纳米羟基磷灰石-壳聚糖复合材料对NIH3T3细胞粘附增殖的影响

目的制备纳米羟基磷灰石-壳聚糖(nano hydroxyapatite-chitosan,nHA/CS)复合膜和三维立体支架,观察复合材料的两种状态对成纤维细胞粘附形态的影响。方法制备nHA/CS复合膜和HA/CS复合膜,然后将两组膜分别与NIH3T3细胞共培养,倒置显微镜下观察细胞在材料表面粘附形态同时进行粘附细胞数量的测定;冷冻干燥法制备nHA/CS三维支架,将HA制成同样大小的圆盘状,然后将NIH3T3细胞分别与两组材料共培养,扫描电镜观察细胞在两种材料表面的粘附形态同时进行细胞粘附数量的测定和能谱分析。结果与NIH3T3细胞共培养5、7d后nHA/CS组细胞粘附数量高于HA/CS组和HA组,差异有显著性。结论nHA/CS复合材料有促进细胞粘附增殖作用。     

nHA/Mg/PLGA生物复合材料的结构及耐蚀性能研究

采用粉末冶金法制备nHA-Mg复合材料,通过浸涂提拉法在nHA-Mg复合材料表面制备PLGA、nHA-PLGA涂层,利用SEM观察nHA-Mg-PLGA生物复合材料在模拟体液浸泡腐蚀后表面形态的变化,研究腐蚀时间与腐蚀液pH之间的关系。结果表明,PLGA涂层、nHA-PLGA涂层的加入减缓了材料的腐蚀速率,降低了材料降解时的pH值;nHA加入到涂层中,减缓了材料的腐蚀速度,提高了复合材料的生物相容性。结论:nHA-Mg-PLGA生物复合材料减缓了镁合金的腐蚀速率,具有良好的抗腐蚀性能以及良好的生物相容性。     

载乳铁蛋白壳聚糖微球/nHA/Co复合材料的制备

目的:制备载乳铁蛋白壳聚糖微球/nHA/Co复合材料作为组织工程材料拟修复骨缺损。方法:通过乳化交联法法制备载乳铁蛋白壳聚糖微球,化学沉淀法制备纳米羟基磷灰石,改良酸酶法提取Ⅰ型胶原,应用京尼平交联制备复合材料,SEM检测材料的微观结构,测定壳聚糖微球对乳铁蛋白的载药率和包封率。结果:复合材料及各组成成份扫描电镜观察均具有较好的微观形态,壳聚糖微球对乳铁蛋白的载药率为(1.06±0.06)%,包封率为(88.2±2.9)%。结论:载乳铁蛋白壳聚糖微球/nHA/Co复合材料具有较好的微观形态。     

纳米羟基磷灰石-壳聚糖复合材料对细胞粘附的影响

目的：制备纳米羟基磷灰石-壳聚糖（nano hydroxyapatite-chitosan,nHA/CS）复合材料,观察其对成纤维细胞粘附行为的影响.方法：将溶胶-凝胶法制得的纳米羟基磷灰石充分混合于2%壳聚糖乙酸溶液中,冷冻干燥法制备纳米羟基磷灰石-壳聚糖复合材料,并对材料进行X射线衍射分析（XRD）、红外光谱分析（FT-IR）、扫描电镜（SEM）、透射电镜（TEM）检测.将NIH3T3细胞分别接种于复合材料和致密羟基磷灰石（dense hydroxyapatite,HA）表面,细胞计数法计算细胞粘附数量,扫描电镜下观察细胞粘附形态.结果：XRD分析结果表明溶胶-凝胶法制备的HA和nHA的晶体结构符合标准羟基磷灰石的空间6方晶体结构.TEM分析结果显示nHA/CS材料中羟基磷灰石为纳米级粉体.接种5、7、9 d后nHA/CS材料表面的细胞粘附数量高于HA组,差异有显著性（P＜0.05）.扫描电镜下,细胞以多个突起粘附于复合材料表面,并具有良好的伸展状态.结论：与HA相比,nHA/CS材料更有利于成纤维细胞的粘附,生物相容性良好.     

可注射镁合金/硫酸钙成骨复合材料的制备及性能研究

目的:本研究采用半水硫酸钙晶体(Calcium sulphate hemihydrate,CSH)与可吸收镁合金(Magnesium alloys,Mgalloys)制备出一种可注射的新型复合人工骨材料,并研究其可注射性,机械性能,生物相容性、生物降解等各方面的性能.方法:对比不同比例Mg/CSH复合材料的初、终凝时间、压缩强度、注射特性;采用X线衍射分析(X-ray diffraction analysis,XRD)和能量弥散X射线探测器(Energy Dispersive X-ray Detector,EDX)对材料成分进行分析;模拟体内液态环境,测试材料在37℃浸泡环境下的生物活性及在磷酸缓冲盐浸泡下的重量变化以及pH变化;材料表面形态采用扫描电镜(Scaning electron microscopy,SEM)观察;用大肠杆菌抑菌性实验对材料的抗菌性进行检测.结果:与纯CSH组相比,添加Mg的复合材料凝固时间延长,复合材料的可注射性显著提高(纯CSH的可注射比例为43％,20％ Mg/CSH为69％).随着Mg含量的提高,抗压强度方面也有所提高(K0.05).XRD及EDX检测结果均证明材料中含有CSH以及Mg晶体.不同复合材料在浸泡环境下的结果表明,Mg的添加对复合材料的pH无影响;降解率方面,在浸泡时间小于21d时,纯CSH与Mg/CSH复合材料的降解速度差异无统计学意义;在浸泡21d后,复合材料的降解性明显优于纯CSH (P＜ 0.05).SEM检测浸泡前后材料表面,结果表明浸泡对材料差异无统计学意义;20％ Mg/CSH及10％ Mg/ CSH与纯CSH 24h后抑菌性能的差异有统计学意义.结论:添加镁合金的可注射硫酸钙复合材料展示出良好的机械性能,在可注射能力、抗菌性,体内生物相容性方面也表现良好.该材料具有潜在的临床应用价值.     

电纺聚己内酯引导骨再生膜的仿生矿化研究

目的 探讨组织工程化电纺聚己内酯支架材料的生物矿化特性及其用作引导骨组织再生膜的可能性。方法利用静电纺丝法制备聚己内酯（PCL）超细纤维膜支架,采用体外过饱和矿化液（SCS）浸泡法,在电纺膜上仿生沉积磷灰石。该复合材料采用扫描电子显微镜（SEM）、X射线衍射仪（XRD）、傅里叶变换红外光谱仪（FTIR）等方法进行结构表征;采用接触角实验评价其亲水性;将成骨细胞与复合材料共培养,用SEM观察并评价其细胞相容性。结果 PCL电纺薄膜由超细纤维交织形成三维多孔结构,随着矿化时间增加,PCL电纺纤维上沉积的结晶物数量增多,形态增大并覆盖整个薄膜表面,形成磷酸氢钙及类骨磷灰石晶体。成骨细胞在复合材料表面黏附、铺展,呈正常生长形貌。结论 PCL电纺膜经过SCS处理是一种简便有效的制备复合材料的仿生矿化方法,该材料具有良好的细胞相容性,在仿细胞外基质组织工程化材料及引导骨组织再生膜研制方面具有一定的应用前景。     

多孔颗粒状HAPw/n-ZnO复合材料的制备工艺研究

目的:将粉末状羟基磷灰石晶须纳米氧化锌(HAPw/ n-ZnO)复合材料制备成多孔颗粒状。方法:以HAPw/n-ZnO复合材料为原料,加入硅溶胶在不同温度下煅烧并借X射线衍射(XRD)分析确定硅溶胶与HAPw/n-ZnO发生化学反应的温度。再加入控制粒径100~250 μm的造孔剂聚甲基丙烯酸甲酯(PMMA)及30wt%的硅溶胶为粘接剂,以魔芋萄甘聚糖(KGM)凝胶冷压过模成型烧结后粉碎过筛,应用X射线衍射、扫描电镜、万能试验机、阿基米德排水法测试分析。结果:硅溶胶与HAPw/n-ZnO在高于600 ℃时会发生反应;烧结600 ℃保温2 h孔隙率最为理想;造孔剂含量为40 VOL%时孔隙率为64.2%,抗压缩强度为0.9 MPa。结论:造孔剂法可制备多孔HAPw/n-ZnO复合材料。     

模拟体液仿生矿化法制备的羟磷灰石-壳聚糖支架的性能研究

目的 应用模拟体液（SBF）仿生矿化法制备羟磷灰石（HA）-壳聚糖支架,探讨矿化时间对HA-壳聚糖支架结构及细胞相容性的影响。方法 应用冷冻干燥法制备壳聚糖支架,将该支架应用交替浸泡法进行预钙化,然后浸入SBF中进行矿化,控制矿化时间分别为7、14、21 d,即为3组实验组,以单纯壳聚糖支架为对照组,检测4组支架的理化性质。再将经过成骨诱导后的脂肪基质干细胞（ADSCs）接种到HA-壳聚糖支架上,检测不同矿化时间支架的细胞相容性。结果 矿化14 d,HA-壳聚糖支架的矿化物分布均匀,晶体组成符合HA特征,压缩弹性模量随着矿化时间的延长而增强,在矿化21 d时其压缩弹性模量与对照组的差异具有统计学意义（P<0.05）。矿化14 d,ADSCs的增殖量最多,与其他实验组的差异均有统计学意义（P<0.05）;其钙离子和Ⅰ型胶原的分泌量也最多。结论 SBF仿生矿化法可用于制备HA-壳聚糖骨组织工程支架,该支架在SBF中矿化14 d左右时其生物相容性及理化性质可达到最佳状态。     

成人牙髓干细胞与壳聚糖-磷酸三钙复合材料相容性试验研究

目的:研究成人牙髓干细胞与壳聚糖-磷酸三钙复合材料的生物相容性。方法:采用冷冻干燥法制备壳聚糖-磷酸三钙复合材料。酶消化法分离,培养人牙髓干细胞,并将达到一定数量级的牙髓干细胞与支架材料进行复合培养,通过扫描电镜观察细胞的生长情况。结果:扫描电镜可见复合材料具有良好的多孔网状结构,成人牙髓干细胞与材料表面紧密贴附,生长良好。结论:复合壳聚糖-磷酸三钙进行培养的成人牙髓干细胞生长良好,具有良好的生物相容性。表明壳聚糖-磷酸三钙完全符合生物支架材料的要求,是一个具有很好应用前景的牙髓组织工程支架材料。     

新型多孔HA/PDLLA支架体外细胞相容性的实验研究

目的:研究新型多孔羟基磷灰石/聚乳酸(HA/PDLLA)支架材料的体外细胞相容性。方法:贴壁法培养兔骨髓基质细胞(bone marrow stromal cells,BMSCs),经体外矿化诱导培养、扩增后,与实验组 A(含2%HA 的 HA/PDLLA)、实验组 B(含4%HA 的 HA/PDLLA)及对照组(PDLLA)分别进行体外复合培养;并通过定性及定量检测细胞在材料表面的粘附能力、增殖活力,验证细胞材料复合体的成骨活性,比较分析各组支架材料之间的差异。结果:兔 BMSCs在三组支架材料的表面均能生长,经体外诱导后在支架材料的表面形成钙结节,实验组 A 与 B 细胞的粘附及增殖能力均强于对照组(P<0.05)。结论:兔 BMSCs 与新型多孔 HA/PDLLA 支架材料有良好的细胞相容性。     

Inhibition of Candida albicans by the peroxidase/SCN−/H2O2 system

Effects of the salivary peroxidase (SPO) system on the growth, glucose uptake and metabolic activities of oral bacteria are well documented but the effects on oral fungi are virtually unknown. Therefore, the viability of Candida albicans (ATCC 28366) exposed to the peroxidase/SCN-/H2O2 system was studied in sterilized saliva, in phosphate-buffered saline (PBS) and in potassium chloride. The growth of C. albicans in glucose-supplemented saliva was faster at pH 5.5 than at pH 7. The addition of the complete SPO (or lactoperoxidase) system to either sterilized saliva, KCl (50 microM) or PBS at pH 5.5 inhibited dose-dependently the viability of C. albicans in KCl, but no inhibition was found in PBS or saliva. Maximal inhibition was achieved in 2 h and with > 320 microM of peroxidase-generated HOSCN/OSCN-. However, physiological salivary concentrations of phosphate (> or = 1.0 mM) and PBS blocked the antifungal effect of HOSCN/OSCN-. The relative proportions of SCN- and H2O2 were critical to the antifungal effects. With 0.2 mM KSCN, a complete loss of viability was achieved, though the HOSCN/OSCN- concentrations did not exceed 100 microM. It is concluded that C. albicans is sensitive to HOSCN/OSCN- but salivary concentrations of phosphate block the antifungal effect of the peroxidase systems.