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1.
柔嫩艾美耳球虫田间分离株对马杜霉素耐药性检测   总被引:1,自引:0,他引:1  
以对马杜霉素完全敏感和柔嫩艾美耳球虫豪顿株为参照 ,检测柔嫩艾美耳球虫 2个河北分离株(HBZ、HBH)、 2个山东分离株 (SDZ、SDT)对马杜霉素的耐药程度。按每羽 5× 1 0 4个孢子化卵囊的剂量接种 7日龄试验鸡只 ,接种后第 7天剖杀所有试验鸡 ,观察盲肠病变 ,计算平均增重、盲肠内容物卵囊数、粪便中卵囊排出量和抗球虫指数 (ACI)。以ACI值作为判定耐药程度的标准 ,ACI≥ 1 80判为敏感 ,1 6 0≤ACI<1 80判为部分耐药 ,ACI<1 6 0判为耐药。结果是柔嫩艾美耳球虫豪顿株的ACI为 1 98 3,柔嫩艾美耳球虫河北分离株HBZ、HBH组的ACI分别是 1 4 7 5、 1 5 3 7,山东分离株SDZ、SDT组的ACI分别是1 2 7 2、 1 30 0。试验证明柔嫩艾美耳球虫 2个河北分离株 (HBZ、HBH)、 2个山东分离株 (SDZ、SDT)对马杜霉素具有耐药性  相似文献   

2.
用1000个柔嫩艾美耳球虫(E.tenella)早熟株孢子化卵囊,1000个毒害艾美耳球虫(E.necatrix)早熟株孢子化卵囊和500个巨型艾美耳球虫(E.maxima)早熟株卵囊分别接种1,7和25日龄雏鸡,接种后14天分别用相应的200,200和100个亲本毒株孢子化卵囊进行攻虫.初次接种和攻虫后分别检查卵囊总产量.结果表明,3种早熟虫株的卵囊都能够成功的感染1日龄和7日龄雏鸡.初次接种后雏鸡都产生了不同程度的球虫免疫力.本研究证实,艾美耳球虫早熟株卵囊能够诱导初生和幼龄雏鸡产生球虫免疫力.  相似文献   

3.
用 10 0 0个柔嫩艾美耳球虫 (E .tenella)早熟株孢子化卵囊 ,10 0 0个毒害艾美耳球虫 (E .neca trix)早熟株孢子化卵囊和 5 0 0个巨型艾美耳球虫 (E .maxima)早熟株卵囊分别接种 1,7和 2 5日龄雏鸡 ,接种后 14天分别用相应的 2 0 0 ,2 0 0和 10 0个亲本毒株孢子化卵囊进行攻虫。初次接种和攻虫后分别检查卵囊总产量。结果表明 ,3种早熟虫株的卵囊都能够成功的感染 1日龄和 7日龄雏鸡。初次接种后雏鸡都产生了不同程度的球虫免疫力。本研究证实 ,艾美耳球虫早熟株卵囊能够诱导初生和幼龄雏鸡产生球虫免疫力  相似文献   

4.
肠艾美耳球虫是兔球虫中的主要致病虫种之一,充分研究其生物学特性对兔球虫病的防治有十分重要的意义。本文对肠艾美耳球虫张家口分离株的致病性和免疫原性进行了初步研究。利用3个剂量(1×10^4、1×10^5、1×10^6)的肠艾美耳球虫张家口分离株孢子化卵囊感染35—45日龄无球虫兔,观察临床症状和体重变化,以研究其致病性;21d后,再用1×10。个肠艾美耳球虫孢子化卯囊进行攻毒,监测体重变化和卵囊排出量,评价其免疫原性。结果发现,接种1×10^4个卵囊,即可导致家兔出现临床症状,与空白对照组相比,日增重显著下降,更高感染剂量则会加重症状。攻毒后,免疫组增重未受影响,与空白对照组相比无差异,而不免疫攻毒组体重显著下降;同时免疫组的卵囊排出量显著低于不免疫攻毒组。结果表明肠艾美耳球虫张家口分离株对仔兔具有中等致病性;同时其免疫原性良好。因此可以把该株球虫作为原始株进行早熟虫株选育,并以此为基础,进行兔球虫病疫苗的开发。  相似文献   

5.
为了建立鸡球虫种类的快速分子生物学鉴定方法,检测实验室保存虫株受污染状况,分别对单卵囊分离繁殖及实验室长期传代保存的6株巨型艾美耳球虫(EMSH01、EM4101、EMES01、EMBA01、EMTY01和EMTO01)、4株柔嫩艾美耳球虫(ETDS01、ETGD01、ETAD和ETAM)、1株堆形艾美耳球虫(EA1201)、1株变位艾美耳球虫(EMIS01)、1株毒害艾美耳球虫(ENGD01)收集卵囊,纯化、提取总DNA,根据巨型艾美耳球虫、柔嫩艾美耳球虫、堆形艾美耳球虫的RAPD和SCAR分子标记、ITS-1区序列分别设计Tn-F与Tn-R、Mx-F与Mx-R、Ac-F与Ac-R、ET-1与ET-2、EM-1与EM-2、EA-1与EA-2等6对特异性引物,对13个虫株分别进行PCR扩增,1%琼脂糖电泳分析片段大小.结果显示:用引物Tn-F与Tn-R、ET-1与ET-2对ETDS01、ETGD01、ETAD、ETAM、EMTO01扩增出特异性条带,其余4种8个虫株未见条带;用引物Mx-F与Mx-R、EM-1与EM-2对EMSH01、EM4101、EMES01、EMBA01、EMTY01和EMTO01扩增出特异性条带,其余4种7个虫株未见条带;用引物Ac-F与Ac-R、EA-1与EA-2对EA1201扩增出特异性条带,其余4种12个虫株未见条带.结果说明特异性引物PCR方法鉴定的5种球虫与原常规生物学方法鉴定的结果一致,检测出保存的巨型艾美耳球虫EMTO01虫株受柔嫩艾美耳球虫污染,其余虫株未发现交叉污染.研究证明利用特异性引物建立的PCR方法可用于鸡球虫种类与卵囊纯度的鉴定.  相似文献   

6.
分别用柔嫩艾美耳球虫早熟弱毒株、鸡胚适应株和强毒株孢子化卵囊1000个/只,给10日龄无球虫雏鸡免疫接种,逐日检查粪便并进行克粪便卵囊(O.P.G.)计数,结果发现早熟弱毒株和鸡胚适应株的潜隐期均有不同程度缩短,繁殖力亦有不同程度的下降。同时进行了柔嫩艾美耳球虫不同株球虫的免疫原性比较:分别用三株卵囊免疫雏鸡,免疫剂量为1000个/只,免疫后14d各用1000个/只强毒株卵囊攻虫,逐日进行O.P.G.计数,发现各组免疫鸡攻虫后的卵囊产量均大大下降,其中以强毒株免疫攻虫组的排出卵囊量最低,仅为未免疫组的1.23%,早熟株和鸡胚株免疫鸡攻虫的排出卵囊量相近,分别为未免疫组的7.35%和7.23%。由此可见,三株柔嫩艾美尔球虫均表现出良好的免疫原性。  相似文献   

7.
采用直肠接种毒害艾美耳球虫(Eimeria necatrix)裂殖子方法对毒害艾美耳球虫卵囊进行纯化,用柔嫩艾美耳球虫子孢子表面抗原TA4基因特异性引物,以纯化E.necatrix孢子化卵囊总RNA为模板,RT-PCR方法克隆出了一段新基因序列。该基因全长747bp,共编码248个氨基酸,与国外Brothers等(1991)从E.necatrix孢子化卵囊表面得到的NA4基因同源性达99.7%,与柔嫩艾美耳球虫TA4(No.AJ586531.2)基因同源性达到91.4%,拥有与柔嫩艾美耳球虫TA4抗原基因相同序列的一段信号肽。从结果可得出,新克隆的基因为E.necatrix NA4基因。此基因已登录GenBank,登录号为EU523548。  相似文献   

8.
分别用柔蒋美耳球虫早熟弱毒株、鸡胚适应株和强毒株孢子化卵囊1000个/只,给10日龄无早雏鸡免疫接种,逐日粪便并进行克粪便卵囊计数,结果发现产毒株和鸡胚适应株的潜隐期均有不同程度缩短,繁殖力亦有不同程度的下降,同时进行了柔嫩艾美耳球虫不同株球虫的免疫原性比较,分别用三株卵囊免疫雏鸡,免疫剂理为1000个/只,免疫后14d各用1000个/只强毒株卵囊攻虫,逐日进行O.P.G.计数,发现各组免疫鸡攻虫  相似文献   

9.
微线体蛋白2(Microneme protein2,Mic2)是艾美耳球虫入侵宿主细胞时分泌的主要功能蛋白之一。本研究中,以抗柔嫩艾美耳球虫微线体蛋白2(EtMic2)单克隆抗体为检测抗体,利用间接免疫荧光实验(IFA)检测了Mic2在柔嫩艾美耳球虫、和缓艾美耳球虫、斯氏艾美耳球虫和无残艾美耳球虫等不同种艾美耳属球虫的空间分布。结果显示,Mic2在不同种艾美耳属球虫中均定位于子孢子的顶部(微线体部位),但表达强度存在差异。这提示Mic2可作为研究艾美耳属球虫相关蛋白空间分布的“参照物”。  相似文献   

10.
鸡球虫卵囊的三种同工酶酶谱分析   总被引:6,自引:0,他引:6  
者对3种艾美耳球虫和4株柔嫩艾美耳球虫抗药性虫株分别进行了乳酸脱氢酶(LDH)、葡萄糖磷酸异构酶(GPI)、葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PD)同工酶电泳图谱分析。其中LDH同工酶谱共观察到5条酶带,GPI同工酶谱共观察到8条酶带,G6PD同工酶谱观察到7条酶带。3种艾美耳球虫的同工酶谱存在种间差异,不同抗药性虫株间酶谱也存在差异。G6PD-5很可能与球虫对氯嗪苯乙氰的抗药性有关,G6PD-2则可能与球虫对氯羟吡啶的抗药性有关  相似文献   

11.
柔嫩艾美耳球虫山西分离株的分离与致病性观察   总被引:2,自引:1,他引:1  
运用单卵囊分离技术,从山西省某鸡场鸡球虫感染粪便样品中获得l株纯种球虫,鉴定为柔嫩艾美耳球虫并命名为Eimeria tenella SX010323,并对其致病性进行了研究。(1)该球虫卵囊寄生于盲肠、为宽卵圆形,卵囊壁光滑、褐色,无卵膜孔,有极粒,无内、外残体。孢子囊呈长卵圆形,有斯氏体。卵囊大小范围为(16.80~28.80)μm×(14.40~25.20)μm,平均大小为(21.54±0.24)μm×(17.85±0.24)μm,形状指数为1.21±0.05。子孢子,大小范围为(10.20~12.75)μm×(4.40—7.25)μm,平均大小为(11.54±0.24)μm×(6.27±0.43)μm。潜隐期为141h,最短孢子化时间为19h;(2)63只11日龄的海兰白公雏随机分为7组,分别口服感染此新鲜卵囊1×10^3、5×10^3、1×10^4、2×10^4、5×10^4、1.0×10^5个,并设立不感染对照组。结果表明:所有感染组增重均低于对照组(P〈O.05),各感染组间随着感染剂量的增加,增重和增重率显著降低,血便率和盲肠病变记分增加(P〈0.05);(3)将4℃分别保存17、13、10、4、1个月和新鲜孢子化的虫株卵囊,以1.5×10^4个/只的剂量感染11日龄雏鸡,每组10只。结果表明:保存1个月和4个月活力较高,保存10个月活力开始下降,保存13、17个月活力下降较大。  相似文献   

12.
目的分析与评价部分脾动脉栓塞术对肝硬化患者的各种临床影响。方法112例肝硬化合并脾功能亢进患者,其中男性71例,女性41例;年龄38~72岁,平均年龄52-3岁。采用Seldinger技术进行部分脾动脉栓塞术.观察其外周血细胞、肝功能、凝血酶原时间、白蛋白、肾功能、门静脉内径等。结果所有患者经过部分脾动脉栓塞术治疗5d后,外周血白细胞由(3.63±1.82)×10^9/L明显增高至(7.67±4.20)×10^9/L(P〈0.05),血小板由(62.03±36.55)×109/L明显升高至(125.71±98.18)×10^9/L(P〈0.05),凝血酶原时间由(17.68±3.44)s明显缩短至(16.68±2.92)s(P〈0.05)。肾功能中血尿素氮明显变化。血肌酐由(83.82±20.66)μmol/L明显升高至(90.54±19.15)μmol/L(P〈0.05),4周后门静脉管径由(1.33±0.16)cm缩小至(1.16±0.16)cm(P〈0.05),门静脉血液流速由(721.97±230.09)mL/min缩小至(492.30±174.67)mL/min(P〈0.05)。肝功能中观察了总胆红素、丙氨酸氨基转移酶、天冬氨酸氨基转氨酶、谷酰转肽酶等指标均无明显变化。结论部分脾动脉栓塞术对肝硬化患者不仅有缓解脾功能亢进,且能降低门静脉压,预防出血,对肝功能无明显影响。  相似文献   

13.
The identification of the two novel alleles, HLA-B*0709 and B*0710, is described. B*0709 differs from B*07021 by a nucleotide exchange at position 419 (A>C) which is located in exon 3. At the protein level the nucleotide exchange results in an amino acid residue difference (Tyr116Ser). The other newly detected allele, B*0710, differs from B*07021 by a nucleotide exchange at position 272 (A>G) which is located in exon 2. This nucleotide exchange also leads to an amino acid substitution (Tyr67Cys). The allogeneic potential in case of mismatch with other alleles of the B*07 group at bone marrow transplantation was assessed. The peptide motifs between B*0709 and B*0711 may be very similar and thus the alloreactive potential in case of mismatch may be low. In contrast, mismatches of B*0709 and B*0710 with other B*07 alleles are likely to stimulate alloreactive T cells.  相似文献   

14.
目的构建恶性疟原虫裂殖子表面蛋白3功能片段MSP3(69)与谷胱甘肽(GST)的融合蛋白,并在大肠杆菌中进行表达,分析其免疫原性。方法采用大肠杆菌系统表达融合蛋白GST—MSP3(69),以疟疾病人血清进行Western-blot,并以ISA720、佛氏、氢氧化铝与CpG联合3种佐剂与GST—MSP3(69)融合蛋白乳化,免疫Balb/ca小鼠.分析其免疫原性。结果在大肠杆菌系统中成功表达GST-MSP3(69)融合蛋白,疟疾病人血清能与融合蛋白反应。3种佐剂免疫Balb/ca小鼠均能诱发Balb/ca小鼠产生较高水平的特异抗体,3次免疫后的抗体滴度分别为4.5×10^5,4.1×10^5和3.5×10^5。3次免疫后血清抗体亚型分析显示该蛋白能够诱导Balb/ca小鼠产生较高滴度的亲细胞亚型IgG1和IgG2b.ISA720、佛氏、氢氧化铝与CpG联合佐剂组IgG1分别为8×104、7.8×10^4、6.8×10^4.IgG2b分别为1.2×10^4,1.25×10^4、1.5×10^4。统计学分析显示不同佐剂组的抗体滴度及抗体亚型滴度之间差异均无统计学意义(P〉0.05)。结论制备了在大肠杆菌表达的GST-MSP3(69)融合蛋白,该蛋白具有高免疫原性,并产生亲细胞亚型抗体,这些为研究MSP3蛋白功能区的免疫保护作用打下了基础。  相似文献   

15.
The concentration of secretory IgA (sIgA) in intestine flush and solid organs (spleen, bursa) in chickens pretreated with probiotic strain Enterococcus faecium AL41 (EF) and challenged with Salmonella Enteritidis PT4 (SE) was assessed. Forty 1-day-old chickens Cobb 500 were divided into four groups: control, EFAL41, SE and combined EFAL41+SE. The increased concentration of sIgA was determined on day 4 after salmonella infection in the intestine flush in EFAL41group. In combined EFAL41+SE group significant increase of sIgA in the intestine flush was found 7 days post-infection. Pre-treatment of chickens with E. faecium AL41 also showed beneficial effect in bursa in EFAL41 and EFAL41+SE groups. In spleen, total IgA was increased only in SE group. The results demonstrated positive effect of E. faecium AL41 on IgA production in chickens' intestine and solid organs after S. Enteritidis PT4 challenge. Validity of method using for IgA evaluation in solid organ was proved.  相似文献   

16.
目的建立一种体外诱导干细胞分化的胰岛细胞形成胰岛样结构的技术方法。方法体外诱导人胚胎胰腺干细胞分化为胰岛细胞,将胰岛细胞制备成浓度分别为1×10^4/ml、3×10^4/ml、1×10^5/ml、3×10^5/ml(1×10^4/ml、3×10^4/ml、1×10^5/ml、3×10^5/ml组)单细胞悬液,在含有细胞外基质(ECM)的培养基中悬浮培养24h以诱导形成胰岛样结构,在荧光体视显微镜下观察胰岛样结构的形态和大小;采用免疫荧光染色方法检测胰岛样结构中ECM成分及其细胞组成与定位。将胰岛样结构分别在含5.6和30.0mmol/L葡萄糖的培养基中体外培养2h,采用放射免疫法测定上清中胰岛素水平。建立糖尿病大鼠模型,经门静脉将胰岛样结构移植至大鼠肝脏,移植后连续3d经鼠尾静脉检测血糖水平。结果90%人胚胎胰腺干细胞分化的胰岛细胞形成了胰岛样结构,其包膜、大小均与天然人胰岛组织结构相似;以形成直径150μm大小胰岛样结构的比例为标准,比较各组细胞浓度与胰岛样结构形成率的关系,结果显示分别与1×10^4/ml、3×10^4/ml、3×10^5/ml组(25.0%±2.5%、28.0%±3.0%、21.5%±2.5%)相比,1×10^5/ml组胰岛样结构形成率最佳(36.5%±4.0%,均P〈0.01)。胰岛样结构包膜上含有与天然人胰岛组织类似的ECM成分,且其中含有胰岛素、胰高血糖素和C-肽阳性细胞,其细胞比例与分布均与天然人胰岛组织类似。30.0mmol/L高糖浓度刺激后胰岛样结构胰岛素释放水平[(110±12)μIU/ml]较5.6mmol/L基础糖浓度[(59.5±8.0)pIU/ml]明显增加(P〈0,01),胰岛样结构移植后糖尿病大鼠血糖水平较移植前均明显降低(P〈0.01)。结论本研究建立的技术方法可以将干细胞分化的胰岛细胞在体外大量、快速、高效地诱导形成具有功能的胰岛样结构。  相似文献   

17.
目的加强对造血干细胞移植中HBV感染的重视,注重早期干预,提高移植成功率。方法回顾性分析97例异基因造血干细胞移植患儿的临床资料,通过对2例HBV感染的诊治体会结合文献复习。结果2001年5月至2008年5月在上海交通大学附属上海儿童医学中心接受异基因造血于细胞移植的97例患儿中,2例分别在移植后41d(病例1)、15个月(病例2)发生HBV感染。病例1移植前肝功能正常,乙肝二对半检查阴性,回顾性分析发现该患儿移植时HBV正处于潜伏状态(HBV—DNA1.17×10^6copies·mL^-1)。该患儿乙肝来势凶猛,移植后41~43d出现巩膜明显黄染并伴大量腹水,移植后46d迅速发展至肝、肾功能衰竭,出现少尿,凝血酶原时间38.4S,部分凝血酶原时间〉120S,凝血酶时间〉100s,Cr251μmol·L^-1,ALT3195U·L^-1,血清总胆红素7mg·L^-1,直接鹏红素2.8mg·L^-1,HBV—DNA1,08×10^3copies·mL^-1,经拉米夫定等积极治疗2周后好转。移植后130d随着移植物抗宿主病(GVHD)的复燃和免疫抑制药物的加强应用,HBV再度活跃,HBV—DNA从原已控制的3.50×10^4copies·mL^-1逐升至2.05×10^6copies·mL^-1,移植后315d出现HBVYMDD(+)变异株,遂予阿德福韦酯联合治疗至今(移植后3.5年),目前肝、肾功能正常。病例2白血病起病初及干细胞移植前均示HBs-Ab(+)、HBc—Ab(+)、HBe—Ab(+),A¨和HBV—DNA正常,移植后12个月发生慢性广泛性GVHD,加强抗排异治疗后于移植后15个月复查发现:ALT168U·L^-1,HBV-DNA升至5×10^8copies·mL^-1,出现HBs-Ag(+)和HBe-Ag(+)。予拉米夫定治疗至移植后4.5年,目前ALT40~80U·L^-1,HBV—DNA1×10^3~1×10^4copies·mL^-1。结论乙肝在移植患儿巾并不少见,长期的免疫抑制治疗常使病情反复,加强病毒监测、重视早期干预至关重要;移植前HBVDNA检测有助于发现潜伏期患儿;HBs—Ab(+)、HBe—Ab(+)和HBc—Ab(+)患儿在强烈免疫抑制下仍有HBV复燃的风险。  相似文献   

18.
The tracheal flora of healthy chickens consisted mainly of Gram-positive microorganisms. A shift to a predominantly Gram-negative flora, mainly due to Escherichia, was observed in chickens with respiratory symptoms caused by infectious bronchitis. Most of the chickens in which E. coli formed a predominant part of the tracheal flora also showed a positive serological reaction to Mycoplasma gallisepticum. A raised incidence of Pasteurella haemolytica with increase in age was noted both with regard to flocks and number of chickens examined. No differences other than those due to age were related to the incidence of P. haemolytica in trachea of chickens with and without respiratory symptoms. None of the isolated strains corresponds to earlier described biotypes of P. haemolytica. Intraperitoneal injection of P. haemolytica did not affect 1-day-old chickens, nor did simultaneous intratracheal injection of 14-day-old chickens with P. haemolytica and infectious bronchitis virus exacerbate subsequent infectious bronchitis. It can be presumed that P. haemolytica in certain environments constitutes a part of the normal tracheal flora in chickens beyond a certain age, and that invasion apparently only takes place in cases of extreme general debilitation.  相似文献   

19.
目的探讨新生儿尿液中人巨细胞病毒(HCMV)病毒载量与先天性感染的关系及与HCMV所致疾病严重程度的关系。方法采集98例经PCR方法确诊的有症状及无症状的先天性HCMV感染新生儿尿液标本,用实时荧光定量PCR法(FQ—PCR)检测尿液中巨细胞病毒载量。结果98例先天性HCMV感染的新生儿中85例在出生后有临床症状(86%)。无症状感染和有症状感染的新生儿尿液中平均HCMV病毒载量分别是1.4×10^5拷贝/ml和3.1×10^6拷贝/ml,P〈0.01,差异有统计学意义。结论先天性HCMV感染的新生儿中无症状感染者尿液中病毒载量显著低于有症状感染者,提示病毒载量与疾病严重程度相关。  相似文献   

20.
目的获得能特异性识别人层粘连蛋白(hLN)的单克隆抗体(McAb)。方法用纯化的人层粘连蛋白(hLN)作抗原免疫Balb/C小鼠,以细胞融合、酶联免疫吸附实验(ELISA)筛选和克隆化技术获得抗hLN的杂交瘤细胞株;用生物学方法鉴定杂交瘤细胞,用免疫学方法鉴定McAb的特异性。结果获得4株稳定分泌抗人LN的杂交瘤细胞株(2A1、3B5、2C4、4D1),培养上清的ELISA效价分别为:1∶512、1∶1024、1∶512、1∶256;腹水效价分别为:1×10^6、1×10^7、1×10^6、1×10^5;采用ELISA相加法表明2A1、4D1与3B5、2C4识别的hLN上的抗原决定簇和识别的不同,4株单抗均属实IgG。结论成功建立了4株稳定分泌抗人LNMcAb的杂交瘤细胞株,它们分别识别hLN上2个不同的抗原位点,有望作为hLN定量检测的特异性抗体。  相似文献   

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