急性淋巴细胞白血病细胞β2整合素及L-选择素的表达与意义

目的和方法:研究急性淋巴细胞白血病(ALL)细胞粘附分子β₂整合素(CD11a、CD11b)及L-选择素(CD62L)的表达及其临床意义。用流式细胞仪检测45例ALL及25例正常人骨髓单个核细胞的CD11a、CD11b、CD62L表达。结果:①CD11a、CD11b在ALL细胞上表达均明显低于正常人,CD11b低表达的阳性率为100%,50%患者有CD11a低表达。而60%患者CD62L在ALL细胞上表达升高。②CD11a在B-ALL表达明显低于T-ALL表达,CD62L在B-ALL表达高于T-ALL。③浸润组CD11a表达高于非浸润组(P＜0.05)。④ALL完全缓解组CD11a、CD11b的表达在正常范围。结论:急性淋巴白血病细胞上存在多个粘附分子的表达异常,检测粘附分子有助于判断白血病细胞类型及疗效。     

急性白血病患者IL-6,TNF-α和sIL-6R含量及其与白血病负荷的相关性

应用生物学检则法,ELISA法和间接免疫荧光法分析了24例急性白血病患者外周血IL-6,sIL-6R和TNF-α的含量及其与白血病细胞负荷的相关性.结果显示:(1)急性白血病患者外周血IL-6,sIL-6R及TNF-α水平明显升高,其中急性B淋巴性白血病(B-ALL)的IL-6,sIL-6R及急性T淋巴性白血病(T-ALL)的TNF-α升高尤为明显;(2)B-ALL的IL-6,TNF-α及T-ALL的TNF-α水平与白血病细胞负荷有着较好的正相关性;而sIL-6R水平与白血病细胞负荷则无明显的相关.由此表明不同类型的白血病存在不同的有利于肿瘤细胞生长的生物因子微环境,这些生物因子及其受体的异常表达与白血病的发生发展相关.     

111例急性T淋巴细胞白血病免疫表型分析

选用一组抗人白细胞表面分化抗原单克隆抗体和基因探针,依靠间接免疫荧光技术、Ap-AAP桥联酶标免疫组化染色和分子杂交手段.对111例急性T淋巴细胞白血病(T-ALL)进行了免疫分型研究。本研究所观察到的T-ALL细胞表型绝大多数反映着正常胸腺细胞分化发育阶段或某些少见类型细胞的表型特征,亦有少数病例则无正常淋巴细胞相对应的表型,表明T-ALL细胞的高度异质性。对T-ALL表型的研究为今后深入探讨胸腺内淋巴细胞的分化成熟以及T-ALL发生学提供了良好的研究模式。     

脑脊液微管相关蛋白(tau蛋白)在急性淋巴细胞中枢神经系统白血病中表达及其意义

目的:为探讨脑脊液微管相关蛋白(tau蛋白)在急性淋巴细胞中枢神经系统白血病(CNSL)中表达及其意义.方法:分为CNSL患者组(25例)、急性淋巴细胞白血病(ALL)患者组(28例)和正常对照组(30例).分别用酶联免疫试验(ELISA)检测各组脑脊液tau蛋白水平.结果:发现CNSL组的脑脊液tau蛋白含量明显高于...     

急性淋巴细胞白血病融合基因表达特点分析

目的分析初诊急性淋巴细胞白血病(ALL)患者融合基因的表达情况, 进一步探讨融合基因阳性患者的实验室检查特点。方法回顾性分析2016年9月至2020年12月天津见康华美医学诊断中心1 994例初诊ALL患者的融合基因筛查结果, 同时对表达不同融合基因患者的基因突变筛查结果、免疫表型特点及染色体核型结果进行系统分析。结果 (1)1 994例ALL患者, 中位年龄为12岁(15 d至89岁)。44.3%(884/1 994)的ALL患者检测到15种不同的融合基因, 其表达呈现典型的"幂律分布"。(2)急性B淋巴细胞白血病(B-ALL)患者融合基因的阳性率显著高于急性T淋巴细胞白血病(T-ALL)患者(48.48%∶18.71%), B-ALL和T-ALL的融合基因分布具有重现性的特点, 交叉少见。(3)融合基因的表达高峰分别出现在<1岁、3～5岁和35～44岁;儿童患者融合基因的种类明显多于成人;MLL-FG、TEL-AML1及BCR-ABL1分别是婴儿、儿童和成人患者最常见的融合基因。(4)融合基因阳性ALL患者以伴随信号通路相关基因突变为主, 其中以NRAS和KRAS突变率最高;...     

急性淋巴细胞白血病患者外周血CD4+CD25+T调节细胞与白细胞介素2、白细胞介素10、转化生长因子β的检测*

背景：目前急性淋巴细胞白血病的病因尚未完全清楚,而CD4+CD25+T调节细胞对机体的免疫反应可能起着一定的调节作用。 目的：观察急性淋巴细胞白血病患者外周血CD4+CD25+T调节细胞分泌白细胞介素2、白细胞介素10及转化生长因子β的情况。 方法：采用密度梯度离心法分离22例B细胞系列的急性淋巴细胞白血病(B-ALL)患者、13例T细胞系列的急性淋巴细胞白血病(T-ALL)患者和18名正常人外周血单个核细胞。采用免疫磁珠法分离出CD4+CD25+T调节细胞进行培养,同时用双抗体夹心酶联免疫吸附试验检测细胞培养上清中白细胞介素2、白细胞介素10及转化生长因子β的水平。 结果与结论：B-ALL患者和T-ALL患者外周血CD4+CD25+T调节细胞培养上清中白细胞介素10和转化生长因子β水平显著高于正常人水平,而白细胞介素2水平显著低于正常人水平(P < 0.05);B-ALL和T-ALL患者的CD4+CD25+T调节细胞培养上清中3种因子表达差异无显著性意义(P > 0.05)。提示CD4+CD25+T调节细胞可能通过增加分泌白细胞介素10和转化生长因子β、减少分泌白细胞介素2等干扰抗肿瘤的免疫反应。      

过表达转录因子BACH2对人急性淋巴细胞白血病T淋巴细胞活力及凋亡的影响

目的:探讨BTB与CNC同源基因2(BACH2)过表达对人急性淋巴细胞白血病T淋巴细胞CCRFCEM活力和凋亡的作用。方法:将人急性淋巴细胞白血病T淋巴细胞CCRF-CEM分为3组:对照组、空载体组和BACH2过表达组,通过脂质体转染法将BACH2过表达载体转入BACH2过表达组的CCRF-CEM细胞。采用qPCR检测CCRF-CEM细胞和正常人外周血单个核细胞(PBMC)中BACH2的mRNA表达差异,CCK8法检测CCRF-CEM细胞活力,流式细胞术检测细胞凋亡水平,免疫荧光染色观察细胞中BACH2和细胞周期蛋白D3(cyclin D3)表达的变化,Western blot检测细胞中cyclin D3、Bcl-2及caspase-3的蛋白表达水平。结果:CCRF-CEM细胞中BACH2的mRNA表达水平显著低于PBMC(P0.05)。与对照组比较,BACH2过表达组CCRF-CEM细胞活力显著减弱(P0.05),凋亡率显著升高(P0.05),cyclin D3和Bcl-2表达水平显著降低(P0.05),而caspase-3表达水平显著升高(P0.05)。结论:人急性淋巴细胞白血病T淋巴细胞中BACH2呈低表达,过表达BACH2可抑制人急性淋巴细胞白血病T淋巴细胞的活力,并诱导其凋亡。     

多参数流式细胞术分析急性白血病免疫表型

为了探讨急性白血病免疫表型特征,利用流式细胞术三色荧光直接标记技术CD45/SSC多参数散点图设门方法,对162例急性白血病患者幼稚细胞表面及胞浆内分化抗原进行分析.结果提示:急性非淋巴细胞白血病(ANLL)患者主要表达CD117(94.9%)、CD13(88.5%)和CD33(70.5%);急性淋巴细胞白血病(ALL)患者中B-ALL主要表达cCD79a(100%)、CD19(92.1%),T-ALL表达cCD3(100%)、CD2(83.3%);ANLL伴淋系抗原表达(Ly ANLL),以CD7(56.2%)、CD19(31.2%)多见;ALL伴髓系抗原表达(My ALL),以CD13(88.9%)、CD33(27.8%)多见.为此用多参数流式细胞术三色荧光直接标记法进行免疫分型,对急性白血病的确诊、治疗和预后有重要的临床意义.     

急性淋巴细胞白血病患者GLUT3、TSLC1的表达及临床意义

目的:探讨急性淋巴细胞白血病患者葡萄糖转运蛋白-3(Glucose transporter 3,GLUT3)、肿瘤抑制物1(Tumor suppressor in lung cancer 1,TSLC1)的表达及临床意义.方法:选取2018年4月至2020年4月期间我院诊治的59例急性淋巴细胞白血病患者作为研究对象的研究组,另选取53例同期非急性淋巴细胞白血病患者作为研究对象的对照组.比较两组患者骨髓单个核细胞中GLUT3、TSLC1的表达情况,以及患者的不同临床病理特征对骨髓单个核细胞中GLUT3、TSLC1表达的影响.结果:研究组GLUT3阳性表达率高于对照组、TSLC1阳性表达率低于对照组(P<0.05);血红蛋白(异常)、白细胞计数(异常)者GLUT3阳性率明显高于血红蛋白(正常)、白细胞计数(正常)者(P<0.05).白细胞计数(异常)者TSLC1阳性率明显高于白细胞计数(正常)者(P<0.05).结论:在急性淋巴细胞白血病患者骨髓单个核细胞中GLUT3阳性表达率高、TSLC1阴性表达率高.     

T-ALL患者外周血TCRγ/δ T细胞的分布和增殖特点

目的:了解T细胞急性淋巴白血病(T-cell acute lymphocytic leukemia,T-ALL)患者外周血TCR Vγ和Vδ亚家族T细胞的分布和克隆情况。方法:利用RT-PCR扩增9例T-ALL患者和10例正常人外周血单个核细胞中3个TCR Vγ和8个Vδ亚家族基因的互补决定区3(CDR3),了解TCR亚家族Vγ和Vδ亚家族细胞的分布;阳性产物进一步经基因扫描分析CDR3长度,从而了解其克隆性。结果:9例T-ALL患者3个Vγ亚家族的表达率都明显低于正常人Vγ亚家族的表达率(P<0.05);Vδ亚家族中只有Vδ1和Vδ3的表达率低于正常人(P<0.05)。3例T-ALL患者出现克隆性增殖的γ/δT淋巴细胞。结论:T-ALL患者外周血TCR Vγ和部分Vδ亚家族谱系出现限制性表达和克隆性增殖。同时存在克隆性增殖γδ T细胞提示可能为γδ 白血病性T细胞克隆。     

Immunophenotyping of acute lymphoblastic leukemia in pediatric patients by three-color flow cytometric analysis.

Immunophenotyping of acute lymphoblastic leukemia (ALL) in children using three-color flow cytometry was carried out at Chulalongkorn Hospital, Bangkok, Thailand. Of 38 patients with acute lymphoblastic leukemia, 65.8% were identified as common ALL, 15.8% were B-ALL, and 18.4% were T-ALL. Of these 38 cases, there were 4 cases of infantile leukemia. Relapsed cases of leukemia were found most in B-ALL up to 3 out of 6 cases and to a lesser extent in T-ALL (1 of 7 cases) and c-ALL (1 of 25 cases). Our data showed the CD markers expression for common ALL (c-ALL) were CD19+/10+ (100%), CD20+ (24%), CD22+ (100%), HLA-DR+ (70.1%), and CD34+ (58.8%). CD markers expression for B-ALL were CD19+ (100%), CD20+ (33.3%), CD22+ (80%), and HLA-DR+ (80%). CD markers expression for T-ALL were CD3+ (42.9%), CD5+ (100%), CD7+ (85.7%). Myeloid aberrant expressions were found in c-ALL (25-37.5%), B-ALL (20%), and T-ALL (14.3%). The significance of the aberration is discussed. The immunophenotyping classification of ALL as c-ALL, B-ALL, and T-ALL is useful in prognosis and treatment.     

Inhibition of USP1 induces apoptosis via ID1/AKT pathway in B-cell acute lymphoblastic leukemia cells

Deubiquitylating enzyme ubiquitin-specific protease 1 (USP1) has been reported to be aberrantly overexpressed in cancers, and it plays a critical role in regulating various cellular processes, such as cell proliferation, apoptosis, and cell differentiation. However, the role of USP1 in B-cell acute lymphoblastic leukemia (B-ALL) remains largely undefined. USP1 expression in 30 newly diagnosed B-ALL patients was detected by real-time PCR and western blot. We found that USP1 was generally upregulated in the bone marrow cells derived from B-ALL patients. Knockdown of USP1 by siRNA decreased B-ALL cell growth and induced apoptosis. Similarly, pharmacological inhibition of USP1 by SJB3-019A significantly repressed cell proliferation and triggered B-ALL cell apoptosis. Finally, we found that inhibition of USP1 downregulated the expression of ID1 and p-AKT, and upregulated ID1 expression could reverse the suppressive effects of USP1 inhibitor in B-ALL cells. Taken together, these results demonstrate that USP1 promote B-ALL progression at least partially via the ID1/AKT signaling pathway, and USP1 inhibitors might be promising therapeutic application for B-ALL.     

急性淋巴细胞白血病的免疫分型及CD4+CD25+T调节细胞检测

背景：在急性淋巴细胞白血病发病过程中,CD4⁺CD25⁺T调节细胞对机体免疫反应可能起着一定的调节作用。 目的：观察急性淋巴细胞白血病患者的免疫分型及外周血CD4+CD25+T调节细胞的变化情况。 方法：采用流式细胞仪对35例急性淋巴细胞白血病患者进行免疫分型,并检测外周血CD4⁺CD25⁺T调节细胞的数目,与18名健康对照作比较。 结果与结论：急性B细胞淋巴细胞白血病22例,急性T细胞淋巴细胞白血病13例;22例急性B细胞淋巴细胞白血病中CD19的阳性表达率最高(100%),而13例急性T细胞淋巴细胞白血病中CD7阳性表达率最高(100%)。急性B细胞淋巴细胞白血病患者外周血CD4⁺CD25⁺T调节细胞和急性T细胞淋巴细胞白血病患者差异无显著性意义(P > 0.05),但均高于健康对照(P < 0.05)。表明急性B细胞淋巴细胞白血病中CD19阳性表达率最高,急性T细胞淋巴细胞白血病中CD7阳性表达率最高,同时急性淋巴细胞白血病患者外周血CD4⁺CD25⁺T调节细胞水平显著增高。     

八种粘附分子在急性淋巴细胞性白血病异常表达的研究

本文分析了３８名正常人和２５例急性淋巴细胞性白血病（ＡＬＬ）细胞表面ＣＤ１１ａ、ＣＤ１１ｂ、ＣＤ５４、ＣＤ４４等的表达。与正常人相比，肿瘤细胞上表达的ＣＤ１１ｂ、ＣＤ１８和ＣＤ５４降低，ＣＤ４４升高；ＣＤ１１ａ在Ｂ－ＡＬＬ和混合型ＡＬＬ表达减弱，在Ｔ－ＡＬＬ增强。３例急性淋巴细胞性白血病骨髓基质细胞表面ＣＤ５４、ＣＤｗ４９ｂ表达亦降低。认为粘附分子可能参与了急性淋巴细胞性白血病的发病机制。     

小儿急性白血病的免疫球蛋白重链基因VDJ区重组及其部分序列分析

在Ｓｏｕｔｈｅｒｎ印迹法分析的基础上用ＰＣＲ方法分析了２７例小儿急性白血病细胞的免疫球蛋白重链基因ＶＤＪ区的变化。６例未分化型白血病中５例有Ｖ＿Ｈ－Ｄ＿Ｈ－Ｊ＿Ｈ基因扩增带，提示已定向Ｂ系。１３例Ｂ系来源的白血病细胞中９例发生ＶＤＪ完全重排，４例Ｂ系来源和１例未分化型白血病ＰＣＲ无阳性扩增带而Ｓｏｕｔｈｅｒｎ印迹法有重排带。１例普通型白血病ＰＣＲ有阳性扩增带而Ｓｏｕｔｈｅｒｎ印迹法呈胚系。在１４例阳性病例中有１例出现二条扩增带呈双克隆性。１例Ｔ细胞性白血病和７例非淋系白血病均为阴性与ｓｏｕｔｈｅｒｎ印迹法结果一致，对２例未分化型，２例普遍型白血病进行顺序分析，发现它们的重排格局各不相同。     

急性淋巴细胞白血病患者FGFR3表达对循环内皮细胞增殖的影响

目的:了解急性淋巴细胞白血病(ALL)患者成纤维细胞生长因子受体3(FGFR3)表达对循环内皮细胞(CECs)增殖的影响。方法:通过RT-PCR法检测44例ALL患者骨髓中FGFR3 mRNA表达,分成FGFR3~+组及FGFR3~-组进行Kaplan-Meier生存分析。利用免疫磁珠结合流式细胞术分离计数CECs,对比两组CECs数量、表面抗原表达、生长曲线及集落生成数的差异。免疫荧光组化染色测定CECs表面FGFR3表达水平。结果:44例核型正常ALL患者中FGFR3 mRNA表达阳性率为43.2%,T-ALL组的FGFR3表达高于B-ALL组(P0.05)。19 d骨髓原始细胞比例≥5%的患者FGFR3表达升高(P0.05)。FGFR3阳性组的总生存率明显低于阴性组(P0.05)。分离出的CECs高表达CD31、CD144、VEGFR-2和CD146,基本不表达CD45。与FGFR3阴性组相比,阳性组CECs数量、CD133的阳性率及集落生成数均增多(P0.05)。体外培养中,FGFR3阳性组与阴性组相比,生长曲线3个时点上的细胞数差异有统计学显著性(P0.05)。19例ALL-FGFR3~+患者CECs表面均能检测到FGFR3表达,阳性率为29.00%±15.71%。结论:致癌基因FGFR3对ALL患者CECs的增殖有促进作用,可能具备了抗肿瘤及抗血管生成的双重靶点身份,可以为今后的分子治疗提供更多的选择。     

急性淋巴细胞白血病患者骨髓单个核细胞TAp63基因的表达

背景：据作者查新检索,国内外有关急性白血病患者骨髓单个核细胞TAp63基因表达的报道罕见。 目的：观察急性淋巴细胞白血病患者骨髓单个核细胞TAp63基因的表达及其意义。 方法：50例急性淋巴细胞白血病患者,其中32例急性B淋巴细胞白血病,18例急性T淋巴细胞白血病。同期选择27例非恶性血液病患者作为对照。取肝素抗凝的骨髓液2~4 mL,用Ficoll液分离骨髓单个核细胞,半定量反转录聚合酶链反应法检测TAp63的表达。 结果与结论：50例急性淋巴细胞白血病患者有49例表达TAp63,急性淋巴细胞白血病组明显高于非恶性血液病组(P < 0.05),急性B淋巴细胞白血病表达水平显著高于急性T淋巴细胞白血病(P < 0.05)。动态观察了5例初治急性淋巴细胞白血病化疗后不同阶段TAp63的表达变化,发现初治时TAp63表达,缓解后低表达或不表达,复发后又表达。结果表明TAp63在急性淋巴细胞白血病患者骨髓单个核细胞的表达明显高于非恶性血液病患者,尤其在急性B淋巴细胞白血病患者中高表达。     

MALT1基因2种转录本在正常人和B细胞白血病患者中的表达特点

 目的：比较正常人和B细胞白血病患者外周血中黏膜相关淋巴样组织淋巴瘤转位基因1（MALT1）2种异构体的分布和表达差异。方法：根据MALT1基因的结构特点,设计2对引物,通过建立2种转录本的逆转录聚合酶链式反应（RT-PCR）方法分析8例B细胞急性淋巴细胞白血病(B-ALL)、8例B细胞慢性淋巴细胞白血病（B-CLL）和8例正常人的外周血单个核细胞(PBMC)中MALT1的表达情况。实时定量PCR分析各组样本的MALT1 mRNA表达水平。结果：所有样本中均能得到所预期的PCR产物,其中第1对引物可以扩增出2条片段,分别为MALT1转录本1（包含第5、6、7、8、9外显子）和MALT1转录本2（包含第5、6、8、9外显子）,第2对引物只能扩增出1条包含转录本1的片段,所有PCR产物均通过核苷酸序列分析证实。MALT1 2种转录本均在外周血中有表达,并且MALT1转录本2表达水平高于转录本1。通过灰度分析发现,在B-ALL中,MALT1转录本1的灰度与正常人相比显著增高（P＜0.05）,而MALT1转录本2显著降低（P＜0.05）;在B-CLL中,MALT1 2种转录本的灰度与正常人相比无显著差异（P＞0.05）。此外,B-ALL中,MALT1 mRNA表达水平（中位数：1.253）低于正常人（中位数：1.976）（P=0.05）;而B-CLL中,MALT1 mRNA的表达水平与正常人相比无显著差异（P＞0.05）。结论：MALT1 2种转录本均表达于正常和B细胞白血病样本中,但B-ALL中两者的表达水平有所差异,同时,B-ALL的MALT1 mRNA表达水平也有所降低。B-ALL中MALT1基因表达的异常可能影响MALT1信号通路而与疾病的发生发展相关。