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1.
本研究调查了日本血吸虫感染的BALB/C小鼠脾细胞的IFN-γ和IL-4mRNA转录。于感染后0,3,5,8,10和12周摘取小鼠脾脏,将脾细胞置于含SEA或ConA的培养基中培养,然后提取脾细胞总RNA,通过逆转录后cDNA的扩增,分析IFN-γ和IL-4的mRNA水平。RNA模板同时进行β-actin的逆转录和扩增,扩增产物被用作IFN-γ和IL-4扩增的标准对照。在SEA或ConA诱导的未感染或感染3周小鼠脾细胞未检测到IFN-γ和IL-4mRNA逆转录PCR产物,感染5周和8周的小鼠脾细胞则可以观察到IFN-γ和IL-4mRNA的表达。与感染5周时相比,SEA刺激的感染8周小鼠脾细胞的IL-4mRNA转录显著增强。然而,在感染10周和12周小鼠,无论ConA或SEA都不能诱导IFN-γ或IL-4mRNA转录,显示这两种淋巴因子表达受到抑制。结果表明,SEA诱导的日本血吸虫感染小鼠脾细胞IFN-γ和IL-4基因转录存在着调节,这种调节可能与感染从急性期到慢性期的对血吸虫虫卵抗原的全身性免疫反应包括对肉芽肿形成的调控有关。  相似文献   

2.
定量测定IL—4和IFN—γmRNA的RT—竞争PCR法及其 …   总被引:2,自引:1,他引:1  
目的 建立测定IFN-γmRNA和IL-mRNA和RT-竞争PCR方法,探讨体外诱生条件并作临床初步应用。方法 用自行设计和制备的IFN-γ CDNA和IL-4 eDNA竞争模板,作RT-竞争PCR,对健康人经PMA和calcium ionophore(钙离子载体)诱导的PBMC、11例健康人和13例哮喘患者PBMC作IFN-γ mRNA和IL-4 mRNA定量测定。结果 在建立了准确的定量测定m  相似文献   

3.
β—内啡肽增强人外周血单个核细胞IL—1β,IL—6和 i …   总被引:3,自引:0,他引:3  
目的 研究β-内啡肽(β-endorphin,β-END)对人外周血单个核细胞(PBMC)细胞因子IL-1β、IL-6和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)的mRNA表达,探讨神经递质对免疫细胞产生细胞因子和iNOS的调节作用。方法 以不同浓度β-END体外作用于人外周血单个核细胞,随后提取细胞RNA。逆转录成cDNA,并分别和相应的上下游引物进行PCR扩增,扩增产物在含有溴化乙锭(EB)的琼脂糖凝胶上  相似文献   

4.
痢疾菌苗滴鼻免疫小鼠诱导不同部位淋巴组织的免疫应答   总被引:2,自引:2,他引:0  
目的 探讨痢疾菌苗滴鼻免疫后,小鼠不同粘膜部位和其它部位免疫应答的影响。方法将Balb/c小鼠随机分为3组,每组15只。舰疾菌苗株 TIM-2117或 FS-5416,按 5×10~6、1×10~7、4×10~7和4×10~7CFU/只滴鼻跟 Balb/c小鼠4次涧隔两 wb。分离鼻相关淋巴组织(NALT)、鼻通道(NP)及脾、小肠的PP结淋巴细胞。一部分细胞采用流式细胞术检测淋巴细胞表型的变化;另一部分细胞与全菌破碎抗原共培养,于不同时间点取出,提取RNA做RT-PCR。结果两株菌苗经鼻内免疫后,NAL、NP和PP结的淋巴细胞中CD3T细胞显著增加,其中以CD4+T细胞增加为主。TSM-2117株免疫组的脾细胞中,B220+细胞显著增加;而FS-5416株免疫组的脾细胞中,CD3+T细胞显著增加。免疫小鼠的NALT、NP和PP结淋巴细胞,在体外经抗原刺激后,均在不同时间出现IFN-γ和IL-4mRNA的表达,TGF-β mRNA的表达在免疫前后无明显变化。结论痢疾菌苗经鼻粘膜免疫,可诱导不同粘膜部位及全身免疫应答的产生。  相似文献   

5.
I—4在支气管哮喘发病中的作用研究   总被引:2,自引:0,他引:2  
研究IL-4在促使支气管哮喘发病中的作用。方法用ELISA方法检测39例支气管哮产妇和46例正常产妇新生儿脐血中IL-4、IFN-γ,sIL-2R和总IgE含量,并计数脐血嗜碱性粒细胞数,同时用免疫磁珠纯化脐血T淋巴细胞和嗜碱性粒细胞,以RT-PCR和ELISA方法检测上述细胞刺激后表达IL-4mRNA和IFN-γmRNA以及其释放的蛋白质。结果哮喘脐血组IL-4、INF-γ和sIL-2R含量和哮  相似文献   

6.
为探讨人疱疹病毒6型(HHV-6)感染对单核/巨噬细胞功能的影响,用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和双抗体夹心ELISA法检测IL-10及IL-12的产生。HHV-6诱导单核细胞、THP-1细胞表达及产生IL-10和IL-12。细胞因子mRNA动力学观察显示IL-12随IL-10mRNA积累而减少,用抗人IL-10的单克隆抗体阻断HHV-6诱导的内源性IL-10,IL-12mRNA表达和因子产生明显增加,提示内源性IL-10抑制IL-12产生。在HHV-6感染培养中加入IFN-γ,IL-12基因表达随IFN-γ浓度而增加,IL-10mRNA测减少,IL-12和IL-10因子测定结果亦明显增加或降低,表明IFN-γ在转录水平调节HHV-6诱导的IL-12和IL-10产生,其机理可能主要与IFN-γ抑制内源性IL-10有关。  相似文献   

7.
用AChR加CFA免疫大鼠后,Lewis大鼠出现典型的临床肌无力,而WistarFurth(W.F)大鼠不出现任何症状。为阐明W.F大鼠对AChR耐受的机制,检测了表达IFN-γ、IL-4和TGF-βmRNA的MNC和肌肉AChR。结果表明,W.F大鼠免疫后第5、7周PILN中AChR诱导的IFN-γmRNA表达细胞数比Lewis大鼠低,TGF-βmRNA表达细胞数比Lewis大鼠高,肌肉AChR含量比Lewis大鼠高。提示IFN-γ和TGF-β与EAMG的发生有关,TGF-β上调可抑制IFN-γmRNA表达,减少肌肉AChR丢失,进而预防和抑制EAMG发生  相似文献   

8.
北芪对老龄机体细胞因子产生影响的实验研究   总被引:4,自引:1,他引:3  
本文以15月龄昆明鼠和60~72岁老龄人为对象,采用生物学活性检测法观察了北芪对老龄鼠脾细胞受ConA刺激后产生IL-2,TNF及IFN-γ水平的影响,采用ELISA双抗体夹心法检测了老龄鼠脾细胞上清中sIL-2R含量,实验结果证明老龄机体IL-2,TNF和IFN-γ分泌功能下降,sIL-2R水平增高,服用北芪后明显地提高了老龄机体的IL-2,TNF和IFN-γ水平,降低了sIL-2R水平,进而证  相似文献   

9.
胸腺基质细胞的抗原提呈作用   总被引:2,自引:0,他引:2  
目的 研究胸腺基质细胞的抗原提呈能力。方法 应用OVA-特异的、受I-A^d分子识别限制的辅助T细胞杂交瘤(3DO.18.3)识别提呈的OVA的CNBr水解片段而被活化后产生IL-2,测定IL-2活性来分析胸腺基质细胞的抗原提呈作用。结果IFN-γ能促进MTECI和MTSC4表达I-A^d分子,并促进MTSC4表达B7-1分子。经IFN-γ作用后,MTEC1和MTSC4均有抗原提呈能力,MTSC  相似文献   

10.
以重组人IL-1免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞653融合,得到一组分泌抗人重组IL-1单克隆抗体的杂交瘤细胞。对其中的3株 YA133、YA140和YA163进行了初步鉴定,抗体类别为IgG,亚类均为IgG1,免疫转印显示,3株抗体均能特异性地识别分子量为17.5kD的IL-1蛋白条带,ELISA法证明与其它细胞因子如:IL-2、IL-6、TND-α,IFN-γ和GM-CSF均无  相似文献   

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