抗流感病毒药物的新进展与临床应用

流感是发病率较高的病毒性疾病,临床上仍难于治疗.虽然应用了流感疫苗,流感导致的发病率和死亡率还是很高.所以有效抗流感药物的研发就变得十分重要和紧迫.     

抗流感病毒药物研究的现状

流行性感冒（简称流感）是一种常见病和多发病。由于流感病毒粒表面抗原（ＨＡ和ＮＡ）能经常不断地发生变异，使本来有效的流感病毒疫苗很快失效。因此，抗流感病毒药物的研究已越来越引起人们普遍地重视，至今已发现了一些有苗头的药物，有的已应用于临床，但绝大多数仍处于实验阶段。     

抗流感新药:神经氨酸酶抑制物研究近况

至今在美国已被批准使用的抗流感病毒有 :金刚烷胺 ,金刚乙胺 ,Zanamivir和 Oseltamivir它们正式被批准使用时间分别为 1976,1993,1999和 1999。前两种为金刚烷胺类药物。主要用于预防也可用于早期治疗 ,仅对甲型流感有效 ,对乙型流感无效。而后两者为神经氨酸酶 ( NA)抑制物 ,主要用于早期 (发病在两天内 )治疗 ,尚未被批准用于流感预防 ,对甲、乙型流感均有效。然而 ,对具有合并症的流感疗效较差 ,对全身性感染几乎无效。本文侧重对两种 NA抑制物的防治效果 ,给药剂量和途径 ,药物动力学 ,副反应 ,它们与其它药物间相互作用及导致耐药毒株出现等均做了简要介绍。但该两种药物尚未广泛加以应用 ,故许多结果仅是初步的 ,并仍有不少未知数。同时需指出的该四种药均为流感疫苗重要的助手 ,而不是用来替代流感病毒疫苗     

抗流感新药：社会氨酸酶抑制物研究近况

至今在美国已被批准使用的抗流感病毒有：金刚胺，金刚乙胺，Ｚａｎａｍｉｖｉｒ和Ｏｓｅｌｔａｍｉｖｉｒ它们正式被批准使用时间分别为１９７６，１９９３，１９９９和１９９９。前两种为金刚烷胺类药物，主要用于预防也可用于早期治疗，仅对甲型流感有效，对乙型流感无效，而后两者为神经氨酸酶（ＮＡ）抑制物，主要用于早期（发病在两天内）治疗，尚未被批准用于流感预防，对甲、乙型流感均有效。然而，对具有合并症的流感疗效较     

基于气象及流感病毒活动度的流感流行预测研究

目的 探索基于气象及流感病毒活动度建立北京市流感预测模型的可行性.方法 利用北京市2012—2014年流感样病例监测数据、流感病原学监测数据以及气象数据,采用Poisson回归模型,拟合流感病例数,并对流感流行趋势进行预测.结果 2012—2014年,北京市流感病毒活动度及流感发病水平呈现季节性,每周平均气温、气压、降雨量、相对湿度、最大温差和日照时数与每周流感病例数呈负相关.基于两周前流感病毒各亚型的阳性率及两周前的气象因素拟合北京市流感病例数的效果最好,且预测效果最佳.结论 基于气象及流感病毒活动度数据预测流感发病水平是可行的.     

抗乙型流感病毒单克隆抗体的制备和分析

抗乙型流感病毒单克隆抗体的制备和分析韩洪彦张容惠张励力（解放军第２６２医院临床实验科，北京１０００８８）流感是人类还不能控制的世界性传染病。我国被认为是流感病毒流行和变异的发源地之一［１］，对人类危害较大的是甲型和乙型流感病毒。以往认为乙型流感病毒设...     

靶向宿主的抗流感病毒药物研究进展

正流行性感冒,又称流感,是由流感病毒(influenzaA virus,IAV)引起的急性呼吸道疾病,在全球范围内具有较高的发病率和死亡率。流感病毒导致季节性大流行和人畜共患疾病的暴发,给全球经济带来严重的损失并对世界范围内的公共卫生产生威胁。疫苗和抗病毒药物是预防和治疗流感病毒的主要手段,但因流感病毒易发生抗原漂移和抗原转换,疫苗防治效率低。目前临床上的抗病毒药物主要有:     

成都市流感样病例常见呼吸道病毒流行特征分析

目的 了解成都市流感样病例常见呼吸道病毒感染状况.方法 抽取2014年5月-2015年11月间成都市3个流感监测点采集的流感样病例的临床标本1367份,使用PCR法进检测甲型流感病毒、乙型流感病毒、丙型流感病毒、Ⅰ型副流感病毒、Ⅱ型副流感病毒、Ⅲ型副流感病毒、Ⅳ型副流感病毒和鼻病毒8种病毒及其亚型.结果 1367份标本中共374份8种病毒检测呈阳性,其中19例为混合感染,总阳性检出率为27.36％.阳性检出率夏季最高(32.68％),秋季最低(23.76％),春季和冬季分别为28.01％和31.26％,四季检出率结果有统计学差异(x2=17.334,P＜0.001).19例混合感染的样本,以鼻病毒合并其他病毒感染为主.结论 成都市流感样病例以鼻病毒、甲型和乙型流感病毒感染为主,其次为丙型流感病毒感染,偶发副流感病毒感染.     

甲型流感病毒与免疫

甲型流感病毒是引起大规模流感爆发的主要病原体，在流行期间引起超额死亡率。近年来，高致病性禽流感病毒（HSN1和H7N7）引发的疫情引起了全世界的广泛关注。对甲型流感病毒引起机体免疫系统的变化及免疫应答的发生深入了解，有助于了解甲型流感病毒的致病机制，以采取更有效的治疗措施、设计更有效的抗病毒药物和流感疫苗，有助于应对有可能到来的甲型流感爆发的威胁。本文就甲型流感病毒诱导机体免疫应答的研究进展进行综述。     

双重荧光定量RT—PCR在快速检测A、B型流感病毒上的应用

目的 建立双重荧光定量RT-PCR技术同时快速检测A、B型流感病毒,并应用于临床样本的检测.方法 在A型流感病毒M基因和B型流感病毒HA基因的保守区序列分别设计特异性引物和Taqman探针,建立优化双重荧光RT-PCR反应体系,评价所建双重RT-PCR反应体系的特异性、敏感性和稳定性,并应用于疑似流感含漱液标本检测.结果 该方法对A、B型流感病毒检测具有高度特异性,检出限分别为0.1TCID50和0.01TCID50,具有较好的稳定性.可从疑似流感患者含漱液中直接检测到流感病毒核酸.结论 本研究建立的双重荧光定量RT-PCR可以同时准确分型A、B型流感病毒,灵敏度高,稳定性好,是一种快速检测流感病毒的新方法.     

中国H3N2亚型流感病毒烷胺类药物耐药性研究

目的 通过监测我国自1989年以来H3N2亚型流感病毒对烷胺类药物产生耐药性的情况,为流感的临床治疗用药提供一定的指导.方法 从我国流感监测网络中所分离的H3N2亚型流感病毒中随机选择了584株病毒,通过对病毒与烷胺类药物耐药性相关的M2基因进行序列测定,同时在细胞水平上通过药物敏感试验分析病毒对药物的敏感性,从而分析病毒产生耐药的情况.结果 1989-1999年没有发现对烷胺类药物产生耐药性病毒株,但2003年对烷胺类药物产生耐药性病毒株的比例从2002年的3.4%升到了56.0%,2005年达到77.6%.结论 自2003年以后,流行的H3N2亚型流感病毒超过50%的病毒产生了对烷胺类药物的耐药性,并且耐药病毒株的比例呈逐年升高的趋势.     

乙型流感病毒单克隆抗体的制备与评价

目的制备抗乙型流感单克隆抗体,为建立特异、灵敏、简便的乙型流感病毒快速检测方法奠定基础。方法应用鸡胚接种法、ELISA方法、免疫扩散法、血凝抑制法筛选能稳定分泌抗乙型流感病毒单抗的杂交瘤细胞,并对分泌的单抗的安全性,有效性、抗体亚型,特异性及灵敏性进行了全面评价。结果获得了3株能稳定分泌抗乙型流感病毒单抗的杂交瘤细胞株,分别命名为3G11、4F9、8G6;制备的抗乙型流感病毒单克隆抗体无鼠源病毒污染;抗体亚型为IgG2a亚型,轻链均为κ链;对乙型流感病毒具有高度特异性,而与甲型流感病毒、呼吸道合胞病毒、副流感病毒、呼吸道腺病毒等无交叉反应。结论制备的乙型流感病毒单克隆抗体具有特异性强、灵敏性高,为临床乙型流感的早期快速诊断及流行病调查奠定了实验基础。     

临床实验室流感病毒检测的相关影响因素分析

目的 在流感流行季节对流感样病例进行流感病毒筛查,分析影响流感病毒阳性检测结果的相关因素,提高流感的阳性检测率.方法 选取发热门诊就诊的流感样病例,采集鼻咽拭子,应用胶体金抗原快速检测法与巢氏PCR法进行流感病毒的检测并对比结果.分析患者就诊时间、临床症状及检测方法、采样部位等因素对阳性率的影响.结果 研究发现年龄>60岁、体温在38.0℃~38.9℃之间、发热2 d就诊的患者,流感病毒阳性检出率高于其他组;鼻拭子及咽拭子流感病毒检出率无统计学差异;不同检测方法,流感病毒胶体金抗原快速检测法阳性检出率为17.6%,核酸PCR阳性检出率为31.0%,差异有统计学意义,流感病毒胶体金抗原快速检测法的敏感性27.6%,特异性86.9%,阳性预测值48.8%,阴性预测值72.8%,与PCR的一致性为68.6%.结论 发病早期就诊的流感样病例,流感病毒阳性检出率偏高;不同标本采样部位流感病毒检出率差别不大.虽然流感病毒胶体金抗原快速检测法操作简单、方便快捷,但其敏感性偏低,且存在一定假阴性结果,而流感病毒核酸检测阳性率较高,但实验要求高,操作过程复杂.     

以分泌型荧光素酶为报告基因的单轮感染流感病毒的构建

目的构建以分泌型荧光素酶为报告基因的单轮感染流感病毒用于药物作用机制的快速鉴别。方法通过使用分泌型荧光素酶(Gluc)序列替代流感病毒HA基因,并利用表达质粒反式提供HA蛋白,借助甲型流感病毒WSN反向遗传学产毒系统,构建带有报告系统的单轮感染流感病毒。结果首轮接种单轮感染流感病毒的细胞上清中可以检测到Gluc信号,但检测不到病毒滴度,而在第二轮感染的细胞上清中检测不到Gluc信号,表明该单轮感染病毒在感染过程中能够分泌Gluc蛋白并且不能产生具有感染性的子代病毒颗粒。通过对复制动力学和时相的观察,明确了单轮感染病毒的生活周期,同时结合4种已知作用机制的抗流感药物的阻断实验结果,证明该系统可以用来快速、有效地鉴别药物的作用机制。结论成功构建了以分泌型荧光素酶为报告基因的单轮感染流感病毒,该系统可以用于抗病毒药物作用机制的快速鉴别。     

抗三价流感病毒亚单位疫苗IgY防治小鼠流感病毒感染的实验研究

目的:探讨抗三价流感病毒亚单位疫苗IgY(Immunoglobulin Yolk)预防及治疗流感病毒感染小鼠的作用。方法:建立A/fm/1/47(H1N1)流感小鼠模型;分5组,观察各组小鼠死亡率,脾、肺指数及肺指数抑制率。结果:0.2%抗三价流感病毒亚单位疫苗IgY于攻毒前24、6、1小时滴鼻3次显著地预防流感病毒致死率(30.0%),而攻毒后1、6、24小时分别滴鼻3次,此后每天滴鼻1次,持续5天,致死率为20.0%,两组与阳性对照组(致死率90.0%)、非特异性IgY预防和治疗组(致死率80.0%,70.0%)比较差异显著(P<0.01)。0.2%抗三价流感病毒亚单位疫苗IgY预防组和治疗组肺指数显著低于阳性对照组(P<0.05~0.01),其治疗组也低于非特异性IgY预防和治疗组(P<0.05)。结论:抗三价流感病毒亚单位疫苗IgY感染前后24小时内多次滴鼻能有效地预防和治疗流感病毒感染。     

流感病毒膜蛋白M2e应用研究进展

流行性感冒是一种传染性较高的急性呼吸道疾病,极大地威胁了人类健康.由于流感病毒易发生变异,致目前的防治措施不能及时有效地应对,使防治效果严重降低.流感病毒膜蛋白M2e(extracellular domain of the M2 protein)高度保守,是流感病毒的通用性作用靶点,基于M2e的免疫预防措施可提供广谱的保护作用.M2e疫苗及M2e抗体已成功在动物模型中发挥抗流感作用,临床应用则报道较少,因而研究M2e对于流感病毒的防治具有重要意义.     

流感病毒核酸疫苗与粘膜疫苗研究（摘要）

流感病毒至今仍是引起人类死亡的主要病因之一.因为流感病毒易突变,人类至今无法征服流感.疫苗接种预防流感是一种有效的手段.随着现代医学工程的进展,核酸疫苗为我们提供了新的选择,特别是核酸疫苗容易快速制备,在爆发大流行时将是一种快速有效的手段. 流感病毒核酸疫苗是指将含有流感病毒基因的表达质粒,通过肌肉注射,基因枪注射等方法将其导入机体内,在机体内表达抗原蛋白,从而激发机体免疫系统产生针对流感病毒编码蛋白的特异性免疫应答反应,有效保护小鼠抵抗致死量流感病毒感染.核酸疫苗的产生使疫苗由传统的灭活疫苗、减毒疫苗等第一代疫苗和亚单位等第二代疫苗发展至第三代.它不仅能应用于各种感染性疾病,而且还能应用于癌症和免疫性疾病的治疗,使疫苗由预防疾病转为治疗疾病.我们以小鼠为实验动物,流感病毒核酸疫苗为研究模式来阐述核酸疫苗抗病毒感染的作用机理.     

北京市房山区2014-2015年流感病原学监测结果分析

目的 通过对北京市房山区2014-2015年流感病原学的监测结果进行分析,了解房山区流感病毒的流行特征.方法 采集房山区哨点医院流感样病例的咽拭子标本1 339份,用荧光定量PCR法检测核酸及亚型,同时进行流感病毒分离及血凝实验(HA)检测.结果 2014年1月6日-2015年12月28日,共采集1 339份流感样病例咽拭子,荧光定量PCR法检测核酸阳性数为215例(阳性率为16.06％),其中甲型H1N1流感病毒32株,甲型H3N2流感病毒107株,乙型流感病毒76株.病毒分离阳性数为148例(阳性分离率为11.05％).本年度第2-6周和第48-52周流感阳性率较高,且第2-6周以甲型H1N1和乙型流感病毒为主,第48-52周以甲型H3N2流感病毒为主.结论 房山区2014-2015年流感高发季节为第2-6周和第48-52周,上半年致病病原体以甲型HIN1流感病毒和乙型流感病毒为主,下半年以H3N2流感病毒为主,不同性别之间各亚型流感病毒的阳性率构成比无统计学差异(P＞ 0.05).     

254例急性呼吸道感染病例病原学调查分析

目的 分析急性呼吸道感染病例的病毒病原构成,掌握主要病原体活动水平及变化规律,了解丰台地区急性呼吸道感染病原谱.方法 以2010-2012年成人急性呼吸道感染病例为研究对象,收集病例基础信息,采集鼻咽拭子标本,使用多重PCR及RT-PCR对流感病毒、呼吸道合胞病毒、腺病毒、副流感病毒、偏肺病毒、冠状病毒、鼻病毒、博卡病毒和肺炎支原体等9种病原进行检测,数据分析使用SPSS 17.0软件.结果 254例标本中154例检测阳性,阳性率为60.63％,男女阳性检出率无统计学差异.冬春季致病病原体以流感病毒、副流感病毒及支原体为主,夏季仅检出副流感和支原体.流感样病例的主要病原体为流感病毒及副流感病毒;肺炎病例致病病原体主要为肺炎支原体.2010-2011年流感流行季甲型流感病毒为优势病原,2011-2012年流感流行季乙型流感病毒为优势病原.结论 2010-2012年间,北京丰台地区引起成人急性呼吸道感染的主要病原为流感病毒、支原体和副流感病毒.不同季节的优势病原不同.     

一起甲型H1N1疫情爆发的流行病学分析

甲型H1N1流感为急性呼吸道传染病,其病原体是一种新型的甲型H1N1流感病毒,在人群中传播.与以往或目前的季节性流感病毒不同,该病毒毒株包含有猪流感、禽流感和人流感三种流感病毒的基因片段.人群对甲型H1N1流感病毒普遍易感,并可以人传染人,人感染甲流后的早期症状与普通流感相似,包括发热、咳嗽、喉痛、身体疼痛、头痛、发冷和疲劳等,有些还会出现腹泻或呕吐、肌肉痛或疲倦、眼睛发红等.2009年开始,甲型H1N1流感在全球范围内大规模流行.