去氢表雄酮的抗氧化作用及其机理

目的：探讨去氢表雄酮（Dehydroepiandrosterone,DHEA)对活性氧自由基的抗氧化作用，以进一步研究DHEA抗突变及增强机体免疫力的机理。方法：利用超微弱发光法，单细胞凝胶电泳、DNA琼脂糖凝胶电泳分析、流式细胞术等方法观察DHEA对活性氧造成细胞及DNA损伤的保护作用。结果：25nmol/LDHEA可彻底消除自由基对DNA的气体损伤，无DNA氧化所致发光峰出现。单细胞凝胶电泳结果可见，DHEA在10nmol/L浓度时能显著保护胸细胞免受活性氧损伤，在单细胞电泳图上无彗星状拖尾，表明DHEA具有明显的抗氧化损伤作用，DNA琼脂糖凝胶电泳证明，10nmol/L、25nmol/LDHEA可明显抑制因氧化受损引起的胸腺细胞凋亡，无DNA梯状条带山现，细胞周期分析表明经10nmol/LDHEA预处理，受氧化损伤的细胞G0／G1期比例显著增高，而G1亚倍体细胞明显减少，结果说明DHEA可阻断活性氧引起的胸腺细胞凋亡。经5nmol/LDHEA预先处理，可逆转氧化损伤引起的胸腺淋巴细胞运动百分率和细胞粘附能力下降。结论：DNEA可保护DNA及胸腺细胞免受氧化损伤，这可能是其发挥癌化学预防作用，阻断突变、抗促癌过程及增强机体免疫功能的机理之 一。     

五氯酚钠的细胞遗传毒性研究

背景与目的:探讨五氯酚钠诱发中国仓鼠卵巢细胞(CHO)DNA损伤和染色体畸变的效应.材料与方法:五氯酚钠对中国仓鼠卵巢细胞(CHO)进行梯度染毒,应用单细胞凝胶电泳试验和体外染色体畸变试验观察其诱发细胞DNA损伤和染色体畸变.结果:80 μg/ml和160 μg/ml五氯酚钠诱发细胞DNA链断裂损伤的频率与对照组相比显著升高(P＜0.01),且随着剂量增加,其损伤程度加重;无论是否加入代谢活化剂,受试物均引起染色体畸变率的明显增加(P＜0.01).结论:五氯酚钠能诱发CHO细胞DNA损伤和染色体畸变.     

Aroclorl254预先染毒增强苯并[a]芘对Hep G2细胞DNA的损伤

目的 :探讨Hep G2细胞经Aroclor1254预处理后对苯并[a]芘诱发的DNA损伤的影响。 方法 :运用单细胞凝胶电泳技术检测了HepG2细胞经Aroclor1254(23、46、92和184μmol/L)单独染毒24h和将其预处理24h后再用苯并[a]芘染毒1h对DNA损伤的影响。 结果 :苯并[a]芘诱发的DNA损伤随着Aroclor1254预处理的浓度增大而升高 ,呈明显的剂量效应关系。当Aroclor1254预处理的浓度分别为46、92和184μmol/L时 ,苯并[a]芘诱发的DNA损伤与苯并[a]芘单独作用相比分别升高了8 %、16 %和160 %。184μmol/L的Aroclor1254预处理后 ,苯并[a]芘诱发的DNA损伤与苯并[a]芘单独作用相比有极显著性差异(P<0.01)。 结论 :Aroclor1254可显著地增强苯并[a]芘在HepG2细胞中诱导的DNA损伤 ,这种损伤的增强可能和Aro clor1254对Hep G2细胞CYP1A1的诱导有关。     

白头翁水提物的抗诱变和抗氧化作用的初步研究

背景与目的:观察白头翁水提物(PWE)的抗诱变和抗氧化作用。材料与方法:以环磷酰胺(CP)为诱变剂,检测PWE对小鼠骨髓嗜多染红细胞(PCE)微核(MN)率的影响,并以维生素C(VitC)为抗氧化对照剂,检测PWE对小鼠血清超氧化物歧化酶(SOD)活性和血清总抗氧化能力(T-AOC)的影响。结果:白头翁水提物能显著降低环磷酰胺所诱发的微核率、提高小鼠血清超氧化物歧化酶活性、增强总抗氧化能力,与阳性对照组(CP)比较,差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论:白头翁水提物具有抗诱变和抗氧化作用。其机制可能与消除自由基、中断或终止自由基的氧化反应,增强机体的总抗氧化能力有关。     

Aroclor1254预先染毒增强苯并[a]芘对Hep G2细胞DNA的损伤

目的: 探讨Hep G2细胞经Aroclor1254预处理后对苯并[a]芘诱发的DNA损伤的影响. 方法: 运用单细胞凝胶电泳技术检测了Hep G2细胞经Aroclor1254(23、46、92和184 μmol / L)单独染毒24 h和将其预处理24 h后再用苯并[a]芘染毒1 h对DNA损伤的影响. 结果: 苯并[a]芘诱发的DNA损伤随着Aroclor1254预处理的浓度增大而升高,呈明显的剂量效应关系.当Aroclor1254预处理的浓度分别为46、92和184 μmol / L时,苯并[a]芘诱发的DNA损伤与苯并[a]芘单独作用相比分别升高了8 %、16 %和160 %.184 μmol / L的Aroclor1254预处理后,苯并[a]芘诱发的DNA损伤与苯并[a]芘单独作用相比有极显著性差异(P<0.01). 结论: Aroclor1254可显著地增强苯并[a]芘在Hep G2细胞中诱导的DNA损伤,这种损伤的增强可能和Aroclor1254对Hep G2细胞CYP1A1的诱导有关.     

活性氧与肿瘤发生

超氧阴离子、羟自由基等活性氧物质广泛存在于自然界,并与多种疾病的发生有关。目前大量证据表明,肿瘤发生有活性氧介入。活性氧主要影响肿瘤形成的促癌过程。它们引起的脂质过氧化、DNA氧化损伤以及最终对癌基因表达的影响都是其参与肿瘤形成的可能机理。设法维持机体氧化与抗氧化平衡,可能是预防肿瘤发生的一条合理途径。本文主要从上述几方面对活性氧与肿瘤发生的关系作一综述。     

扶正解毒颗粒对染镍大鼠肾细胞DNA单链断裂的影响

目的研究扶正解毒颗粒（FJG）对镍（NiSO4）诱发大鼠肾细胞DNA损伤的拮抗作用。方法以Wistar大鼠NiSO4 ［2.5 mg/(kg·d)］染毒造模,FJG灌胃处理,分别以单细胞凝胶电泳（SCGE）技术及比色法检测肾组织细胞DNA单链断裂及总抗氧化力（TAC）。结果与NiSO4组相比,FJG各组“彗星”样细胞出现率（计数一定量细胞中彗星样细胞所占的比例）、尾长、Olive尾矩、尾DNA%、尾长/头长比均明显降低（P<0.05和P<0.01）,TAC则显著升高（P<0.05和P<0.01）。结论FJG对镍致细胞DNA损伤有一定的拮抗作用,其机制与抑制镍诱导氧化损伤有关。     

对PTEN缺失小鼠成纤维细胞中DNA氧化损伤的研究

背景与目的:研究FIEN缺失细胞中活性氧(ROS)水平、DNA氧化损伤和抗氧化能力的变化.材料与方法:运用化学/荧光发光分析、免疫细胞化学、中性单细胞凝胶电泳技术,分别比较Pten / MEFs与Pten-/-MEFs细胞中ROS、8-羟基脱氧鸟苷(8-OH-dG)水平、DNA双链断裂(DSBs)以及抗氧化能力的差异.结果:Pten-/-MEFs细胞中ROS、8-OH-dG水平明显增高,DSBs增加,抗氧化能力减弱.结论:PTEN可能通过调控细胞内ROS水平拮抗DNA氧化损伤.     

用SCGE分析甲氨蝶呤对小鼠体内多个组织器官DNA损伤作用

背景与目的:为进一步了解甲氨蝶呤(Methotrexate,MTX)的作用机制,探测其对不同组织器官作用的敏感性。材料与方法:用单细胞凝胶电泳技术(Singlecellgelelectrophoresisassay,SCGE)检测小鼠腹腔注射MTX染毒1、3、6、12、24h后对肝、脾、骨髓、胸腺、肾、睾丸、胃和外周血淋巴细胞的DNA损伤作用及其与MTX剂量间的关系。结果:腹腔注射1.25~5mg/kgMTX可诱发小鼠脾细胞、骨髓细胞、胸腺细胞和外周血淋巴细胞的DNA单链断裂;核DNA损伤程度与用药剂量呈正相关。结论:MTX可致小鼠体内多脏器细胞的DNA单链断裂,不同脏器细胞对MTX的易感性不同,脾、骨髓、胸腺、外周血淋巴细胞可考虑为MTX的遗传毒性靶细胞。     

WTK1细胞在tk位点突变和DNA损伤与修复中的应用

背景与目的:为WTK1细胞在遗传毒理学可同时应用于基因突变和DNA损伤的研究提供实验依据.材料与方法:分别用标准诱变剂甲基磺酸甲酯(MMS)和过氧化氢(H2O2)处理WTKl细胞,采用tk基因突变试验和单细胞凝胶电泳技术(Single Cell GelElectrophoresis,SCGE)对细胞的tk位点突变和过氧化氢诱发的DNA损伤情况进行检测.结果:甲基磺酸甲酯可诱发WTKl细胞tk位点的突变,以诱发染色体畸变为主.过氧化氢诱发了WTKl细胞DNA的损伤,并有剂量反应关系.随着修复孵育时间的延长,彗星细胞尾长和彗星细胞出现率明显下降,与对照组比较,差异有显著性(P＜0.01).结论:WTKl细胞可同时应用于tk基因突变和DNA损伤与修复的研究.采用该细胞株可对化合物进行基因突变和DNA损伤进行研究评价.     

螺旋藻制剂对吐温20引发蚕豆根尖细胞微核发生率的抑制作用

本文采用不同浓度的螺旋藻酒精提取液处理吞豆根尖，随后以吐温２０染毒以观察螺藻制剂对吐温２０引发的蚕豆根尖细胞微核发生率的抑制作用。     

螺旋藻提取物对表皮生长因子受体酪氨酸激酶的抑制作用及诱导HL-60细胞凋亡

目的：研究螺旋藻提取物（藻福康）对肿瘤细胞生长的抑制作用。方法：运用ＥＬＩＳＡ法检测藻福康对表皮生长因子受体（ｅｐｉｄｅｒｍａｌ ｇｒｏｗｔｈ ｆａｃｔｏｒ ｒｅｃｅｐｔｏｒ,ＥＧＦＲ）酷氨酸激酶的作用;用荧光显微镜、流式细胞术和琼脂糖凝胶电泳分析细胞凋亡。结果：藻福康能明显抑制ＥＧＦＲ酪氨酸激酶的活性。ＩＣ５０为０．１２５ｍｇ／ｍｌ;不管是细胞形态分析,还是流式细胞仪检测或ＤＮＡ片段电泳,藻福康都显示能诱导ＨＬ－６０细胞凋亡。结论：藻福康能明显抑制ＥＧＦＲ酪氨酸激酶的活性和诱导白血病细胞凋亡。     

螺旋藻多糖抑制人肝癌细胞株IGF-2 mRNA表达的研究

目的　研究螺旋藻多糖对体外培养的人肝癌细胞株 (HepG 2 )胰岛素样生长因子 2mRNA表达的影响。方法　以不同剂量的螺旋藻多糖作用于HepG 2细胞 ,设计对应于胰岛素样生长因子 2cDNA的寡核苷酸探针 ,进行mRNA原位杂交。 结果螺旋藻多糖作用组IGF 2mRNA表达率显著低于HepG 2细胞对照组 (P <0 .0 1)。 结论　螺旋藻多糖可明显抑制HepG 2细胞中IGF 2mRNA的表达     

碳酸锂对抗放化疗肿瘤患者遗传及氧化损伤作用的研究

目的:探讨碳酸锂(Li2CO3)对放化疗肿瘤患者有无抗遗传及抗氧化损伤作用.方法:给予临床放化疗肿瘤患者Li2CO3联合用药治疗,采用单细胞凝胶电泳试验、外周血淋巴细胞微核试验及生化试验方法测定DNA损伤、微核率(MNF)、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱苷肽过氧化物酶(GSH-Px)活力、疏基(-SH)和丙二醛(MDA)含量.结果:随Li2CO3疗程及剂量的增加,联合用药组与单纯放化疗组相比DNA断裂分级、慧星尾长、MNF显著降低(P＜0.05);SOD、GSH-Px活力、-SH含量、WBC总数显著增高(P＜0.01).结论:Li2CO3可降低肿瘤患者遗传损伤程度,提高其抗氧化酶活性,降低抗癌药物的骨髓抑制作用.     

Rosmarinic acid inhibits angiogenesis and its mechanism of action in vitro

Rosmarinic acid (RA), a water-soluble polyphenolic compound with anti-oxidative and anti-inflammatory activities, inhibited several important steps of angiogenesis including proliferation, migration, adhesion and tube formation of human umbilical vein endothelial cells (HUVEC) in a concentration-dependent manner. RA also reduced intracellular reactive oxygen species (ROS) level, H2O2-dependent VEGF expression and IL-8 release of endothelial cells. These findings suggested that the anti-angiogenic potential of RA might be related to its anti-oxidative activity, which further resulted in the inhibition of ROS-associated VEGF expression and IL-8 release.     

Effects of trichostatins on differentiation of murine erythroleukemia cells

The fungistatic antibiotics trichostatins (TS) A and C were isolated from culture broth of Streptomyces platensis No. 145 and were found to be potent inducers of differentiation in murine erythroleukemia (Friend and RV133) cells at concentrations of 1.5 X 10(-8) M for TSA and 5 X 10(-7) M for TSC. Differentiation induced by TS was cooperatively enhanced by UV irradiation but not by treatment with dimethyl sulfoxide. This enhanced activity was completely inhibited by adding cycloheximide to the culture medium 2 h after exposure to TS, suggesting that TS are dimethyl sulfoxide-type inducers of erythroid differentiation. No inhibitory effect of TS was observed on macromolecular synthesis in cultured cells.     

电针联合疼痛贴对骨癌痛大鼠的抗抑郁作用机制

目的 观察电针联合疼痛贴对骨癌痛大鼠的抗抑郁作用并探讨其可能的机制。方法 建立大鼠胫骨癌痛模型，随机分为模型组、电针治疗组、疼痛贴治疗组、电针联合疼痛贴治疗组，另设空白组。造模成功后给予对应干预，观察胫骨癌痛模型大鼠行为学的改变。采用HPLC检测基底杏仁核脑组织中单胺类神经递质的变化、Elisa检测氧化应激水平的变化，Western blot检测凋亡蛋白的表达。结果 旷场实验中模型组大鼠的活动里程低于空白组，悬尾实验、强迫游泳实验中模型组大鼠的不动时间均高于空白组（P<0.01）。模型组5-HT、NE、DA含量均低于空白组（P<0.01），MDA含量和Caspase-3表达均高于空白组、CAT活性和Bcl-2表达均低于空白组（P<0.01）。旷场实验中三组治疗组的大鼠活动里程均高于模型组，悬尾实验、强迫游泳实验中三组治疗组的大鼠不动时间均低于模型组；三组治疗组的5-HT、NE、DA含量均明显高于模型组，MDA含量和Caspase-3表达均低于模型组，CAT活性和Bcl-2表达均高于模型组（P<0.01）。结论 电针治疗、疼痛贴治疗以及联合治疗可以改善胫骨癌痛模型大鼠的抑郁样行为学改变，其机制与缓解疼痛纠正脑内单胺类神经递质平衡失调、抗氧化应激和减轻神经细胞凋亡有关。     

Anti-Proliferative and Apoptosis-Inducing Activity of Acacia Modesta and Opuntia Monocantha Extracts on HeLa Cells

Background: Cancer is one of the leading causes of death in the world. Numerous phytochemicals from plants have shown antineoplastic effects via programmed cell death (apoptosis). The aim of this study was to evaluate the effect of anti-proliferative and apoptosis-inducing activity of Acacia modesta and Opuntia monocantha against HeLa cells. Methods: To estimate anti-proliferative activity of the plants against HeLa cells, ethanol solvent was used for the extraction. For the evaluation of anti-proliferative effects, MTT assay was performed with 100, 200, and 400 µg/mL dose. The antioxidant assays including glutathione reductase (GSH), superoxide dismutase (SOD) and catalase were performed. Moreover, enzyme linked immunosorbent assay (ELISA) was performed. Furthermore, immunocytometry P53 and flow cytometry were also carried out to assess the apoptosis in HeLa cell. Results: MTT assay showed that the groups treated with Opuntia monocantha and Acacia modest have less level of toxicity as compared to untreated groups. Antioxidant assays confirmed that GSH, SPD and, catalase activities were quite decreased in treated groups as compared to untreated groups. Similarly, ELISA and apoptosis p53 have shown more pronounced apoptosis effect in treated groups as compared to untreated groups. Conclusion: Based on above findings, treatment of HeLa cells with these plant extracts induced apoptosis, restricts proliferation, and enhances the anti-oxidative index in post treated cells.