人外周血和扁桃体中Tfh细胞与其他Th细胞亚群之间的关系

目的比较观察人外周血和扁桃体Tfh细胞的表型以及与Th1、Th17、Th22细胞亚群之间的关系。方法分离正常人PBMC及扁桃体单个核细胞,利用anti-CD3+anti-CD28或PMA+ionomycin刺激后,采用ELISA和流式细胞术(FCM)检测其细胞因子的产生,分析Tfh与Th1、Th17、Th22细胞亚群之间的关系。结果与PBMC中CD4+T细胞不同,扁桃体CD4+T细胞高表达CXCR5和CD45RO,低表达CCR7和CD62L;与PBMC中CD4+T细胞相比,扁桃体CD4+T细胞IL-21和IL-17产生水平较高,IFN-γ产生水平较低,IL-22水平无显著差异;外周血和扁桃体CD4+T细胞中均存在一定比例的IL-21+IL-17+双阳性、IL-21+IL-22+双阳性、IL-21+IFN-γ+双阳性细胞,IL-21单阳性细胞在扁桃体CD4+T细胞中所占比例明显高于外周血;外周血和扁桃体CD4+CXCR5+细胞除表达IL-21外,还表达IL-17、IL-22和IFN-γ。结论扁桃体中存在较多数量的Tfh细胞,大多数Tfh细胞是不同于Th1、Th17和Th22的细胞亚群。     

1例新发TYK2基因突变患儿临床分子特征及免疫学表型研究

目的报道1例新发TYK2基因突变患儿的临床特征、诊治经过及免疫学表型,同时总结文献已报道的9例TYK2缺陷患者资料,期望促进对本病的早期识别及规范治疗。方法总结临床资料,采用Sanger测序验证本例患儿二代测序报告所示突变位点,预测错义突变对TYK2蛋白结构及功能的影响;利用蛋白印迹法检测TYK2蛋白表达,流式细胞术检测淋巴细胞各亚群分布以及NK细胞表达CD107a水平。结果此前报道的TYK2缺陷患者临床表现多变,以卡介苗病、反复感染、湿疹为主,部分可伴有血清IgE水平升高或嗜酸性粒细胞增多。因此是否将本病归为高IgE综合征存在很大争议。本例患儿TYK2基因发生复合杂合突变(c.3041TC,c.1253CA),TYK2蛋白表达缺失,血清IgE水平正常,但外周血嗜酸性粒细胞比例增高;外周血CD4~+T细胞、初始CD4~+T细胞比例减少,过渡型B细胞、中心记忆CD4~+T细胞及效应记忆CD4~+T细胞比例升高;Tfh细胞比例稍增高,Tfh1比例增高,Tfh2与Tfh17比例稍降低;同时,患儿NK细胞表达CD107a水平下降。结论本研究报道了TYK2基因新发突变1例,对于卡介苗接种后出现异常反应(特别是严重的卡介苗病)、有反复胞内菌及病毒感染、湿疹史的患儿应疑诊此病,二代测序有助于快速明确诊断。此例患儿外周血CD4~+T细胞比例下降,且各亚群分布异常,NK细胞表达CD107a水平下降,具体机制需进一步明确。     

滤泡辅助性T细胞及其可塑性的研究进展

初始T细胞受到抗原刺激后,在不同细胞因子的调控下,分化成不同的CD4+T细胞亚群,主要包括Th1、Th2、Th17、Treg和Tfh细胞。滤泡辅助性T细胞(follicular helper T cell,Tfh)是一类新的CD4+T细胞亚群,参与生发中心(germinal center,GC)形成,促使B细胞分化成浆细胞和记忆B细胞,进而在产生抗体的过程中发挥着重要作用。研究发现,Tfh细胞与其他辅助性T细胞在表达转录因子和产生细胞因子上具有重叠性,并且具有向其他CD4+T细胞亚群分化的潜能。本文主要综述Tfh细胞分化的相关分子以及表现Tfh细胞可塑性的证据。     

流式细胞术鉴定人外周血滤泡辅助性T细胞

目的:用免疫荧光染色和流式细胞术(FCM)鉴定正常人外周血单个核细胞(PBMC)中滤泡辅助性T(Tfh)细胞, 以便对其功能进行进一步研究.方法:密度梯度离心法分离人PBMC, 采用不同荧光素标记的抗CXCR5、 CD4及CD19抗体进行染色FCM分析, 鉴定出表型为CD4+CXCR5+的T细胞亚群.结果:外周血可以检测到CD4+CXCR5+T细胞亚群, 占CD4+T淋巴细胞百分比为(11.09±0.38)%, MFI值为25.78±0.72, 低于B细胞膜表面CXCR表达水平(MFI值为99.6±8.1).结论:健康人外周血存在一定比例的Tfh细胞, 应用FCM可以成功鉴定Tfh细胞, 为进一步研究其功能提供了良好的技术平台.     

滤泡辅助性T细胞的研究进展

滤泡辅助性T细胞（Tfh）是最近发现的CD4^＋辅助性T淋巴细胞亚群,其作用是辅助B细胞的抗体产生.其发生、分化和功能均独立于以往的Th1、Th2和Th17细胞,是体液免疫反应的关键.转录因子Bcl-6和Blimp-1在Tfh细胞的分化中起着关键的、相互拮抗的作用,调节趋化因子受体、表面分子和细胞因子等表达,这些因子对Tfh细胞募集和B细胞辅助功能非常重要.     

滤泡辅助性T细胞及其与自身免疫性疾病关系的研究进展

滤泡辅助性T(Tfh)细胞是一类新的CD4+T细胞亚群,主要功能是辅助B细胞参与体液免疫。与其他亚群的CD4+T细胞如Th1、Th2和Th17细胞相比,对于Tfh细胞的发育过程及其功能的了解还不是很清楚;此外,对于人体中Tfh细胞的发育以及与自身免疫性疾病的关系也不是很清楚。然而,近几年来通过对系统性红斑狼疮小鼠模型以及患有系统性自身免疫性疾病的患者的研究表明Tfh细胞对致病性自身抗体的产生发挥着重要调控作用。本文主要综述了Tfh细胞的发育、功能以及Tfh细胞异常与自身免疫性疾病的关系。     

间充质干细胞对不同刺激条件下Th1/Th2细胞比值的影响

目的探讨间充质干细胞(MSC)对不同刺激作用下T淋巴细胞向Th1及Th2亚群转化的影响。方法将MSC植入24孔板中,在第3天加入经佛波脂(PMA)及离子霉素(ionomyc in)刺激的T淋巴细胞,或者按照不同比例将MSC加入双向混合淋巴细胞培养体系中,用流式细胞术分析各组T淋巴细胞亚群和内因子IL-4、IFN-γ的分泌变化情况,从而间接了解Th1及Th2亚群的改变。结果对于共刺激作用下单独培养的T细胞,MSC能轻度抑制其Th1细胞的转化;而在混合淋巴细胞培养体系(MLC)中,MSC能够明显抑制其中的CD8 T细胞亚群和Th1细胞,轻度提高Th2细胞比率。结论MSC在体外能抑制CD8 T细胞(CTL)和Th1细胞,升高Th2细胞。所以在临床上可能有减轻移植后急性移植物抗宿主病(aGVHD)的发生,而保留移植物抗白血病(GVL)的潜力。     

滤泡辅助T细胞的分化和功能及其在疾病中的作用

CD4~+辅助T(Th)细胞在抗原的刺激下会分化为不同的效应T细胞亚群。体液免疫应答具有很好的持久性,持久性的维持依赖于一群特殊的CD4~+T细胞提供辅助,即滤泡辅助性T(Tfh)细胞。树突状细胞(DC)提呈抗原并促进活化的Tfh前体细胞迁移到B细胞滤泡区域分化为成熟的Tfh细胞,辅助生发中心(GC)形成以及浆细胞和记忆性B细胞的分化,从而形成完整的体液免疫应答。Tfh细胞分化和功能上的失调均会导致多种疾病的发生。本文主要从Tfh细胞分化、功能以及在疾病中的作用三个方面对Tfh细胞的研究进展进行阐述。     

环孢素A抑制正常人外周血记忆CD4~＋T细胞产生IL-22的实验研究

目的探讨环孢素A（CsA）是否能够抑制正常人CD4＋T细胞产生白细胞介素22（IL-22）。方法使用密度梯度离心法制备正常人外周血单个核淋巴细胞（PBMCs）,加入PMA＋Inomycin刺激细胞后,做细胞内细胞因子染色,流式细胞仪检测正常人外周血PBMCs中产生IL-22的T细胞亚群,以及IL-17-IFN-γ-IL-22＋CD4＋T细胞亚群（Th22）;PMA＋Inomycin刺激正常人PBMCs,同时加或不加环孢素A（CsA）后,做细胞内细胞因子染色,流式细胞仪检测IL-22＋CD4＋T细胞和IFN-γ＋CD4＋T细胞的比例,以及IL-22＋CD4＋T细胞表达记忆表型分子CD45RO情况。结果正常人外周血中产生IL-22的T细胞以CD4＋T细胞为主,且存在仅分泌IL-22,不分泌IL-17和IFN-γ的Th22亚群;CsA以剂量依赖方式抑制CD4＋T细胞产生IL-22和IFN-γ;CsA抑制外周血PBMCs中记忆CD4＋T细胞产生IL-22。结论 CsA能抑制正常人外周血中记忆CD4＋T细胞产生IL-22。     

人外周血CD4~+ IL-21~+记忆T细胞的特征

目的:探讨人外周血中白细胞介素21(IL-21)的产生细胞及其特征。方法:分离人外周血单个核细胞(PBMC),分为不刺激或anti-CD3(OKT3)、OKT3+anti-CD28、PMA+ionomycin刺激四个组,流式细胞术(FCM)检测产生IL-21的细胞亚群。PMA+ionomycin刺激PBMC、纯化CD4+、CD4+CD45RA-、CD4+CD45RA+细胞、脐带血单个核细胞(CB-MC),FCM分析产生IL-21细胞的表型特征和IL-21与Th1、Th2、Th17和Th22细胞因子之间的关系。结果:与OKT3、OKT3+anti-CD28相比,PMA+ionomycin能诱导最高量的IL-21产生。产生IL-21的主要细胞为CD4+T细胞,少数CD8+T细胞。CD4+IL-21+T细胞表达CD45RO,不表达CD45RA,其中部分细胞表达CCR6、CCR7或CXCR5。CD4+CD45RA-细胞表达IL-21远高于CD4+CD45RA+细胞。进一步研究表明,PBMC产生IL-21,而CBMC不产生。此外,大约24%的CD4+IL-21+细胞表达IFN-γ,小于10%CD4+IL-21+细胞表达IL-4、IL-17或IL-22。结论:人PBMC在多克隆刺激的条件下,可以诱导IL-21的产生。产生IL-21的主要细胞亚群具有记忆CD4+T细胞的表型。其中一部分CD4+IL-21+T细胞的表型独立于Th1、Th2、Th17和Th22细胞亚群。     

滤泡辅助性T细胞分化及其在HIV感染中的变化

T细胞辅助B细胞是适应性免疫和免疫记忆生成的基础.滤泡辅助性T细胞(Tfh)是辅助B细胞的主要T细胞亚群,其主要转录因子为Bcl6.Tfh细胞的明显特征为表达CXCR5、程序性死亡因子-1(PD-1)、IL-21和ICOS,同时Blimp-1表达下调.在HIV-1慢性感染过程中Tfh细胞累积增多,从而导致B细胞调节异常,发生功能性改变,这可能是HIV-1逃避体液免疫应答的根源.     

滤泡辅助性T细胞(T_(fh))的研究进展

T细胞辅助B细胞抗体的生成是体液免疫应答的中心环节.但直到最近,科学家们才对T细胞辅助B细胞的细胞及分子机制有了更清楚的认识.滤泡辅助性T细胞(T follicular helper cells,Tfh)是最近明确的一种新的CD4+T细胞亚群,其主要功能是辅助B细胞参与体液免疫.Tfh的表型和功能与其他CD4+T细胞亚群有所不同,包括趋化因子受体的表达(如CXCR5)、定位和迁移(Tfh存在于B细胞滤泡)及其辅助B细胞的功能.Tfh产生的细胞因子IL-21在Tfh功能中处于核心地位,通过与其受体IL-21R结合,可有效地刺激B细胞分化成抗体形成细胞.因此Tfh细胞相关分子(如ICOS或IL-21)的高表达或低表达,很可能与某些自身免疫性疾病或免疫缺陷疾病的发病有关.     

滤泡辅助性T细胞在原发性干燥综合征中的研究进展

滤泡辅助性T细胞(follicular helper T cell, Tfh)是辅助B细胞的主要CD4⁺T细胞亚群,其特点是表达转录因子B细胞淋巴瘤6(B-cell lymphoma 6,Bcl-6)以及趋化因子受体5(C-X-C chemokine receptor type 5,CXCR5)、诱导性共刺激分子(inducible co-stimulator, ICOS)、PD-1等表面分子和产生细胞因子IL-21。Tfh的分化是一个多步骤、多因素参与的过程。原发性干燥综合征(primary Sj?gren’s syndrome, pSS)是一种以外分泌腺局灶性淋巴细胞浸润为特点的全身性自身免疫性疾病。越来越多的研究表明,Tfh参与pSS的发病过程,是pSS的潜在生物标志物,一些治疗pSS的药物可影响Tfh从而缓解病情。该文对近年来Tfh在pSS中的研究进展进行综述。     

肺炎支原体肺炎患儿外周血T淋巴细胞表面IL-18Rα的变化及意义

目的：探讨肺炎支原体肺炎（MPP）患儿外周血T淋巴细胞表面IL-18Rα表达的意义。方法：采用流式细胞术测定35例MPP患儿外周血T淋巴细胞亚群（CD3/CD4/CD8）和T淋巴细胞表面IL-18Rα的表达水平,并与正常对照组比较。结果：MPP患儿T细胞亚群与正常对照相比,CD3^＋细胞百分率降低（P〈0.05）,51.4%的MPP患儿CD4^＋/CD8^＋在1.0-1.9的范围之外。急性期MPP组CD4^＋T和CD8^＋T淋巴细胞表面IL-18Rα的表达较正常对照组明显升高,有显著性差异（P〈0.01）;恢复期与对照组比较有显著性差异（P〈0.05）。恢复期表达水平下降,与急性期比较有显著性差异（P〈0.05）。T细胞亚群异常组与正常组相比,CD4^＋T和CD8^＋T细胞IL-18Rα表达明显增高（P〈0.01）,T细胞亚群正常组与正常对照无明显差别（P〉0.05）。结论：MPP患儿存在细胞免疫功能紊乱,外周血T淋巴细胞存在Th1/Th2失衡,急性期表现为Th1优势应答。     

CD4~+T细胞亚群在再生障碍性贫血中的作用及机制

再生障碍性贫血(AA)是一组多种原因引起的骨髓造血功能衰竭,主要表现为全血细胞减少的综合征。CD4+T淋巴细胞在AA发病中发挥更重要作用,AA患者中Th1细胞的极化、Th17细胞的高表达及调节性T细胞(Treg)数量的减少,都与AA的发病密切相关。Th1细胞的极化和Th17细胞/Treg比例的失衡,T细胞异常活化,导致骨髓造血细胞的凋亡,也是目前AA研究的热点之一。Th22细胞的增多、Th9细胞的双向性生物学效应、滤泡辅助T细胞的辅助作用及各亚群之间的相互作用,也都提示了CD4+T细胞亚群参与AA的发病。本文在分析各亚群生物学特性和功能的基础上,重点阐述CD4+T细胞亚群与AA发病关系的研究进展。     

滤泡辅助性T细胞与相关疾病研究进展

滤泡辅助性T细胞(Tfh)是近几年发现的一种新的T细胞亚群,与Th1细胞、Th2细胞、Th17细胞及调节性T细胞(Tr)相互促进或拮抗,维持免疫系统的正常生理功能,其主要功能是辅助B细胞分化、发育和促进体液免疫应答,当Tfh细胞数量或功能紊乱时可引起自身免疫病、免疫缺陷病、肿瘤或感染性疾病的发生或加重.     

中国恒河猴外周血淋巴细胞免疫表型及功能研究

目的通过研究中国恒河猴外周血淋巴细胞免疫表型及其功能, 为以恒河猴为模型的研究提供数据参考。方法通过优选抗体克隆和荧光配色, 确定了主要淋巴细胞亚群检测和T细胞功能检测Panel, 并用此方法分析15只健康中国恒河猴外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells, PBMCs)中T、B、NK等多种细胞亚群的比例, 以及在非特异性刺激条件下T细胞分泌细胞因子的能力。结果成功建立了两套多色流式Panel, Panel 1可同时检测细胞毒性T淋巴细胞(cytotoxic T-lymphocyte, CTL)、滤泡辅助性T细胞(follicular helper T cell, Tfh)、调节性T细胞(regulatory T cells, Treg)、B细胞和NK细胞等多种淋巴细胞亚群, Panel 2可检测多种T细胞亚群功能和免疫检查点分子的表达。中国恒河猴PBMCs中主要淋巴细胞亚群比例的平均值分别为T细胞(75.32±7.73)%、B细胞(13.22±7.50)%、NK细胞(0.88±0.48)%、Tfh细胞(0.73±0.27)%、Treg细胞...     

滤泡辅助性T细胞在免疫相关性血液病中的研究进展

T细胞亚群异常是导致免疫相关性血液病发病的重要因素,其发病机制与Thl／Th2、Thl7细胞、调节性T细胞（Treg）等辅助性T细胞异常有关。滤泡辅助性T细胞（Tfh）作为新近发现的辅助性T细胞具有辅助B细胞产生抗体的作用,其产生、分化和功能均不同于以往的Thl、Th2和Thl7等CD4＋T细胞。Tfh细胞及其相关分子的数量和／或功能异常在免疫相关性血液病的发病中发挥重要作用,有望成为其新的治疗靶点。     

C D4＋ T细胞亚群在类风湿关节炎中的研究

类风湿关节炎（ rheumatoid arthritis, RA）是由多因素共同作用引起的自身免疫性疾病,至今发病机制仍未完全阐明, CD4＋T细胞在RA的发生发展中发挥重要作用。早期发现Th1／Th2细胞后,新的CD4＋T细胞亚群不断被发现,包括Th17细胞、 Treg细胞、 Th22细胞、 Th9细胞和Tfh细胞。不同CD4＋T细胞亚群在RA中表达异常,深入研究不同亚群CD4＋T细胞在RA中的作用可为RA的发病机制提供线索。     

外周血循环滤泡辅助性T 细胞及IL-21 在银屑病中的表达及意义

目的:探讨外周血循环滤泡辅助性T 细胞(Follicular helper T cells,Tfh)及相关细胞因子IL-21 在银屑病患者中的表达水平及其与疾病活动度的关系。方法:收集38 例银屑病患者及32 例健康对照者,流式细胞术检测外周血循环CD4+CXCR5+ Tfh 和CD4+ CXCR5+ ICOS+ Tfh 细胞比例以及Th17 细胞比例;ELISA 检测血清IL-21 浓度;分析这些指标间及与银屑病疾病活动度评分PASI 间的相关性。结果:与健康对照者相比,银屑病患者外周血循环CD4+ CXCR5+ Tfh 和CD4+ CXCR5+ ICOS+Tfh 细胞比例更高,血清IL-21 浓度和Th17 细胞比例亦显著高于对照组(P<0.05);IL-21 浓度与CD4+ CXCR5+ Tfh 和CD4+CXCR5+ ICOS+ Tfh 细胞比例均显著正相关,而与Th17 细胞比例间无显著相关性(P>0.05);且CD4+ CXCR5+ ICOS+ Tfh 细胞比例和血清IL-21 与银屑病疾病活动度PASI 评分显著正相关,而CD4+ CXCR5+ Tfh 则与之无显著相关性(P>0.05)。结论:银屑病患者外周血循环Tfh 比例、IL-21 浓度上调与银屑病患者疾病活动度密切相关,提示Tfh 可能参与银屑病的发生发展过程,这一效应可能是通过分泌高水平IL-21 实现;IL-21 浓度与Tfh 细胞比例相关,而与Th17 细胞比例无相关性提示银屑病患者IL-21可能主要由Tfh 细胞分泌。