IL－2基因转移的瘤苗与IL－1、低剂量环磷酰胺合用后的肿瘤治疗作用及其免疫学机理

经ＩＬ－２基因转移瘤苗治疗后荷瘤小鼠肺转移结节明显减少、存活期明显延长，与ＩＬ－１或低剂量Ｃｙ合用后，可使荷瘤小鼠的肺转移结节更少，存活期更长，特别是当ＩＬ－２基因转移的瘤苗、ＩＬ－１、低剂量Ｃｙ三者合用时抗肿瘤转移效果最强。对瘤苗治疗后荷瘤小鼠体内免疫功能的研究表明，小鼠脾脏ＣＴＬ活性、ＮＫ活性、ＩＬ－２导的ＬＡＫ活性均显著增强，脾脏细胞分泌ＩＬ－２和ＴＮＦ水平也显著升高，当与ＩＬ－１、低剂量Ｃｙ合用时，上述抗肿瘤免疫功能升高得更加明显，可见ＩＬ－２基因转移的瘤苗能通过有效地激活体内抗肿瘤免疫功能而具有显著的抗肿瘤转移效果，将其与ＩＬ－１或低剂量Ｃｙ联合应用时抗肿瘤效果更佳，当三者同时合用时抗肿瘤效果最佳。     

IL—2和环磷酰胺体内增强TNF基因转染瘤苗的抗肿瘤作用

应用细胞因子基因转染的瘤苗进行肿瘤治疗是一条值得探讨的新途径。本研究将放射线灭活的ＴＮＦ－ａ基因转染的肿瘤细胞作为瘤苗联合低剂量ＩＬ－２和／或低剂量环磷酰胺治疗实验性肺转移荷瘤小鼠，结果发现单独应用ＴＮＦ基因转染的瘤苗无明显疗效，但联合低剂量ＩＬ－２或低剂量ＩＬ－２加低剂量环磷酰胺后具有显著的抗肿瘤转移作用。本研究表明，低剂量ＩＬ－２和低剂量环磷酰胺对ＴＮＦ基因转染瘤苗的抗肿瘤转移作用有增强效应。     

IL－2和环磷酰胺体内增强TNF基因转染瘤苗的抗肿瘤作用

应用细胞因子基因转染的瘤苗进行肿瘤治疗是一条值得探讨的新途径。本研究将放射线灭活的ＴＮＦ－α基因转染的肿瘤细胞作为瘤苗联合低剂量ＩＬ－２和／或低剂量环磷酰胺治疗实验性肺转移荷瘤小鼠，结果发现单独应用ＴＮＦ基因转染的瘤苗无明显疗效，但联合低剂量ＩＬ－２或低剂量ＩＬ－２加低剂量环磷酰胺后具有显著的抗肿瘤转移作用。本研究表明，低剂量ＩＬ－２和低剂量环磷酰胺对ＴＮＦ基因转染瘤苗的抗肿瘤转移作用有增强效应。     

白细胞介素4基因转移的肿瘤细胞体内诱导杀伤细胞活性及细胞因子产生的实验研究

观察了小鼠接种高分泌ＩＬ－４的黑色素瘤细胞后体内免疫效应细胞（包括ＣＴＬ、ＮＫ细胞及ＬＡＫ细胞）抗肿瘤活性及其分泌的细胞因子（包括ＩＬ－２、ＩＦＮ－ｒ、ＴＮＦ及ＧＭ－ＣＳＦ）水平的变化，荷瘤后第１５天小鼠脾细胞ＮＫ活性及经诱导后的ＬＡＫ活性有所降低，而经诱导后的ＣＴＬ杀伤活性显著升高，荷瘤小鼠腹腔内巨噬细胞杀伤活性及其分泌的ＩＬ－１水平也明显升高；在荷瘤后第４天及第１２天出现两个高峰，实验结果表明，高分泌ＩＬ－４的黑色素瘤细胞体内生长受抑制是因为ＩＬ－４基因的导入及ＩＬ－４的分泌使体内ＣＴＬ及巨噬细胞杀伤活性提高，因而使机体抗肿瘤免疫功能得以增强。     

联合应用IL-2基因疗法和IL-3基因疗法对骨髓移植后荷瘤小鼠免疫功能的增强作用

以大剂量化疗后给予同基因骨髓移植（ＢＭＴ）的荷瘤小鼠为实验模型，动态观察了联合应用ＩＬ－２基因疗法和ＩＬ－３基因疗法配合ＢＭＴ对荷瘤小鼠抗肿瘤免疫功能的影响。结果表明，联合应用基因疗法能显著提高ＢＭＴ治疗后荷瘤小鼠脾细胞诱导的ＣＴＬ杀伤活性、腹腔巨噬细胞杀伤活性及其所分泌的ＩＬ－１、ＴＮＦ水平，但是对荷瘤小鼠脾脏分泌ＩＦＮ－γ无协同诱导效应。提示联合应用ＩＬ－２基因疗法和ＩＬ－３基因疗法通过显著地协同促进机体某些免疫功能恢复而增强ＢＭＴ后的抗肿瘤作用。     

联合应用IL—2基因疗法和IL—3基因疗法对骨髓移植后荷瘤小鼠免 …

以大剂量化疗后基因骨髓移植（ＢＭＴ）的荷瘤小鼠为实验模型。动态观察了联合应用ＩＬ－２基因疗法和ＩＬ－３基因疗法配合ＢＭＴ对荷瘤小鼠抗肿瘤免疫功能的影响。结果表明，联合应用基因疗法能显著提高ＢＭＴ治疗后葆瘤小鼠脾细胞诱导的ＣＴＬ杀伤活性、腹腔巨噬细胞杀伤活性及其所分泌的ＩＬ－１、ＴＮＦ水平，但是对荷瘤小鼠脾脏分泌ＩＮＦ＿γ无协同诱导效应。提示联合应用ＩＬ－２基因疗法和ＩＬ－３基因疗法通过显著地协同促     

联合应用IL—2及IL—4基因转染瘤苗对实验性肺转移…

将ＩＬ－２基因转染的高分泌ＩＬ－２的Ｂ１６黑色素瘤细胞株（Ｂ２）及ＩＬ－４基因转染的高分泌ＩＬ－４的Ｂ１６黑色素瘤细胞株（Ｂ４）制备成新型瘤苗，用以治疗实验性肺转移荷瘤小鼠，并辅以低剂量环磷酰胺，结果表明，荷瘤小鼠存活期明显延长；肺部转移结节数明显减少；两种瘤苗联合治疗后的疗效较单独使用明显，当辅以低剂量环磷酰胺时治疗效果更加明显。体内免疫功能检测表明，经两种瘤苗联合治疗的荷瘤小鼠脾细胞ＮＫ及ＣＴ     

IL—6基因转染的瘤苗体内诱导的抗肿瘤免疫功能与效果

经丝裂霉素C体外处理后,将IL-6基因转染的、高分泌的IL-6的B16黑色素瘤细胞制成瘤苗。结果发现,体内注射IL-6基因转染的瘤苗后,小鼠脾脏CTL活性、NK活性及IL-2诱导的LAK活性显著升高。经IL-6基因转染瘤苗体内治疗后,荷瘤小鼠的皮下肿瘤生长显著减慢、肺转移结节数显著降低、存活期显著延长,若同时合用低剂量IL-2,则上述治疗效果更好。可见IL-6基因转染的瘤苗能有效地通过诱导机体抗肿瘤免疫功能而发挥抗肿瘤作用,与低剂量IL-2合用后,IL-6基因转染的瘤苗的抗肿瘤效果更佳。     

反义IGF-Ⅰ基因转染的黑色素瘤苗抗黑色素肿瘤转移作用的研究

应用反义技术修饰的瘤苗进行肿瘤治疗是一条值得探讨的新途径。本研究将反义ＩＧＦ－Ⅰ基因转染的黑色素瘤细胞作为瘤苗联合ＩＬ－２治疗实验性肺转移荷瘤小鼠及观察其生存期，结果发现反义ＩＧＦ－Ⅰ基因转染的瘤苗可使实验性荷瘤鼠肺部肿瘤转移结节数减少和荷瘤鼠生存期延长，并显著高于亲本瘤苗治疗的效果，而辅以ＩＬ－２治疗，效果更加显著。本研究表明反义ＩＧＦ－Ⅰ基因转染的黑色素瘤苗具有一定的抗黑色素肿瘤能力，ＩＬ－２对其抗该瘤转移作用有增强效应。     

白细胞介素4基因转移的肿瘤细胞体内增强巨噬细胞功能的实验研究

观察了小鼠接种高分泌ＩＬ－４的黑色素瘤细胞后腹腔内巨噬细胞功能的变化。荷瘤小鼠腹腔内巨噬细胞杀伤性在荷瘤后第４天及第１２天出现两个高峰；荷瘤后第１５天小鼠腹腔内巨噬细胞的吞噬能力及ＭＨＣⅡ类抗原的表达增强，抗原提呈能力增高；荷瘤后第４天及第１２天腹腔内巨噬细胞经诱导的ＩＬ－１水平出现两个高峰，经诱导的ＴＮＦ水平变化不明显。此实验结果表明，高分泌ＩＬ－４的黑色素瘤细胞体内生长受抑制的原因之一是ＩＬ－４基因的导入及ＩＬ－４的分泌使体内巨噬细胞的抗原提呈能力增强及杀伤活性的显著提高，因而使机体抗肿瘤免疫功能得以增强。     

IFN—γ对IL—2基因转染B16细胞治疗肿瘤的增强作用

本实验在完成ＩＬ－２基因转染瘤苗的基础上，探索了重组ＩＦＮ－γ对其效果的增强作用。结果表明，ＩＬ－２基因转染使Ｂ１６细胞成瘤性显著降低；小鼠经ＩＬ－２基因修饰的Ｂ１６细胞免疫后，对接种的亲代Ｂ１６细胞有保护作用；ＩＬ－２基因转染的Ｂ１６细胞对接种亲代Ｂ１６细胞的小鼠有一定的治疗作用，与重组ＩＦＮ－γ联合应用后，治疗作用加强。上述结果表明，佐以合适的重组细胞因子，有可能提高单基因转染瘤苗的作用，是一条值得探索的途径     

白细胞介素4基因转移的肿瘤细胞体内增强巨噬细胞功能的实…

观察了小鼠接种高分泌ＩＬ－４的黑色素瘤细胞后腹腔内巨噬细胞功能的变化，荷瘤小鼠腹腔内巨噬细胞杀伤性在荷瘤后第４天及第１２天出现两个高峰，荷瘤后第１５天小鼠腹腔内巨噬细胞的吞噬能力及ＭＨＣⅡ类抗原的表达增强，抗原提呈能力增高，荷瘤后第４天及第１２天腹腔内巨噬细胞经诱导的ＩＬ－１水平出现两个高峰，经诱导的ＴＮＦ水平变化不明显，此实验结果表明，高分泌ＩＬ－４的黑色素瘤细胞体内生长受抑制的原因之一是ＩＬ－     

白细胞介素3基因疗法和白细胞介素6基因疗法的联合造血调控作用

研究了成纤维细胞介导的ＩＬ－３基因疗法，ＩＬ－６基因疗法以两者联合后对造血系统的影响。结果发现，单用ＩＬ－基因疗法的小鼠白细胞总数，中性粒细胞，骨髓ＣＦＵ－ＧＭ，ＣＦＵ－ＭＫ等显著上升，但血小板上升程度经，单用ＩＬ－６基因疗法的小鼠血小板，中性粒细胞，骨髓ＣＦＵ－ＧＭ，ＣＦＵ－ＭＫ上晚为显著。     

白细胞介素10基因转移抑制肾小球系膜细胞诱生炎症细胞因子

目的：通过建立白细胞介素１０（ＩＬ－１０）的重组逆转录病毒载体基因转移系统,观察ＩＬ－１０对脂多糖（ＬＰＳ）诱导的大鼠肾小球系膜细胞（ｇｌｏｍｅｒｕｌａｒｍｅｓｅｎｇｉａｌｃｅｌ,ＧＭＣ）中细胞因子的产生及其基因表达的影响。方法：通过构建的重组逆转录病毒载体ｐＬＸ（ＩＬ－１０）ＳＮ将外源基因ＩＬ－１０转移至大鼠ＧＭＣ：（１）应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）,反转录聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）和ＥＬＩＳＡ检测ＩＬ－１０基因的整合和表达;（２）以ＲＴ－ＰＣＲ观察ＩＬ－１０基因转移对ＬＰＳ诱导的ＧＭＣ肿瘤坏死因子－α（ＴＮＦ－α）的ｍＲＮＡ表达的影响,以ＥＬＩＳＡ测定白细胞介素－１β（ＩＬ－１β）和ＴＮＦ－α的蛋白质表达。结果：外源性ＩＬ－１０基因已整合到靶细胞染色体ＤＮＡ并有效地表达,它能抑制ＬＰＳ诱生ＧＭＣ过度产生ＩＬ－１β,ＴＮＦ－α。结论：外源性ＩＬ－１０基因可以转移到ＧＭＣ并稳定表达,它能抑制ＧＭＣ炎症效应中细胞因子的产生及其基因表达。     

TNF-α基因和IL-2基因共转染的肿瘤细胞体内致瘤性和瘤苗效果的观察

为了探讨两种具有协同作用的细胞因子共转染的瘤苗是否具有更好的抗肿瘤作用，我们将ＴＮＦ－α基因和ＩＬ－２基因转染Ｂ１６黑色素瘤细胞，获得同时分泌ＩＬ－２和ＴＮＦ的Ｂ１６细胞克隆株（命名为Ｂ１６－ＩＬ－２＋－ＴＮＦ－α＋细胞），并观察了其体内致瘤性和瘤苗效果。结果发现，Ｂ１６－ＩＬ－２＋－ＴＮＦ－α＋细胞的体内致瘤性显著低于ＴＮＦ－α基因或ＩＬ－２基因单独转染的Ｂ１６细胞；而且，事先接种Ｂ１６－ＩＬ－２＋－ＴＮＦ－α＋细胞的小鼠能抵抗再接种的野生型肿瘤细胞的生长，表明其具有更佳的瘤苗效果。     

应用IL—2和IL—3联合基因疗法对骨髓移植后造血及免疫…

以大剂量化疗后骨髓功能严重损伤再给予同基因骨髓移植的小鼠为实验模型，动态观察了联合应用成纤维细胞介导的ＩＬ－２基因疗法和ＩＬ－３基因疗法对同基因骨髓移植后实验小鼠骨髓造血免疫功能重建的影响。结果表明，ＩＬ－２基因疗法对造血重建无明显效果，ＩＬ－３基因疗法对免疫重建无明显作用，但联合应用ＩＬ－２基因疗法和ＩＬ－３基因疗法能显著加快骨髓ＣＦＵ－ＧＭ、ＣＦＵ－ＭＫ及ＣＦＵ－Ｅ恢复过程及提高骨髓细胞ＮＫ、     

腺病毒介导IFN—γ基因转染的瘤苗体内抗肿瘤转移作用

通过缺陷型腺病毒载体的介导将小鼠ＩＦＮ－γ基因转染入肿瘤细胞，经５０００ｒａｄ＾６０Ｃｏ照射后射备成瘤苗，观察其对实验性肺转移荷瘤小鼠的治疗效果，并对其治疗作用的免疫要现进行了研究。结果显示：经ＩＦＮ－γ基因转染瘤苗治疗后小鼠脾淋巴细胞诱导的ＣＴＬ，ＬＡＫ及腹腔巨噬细胞杀伤活性均明显升高。     

应用IL-2和IL-3联合基因疗法对骨髓移植后造血及免疫功能重建的影响

以大剂量化疗后骨髓功能严重损伤再给予同基因骨髓移植的小鼠为实验模型，动态观察了联合应用成纤维细胞介导的ＩＬ－２基因疗法和ＩＬ－３基因疗法对同基因骨髓移植后实验小鼠骨髓造血免疫功能重建的影响。结果表明，ＩＬ－２基因疗法对造血重建无明显效果，ＩＬ－３基因疗法对免疫重建无明显作用，但联合应用ＩＬ－２基因疗法和ＩＬ－３基因疗法能显著加快骨髓ＣＦＵ－ＧＭ、ＣＦＵ－ＭＫ及ＣＦＵ－Ｅ恢复过程及提高骨髓细胞ＮＫ、ＬＡＫ活性和ＣｏｎＡ刺激的骨髓细胞增殖反应。提示联合应用成纤维细胞介导的ＩＬ－２和ＩＬ－３基因疗法能显著加快骨髓移植后造血及免疫重建过程，从而有可能提高骨髓移植成功率。     

反义IGF—I基因转染的黑色素瘤苗抗黑色素肿瘤转移作…

反应反义技术修饰的瘤苗进行肿瘤治疗是一条值得探讨的新途径。本研究将反义ＩＧＦ－Ｉ基因转染的黑色素瘤细胞作为瘤苗联合ＩＬ－２治疗实验性肺转移荷瘤小鼠及观察其生存期，结果发现反义ＩＧＦ－Ｉ基因转染的瘤苗可使实验性荷鼠肺部肿瘤转移结节数减少和荷瘤鼠生存期延长，并显著高于亲本瘤苗治疗的效果，而辅以ＩＬ－２治疗，效果更加显著。本表明反义ＩＧＦ－Ｉ基因转染的黑色素瘤苗具有一定的抗黑色素肿瘤能力，ＩＬ－２对其抗     

联合应用IL-2及IL-4基因转染瘤苗对实验性肺转移肿瘤的治疗作用

将IL—2基因转染的高分泌IL—2的B16黑色素瘤细胞株(B2)及IL—4基因转染的高分泌IL—4的B16黑色素瘤细胞株(B4)制备成新型瘤苗,用以治疗实验性肺转移荷瘤小鼠,并辅以低剂量环磷酰胺,结果表明,荷瘤小鼠存活期明显延长;肺部转移结节数明显减少;两种瘤苗联合治疗后的疗效较单独使用明显,当辅以低剂量环磷酰胺时治疗效果更加明显。体内免疫功能检测表明,经两种瘤苗联合治疗的荷瘤小鼠脾细胞NK及CTL杀伤活性升高得更加明显,但对LAK活性及腹腔巨噬细胞杀伤活性无明显协同增强作用;脾细胞经诱导后产生的细胞因子中,IL—2含量有所升高。