CD1C和S-100蛋白在乳腺癌组织树突状细胞的表达

目的观察CD1C和S-100蛋白在人乳腺癌组织中树突状细胞(DC)的表达。方法利用CD1C和S-100蛋白作为DC不同的特征性标志分子,用免疫组织化学方法观察20例乳腺癌组织及癌旁相对正常乳腺组织中CD1C+和S-100+DC的分布和形态学变化。结果乳腺癌组织S-100和CD1C表达阳性树突状细胞的平均光密度值(MOD)均明显弱于正常乳腺组织(P<0.05),面数密度也少于正常乳腺组织(P<0.05),且CD1C+DC数量的减少较S-100+DC数量的减少明显。结论DC可能与乳腺癌的发生、发展及愈后有一定关系,CD1C+DC的影响可能较S-100+DC大。     

人乳腺癌中树突状细胞的形态学变化及其与DNA含量的关系

目的利用CD1C作为树突状细胞的特异性标志分子,研究乳腺癌患者树突状细胞的形态学变化及其与DNA含量的关系,探讨CD1c+DC与乳腺癌生物学特性的关系,为乳腺癌的生物治疗提供实验依据。方法收集手术切除的人乳腺癌组织和癌旁相对正常乳腺癌组织,用免疫组织化学方法和流式细胞术对20例乳腺癌标本进行检测。结果乳腺癌组织中CD1C的表达强度较相对正常乳腺组织明显减弱(P<0.05),CD1C+DC的数量较相对正常乳腺组织明显减少(P<0.05),CD1C+DC的数量和乳腺癌细胞内DNA指数(DI)呈负相相关,CD1C+DC的数量增多时,则DI值减小。结论树突状细胞是专职的抗原呈递细胞,在抗乳腺癌的免疫反应中起着重要作用。     

主要组织相容性复合体在人乳腺癌组织的表达

目的通过观察主要组织相容性复合体(MHC)在乳腺癌组织的表达,探讨MHC与乳腺癌发生发展的关系,为临床进行乳腺癌的生物治疗提供实验依据。方法收集手术切除的人乳腺癌组织和癌旁相对正常乳腺组织,用免疫组织化学方法和图像分析技术,观察人白细胞抗原(HLA-DR)阳性细胞、CD4+T细胞和TCD8+T细胞在不同乳腺组织中的表达。结果在乳腺癌组织中HLA-DR阳性细胞平均光密度值和面数密度明显高于正常乳腺组织(P<0.05);CD4+T和TCD8+T细胞阳性细胞面数密度与正常乳腺组织相比明显减少(P<0.05),且CD4+T细胞多分布在HLA-DR阳性细胞附近。结论人乳腺癌局部微环境中HLA-DR阳性细胞数多于正常乳腺组织,CD4+T和TCD8+T在人乳腺癌组织低于乳腺正常组织。     

乳腺导管内增生性病变及浸润性癌中树突状细胞的检测

目的　检测乳腺导管内增生性病变和微小浸润性癌及浸润性导管癌中树突状细胞(dendriticcells,DC)和T细胞的 分布状况和浸润密度,探讨乳腺癌发生、发展中机体免疫状态的变化规律。方法　应用免疫组化S P法和两步法对16例正常 副乳腺、58例导管内增生性病变、4例微浸润导管癌及67例浸润性导管癌乳腺标本进行S 100蛋白+DC、HLA DR+DC、CD1a +DC(DC三参数)及CD45RO+T细胞的浸润密度检测。结果　浸润癌中DC三参数浸润密度均高于其它病变组织(P< 0.05)。导管原位癌、微浸润癌及浸润癌组织中CD45RO+T细胞浸润密度均高于其它病变组织(P<0.05)。DC三参数间及 其与CD45RO+T细胞间均呈正相关(P<0.001)。结论　DC浸润密度随增生性病变加重而逐渐增高,发展为浸润癌时则明 显增高。     

凋亡调节蛋白Bcl-2、p53和Caspase-3在乳腺癌组织中的表达及其相互关系

目的通过观察人乳腺癌组织中凋亡调节蛋白p53、bcl-2和caspase-3表达,探讨bcl-2、p53和caspase-3在乳腺癌发生、发展过程中的作用及其相互关系,为乳腺癌的生物治疗提供实验依据。方法收集手术切除的人乳腺癌组织和癌旁相对正常乳腺组织,用免疫组织化学方法和图像分析技术对21例乳腺癌标本进行检测。结果乳腺癌组织中bcl-2蛋白阳性表达率(52.4%,11/21)明显高于相对正常乳腺组织(19.0%,4/21);乳腺癌组织中p53蛋白阳性表达率(57.1%,12/21)也明显高于相对正常乳腺组织(0%);而乳腺癌组织中caspase-3蛋白阳性表达率(38.0%,8/21)明显低于相对正常乳腺组织(76.1%,16/21)。结论p53、bcl-2和caspase-3蛋白在乳腺癌发生、发展过程中发挥着既独立又协同的作用。     

食管鳞状细胞癌中VEGF与肿瘤浸润性树突状细胞的关系

目的探讨食管鳞癌中血管内皮细胞生长因子(vascu lar endothelial growth factor,VEGF)与肿瘤浸润性树突状细胞(tumor infiltrated dendritic cell,TIDC)的关系。方法运用原位杂交和免疫组化方法检测食管鳞癌组织中VEGF蛋白和mR-NA的表达、S-100蛋白标记的TIDC的密度。结果(1)46例食管鳞癌组织中VEGF蛋白在不同浸润深度、不同转移状态的肿瘤中表达阳性率差异有显著性。(2)食管鳞癌中S-100蛋白阳性树突状细胞(dendritic cell,DC)平均密度为(19.83±13.91)个/HP;不同分化肿瘤之间S-100蛋白阳性TIDC密度分别为(18.50±17.27)个/HPF、(28.08±14.05)个/HPF、(15.740±10.38)个/HPF,差异有显著性;不同浸润深度的肿瘤之间TIDC密度分别为(32.78±16.60)个/HPF、(15.20±11.96)个/HPF、(19.83±13.92)个/HPF,差异有显著性;VEGF阳性组TIDC密度为(14.93±12.83)个/HPF,显著低于VEGF阴性组的(26.79±12.61)个/HPF,VEGF表达与DC密度之间存在显著的负相关性(r=-0.462)。结论(1)VEGF蛋白表达和食管鳞癌浸润转移之间有一定的相关性。(2)首次探讨了食管鳞癌中DC密度与VEGF蛋白表达之间的关系,发现VEGF影响鳞癌组织中DC的密度,可能影响宿主的抗肿瘤免疫能力和肿瘤的浸润转移。     

乳腺癌中EZH2和p53蛋白表达及其临床意义

目的探讨乳腺癌组织中EZH2和p53蛋白的表达,分析二者表达与乳腺癌临床病理特征及预后的关系。方法采用免疫组化Max Vision法检测50例乳腺腺病、92例乳腺浸润性小叶癌(invasive lobular carcinoma,ILC)和200例乳腺浸润性导管癌(invasive ductal carcinoma,IDC)组织中EZH2和p53的表达及二者的相关性。结果 EZH2在ILC与IDC中的表达差异无统计学意义(P>0.016 7),其在乳腺腺病组织中的表达低于ILC与IDC组织(P<0.016 7)。EZH2表达与患者年龄、绝经状态、组织学类型、p TNM分期等均无关,与肿瘤直径、淋巴结转移、分子亚型、生存状态及p53表达有关(P<0.05)。p53蛋白在乳腺腺病和ILC组织中的表达差异无统计学意义(P>0.016 7),其在IDC组织中的表达高于ILC与乳腺腺病组织(P<0.0167)。p53表达与患者年龄、绝经状态、肿瘤直径、淋巴结转移等无关,与组织学类型、p TNM分期、分子亚型及生存状态相关(P<0.05)。Kaplan-Meier生存分析示:EZH2及p53蛋白表达与乳腺癌患者无病生存率及总生存率具有相关性(P<0.05);COX多因素回归分析显示:EZH2及p53蛋白表达是乳腺癌患者生存的独立影响因素。结论在乳腺腺病、ILC及IDC组织中,EZH2及p53蛋白表达逐渐升高,二者表达呈正相关。EZH2及p53蛋白表达水平对评价乳腺癌患者预后有重要价值。     

树突状细胞标志分子在人乳腺癌中的表达及与T细胞的关系

目的通过观察人乳腺癌组织中CDlc、S-100、HLA-DR阳性细胞数和表达强度的变化及其与T细胞的关系，了解乳腺癌局部微环境的免疫状态，探讨树突状细胞与乳腺癌发生、发展的关系，为乳腺癌的生物治疗提供实验依据。方法收集手术切除的人乳腺癌组织和癌旁相对正常乳腺组织，用免疫组织化学方法和图像分析技术对20例乳腺癌标本进行检测。结果乳腺癌组织中CDlc、S-100和HLA—DR的表达强度均较相对正常乳腺组织明显减弱（P〈0．05）；CDlc^＋ DC、S-100^＋ DC、HLA—DR^＋ DC、CD4^＋T细胞和CD8^＋T细胞的数量均较相对正常乳腺组织明显减少（P〈0．05），且乳腺癌组织中CDlc^＋DC细胞的数量比S-100^＋DC细胞的数量减少更明显，HLA-DR^＋DC与CD4^＋T细胞的数量呈明显相关关系（r=0．998）；结论树突状细胞表面标志分子在人乳腺癌组织中的表达总量下降，树突状细胞在抗乳腺癌的免疫反应中可能起重要作用；这为临床开展乳腺癌的生物治疗提供了实验依据。     

骨髓CD34+细胞体外扩增诱导树突状细胞实验研究

目的探讨应用不同细胞因子组合方案从骨髓CD34+细胞体外扩增诱导树突状细胞(DC)的可行性及评价不同诱导方案诱导DC的效果.方法免疫磁珠法纯化骨髓CD34+细胞.在有血清条件下应用两步法SCF+FL+TPO+IL-3扩增2周,然后以GM-CSF+IL-4+TNF-α(GI方案)或GM-CSF+TNF-α(GT方案)诱导DC;或者一步法SCF+FL+TPO+IL-3+GM-CSF+TNF-α直接作用2周扩增诱导DC.通过相差显微镜、电子显微镜、流式细胞仪分析、异硫氰酸荧光素标记的葡聚糖(FITC-DX)内吞实验检测DC的生物学特性.结果诱导后细胞较0 d或诱导前细胞高表达DC相关标记(CD1a、CD80、CD86、CD40、CD54、HLA-DR).两步法GI方案诱导10 d,总细胞扩增倍数、CDla+DC扩增倍数分别为(198±178)倍和(122±129)倍,与GT方案比较无统计学意义,但诱导细胞CD1a、CD80、CD86的表达明显高于后者.一步法扩增诱导2周时总细胞数扩增(43±16)倍,CD1a+DC数是0 d接种细胞的(4±2)倍.结论两步法能从正常CD34+细胞诱导产生大量DC,GI方案优于GT方案.两者扩增效率均优于一步法.     

细胞周期素E和p53在乳腺癌中表达及意义

目的 探讨细胞周期素E(cyclin E)和p53在乳腺癌中表达的意义和相瓦关系.方法 采用免疫组化方法 (SP法)观察82例乳腺癌、15例乳腺良性肿瘤与15例正常乳腺组织的eyclin E和p53的表达.结果 正常乳腺组织和良性肿瘤中cyclin E和p53无表达,乳腺癌组织中cyclin E和p53的阳性表达率分别为56.10%和60.98%(P<0.05),cyclin E和p53的阳性表达与乳腺癌的临床分期密切相关(P<0.05);cyclin E和p53在乳腺癌的阳性表达具有相关(P<0.05),共同阳性表达的患者5年生存率明显低于阴性者(P<0.05).结论 cyclin E在乳腺癌中的表达与p53的表达呈明显的一致性,并在肿瘤的进展中起一定的作用,cyclin E和p53在乳腺癌中的共同阳性表达可作为乳腺癌预后的有效指标.     

The impact of langerin (CD207)+ dendritic cells and FOXP3+ Treg cells in the small bowel mucosa of children with celiac disease and atopic dermatitis in comparison to children with functional gastrointestinal disorders

In the present study we aimed to evaluate the impact of langerin (CD207)+ dendritic cells (DCs) and FOXP3+ Treg cells in the intestinal mucosa of children with celiac disease (CD) and atopic dermatitis (AD) in comparison to children with functional gastrointestinal disorders (FGD). Seventy‐five children (37 male, mean age 8.4 ± 4.8 years), who randomly underwent small bowel biopsy, were studied. The CD was diagnosed in 14 children, including five persons with concomitant AD (all positive for anti‐tissue transglutaminase IgA antibodies and with small bowel atrophy). Normal small bowel mucosa was found in eight patients with AD and in 53 patients with FGD. The sera of all patients were tested for total and specific IgE antibodies to food allergen panels. Staining for CD11c+, langerin (CD207+) DCs, CD4+, and FOXP3+ Treg cells was performed on paraffin‐embedded sections of bioptates using immunohistochemistry. The density of CD11c+ DCs, CD4+, and FOXP3+ Treg cells was higher in the CD patients compared to the AD and FGD patients (p = 0.02; p = 0.001). In AD, significantly higher density of CD11c+ DCs was detected in patients positive for specific IgE to food allergen panels (p = 0.02). The FGD patients with elevated total IgE had increased density of langerin (CD207)+ DCs compared to the patients with normal total IgE levels (p = 0.01). The increased density of FOXP3+ Treg cells, CD4+, cells and CD11c+ DCs was associated with CD but not with AD. The elevated level of total IgE or specific IgE to food allergens was associated with more pronounced expression of DCs, indicating a possible link between the presence of these cells in small bowel mucosa with elevated level of serum IgE.     

p53、p63及p73在皮肤血管瘤组织中的表达

目的　为探讨p5 3p6 3及p73蛋白在皮肤血管瘤组织中的表达及意义。方法　采用免疫组织化学S P法和图像分析技术检测 4 0例血管瘤组织和 2 0例正常皮肤组织中p5 3、p6 3及p73基因的表达。结果　在增生期血管瘤、退化期血管瘤和正常皮肤组之间 ,p73蛋白免疫组化阳性反应颗粒的平均光密度分别为 6 4 0 8± 2 15 1、1 0 73± 0 5 16和 0 95 3± 0 12 0。p6 3蛋白免疫组化阳性反应颗粒的平均光密度分别为 8 2 71± 1 95 3、0 92 3± 0 191和 0 92 0± 0 187。p5 3蛋白免疫组化阳性反应颗粒的平均光密度分别为 7 2 4 0± 1 874、0 934± 0 187和 0 92 3± 0 16 5。增生期血管瘤与退化期血管瘤、正常皮肤组分别组比 ,p73、p6 3及p5 3阳性表达的差异均有高度显著性差异 (P <0 0 0 1) ,消退期血管瘤与正常皮肤组之间 ,p73、p6 3及p5 3阳性表达差异无显著性 (P >0 0 5 )。结论　在增生期血管瘤组织中p73、p6 3及p5 3呈高表达 ,促进了内皮细胞的增殖 ,是导致血管瘤发生、发展的主要因素     

VEGF-C、VEGFR-3和iNOS在人乳腺癌淋巴管的表达

目的检测乳腺癌组织血管内皮生长因子-C(VEGF-C)及其受体(VEGFR-3)、iNOS基因表达的相关性及这三个基因mRNA表达水平与淋巴管密度(LVD)的相关性,为阐明乳腺癌淋巴管生成的分子机理提供实验依据。方法RT-PCR检测乳腺癌组织及正常乳腺组织VEGF-C、VEGFR-3、iNOSmRNA的表达水平;免疫组织化学染色法检测淋巴管内皮细胞上VEGFR-3的表达,测定淋巴管密度。结果乳腺癌LVD为20.35±4.23,显著高于正常对照组(P<0.05);乳腺癌组织VEGF-C、VEGFR-3、iNOSmRNA三者的表达率分别为74.0%、84.0%、82.0%,显著高于正常对照组(P<0.05);VEGF-C、VEGFR-3、iNOS阳性组中LVD分别为21.34±3.45、18.54±4.68、17.43±4.76,显著高于对照组(P<0.05)。结论VEGF-C、VEGFR-3、iNOSmRNA表达与淋巴管密度之间呈正相关,并且3者之间的表达亦具有相关性,这些基因的表达增高可能在乳腺癌淋巴管生成过程中具有重要作用。     

大肠癌CD44v6、p53基因突变体的表达

探明CD44v6 与肿瘤转移的关系, 了解p53 基因突变、CD44v6 在大肠癌中的表达。应用银染PCR SSCP检测p53 基因的突变; 应用特异CD44v6 探针进行Southern blot 杂交, 对杂交条带进行X光片暴光, 并对X 光片上的杂交条带进行灰度扫描, 定性、定量分析CD44v6 的表达。结果显示, 正常对照组、腺瘤组、未转移组和转移组的p53 基因突变率分别为:0 % 、50-0 % 、35-3% 和55-6% 。四个实验组的CD44v6 表达阳性率分别为0 % 、25-0% 、64-7 % 和88-9% ; CD44v6 表达量分别为175-87 ±43-16 、2017-31 ±1429-9、2039-88±1568-78 和10004-47±8013-36 , 转移组CD44v6 表达量明显高于其它实验组。CD44v6 与转移有关; 在肿瘤转移组和未转移组, CD44v6 阳性率明显高于p53 基因突变率。与p53 基因相比,CD44v6 不失是一个肿瘤转移的良好标记     

人乳腺癌中HLA-DR的异常表达及其与浸润淋巴细胞的关系

目的通过观察乳腺癌细胞HLA-DR的异常表达及其与浸润淋巴细胞的关系,探讨乳腺癌细胞HLA-DR抗原异常表达的免疫生物学意义。方法收集手术切除的人乳腺癌组织和癌旁相对正常乳腺组织,用免疫组织化学方法和图像分析技术对23例乳腺癌标本进行HLA-DR和浸润淋巴细胞的检测。结果 HLA-DR在相对正常乳腺组织中几乎不表达,在乳腺癌组织中的阳性表达率为47.7%,显著高于相对正常乳腺组织(P<0.05)。肿瘤浸润CD4+T和CD8+T的数量均较相对正常乳腺组织明显增多(P<0.05),乳腺癌细胞HLA-DR抗原的表达量与浸润T细胞存在正相关关系(r=0.892)。结论 HLA-DR在乳腺癌细胞过表达与浸润淋巴细胞之间存在正相关关系,HLA-DR在乳腺癌的自身免疫调节过程中可能起重要作用,这为临床开展乳腺癌的生物治疗提供了实验依据。     

激动型CD40单克隆抗体体外抑制结肠癌细胞增殖的实验研究

目的 探讨激动型CD40单克隆抗体在体外对结肠癌细胞增殖的抑制作用.方法 树突状细胞(DCs)经结肠癌冻融抗原致敏后予以不同条件激活,分为激动型CD40单克隆抗体组、阴性对照组及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)阳性对照组,诱导培养至第7天,用流式细胞仪检测各组DCs表面分化相关抗原CD80、CD83、CD86和HLA-DR的表达,酶联免疫吸附测定法检测DCs培养液上清中白细胞介素-12(IL-12)的质量浓度,噻唑蓝比色法检测DCs体外刺激T淋巴细胞增殖的能力,进而检测DCs所诱导的肿瘤特异性细胞毒性T淋巴细胞(CTL)对人结肠癌细胞HCT116的杀伤作用.结果 与阴性对照组相比,激动型CD40单克隆抗体组活化的DCs表面抗原CD80、CD83、CD86和HLA-DR的表达率均显著升高(均P＜0.05),DCs上清中IL-12的质量浓度亦显著升高((716.80±53.43) pg/ml比(405.51±12.17) pg/ml,P＜0.05),活化的DCs具有更强的刺激T淋巴细胞增殖的能力(刺激指数2.006 2±0.438 3比1.365 0±0.209 8,P＜0.05),活化的DCs所诱导的CTL对HCT116细胞具有更强的杀伤作用(抑制率(66.08±0.41)％比(46.60±1.10)％,P＜0.05);而与TNF-α阳性对照组相比,其差异均无统计学意义(均P＞0.05).结论 激动型CD40单克隆抗体在体外可促进DCs的活化与成熟,进而诱导肿瘤特异性CTL的产生,从而抑制人结肠癌细胞HCT116的增殖.     

The meaning of the c-kit proto-oncogene product in malignant transformation in human mammary epithelium

To evaluate the relationship between the c-kit proto-oncogene product and malignant transformation of human breast tissue, we examined the immunohistochemical expression of the c-kit proto-oncogene product in both malignant and non-malignant breast tissues. The immunohistochemical expression of the c-kit proto-oncogene product in 40 primary breast cancer tissues (22 axillary lymph nodes negative, 18 lymph nodes positive), in 18 corresponding axillary lymph nodes, and in 10 distant metastastic tissues were studied using an anti-c-kit proto-oncogene product antibody in comparison with 20 normal and 20 benign breast tissues. The mean values of immunoreactive score (IRS) were compared. The IRS of the c-kit proto- oncogene product in normal mammary epithelia was 5.90±1.37 (mean ± s.d.). In benign tissues, the c-kit proto-oncogene product was detected heterogeneously with a reduced IRS (4.05±1.82). In primary breast cancer tissues, the expression of the c-kit proto-oncogene product was often deleted and the average IRS (0.90±1.73) was significantly reduced compared to those of the normal breast tissues or benign breast disease tissues, but no significant difference was shown between the breast cancer groups. The c-kit proto-oncogene product may correlate with growth control or the differentiation of normal breast epithelium. This result suggests that the loss of expression of this protein might correlate with malignant breast cancer progression, but it is most likely involved at an early stage of human breast cancer development. This revised version was published online in July 2006 with corrections to the Cover Date.