提高免疫组化染色质量的相关处理和操作

恰当的组织处理是做好免疫组化染色的先决条件,也是决定染色成败的内部因素[1].在组织细胞准备过程中,不仅要求保持组织细胞形态的完整,更需要保持组织或细胞内的抗原,使之不受损失或弥散,防止组织自溶.很显然,在一张组织或细胞已坏死、抗原已丢失的材料上,再好的技术和抗体也难以成功染色.本文就组织标本及时取材、固定、组织脱水和包埋、切片以及免疫组化规范操作等过程进行分析与讨论,旨在与技术人员一起学习交流,以提高免疫组化染色的质量,为病理诊断提供有力保证.     

非小细胞肺癌组织中Midkine蛋白表达上调

Midkine(MK)表达与癌发牛和生长有密切关系[1].然而,目前国内外关于MK与非小细胞肺癌(non-small cell lungcancer,NSCLC)发生与发展的研究报道极少,且结果也不尽一致.目前,新鲜冷冻切片已广泛应用于免疫组化研究,且丙酮或甲醛固定的冷冻切片已成为评价抗原修复在甲醛固定、石蜡包埋组织切片中免疫组化染色效果的标准.     

FineFix固定液与福尔马林固定液对组织保存及固定的比较

随着石蜡切片、免疫组化、特殊染色以及分子遗传学分析在病理诊断上的普遍应用,对标本组织处理要求越来越严格.固定是标本处理过程中的重要环节,如果固定液选择不当、浓度不均、固定时间与温度不合适以及固定液过少等均会使组织固定不良而影响制片质量、免疫标记及分子生物学检测结果,从而影响病理诊断.福尔马林是一种有毒、致敏及致癌物,废液处理成本较高,经其固定的组织抗原蛋白的氨基与醛基交联形成羧甲基封闭抗原决定簇,使免疫组化着色效果减弱[1].本实验采用FineFix固定液(以下简称FF)与福尔马林液固定的组织进行对比,经FF固定的组织形态结构完整,尤其在提取DNA和RNA的质和量上具有明显的优越性[2].     

即用型抗体再稀释在全自动免疫组化染色中的应用

全自动免疫组化染色仪使实验室技术人员从繁琐的手工操作中解放出来,大大提高了免疫组化的工作效率,由于其都有相应的加强二抗相匹配,所以染色强度和染色阳性率均相应提高[1].即用型抗体的优点在于使用方便,一般不需要使用者重新摸索稀释的比例[2].但在实际工作中我们发现部分即用型抗体在全自动免疫组化染色仪上染色后组织切片背景有着色,因此我们尝试把即用型抗体再稀释后,再进行全自动免疫组化染色,取得较为满意的效果.     

不同固定时间和烤片时间对乳腺浸润性导管癌HER-2、p16免疫组化染色的影响

正免疫组化是应用抗原与抗体特异性结合的原理,为肿瘤的鉴定、来源、分型及发现微小转移灶的研究提供重要的分析诊断方法[1]。免疫组化操作步骤繁琐、操作过程影响因素较易误诊。一方面,由于组织固定不当引起的。固定不当可引起组织结构发生自溶和定位不确[2]。另一方面,烤片时间也常常影响免疫组化染色效果[3]。本实验拟通过比较86例乳腺浸润性导管癌组织在不同固定及烤片时间下进行HER-2、p16蛋白免疫组化染色的差异,为乳腺浸润性导管癌组织HER-2、p16蛋白免疫组化染色标准化提供实验依据。     

单纯微波固定在组织制片中的应用

在组织制片过程中，组织的正确固定具有重要意义，适当而完好的固定是优良组织切片的基础，特别在免疫组化染色时尤为重要。良好的固定能保存细胞内的物质接近其生活状态时的形态和位置，尽量减少抗原成分弥散或丢失，以保证染色的特异性及敏感性。在临床病理及科研工作中，又常需要我们在短时间内制作出高质量的切片，为此笔者尝试利用微波技术进行组织固定，探索单纯微波固定在组织制片中的应用，以期缩短制片时间，提高制片染色质量。     

自动免疫组化仪的使用体会

免疫组化技术在病理诊断中的应用日益广泛,并已成为常规病理诊断中不可缺少的重要手段.良好的免疫组化制片是正确判断染色结果的前提和基础.但由于免疫组化染色有很多步骤,每一步都有可能影响染色结果[1],对相同的抗体会因为不同的实验室操作程序、操作人员素质的高低而导致结果有所差异[2],因此正确使用自动免疫组化仪,将免疫组化的操作标准化,达到免疫组化的质量控制要求,是病理技术质量控制的必然趋势.本文通过摸索实践,总结出全自动免疫组化染色仪的使用体会,介绍如下.     

探讨外院会诊玻片行全自动免疫组化仪染色异常的优化方法

正免疫组化技术可以检测细胞来源、辨认细胞产物及了解分化程度等,为病理诊断和鉴别诊断提供客观依据,并为疾病治疗提供指导。在精准医疗时代,全自动免疫组化仪以其自动化程度高、操作简便、染色流程标准化等特点,在病理科广泛应用~([1-2])。但全自动免疫组化仪染色也会遇到组织玻片非特异染色、染色偏弱或无法着色等问题~([3]),其中以外院送检的会诊组织在罗氏Ventana免疫组化染色时最为常见。     

高温高压处理在消除双重免疫组化染色交叉反应中的应用

双重免疫组化染色可以在同一张组织切片上清晰地观察到2种不同抗原的表达,更便于病理医生进行观察及诊断.然而,在进行双重免疫组化染色的时候,常常会因为后一种免疫染色所用的抗体系统可能与前一种染色所用的抗体系统发生交叉反应,影响观察,失去双重免疫组化染色的准确性和意义[1].     

延长Bench mark VENTANA空气滤清器使用寿命的改进方法

Bench mark VENTANA是一台由Roche公司推出的集免疫组化和cifsh分子染色的全自动高端染色仪器,全自动免疫组化仪现已在各大医院广泛应用[1].免疫组化与cifsh分子染色是现代临床病理治疗及预后治疗综合评分的重要指标,由于Bench mark VENTANA具有全智能化优点,制片结果清晰判定的稳定化更使其脱颖而出.实际工作中机器使用过程中会发现一些问题,本文就关于延长Bench mark VENTANA空气滤清器使用寿命的改进方法做如下介绍.