大鼠单克隆抗体——Ⅶ.用降植烷和福氏佐剂预处理大鼠后腹水产生及单克隆抗体产量的增加

作者研究了腹腔注射降植烷、福氏不完全佐剂(IFA)以及上述两种佐剂的混合物(V/V)(称PIFA)对Louvain大鼠腹水产生及单克隆抗体(McAb)产量的影响。当腹腔注射杂交瘤或免疫细胞瘤细胞的同时注射2ml PIFA可获得最佳结果。若与未经处理的对照大鼠相比,腹水产生增加4.7倍,单克隆抗体产量增加6倍多。 大鼠-大鼠杂交瘤系统有以下优点:①在小鼠系统不适宜的情况下,可用大鼠代     

大鼠-小鼠淋巴细胞杂交瘤细胞株的建立

<正> 在建立针对小鼠共有抗原的单克隆抗体(McAb)的淋巴细胞杂交瘤细胞株时,若仍以小鼠(同种)作致敏淋巴细胞的供者,很难使小鼠对这类抗原致敏,因此有必要免疫异种动物以解决这问题。本文报道产生针对小鼠 IgE 决定簇的 McAb 的大鼠-小鼠淋巴细胞杂交瘤的建株。作者用小鼠抗天花粉蛋白的 IgE McAb TE-1(见顾华、叶敏,第三     

小鼠形成腹水性肿瘤和产生单克隆抗体的影响因素

杂文瘤细胞注入小鼠腹腔内诱发腹水性肿瘤,并产生含有高滴度单克隆抗体的腹水。为确定形成腹水和产生单克隆抗体的最佳条件,研究了影响分泌免疫球蛋白肿瘤生长的几个因素。用SP2/0骨髓瘤。胞和免疫小鼠脾细胞融合产生杂交瘤细胞,作者证明:(1)诱发腹水性肿瘤需要的最佳杂交瘤细胞数在6—32×15~5细胞之间;(2)每只小鼠最多用0.5ml降植烷致敏;(3)用降植烷致敏后14天才可注射杂交瘤细胞;(4)用雄性小鼠形成腹水和产生单克隆抗体明显优于雌性鼠;(5)小鼠年龄应在43～78天之间。在上述条件下最多在6天过程中,平均每鼠产生7～10ml腹水,其中含有高滴度的抗体。这些动物在注射肿瘤细胞后通常活存11～16天,在第5和第9天之间开始产生腹水。     

大鼠杂交瘤技术的特点及应用的研究

作者成功地引建了大鼠杂交瘤技术体系,以此技术获得分泌大鼠抗辣根过氧化物酶(HRP)单克隆抗体(McAb)的杂交瘤株。并制备了HRP-大鼠抗HRP(PAP)复合物,在细胞及组织切片上染色效果良好,背景清晰。为促进这一技术体系的推广应用提供有利条件。     

分泌抗绵羊红细胞单克隆抗体的杂交瘤细胞的建立

自1975年Kohler和Milstein建立了杂交瘤技术以来,免疫学已进入了一个新的时代。通过杂交瘤技术产生的单克隆抗体具有专一、均匀和大量的优点。其应用范围几乎已深入到生物学的各个领域。我组采用绵羊红细胞(SRBC)作抗原免疫小鼠,取其脾脏细胞与小鼠骨髓瘤细胞进行融合,得到了分泌抗SRBC单克隆抗体的杂交瘤细胞,方法和结果报道如下。     

大鼠杂交瘤技术的特点及应用的研究

作者成功地引建了大鼠杂交瘤技术体系．以此技术获得分泌大鼠抗辣根过氧化物酶(HRP)单克隆抗体(McAb)的杂交瘤株，并制备了HRP-大鼠抗HRP(PAP)复合物，在细胞及组织切片上染色效果良好．背景清晰，为促进这一技术体系的推广应用提供有利条件。     

抗大鼠乳腺癌的单克隆抗体的肿瘤定位以及阿霉素-抗体结合物对肿瘤生长的抑制作用

单克隆抗体技术创立以来,解决了大量生产与细胞表面反应的特异性抗体的问题,并且也解决了用抗体作为肿瘤治疗剂的载体的问题。作为肿瘤治疗剂的载体的问题。作者对此在大鼠体内、外进行了研究。作者用大鼠Sp4乳腺癌细胞免疫同系大鼠后,取其脾细胞与P3NSI小鼠骨髓瘤细胞融合。生成的杂交瘤细胞可产生针对大鼠自发乳腺癌Sp4细胞表面抗原的单克隆抗体。取此杂交瘤细胞的上清液用偶联有羊抗大鼠免疫球蛋白的Sepharose4B洗脱、提纯抗Sp4瘤细胞     

抗乙醇诱导的大鼠肝脏微粒体细胞色素P-450单克隆抗体的制备及特性鉴别

从乙醇处理的大鼠分离细胞色素P-450(EtOH-P-450)。纯化后免疫BALB/c雌鼠,取其脾细胞与小鼠骨髓癌细胞制备杂交瘤。应用固相放射免疫法筛选单克隆抗体(McAb)产生杂交瘤。试验中使用~(35)[S]蛋氨酸标记的大鼠抗小鼠k链McAb作为第二抗体(Yelton,D.E,etal:HYbriboma 1。5-11。1981)。分离31个单独的产生一种单一鼠免疫球蛋白     

BALB/c小鼠腹水中杂交瘤细胞的再利用(摘要)

<正> 在利用杂交瘤技术制备单克隆抗体过程中,小鼠腹水经离心后,我们发现沉淀中的细胞约有50～80％为活性较好的杂交瘤细胞。为了重新利用这些细胞,我们将小鼠腹水中的产AFP单抗杂交瘤细胞,以淋巴细胞分离液(比重1.088)分离,可得活性     

单克隆抗体检测人血液相关的B型肝炎病毒表面抗原(HBs)-相同单克隆抗体能作为捕捉剂和示踪剂

应用血浆来源的B型肝炎病毒疫苗(由Korea Green Cross Research Lab.,Seoul Korea惠赠)作为抗原和杂交瘤技术,分离出一株分泌11G12单克隆抗体(IgG1亚型)的小鼠杂交瘤     

人—人B淋巴细胞杂交瘤

Kohlef和Milstein发明的杂交瘤技术是生物学技术的一项重大突破,它对生物学和医学科学发展的推动作用是无可估量的。但是,迄今为止,绝大多数杂交瘤源自啮齿类动物,所产生的单克隆抗体(简称McAb)是小鼠或大鼠免疫球蛋白。因此,它们在某些领域中的应用,特别是在临床治疗中受到了限制。为此,科学家们努力探求     

抗人前B淋巴细胞鼠-鼠杂交瘤的建立

用急淋患者的白血病细胞为抗原免疫BALB/c小鼠,采用杂交瘤技术制备了一株抗人前B淋巴细胞杂交瘤All_(26)。该杂交瘤分泌的单克隆抗体活性高,特异性地针对前B淋巴细胞,     

抗大鼠Nogo分子单克隆抗体的制备与初步鉴定

目的：制备抗大鼠Nogo分子单克隆抗体(mAb)，为研究Nogo分子的组织分布和功能提供实验手段。方法：应用淋巴细胞杂交瘤技术制备小鼠源性抗大鼠Nogo mAb。用免疫荧光组织化学技术，对Nogo分子在大鼠中枢神经系统(CNS)的分布进行鉴定。结果：获得3株分泌抗Nogo mAb的杂交瘤细胞株。间接ELISA测定腹水效价达10^-6，两株mAb为IgG1(κ)亚类，另一株为IgG2b(κ)，在免疫荧光组织化学技术应用中获得较满意效果。结论：获得3株能特异性识别天然Nogo分子的mAb，为进一步研究Nogo分子的结构和功能奠定了基础。     

经福氏不完全佐剂诱发的小鼠单克隆抗体腹水产量增加

制备单克隆抗体的传统方法是在小鼠腹腔内种植分泌抗体的杂交瘤细胞后诱发小鼠产生单克隆抗体腹水。为了提高小鼠腹水的产量,本文作者探讨了用福氏不完全佐剂(FIA)诱导小鼠及小鼠性别对小鼠腹水产生和单克隆抗体产量的影响。在BALB/c小鼠腹腔内注射0.1ml降植烷或FIA间隔7d后再接种10~6杂交瘤细胞V2.6E4。小鼠腹部呈高度     

大鼠抗人甲胎蛋白单克隆抗体的制备和鉴定

目前抗人甲胎蛋白单克隆抗体(hAFPMcAb)均来自小鼠系统,主要应用于临床诊断和肝细胞癌的选择定位与导向治疗等方面。hAFP McAb的临床应用前景广阔,但国内开展尚不多。本文利用大鼠杂交瘤系统,并采用一种新的筛选方法,以建立分泌hAFP McAb的大鼠杂交瘤。 1 材料和方法 1.1 hAFP抗原 本室制备。     

纯化的单克隆抗体对乙酰胆碱酯酶催化反应的响影

本文研究了BALB/c小鼠杂交瘤细胞分泌的抗AchE单克隆抗体对AchE催化反应的影响及其机制。 小鼠腹水抗体经蛋白A-Sepharose CL-4B亲和层析柱分离纯化,聚丙烯酰胺凝胶电泳为单一区带,ELISA试验结果11株单克隆抗体的滴度分别在1:5000～300,000。在以酰胆碱为底物的催化反应中,3F_3 2G_8、1H_(11)三株杂交瘤分泌的单克隆抗体对AchE活性有明显抑制     

抗白细胞介素-2受体单克隆抗体制备及其应用研究的进展

自1981年Uchiyama等建立第一株抗白细胞介素 2受体(IL_2R)杂交癌抗Tac以来,国外从事这方面的研究工作越来越多。在早期,研究者门试图得到以下几种类型的抗iL_2R的单克隆抗体(McAb)杂交瘤:(1)可以阻断IL_2对IL_2R的作用。(2)有类似于IL_2作用。(3)不同于前两种作用的抗体。目前,所获得的抗IL_2R的杂交瘤细胞系主要是小鼠抗人IL_2R、大鼠抗小鼠iL_2R及小鼠抗大鼠IL_2R。应用这些杂交瘤细胞系分泌的McAb对上述三个种源的IL_2R的分子结构、基因组成及定位、受体的分布与疾病的关系,以及某些免疫学疾病的诊断和治疗方面的研究都取得了重大的进展。并且展示了远大的发展前景。本文就这方面的研究进展作以下综述。     

分泌抗人甲胎蛋白并对肝癌细胞株有特异性亲和力的单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立和鉴定

采用杂交瘤技术将小鼠骨髓瘤细胞Sp2/0与人甲胎蛋白免疫的BALB/c小鼠脾细胞融合,,经3～4次有限稀释法克隆,ELISA法筛选,获得分泌抗人甲胎蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株 其上清和腹水效价分别为10~(-2)和10~(-6～-9)。再经间接荧光法、放射免疫法反复     

一种快速大量生产小鼠单克隆抗体腹水的方法

应用降植烷或不完全福氏佐剂诱导BALB/c小鼠产生腹水的方法已广为采用。但缺点是所得腹水量较少,收获时间较长,有时可诱发实体瘤等。为此,我们参照Kints等(J Immunol Meth,1989;119:241)以降植烷(P)和不完全佐剂(IFA)的混合物(PIFA)与杂交瘤细胞系同时注射大鼠制备腹水的方法,用PIFA+B4(抗SEB单克隆抗体杂交瘤细胞系)制备了BALB/c小鼠的腹水。并与以降植烷、IFA和PIFA的常规制备法作了比较。 实验方法是将实验小鼠分为降植烷、     

森林脑炎病毒单克隆抗体杂交瘤细胞系的建立及实验研究

应用淋巴细胞杂交瘤技术制备高纯度抗体国内外已有不少报道、在病毒学方面的应用更为普遍。但是,有关森林脑炎病毒(简称TBEV)的的单克隆抗体目前国内尚未见有报道,国外仅见M.Novak(1982)建立了一株分泌IgM的S—16杂交瘤细胞系。本文建立了一株稳定分泌抗TBEV杂交瘤细胞系。经辣根过氧化物酶和异硫氰酸荧光素标记初步证实可供TBEV的实验诊断,经小鼠实验性治疗证实有一定效果。