Hemi-straw玻璃化与程序化冷冻小鼠不同发育阶段胚胎的效果

目的:探讨半细管(Hem i-straw)玻璃化方法与程序化方法冷冻不同发育阶段小鼠胚胎的效果。方法:采用慢速程序化方法与玻璃化方法冷冻小鼠原核期胚胎、卵裂期及早期囊胚期胚胎。解冻后观察存活率、囊胚形成率。结果:采用玻璃化方法冷冻小鼠卵裂期与早期囊胚期胚胎的存活率为92.7%与95.5%,显著高于玻璃化冷冻原核期胚胎的存活率79.8%与程序化冷冻的各组(均P<0.01)。程序化冷冻早期囊胚的存活率仅为50.2%,显著低于其他组(均P<0.01)。经培养后囊胚的形成率比较,程序化冷冻组内无显著性差异(P>0.05),但均显著低于玻璃化冷冻组(均P<0.01)。玻璃化冷冻卵裂期与早期囊胚组的囊胚形成率高达90.1%与92.2%,显著高于原核期胚胎玻璃化冷冻组69.5%(均P<0.01)。结论:胚胎行冷冻保存时,玻璃化冷冻效果较程序化冷冻好,且选择早期囊胚可获最佳冷冻效果。     

中低强度激光人工皱缩在扩张期囊胚玻璃化冷冻复苏中的应用研究

目的通过中低强度激光人工皱缩囊胚腔联合快速玻璃化冷冻在囊胚冻融周期中的应用,为囊胚冷冻复苏周期提供稳定的技术基础。方法选取2015年9月-2017年3月在该院常规体外受精培养至第3天移植和或冷冻后剩余的可利用胚胎在三气培养系统中进行囊胚培养,参照Gardner囊胚评分标准,将发育至第5天或第6天的4CB以上的囊胚分成试验组和对照组。试验组采用中低强度激光打孔,使囊胚腔皱缩后行玻璃化冷冻,对照组直接行玻璃化冷冻。分析177例解冻囊胚周期,比较解冻囊胚周期两种方法冷冻复苏的复苏率、临床妊娠率、种植率、多胎妊娠率及流产率等。结果试验组解冻囊胚复苏率高于对照组,流产率、多胎率低于对照组,但差异无统计学意义(P0.05);试验组临床妊娠率、胚胎着床率显著高于对照组,差异有统计学意义(P0.01);单囊胚移植多胎率显著低于双囊胚移植(P0.05)。结论应用中低强度激光人工皱缩囊胚腔联合玻璃化冷冻技术,能够提高囊胚冻融周期的胚胎复苏率、妊娠率、着床率,降低流产率、多胎率。     

玻璃化冷冻人类早期胚胎的研究进展

人类胚胎已经成功冷冻保存并在辅助生殖技术（ART）中起重要作用，目前多采用慢速冷冻-快速复温方法冷冻保存人早期胚胎，并取得较高的胚胎存活率，但此法需要昂贵的仪器、耗时，并且对于囊胚冷冻效果差。近年发展的玻璃化冷冻因其简单、快速、不需要昂贵仪器等优点越来越受到重视。就玻璃化冷冻在人类早期胚胎冷冻保存中的应用及其影响因素作一综述。     

玻璃化冷冻保存人类早期胚胎的临床初步应用

目的：探讨玻璃化冷冻保存人类早期胚胎的临床应用效果。方法：对22例患者应用玻璃化冷冻保存技术冻存的82枚4～16细胞期的早期胚胎进行了解冻和移植。结果：82枚冷冻胚胎经解冻,存活65枚,存活胚胎均予移植,种植10枚,种植率为15.38%（10/65）,共进行了25个冷冻胚胎移植周期,获得8例妊娠,妊娠率32%（8/25）。结论：玻璃化冷冻保存技术是一种冷冻保存人类早期胚胎的有效方法,临床应用效果良好。     

人类囊胚玻璃化冷冻研究进展

1985年Rail和Fahy首次应用玻璃化法冷冻保存小鼠胚胎以来，玻璃化冷冻技术以其简单、有效、经济受到关注。在人类辅助生殖技术中，囊胚的培养和移植对于提高妊娠率、减少多胎妊娠的发生具有重要意义．因此需要将剩余囊胚有效冷冻保存，玻璃化法可望成为有效冷冻保存多余囊胚的新技术。在玻璃化冷冻技术中．不同的冷冻装置、冷冻保护剂的类型和浓度、解冻方法的不同、囊胚冷冻前的不同处理。都是影响囊胚冷冻后复苏的关键因素。     

复苏周期移植不同发育时期的鲜囊胚或冻融囊胚临床结局分析

目的分析冷冻胚胎复苏移植周期移植发育D5/D6的新鲜囊胚和冻融囊胚的临床结局,探讨不同发育时期囊胚的发育潜能,为进一步改进胚胎冷冻移植方案提供依据。方法回顾性分析因输卵管因素或男方因素行IVF/ICSI治疗后复苏周期行胚胎解冻培养新鲜囊胚移植和冻融囊胚移植患者的临床资料,根据囊胚形成和发育时间不同分为D5鲜囊胚组,D6鲜囊胚组,D5冻融囊胚组和D6冻融囊胚组。自然周期或雌激素替代周期准备子宫内膜,厚度达到8 mm以上后予黄体酮转化(D0),内膜转化第3天解冻复苏胚胎行囊胚培养,第5天移植发育至D5的囊胚,第6天移植发育D6囊胚;冻融囊胚在内膜转化第5天复苏,2 h后移植,分析比较各组间的临床结局。结果冷冻胚胎复苏后囊胚培养,D5鲜囊胚移植的胚胎种植率(48.57%)显著高于D6鲜囊胚(26.67%),差异有统计学意义(P0.05);临床妊娠率(68.52%)也明显高于D6鲜囊胚移植(46.67%),但差异无统计学意义(P0.05)。D5冻融囊胚的临床妊娠率(73.72%)和胚胎种植率(55.47%)均显著高于D6冻融囊胚组(47.89%和32.39%),差异有统计学意义(P0.01);D5/D6鲜囊胚分别与D5/D6冻融囊胚相比较,两组间临床妊娠率、胚胎着床率、流产率及活产率差异均无统计学意义(P0.05)。结论无论是冻融胚胎解冻养囊胚还是冻融囊胚复苏移植,D5囊胚移植相较于D6囊胚移植更有利于胚胎着床,获得更好的临床妊娠结局。新鲜周期移植后多余胚胎可行囊胚培养后冷冻保存,反复胚胎移植失败者可考虑将冻融胚胎行囊胚培养后移植,既提高胚胎利用率又有利于改善临床妊娠结局。     

激光人工皱缩在玻璃化冷冻法保存人类囊胚中的效果分析

目的:评估囊胚玻璃化冷冻前用激光对囊胚腔进行皱缩的临床效果。方法:激光打孔使囊胚腔皱缩后将囊胚玻璃化冷冻(皱缩组)或直接将囊胚玻璃化冷冻(对照组),比较两组的临床效果。结果:317个囊胚解冻周期均进行了移植。其中对照组178例和皱缩组139例,两组年龄、不孕年限、内膜厚度、平均移植胚胎数、优质囊胚率、流产率、多胎妊娠率和异位妊娠率比较未见差异(P0.05);对照组的临床妊娠率(44.9%)、种植率(34.4%)均低于皱缩组(66.9%、48.5%)(P=0.001)。结论:囊胚玻璃化冷冻前使用激光打孔人工皱缩可显著提高临床妊娠和着床率,值得临床探索应用。     

选择性单囊胚移植在辅助生殖技术中的应用研究

目的探讨选择性单囊胚移植是否能够在维持临床妊娠率不降低的同时,有效降低多胎妊娠率,为临床提供参考依据。方法将愿意行囊胚培养及选择性单囊胚移植的417例不孕患者作为观察组,本研究仅分析新鲜周期将单囊胚冷冻,解冻周期复苏移植的病例;将不愿意行选择性单囊胚移植,坚持行卵裂期胚胎移植的280例患者设为对照组,也仅分析解冻周期复苏移植的病例;另将冷冻胚胎解冻移植的患者设为自然对照组;分析各组的临床妊娠率、胚胎着床率及多胎妊娠率等。结果观察组临床妊娠率为50. 34%,胚胎种植率为50. 34%,多胎妊娠率为1. 35%。对照组临床妊娠率为45. 85%,胚胎种植率为30. 10%,多胎妊娠率为32. 76%。自然对照组临床妊娠率为43. 67%,胚胎种植率为27. 66%,多胎妊娠率为25. 90%。结论选择性单囊胚移植能够在维持临床妊娠率不降低的同时,有效降低多胎妊娠率。     

玻璃化冷冻法保存人类囊胚的临床应用

目的:探讨玻璃化冷冻法保存人类囊胚的临床应用效果。方法:回顾性分析在某医院生殖中心行玻璃化冷冻解冻囊胚患者共12个周期的结局。结果:玻璃化冷冻解冻共21枚胚胎,存活21枚(存活率100%),共解冻12个周期,均有胚胎移植,获得临床妊娠5例(妊娠率41.67%),着床率23.81%(5/21)。结论:玻璃化冷冻法是保存人类囊胚的一种有效方法。     

囊胚玻璃化冷冻的研究进展

随着序贯培养液的出现，囊胚移植被认为是提高胚胎种植率、降低多胎妊娠率的有效方法．因此囊胚冷冻愈显重要。囊胚的玻璃化冷冻因其简化了冷冻过程；避免细胞内冰晶形成所引起的一系列物理及化学损伤：并且在冷冻过程中可迅速通过临界温度区，减轻了胚胎冷冻中常见的冻伤现象，使存活率提高等优点，近几年得到逐步发展。现对囊胚玻璃化冷冻（vitrification）的原理、要领、现状及应用前景进行综述。     

人类成熟卵母细胞玻璃化冷冻研究

目的:研究人类成熟卵母细胞玻璃化的方法和冷冻液,探讨人类卵母细胞玻璃化冷冻保存的方法及临床应用价值。方法:运用cryoleaf进行人类成熟卵母细胞玻璃化冷冻保存,复苏后行胞浆内单精子注射-胚胎移植或培养至囊胚形成,观察复苏后卵母细胞受精及发育能力。根据冷冻方法分为程序化冷冻组和玻璃化冷冻组,又将玻璃化冷冻组分为自配液冷冻组和成品液冷冻组,比较各组存活率、受精率、卵裂率及囊胚形成率。结果:程序化冷冻组和玻璃化冷冻组间存活率、卵裂率、囊胚形成率均无显著性差异(P>0.05),但是受精率存在显著性差异(P<0.05);程序化组与自配液组、成品液组间存活率、卵裂率均无显著性差异(P>0.05),但受精率存在显著性差异(P<0.05)。成品液组与自配液组、程序化组间囊胚形成率存在显著性差异(P<0.05)。程序化组移植4例,获得临床妊娠并分娩1例,玻璃化组移植7例,获得1例生化妊娠。结论:程序化冷冻与玻璃化冷冻法均可应用于人类成熟卵母细胞,冻融后卵母细胞具备正常受精能力及卵裂能力。玻璃化冻存人类卵母细胞具有更大发展趋势。     

人类成熟卵母细胞玻璃化冷冻研究

目的:研究人类成熟卵母细胞玻璃化的方法和冷冻液,探讨人类卵母细胞玻璃化冷冻保存的方法及临床应用价值.方法:运用cryoleaf进行人类成熟卵母细胞玻璃化冷冻保存,复苏后行胞浆内单精子注射一胚胎移植或培养至囊胚形成,观察复苏后卵母细胞受精及发育能力.根据冷冻方法分为程序化冷冻组和玻璃化冷冻组,又将玻璃化冷冻组分为自配液冷冻组和成品液冷冻组,比较各组存活率、受精率、卵裂率及囊胚形成率.结果:程序化冷冻组和玻璃化冷冻组间存活率、卵裂率、囊胚形成率均无显著性差异(P＞0.05),但是受精率存在显著性差异(P＜0.05);程序化组与自配液组、成品液组间存活率、卵裂率均无显著性差异(P＞0.05),但受精率存在显著性差异(P＜0.05).成品液组与自配液组、程序化组间囊胚形成率存在显著性差异(P＜0.05).程序化组移植4例,获得临床妊娠并分娩1例,玻璃化组移植7例.获得1例生化妊娠.结论:程序化冷冻与玻璃化冷冻法均可应用于人类成熟卵母细胞,冻融后卵母细胞具备正常受精能力及卵裂能力.玻璃化冻存人类卵母细胞具有更大发展趋势.     

人类囊胚玻璃化冷冻研究进展

1985年Rall和Fahy首次应用玻璃化法冷冻保存小鼠胚胎以来,玻璃化冷冻技术以其简单、有效、经济受到关注.在人类辅助生殖技术中,囊胚的培养和移植对于提高妊娠率、减少多胎妊娠的发生具有重要意义,因此需要将剩余囊胚有效冷冻保存,玻璃化法可望成为有效冷冻保存多余囊胚的新技术.在玻璃化冷冻技术中,不同的冷冻装置、冷冻保护剂的类型和浓度、解冻方法的不同、囊胚冷冻前的不同处理,都是影响囊胚冷冻后复苏的关键因素.     

玻璃化冷冻人类早期胚胎的研究进展

人类胚胎已经成功冷冻保存并在辅助生殖技术(ART)中起重要作用,目前多采用慢速冷冻-快速复温方法冷冻保存人早期胚胎,并取得较高的胚胎存活率,但此法需要昂贵的仪器、耗时,并且对于囊胚冷冻效果差。近年发展的玻璃化冷冻因其简单、快速、不需要昂贵仪器等优点越来越受到重视。就玻璃化冷冻在人类早期胚胎冷冻保存中的应用及其影响因素作一综述。     

冷冻膜及冷冻环在人早期胚胎玻璃化冷冻中的应用比较北大核心CSCD

目的探讨冷冻膜和冷冻环2种载体行玻璃化冷冻对人卵裂期胚胎和囊胚的效果。方法采用回顾性队列研究分析912个解冻复苏周期,比较2种载体行玻璃化冷冻后胚胎复苏结局和临床结局的差异及其相关危险因素。结果 (1) 385枚卵裂期胚胎中,冷冻环组(n=251)和冷冻膜组(n=134)的胚胎复苏率、完整胚胎存活率、临床妊娠率、种植率、流产率、移植周期出生率、双胎出生率、早产率及出生男女比率差异均无统计学意义(P>0.05);冷冻环组新鲜周期优质胚胎率(24.78%)、平均移植周期数(1.3±0.6)、复苏后优质胚胎率(40.76%)、复苏后平均移植胚胎数[(2.1±0.4)个]及低体质量儿出生率(19.01%)均明显高于冷冻膜组[18.59%,P=0.002;1.2±0.4,P=0.001;28.13%,P=0.001;(1.9±0.4)个,P=0.000;4.08%,P=0.015]。(2) 527枚囊胚中,冷冻环组(n=287)和冷冻膜组(n=240)的平均移植周期数、胚胎复苏率、完整胚胎存活率、复苏后囊胚扩张率、流产率、双胎出生率、早产率、低体质量儿出生率及出生男女比率差异均无统计学意义(P>0.05);冷冻环组的临床妊娠率(67.94%)、种植率(49.72%)、移植周期出生率(52.96%)、新鲜周期优质胚胎率(27.0%)、平均移植胚胎数[(1.9±0.4)个]显著高于冷冻膜组[54.17%, P=0.001;39.58%,P=0.002;41.25%,P=0.047; 23.0%, P=0.002;(1.8±0.5)个,P=0.004]。Logistic回归显示,新鲜周期优质胚胎数、内膜厚度及冷冻胚胎所用载体类型与冷冻囊胚复苏移植后临床妊娠密切相关(P=0.017、P=0.049、P=0.044),而年龄、复苏后平均移植胚胎个数、复苏后囊胚扩张数、平均移植周期数及内膜分型等差异均无统计学意义(P>0.05)。结论对于卵裂期胚胎,冷冻膜和冷冻环冷冻胚胎的复苏结局和临床结局均是相当的。对于囊胚,冷冻环组的临床结局优于冷冻膜组。     

玻璃化冷冻人类早期胚胎的研究进展

人类胚胎已经成功冷冻保存并在辅助生殖技术(ART)中起重要作用,目前多采用慢速冷冻-快速复温方法冷冻保存人早期胚胎,并取得较高的胚胎存活率,但此法需要昂贵的仪器、耗时,并且对于囊胚冷冻效果差.近年发展的玻璃化冷冻因其简单、快速、不需要昂贵仪器等优点越来越受到重视.就玻璃化冷冻在人类早期胚胎冷冻保存中的应用及其影响因素作一综述.     

玻璃化冷冻胚胎解冻后卵裂球损伤与增殖对移植影响

目的冻融胚胎移植是人类辅助生殖技术发展期间较为重要的组成部分之一,而玻璃化冷冻技术是其中最为有效的方法,具有安全、可靠和易操作等特性,是目前胚囊及卵裂期胚胎的首选冷冻手段。为提高冻融胚胎移植成功率,本研究分析玻璃化冷冻胚胎解冻后卵裂球损伤与增殖对移植结局影响。方法收集2016-01-20-2019-01-20焦作市妇幼保健院生殖中心玻璃化冷冻胚胎解冻1 700个,按照复苏后卵裂球损伤情况的不同分为两组,存在损伤情况的作为观察组(1 401个),无损伤情况的作为对照组(299个),对各组移植后的临床妊娠率和移植率进行对比分析。结果观察组移植成功率为49.18%,低于对照组的59.53%,差异有统计学意义,χ2=10.568,P=0.001;妊娠率为57.18%,低于对照组的67.98%,差异有统计学意义,χ2=5.823,P=0.016。1 401个复苏后卵裂球中,有胚胎卵裂球生长占比最高,为48.11%;无胚胎卵裂球生长占比最低,为6.00%;有胚胎卵裂球融合占21.48%;无胚胎卵裂球融合占24.41%。结论玻璃化冷冻胚胎解冻后,其妊娠率和移植率会受到卵裂球损伤影响。     

囊胚玻璃化冷冻的研究进展

随着序贯培养液的出现,囊胚移植被认为是提高胚胎种植率、降低多胎妊娠率的有效方法,因此囊胚冷冻愈显重要.囊胚的玻璃化冷冻因其简化了冷冻过程;避免细胞内冰晶形成所引起的一系列物理及化学损伤;并且在冷冻过程中可迅速通过临界温度区,减轻了胚胎冷冻中常见的冻伤现象,使存活率提高等优点,近几年得到逐步发展.现对囊胚玻璃化冷冻(vitrification)的原理、要领、现状及应用前景进行综述.     

激光透明带打孔法辅助孵化对冻融胚胎/囊胚移植的影响

目的:探讨激光透明带打孔法辅助孵化(AH)对玻璃化冻融胚胎/囊胚移植临床结局的影响.方法:选取该院生殖中心2012年9月～2014年3月进行的符合相关标准的D3日玻璃化冻融胚胎968周期和DS/D6日玻璃化冻融囊胚284周期资料.根据移植术前是否对胚胎/囊胚进行AH操作,将D3日冻融胚胎移植周期分为A1组(AH组,887周期)和A2组(未做AH组,81周期),D5/D6日冻融囊胚移植周期分为B1组(AH组,112周期)和B2组(未做AH组,172周期).观察各组患者的胚胎种植率、临床妊娠率、早期流产率、多胎妊娠率、异位妊娠率等临床指标,分析AH对胚胎植入和妊娠结局的影响.结果:A1组/A2组、B1组/B2组间年龄、不孕年限、体重指数(BMI)、不孕因素、获卵数、内膜厚度、内膜准备方案等基础资料的比较,差异均无统计学意义(P＞0.05);A1组/A2组、B1组/B2组间移植胚胎/囊胚数、植入优胚/囊胚比例、胚胎种植率、临床妊娠率、早期流产率、多胎妊娠率等指标的比较,差异也均无统计学意义(P＞0.05).结论:对玻璃化冻融胚胎移植和冻融囊胚移植,AH均未见到对胚胎植入和临床妊娠有显著影响.     

不同胚胎冷冻方法对冻融胚胎移植患者临床结局的影响

目的:比较人卵裂期胚胎玻璃化冷冻和慢速冷冻解冻后胚胎复苏率、卵裂球完整率、种植率以及临床妊娠率,评价两种方法的有效性。方法:选择2009年7月～2010年3月在辅助生殖中心行F-ET的89例患者,将其分为玻璃化冷冻组(46例)和慢速冷冻组(43例),比较解冻后胚胎复苏率、卵裂球完整率、种植率以及临床妊娠率。结果:玻璃化冷冻组与慢速冷冻组比较具有较高的胚胎复苏率(92.7%vs.66.1%)、卵裂球完整率(89.2%vs.61.4%)、种植率(21.1%vs.4.7%)以及临床妊娠率(47.8%vs.23.3%)。结论:玻璃化冷冻法解冻后胚胎复苏率高,卵裂球完整性好,胚胎具有更好地发育潜能,是人卵裂期胚胎冷冻的有效方法。