胶质母细胞瘤6号染色体杂合性丢失的初步研究

目的：寻找胶质母细胞瘤（GBM）6号染色体上可能存在肿瘤抑制基因的杂合性丢失（LOH）区域,为发现和定位肿瘤抑制基因（TSG）提供线索和依据。方法：应用聚合酶链反应（PCR）方法,采用荧光标记的引物及377型DNA序列自动分析仪,分析了21例GBM患者6号染色体上20个微卫星多态性标记的LOH。结果：6号染色体总的LOH检出率为47．6％（10／21）,在28．1％（81／288）能提价信息位上检测了LOH。其中,6p和6q的LOH检出率分别是28．6％（6／21）、38．1％（8／21）,在6q^tel上距短臂端粒201．1cM的微卫星位点D6S281检测到较高的LOH率（50％）,6q^16.3上D6S287的LOH率也高达50％,另外,6p^21.1-21.3上D6S276的LOH率也较高（35．3％）。结论：6号染色体分子遗传学异常改变可能在GBM的发生发展中起着重要作用,染色体6q^tel上的D6S281位点,6q^16.3上的D6S287和6p^21.1-21.3的D62S276位点所在的染色体区域可能存在与GBM相关的肿瘤抑制基因。     

急性白血病7q杂合性缺失和微卫星不稳定性研究

目的探讨等位基因杂合性丢失及微卫星不稳定性在白血病发病过程中的作用及意义。方法采用PCR-非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳和硝酸银染色技术，选择位于7q多态微卫星标志序列引物探讨急性白血病等位基因杂合性丢失（LOH）现象。结果在D7S487位点LOH发生率为3．0％（1／33），D7S523发生率为6．1％（2／33），D7S515发生率为15．2（5／33），D7S636发生率为9．1％（3／33），在33例患者中无1例出现微卫星不稳定性（MSI）。20例正常对照标本中无1例出现LOH和MSI。结论7q区域可能存在肿瘤抑制基因（TSG）参与急性白血病的发生发展。     

肝外胆管癌染色体3p21.3区段微卫星不稳定和杂合性缺失分析

目的：研究肝外胆管癌染色体3p21．3区段的微卫星不稳定性（MSI）度杂合性缺失（LOH），探讨染色体3p21．3区段遗传不稳定性与肝外胆管癌的发生发展的关系，定位该区段上肝外胆管癌相关肿瘤基因。方法：用PCR-SSCP方法检测24例肝外胆管癌染色体3p21.3区段上D3S1568，D3S1621，D3S1578和D3S1289四个微卫星位点的MSI和LOH发生率．分析其与临床病理因素之间的关系。结果：24例肝外胆管癌组织中．四个微卫星位点的MSI和LOH平均发生率分别为7．23％和15．63％。其中D3S1621位点的LOH最高（45.83％．11／24），并与TNM分期、是否伴有局部／淋巴结转移相关（p〈0．05）。结论：染色体3p21．3区段D3S1621住点高频率杂合性缺失．提示3p21．3区段可能定位有肝外胆管癌的候选抑癌基因，并在肝外胆管癌的发生发展过程中发挥重要作用。     

FHIT基因与骨肉瘤的相关性研究

目的：探讨FHIT(脆性组氨酸三联体，fragile histamine triad)基因在骨肉瘤发生中的作用。方法：选择FHIT基因内三个微卫星多态标记对20例骨肉瘤进行杂合性丢失(LOH)和微卫星不稳定(MSI)分析。结果：在20例骨肉瘤标本中，LOH的总发生率为35．0％，其中在D3S1300，D3S4130和D3S1234的LOH发生率为27．8％、25．0％、20．0％MSI总发生率为30．0％，三个位点的MSI发生率分别为22.2％、12．5％、13．3％微卫星多态分析表明FHIT基因在骨肉瘤中既存在杂合性丢失，又存在微卫星不稳定现象，但以前者为主。结论：FHIT基因参与了骨肉瘤的发生，可能是骨肉瘤候选抑癌基因之一。     

B淋巴瘤6号染色体微卫星不稳定性及杂合性缺失

目的：探讨6号染色体微卫星不稳定性（microsatellite instability，MSI）及杂合性缺失（loss of heterozygosity，LOH），碱基错配修复系统GTBP和hMLH1基因蛋白在B细胞淋巴瘤（B cell non-hodgkin’s lymphoma，B-NHL）发生学上的意义。方法：选取6号染色体上7对多态微卫星标记，结合PCR及银染技术，采用凝胶成像图象分析系统，分别检测58例B-NHL染色体微卫星MSI及LOH。对其中23例BNHL细胞进行EnVinsion法检测MMR的功能基因GTBP、hMLH1的表达情况。结果：弥漫性大B细胞淋巴瘤（diffuse large B-celllymphoma，DLBCL）与滤泡性淋巴瘤（follicular lymphoma，FL）中GTBP和hMLH1蛋白表达差异无统计学意义，P值分别为0．98和1．30。原发生于淋巴结内与淋巴结外的GTBP、hMLH1蛋白表达差异无统计学意义，P值分别为0．54和0．67。GTBP蛋白在高、低度恶性表达之间差异无统计学意义，P=1．00；而hMLH1蛋白表达在低度恶性较高度恶性高，P=0．99。在位点D6S275 MSI的发生率为7．5％（4／53），其中包括DLBCL2例，FL和BCLL／SLL各1例，LOH总的发生率达66．0％（35／53），其中包括DLBCL19例（19／21，90．5％），FL8例（8／13，61．5％），B-CLL／SLL8例（8／19，42．1％），DLBCL的LOH率同B-CLL／SLL和FL相比，差异有统计学意义，P=10．60。结论：hMLH1和GTBP错配修复基因蛋白表达与BNHL组织学类型、肿瘤的发生部位可能无关系。位点D6S275可能存在一个抑癌基因，该基因的缺失以及与错配修复基因hMLH1突变的关系对B细胞淋巴瘤的发生作用有待进一步研究。     

10号染色体可能含有多个与胶质母细胞瘤相关的肿瘤抑制基因

目的 寻找胶质母细胞瘤（GBM）10号染色体上可能存在肿瘤抑制基因的杂合性丢失（LOH）区域,为发现和定位肿瘤抑制基因（TSG）提供线索和依据。方法 应用聚合酶链反应（PCR）方法,采用荧光标记的引物和先进的377型DNA序列自动分析仪,分析了21例GBM10号染色体上20个微卫星多态性标记的LOH。结果 在85．7％（18／21例）GBM的10号染色体上观察到LOH,在57．7％（162／281）可提供信息位点上存在LOH。10q的LOH率高于10p,分别是81．0％（17／21）、66．7％（14／21）。在下列位点或区域检测到较高的LOH率（＞60％）：10q22.3-23.3上的D10s185-D10s192间区域,10p14-15.1上的D10s591-D10s249间区域,10q24.2-26.3上的D10s1693-D10s212间区域,10p12.2-14上的D10s547位点,10q21.3上的D10537位点。结论 10号染色体可能在GBM的分子水平发病机制中发挥着重要作用,它上面的多个染色体区域可能存在与GBM相关的多个TSG。     

河南食管癌高发区居民食管癌变过程中微卫星LOH的特征

目的微卫星（microsatellite）是广泛分布于生物基因组中的DNA重复序列，与许多重要基因紧密连锁。本研究旨在探讨食管癌变多阶段演进过程中微卫星DNA杂合缺失（loss of heterozygosity，LOH）的特征及其意义。方法采用微卫星DNA多态分析法，选取染色体3p、5q、6p、9p、13q、17p、17q和18q的15个多态微卫星位点，对32例食管癌前病变和癌组织进行LOH分析。结果食管各级癌前病变组织和癌组织均出现不同程度的微卫星DNALOH，其频率随病变程度加重而明显升高（除D9S1752位点外，P均〈0．05）；其中D9S171、D13S260和TP53位点在癌阶段，LOH频率均超过60％。各级癌前病变组织和癌组织中发生LOH的位点不尽相同，同一个体从基底细胞过度增生→间变→原位癌→鳞状细胞癌，均发生LOH的位点是：D3S1234和TP53。结论基因水平的改变发生在食管癌变的早期阶段，随病变程度加重，基因组不稳定性增强，可能是导致食管癌前病变持续向癌的方向发展的重要机制之一。     

肝母细胞瘤基因组不平衡性与染色体变异

目的建立稳定的比较基因组杂交（CGH）技术,探讨肝母细胞瘤（HB）染色体1p36杂合性缺失（LOH）的特点。方法应用CGH检测30例HBDNA的丢失或扩增;应用聚合酶链反应-简单重复序列多态性（SSLP）方法,对30例HB中染色体1p36上6个微卫星的杂合子丢失进行检测。结果每例HB细胞染色体均有不同程度的变异,HB常见增益的染色体区域是1q、2q、2p、8q、8p、12q和22q,常见丢失的染色体区域为1P、4q、4p、16q、17p和18q。30例HB中,1号染色体上6个基因座发生LOH的总频率为63．3％（19／30）,其中D1S199为最高（66．7％）,其次为D1S450（46．7％）。结论HB存在多条染色体DNA拷贝数扩增或丢失的区域;HB在染色体1p36上存在广泛的LOH;染色体变异引起相应瘤基因扩增和抑癌基因的丢失可能参与了HB的发生、发展。     

宫颈癌3、6、11和18号染色体遗传不稳定性的研究

背景与目的：人乳头瘤病毒的感染以及细胞内的遗传性改变是宫颈癌的主要病因。本研究拟分析人宫颈癌组织部分染色体位点遗传不稳定性,以为宫颈癌相关基因的定位以及筛选宫颈癌诊断分子标志提供依据。方法：应用3、6、11和18号染色体上的8个微卫星多态性位点,对50例原发性宫颈癌活检标本进行杂合性丢失（loss of heterozygosity,LOH)和微卫星不稳定性（microsatellite instability,MI)分析。结果：一个或多个位点发生LOH的样本占66％（33／50）,D18s474(18q21)位点的LOH率最高,达40．5％,其它位点的LOH频率为：D3s1478(3p21.3-21.2,31.7%),D3s1766(18q21.32,15.0%),d6s260(5p23,23.3%),D11s925(11q22-23,17.9%),D18s35(18121.1-21.31,8.7%),D18s64(18q21.32,16.7%),D18s68(18q22.1,27.3%).M1发生频率很低,仅为8％（4／50）。结论：宫颈癌染色体特定区域存在不同频率的LOH,而MI是宫颈癌中的低频事件。染色体3p和18q上的LOH高频区可能存在潜在的宫颈癌相关抑癌基因。     

宫颈癌患者基因组遗传不稳定性分析

目的 研究中国宫颈癌高发区宫颈癌患者基因组遗传不稳定性改变，为寻找宫颈癌相关内源因子提供依据。方法 从GenBank中选取8对微卫星DNA引物，采用PCR-变性PAGE-银染方法检测50例宫颈癌(来自高发区)活检组织及其对照(同病例血液)样品的杂合性丢失(LOH)和微卫星不稳定(MI)。结果 LOH总检出率为66％(33／50)，其中，D18S474(染色体18q21)LOH达40．5％；染色体3p21．2—3p21．3中微卫星位点D3S1478，LOH达31．7％；并且在原位癌与浸润癌中，LOH分布也有一定差异。MI在宫颈癌患者基因组中仅存在少数微卫星位点，总的发生率较低，为8％(4／50)。结论 除高危型人乳头瘤病毒(HPVhr)感染外，细胞内源基因的改变在宫颈癌发生发展过程中也起着重要作用。高频LOH位点18q21 D18S474、3p21．2-3p21．3 D3S1478可能存在潜在的宫颈癌抑癌基因。     

mtDNA与肿瘤关系的研究进展

随着现代社会的高速发展,人类肿瘤的发病率逐年升高,严重威胁人类健康,关于肿瘤的研究也越来越多,其 中不乏线粒体DNA（mtDNA）与肿瘤的相关研究,尤其近几年来,mtDNA 与肿瘤的研究已经逐渐成为肿瘤研究的热点。 mtDNA 的研究涉及点突变、片段缺失、含量的变化等方面。本文综合整理mtDNA 含量在肿瘤中的相关研究,查阅近10 年的国内外mtDNA 含量在不同肿瘤中相关研究文献资料,找出其研究的方式、方法及得到的相关资料、数据进行归纳、 分析、总结,发现肿瘤中mtDNA 含量相关研究较多,研究的肿瘤类型多样,并涉及不同肿瘤的发生、发展、治疗及预后 等多方面,不同研究的结果不尽相同,甚至有相反的结果。但大量研究显示：肿瘤的发生、发展中均有 mtDNA 含量的变 化,mtDNA 含量变化对肿瘤发生、发展及治疗、预后等方面均有影响,mtDNA 含量的变化在不同肿瘤中及肿瘤的不同阶 段发挥作用的方式等各不相同,其发挥作用的机理多样,这些研究资料为后期肿瘤中mtDNA含量相关研究提供理论参考, 有望为肿瘤的诊治做出一定贡献。     

Detection and relevance of epigenetic markers on ctDNA: recent advances and future outlook

Liquid biopsy, a minimally invasive approach, is a highly powerful clinical tool for the real‐time follow‐up of cancer and overcomes many limitations of tissue biopsies. Epigenetic alterations have a high potential to provide a valuable source of innovative biomarkers for cancer, owing to their stability, frequency, and noninvasive accessibility in bodily fluids. Numerous DNA methylation markers are now tested in circulating tumor DNA (ctDNA) as potential biomarkers, in various types of cancer. DNA methylation in combination with liquid biopsy is very powerful in identifying circulating epigenetic biomarkers of clinical importance. Blood‐based epigenetic biomarkers have a high potential for early detection of cancer since DNA methylation in plasma can be detected early during cancer pathogenesis. In this review, we summarize the latest findings on DNA methylation markers in ctDNA for early detection, prognosis, minimal residual disease, risk of relapse, treatment selection, and resistance, for breast, prostate, lung, and colorectal cancer.     

DNA糖基化酶1对幽门螺杆菌致胃上皮细胞DNA损伤的保护作用

目的：探讨氧化性DNA损伤修复关键酶DNA糖基化酶1（OGG1）在幽门螺杆菌（HP）感染致胃上皮细胞（GES-1） DNA损伤中的作用。方法：实验分为对照组、HP感染组、OGG1干扰组、HP感染组+OGG1干扰组。采用RNA干扰技术沉默GES-1细胞OGG1表达,24 h后进行HP感染,于感染后24 h和48 h分别采用CCK-8试验和LDH释放试验检测细胞活力和细胞坏死情况;感染48 h后分别采用彗星试验和γH2AX焦点形成试验检测细胞DNA损伤;采用TUNEL试验和PARP表达检测细胞凋亡情况。结果：与对照组相比,HP感染组和单纯OGG1干扰组的细胞活力、LDH水平、DNA损伤情况、γH2AX焦点形成、TUNEL阳性细胞数目及活性PARP表达水平均无显著变化（P均 > 0.05）。而OGG1干扰+HP感染则引起胃上皮细胞活力下降、LDH释放增加、DNA损伤加重、γH2AX焦点形成增多、TUNEL阳性细胞增多及活性PARP表达升高,与对照组及HP感染组相比,差异均有统计学意义（P < 0.05或0.01）。结论：OGG1在HP感染致胃上皮细胞氧化性DNA损伤中发挥了保护作用,为防护HP感染相关的胃部疾病提供了新的策略和方向。     

不同水解温度、时间对细胞核产物与DNA含量检测的影响

目的探讨水解产物变化趋势与染色效果的相关性以及两种不同染色方法达到最佳染色效果的水解时间,为科研和临床的应用提供有价值的参考。方法选取5只成年健康雄性SD大鼠的肝组织,一部分制成恒定细胞数的肝细胞滴片,5N HCL水解后,紫外分光光度计扫描产物的最大吸收峰波长,并检测该产物OD值的变化; 另一部分肝组织制成肝细胞涂片,分别在室温和60℃温度下水解不同时间,应用改良和快速两种Feulgen法染色,图像分析仪检测和分析单个细胞核的DNA含量与倍体。结果（1）肝细胞滴片水解产物扫描在260 nm处有最大吸收波峰; （2）紫外分光光度计在室温和60℃水解温度下测得水解产物的量随着时间的延长逐渐增加; （3）同一大鼠在相同水解温度下,经过不同时间水解,同一倍体的肝细胞核DNA含量存在差异：60℃水解温度下,IOD（5-7 min）〉IOD（9-15 min）〉IOD（1 min,20 min）,室温水解温度下,IOD（50 min）〉IOD（20-30 min,70-90 min）〉IOD（5-10min,100 min）。结论HCL对细胞核的水解作用使DNA双链中糖苷键断裂,醛基暴露,碱基脱至HCL中,且量逐渐增加; HCL水解时间与染色的效果不成正比,两种Feulgen染色法存在各自较佳染色效果的时间段,分别为：快速法5-7 min,改良法20-90 min。     

Indomethacin enhancement of TPA tumor promotion in mice

Skin tumor promotion in mice by 12-O-tetradecanoylphorbol-13-acetate (TPA) is characterized by hyperplasia and inflammation. Based on the inhibitory effect of the steroidal anti-inflammatory drugs, non-steroidal agents, such as indomethacin, were also expected to show some degree of inhibition; however, repeated tumor experiments demonstrate that indomethacin enhances TPA promotion in a dose-response manner. A time-of-application effect was evident such that indomethacin given 2 h prior to TPA resulted in the greatest enhancement. Flurbiprofen was also observed to enhance promotion slightly.     

Consequences of combining siRNA-mediated DNA methyltransferase 1 depletion with 5-aza-2′-deoxycytidine in human leukemic KG1 cells

5-azacytidine and 5-aza-2′-deoxycytidine are clinically used to treat patients with blood neoplasia. Their antileukemic property is mediated by the trapping and the subsequent degradation of a family of proteins, the DNA methyltransferases (DNMT1, DNMT3A, and DNMT3B) leading to DNA demethylation, tumor suppressor gene re-expression and DNA damage. Here we studied the respective role of each DNMT in the human leukemia KG1 cell line using a RNA interference approach. In addition we addressed the role of DNA damage formation in DNA demethylation by 5-aza-2′-deoxycytidine. Our data show that DNMT1 is the main DNMT involved in DNA methylation maintenance in KG1 cells and in mediating DNA damage formation upon exposure to 5-aza-2′-deoxycytidine. Moreover, KG1 cells express the DNMT1 protein at a level above the one required to ensure DNA methylation maintenance, and we identified a threshold for DNMT1 depletion that needs to be exceeded to achieve DNA demethylation. Most interestingly, by combining DNMT1 siRNA and treatment with low dose of 5-aza-2′-deoxycytidine, it is possible to uncouple DNA damage formation from DNA demethylation. This work strongly suggests that a direct pharmacological inhibition of DNMT1, unlike the use of 5-aza-2′-deoxycytidine, should lead to tumor suppressor gene hypomethylation and re-expression without inducing major DNA damage in leukemia.     

Genetic and epigenetic alterations on the short arm of chromosome 11 are involved in a majority of sporadic Wilms' tumours

Wilms' tumour is one of the most common solid tumours of childhood. 11p13 (WT1 locus) and 11p15.5 (WT2 locus) are known to have genetic or epigenetic aberrations in these tumours. In Wilms' tumours, mutation of the Wilms tumour 1 (WT1) gene at the WT1 locus has been reported, and the WT2 locus, comprising the two independent imprinted domains IGF2/H19 and KIP2/LIT1, can undergo maternal deletion or alterations associated with imprinting. Although these alterations have been identified in many studies, it is still not clear how frequently combined genetic and epigenetic alterations of these loci are involved in Wilms' tumours or how these alterations occur. To answer both questions, we performed genetic and epigenetic analyses of these loci, together with an additional gene, CTNNB1, in 35 sporadic Wilms' tumours. Loss of heterozygosity of 11p15.5 and loss of imprinting of IGF2 were the most frequent genetic (29%) and epigenetic (40%) alterations in Wilms' tumours, respectively. In total, 83% of the tumours had at least one alteration at 11p15.5 and/or 11p13. One-third of the tumours had alterations at multiple loci. Our results suggest that chromosome 11p is not only genetically but also epigenetically critical for the majority of Wilms' tumours.     

脱氧核酶对肝癌细胞AFP mRNA表达影响的研究

目的：本研究针对甲胎蛋白mRNA（AFP mRNA）设计脱氧核酶（DZ），观察其切割AFP mRNA的有效性，探索脱氧核酶在肝癌基因治疗的可能性。方法：体外转录AFP mRNA底物，设计并合成DZ、硫代修饰脱氧核酶（DZs，序列同DZ，但两侧各有两个脱氧核苷酸进行了硫代修饰）、反义寡聚脱氧核苷酸（ASO）、无关DZ对照。体外切割AFP mRNA；经转染试剂将DZ转染入肝癌细胞HepG2，利用RT-PCR法检测AFP mRNA水平的变化；免疫细胞化学及图像分析系统检测AFP蛋白质表达情况；MTT法初步估计肝癌细胞的生长效应。结果：DZ与DZs在体外均可切割AFP mRNA底物，其切割率分别为63．2％与60．9％；经转染DZ、DZs的细胞均下调AFP mRNA的水平，而且DZs的作用更强；经转染DZ与DZs的细胞均下调AFP的表达，ASO也略下调AFP的表达；DZ、DZs有抑制细胞生长的作用。结论：本实验设计的DZ能在细胞外有效切割AFP mRNA；在细胞内也能切割AFP mRNA、抑制AFP的表达、抑制肝癌细胞的生长，为肝癌的基因治疗提供可能性。     

人剪切修复基因XPD转染对人肝癌细胞SMMC-7721的生物学影响

目的 将人剪切修复基因XPD稳定转染人SMMC-7721肝癌细胞,观察转染后细胞内野生型p53、XPD、周期素依赖性蛋白激酶(CDK)7、c-myc等基因表达的变化以及对细胞生长的影响,探讨野生型XPD基因与p53、CDK7、c-myc的相互作用及细胞凋亡机制.方法 将表达绿色荧光蛋白并含有人类全长野生型XPD的pEGFP-N2-XPD重组体质粒稳定转染人SMMC-7721肝癌细胞中,选择培养基筛选单克隆稳定转染重组质粒的人SMMC-7721肝癌细胞(SMMC-7721-pEGFP-N2-XPD)和稳定转染空载质粒的人SMMC-7721肝癌细胞(SMMC.7721-pEGFP-N2),并将人SMMC-7721肝癌细胞作为空白对照,利用荧光显微镜观测绿色荧光蛋白表达,用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、Westem blot法检测转染XPD基因后细胞内XPD、p53、CDK7、c-myc的表达量变化,并用细胞增殖力检测(MTT)法及流式细胞仪分别检测细胞增殖及凋亡和细胞周期变化.结果 ①免疫荧光显微镜下,SMMC.7721.pEGFP.N2.XPD和SMMC-7721-pEGFP-N2细胞中观察到绿色荧光蛋白表达,说明pEGFP-N2-XPD重组质粒和pEGFP-N2空载质粒成功转染.②RT-PCR检测:SMMC-7721-pEGFP-N2-XPD中p53 mRNA、XPD mR-NA表达量与SMMC-7721-pEGFP-N2和SMMC-7721相比均明显增高(P<0.01),CDK7 mRNA、c-myc mRNA在SMMC-7721-pEGFP-N2-XPD的表达量比两对照组明显降低(P<0.01),而两对照组各个基因的表达没有明显差异(P>0.05).③Western blot检测:SMMC-7721-pEGFP-N2-XPD细胞的p53、XPD蛋白表达最较两对照组升高(P<0.01),CDK7、c-myc的蛋白相对表达量比两对照组降低(P<0.01),两对照组差异没有统计学意义(P>0.05).④M1Tr检测:SMMC-7721-pEGFP-N2-XPD的细胞增殖力较对照组减弱(P<0.05),两对照组筹异没有统计学意义(P>0.05).⑤流式细胞仪检测:SMMC-7721-pEGFP-N2-XPD细胞进入s期出现障碍,停滞在G1期的细胞增多.结论 将XPD成功稳定转染到人SMMC-7721肝癌细胞中,XPD、p53在转录和蛋白水平的表达明显升高,CDK7、c-myc表达明显降低,野生型XPD基因的过表达可能抑制CDK7、c-myc表达,改变细胞周期,并促进p53抑制肝癌细胞增长,促进细胞凋亡.     

DNA去甲基化对急性B淋巴细胞白血病细胞株中DNA甲基转移酶基因及微RNA作用的研究

目的：探索甲基化转移酶抑制剂5-杂氮-2'-脱氧胞苷（5-Aza-CdR）对急性B淋巴细胞白血病（B-ALL）细胞株NALM-6的作用以及对细胞中微RNA（miRNA）表达水平的影响。方法用不同浓度5-Aza-CdR处理NALM-6细胞,采用四甲基偶氮唑盐（MTT）法检测细胞增殖情况,采用荧光定量反转录聚合酶链反应（RT-PCR）检测5-Aza-CdR处理后细胞DNA甲基转移酶（DNMT）基因mRNA表达水平的变化,采用miScript miRNA PCR Array芯片检测去甲基化后细胞中表达量发生改变的miRNA。结果 NALM-6细胞经不同浓度5-Aza-CdR处理不同时间后,细胞生长受抑,最高抑制率达（74.163±0.381）%。5-Aza-CdR作用浓度与DNMT基因mRNA表达水平呈反比,浓度为1000μmol／L的5-Aza-CdR作用细胞72 h后,DNMT-1的相对表达量降至0.453±0.021,DNMT-3L的相对表达量为0.003±0.001, DNMT-3B的相对表达量为0.395±0.019。miScript miRNA PCR Array筛选出3个miRNA（miR-184、miR-23a-3p、miR-34a-5p）与DNA甲基化相关。结论5-Aza-CdR可下调NALM-6细胞中DNMT基因的表达,并对细胞增殖有抑制作用。miR-184、miR-23a-3p和miR-34a-5p在B-ALL的发生、发展中与DNA甲基化相关。