偶联，制备了免疫毫微球ＤＢＩ－１－ＨＳＡ（ＡＤＲ）－ＮＳ。此免疫毫微球在体外对人膀胱场细胞ＢＩＵ－８７及Ｅ－Ｊ有特异杀伤效应，而对人直肠癌细胞Ｌｏｖｏ无杀伤；荷瘤裸鼠体内实验表明，此免疫毫微球可明显抑制人膀胱癌细胞的生长。     

银屑病中免疫抑制性细胞及中医药对其调控作用的研究进展

银屑病是一种常见的难治性皮肤病,以过度激活的T细胞产生的异常免疫应答为主要特征.在机体免疫系统内,免疫抑制性细胞主要包括髓源抑制细胞(MDSCs)、调节性T细胞(Tregs)、调节性B细胞(Bregs)、巨噬细胞(MP)等,它们可以预防T细胞等免疫效应细胞的异常活化和增殖,维持免疫稳态.近年来随着对银屑病研究的深入,发...     

库普弗细胞对肝星状细胞活化和增殖的影响

肝纤维化是各种慢性肝病向肝硬化发展的必经阶段,其形成过程可简单归纳为：致肝病因子损伤肝细胞→库普弗细胞（KC）激活→分泌多种细胞因子（CK）→星状细胞（HSC）激活、增殖、转化为肌样成纤维细胞→产生大量细胞外基质（ECM）→合成大于降解并沉积→肝纤维化形成。已知HSC的激活是肝纤维化发生的中心环节,HSC的激活受多种CK的调控。目前就KC和HSC之间的相互作用还缺乏更深入的认识,尤其关于KC对HSC活化和增殖的影响尚无定论。本文仅就这方面相关文献综述如下。     

荷瘤小鼠脾脏髓源抑制细胞的分选及鉴定

目的研究荷瘤小鼠脾脏中髓源抑制细胞(myeloid derived suppresser-cell,MDSCs)的分选与鉴定方法。方法常规培养小鼠肾癌细胞(Renca细胞),于Balb/c小鼠皮下建立小鼠肾癌模型;分离小鼠脾脏制成单细胞悬液,磁珠分选Gr-1+CD11b+双阳性的MDSCs;台酚蓝染色检测细胞存活率;流式细胞仪(flow cytometry,FCM)测其细胞纯度;显微镜下观察细胞形态;免疫荧光测其表面Gr-1、CD11b荧光表达情况;RT-PCR检测Cox2和Arg-1的m RNA的表达情况;小鼠皮下成瘤实验观察MDSCs促肿瘤生长。结果成功建立小鼠肾癌模型,磁珠分选后经FCM检测Gr-1+CD11b+双阳性的MDSCs细胞可达92.3%,显著高于分选前(P0.01);免疫荧光鉴定结果显示:分选后的细胞形态完整,Gr-1和CD11b的荧光表达于细胞膜且2种荧光可以融合;RT-PCR检测分选后的MDSCs细胞群的Cox2和Arg-1的m RNA相对表达量显著高于分选前(P0.05);小鼠皮下成瘤观察到MDSCs组与实验对照组有显著差异(P0.05)。结论用免疫磁珠从荷瘤小鼠脾脏中成功分选得到MDSCs,具有较高纯度和良好的生物活性,为后续实验提供了理想的细胞来源。     

IL-12对CIK细胞体外增殖及细胞毒活性影响的研究

目的观察IL-12对细胞因子诱导的杀伤细胞（CIK）体外扩增和细胞毒活性的影响。方法采用3种不同的细胞因子组合扩增CIK细胞,即IL-2组：IFN-1、CD3单抗、IL-1和IL-2;IL-2加IL-12组：IFN-γ、CD3单抗、IL-1、IL-2和IL-12;IL：12组：IFN-γ、CD3单抗、IL-1和IL-12。细胞计数法测定细胞的增殖、流式细胞术分析细胞表型,MTT法测定细胞毒作用。结果3种方法均可使细胞增殖能力显著增加,对CD3^＋CD56^＋细胞的诱导作用也无明显差异,IL-12与IL-2联合作用组促增殖能力和细胞毒性作用明显强于其他两组,P〈0．05,差异有统计学意义。结论IL-12同样可以用于CIK细胞的诱导,而联合IL-12与IL-2可以显著增强CIK细胞的增殖能力和细胞毒性。