原癌基因c—fos在宫颈癌中的表达研究

子宫颈癌是常见的妇科恶性肿瘤,从分子水平研究其病因学起来越受到关注,原癌基因c-fos编码一种核磷蛋白,能与c-jun原癌基因产物结合形成复合物,调节基因转录,本实验对40例宫颈癌中c-fos蛋白的表达与肿瘤组织分化程度,临床分期及预后进行了研究,并与正常宫颈（2例）、慢性宫颈炎（2例）进行对照,结果表明：c-fos在宫颈癌中阳性表达率为70％（28／40）,在正常宫颈与慢性宫颈炎中不表达（0／4）。c-fos与肿瘤组织分化程度、临床分期无关,与预后有关,提示c-fos蛋白有可 为判断宫颈癌预后的指标之一。     

原发性骨质疏松骨组织c-fos、c-jun和p53基因的表达

目的 研究原发性骨质疏松时骨组织中原癌基因c-fos、c-jun和抑癌基因p53的表达情况,以探讨c-fos、c-jun和p53与原发性骨质疏松症的关系及其在骨质疏松中所起的作用. 方法 采用人的新鲜松质骨作为实验标本(骨质疏松组和对照组),分别用兔抗人c-fos、c-jun多克隆抗体和鼠抗人p53单克隆抗体通过免疫组化方法来检测标本中c-fos、c-jun和p53基因的蛋白产物,了解c-fos、c-jun、p53基因的表达情况。结果 骨质疏松组的骨细胞和成骨细胞中c-fos、c-jun、p53基因的阳性表达率均为100％,与对照组相比显著增高,P<0.01。结论 原发性骨质疏松时骨组织中c-fos、c-jun、p53基因的表达增高,提示癌基因c-fos、c-jun和抑癌基因p53与原发性骨质疏松的关系密切,原发性骨质疏松时c-fos、c-jun、p53表达增高与骨细胞和成骨细胞的凋亡有关。     

宫颈癌相关基因的研究进展

宫颈癌是发生在全球妇女中仅次于乳腺癌的第二个最常见的恶性肿瘤.宫颈癌的发生,同其他肿瘤一样,是多步骤、多基因现象的结果.癌基因的激活及抑癌基因的失活是细胞癌变的分子基础.与宫颈癌相关的癌基因有G-erbB-2、c-myc、c-fos、bcl,抑癌基因有P53、P27、P16、FHIT,Rb、nm23.其中,c-fos是对各类外界刺激的传入信息在数分钟之内迅速表达的原癌基因之一,bcl基因是细胞凋亡抑制基因之一;P53基因使细胞分裂停止在G1/S期,P27基因是一个新的细胞周期依赖性激酶抑制剂.     

EGF对ER阴性乳腺癌细胞株MAPK通路及c-fos的活化作用

目的比较表皮生长因子（EGF）对ER（＋）和ER（-）乳腺癌细胞MAPK信号转导通路及原癌基因c-fos表达的活化作用,探讨ER（-）的乳腺癌细胞激素非依赖性生长的可能机制.方法 EGF和MAPK抑制剂（PD98059）分别和（或）联合作用于ER（＋）乳腺癌细胞株MCF-7和ER（-）乳腺癌细胞株MDA-MB-435s,Western blot技术检测两种细胞中磷酸化MAPK蛋白（p-MAPK）及c-fos蛋白的表达.结果 EGF对ER阳性和阴性的两种细胞株p-MAPK和c-fos蛋白的表达均有上调作用,但MDA-MB-435s细胞中两种蛋白的激活明显高于MCF-7细胞,且c-fos蛋白表达与p-MAPK蛋白表达一致.结论 EGF通过激活MAPK信号转导通路,活化原癌基因c-fos来刺激细胞恶性增殖可能是引起ER（-）乳腺癌细胞的激素非依赖性生长的重要机制之一.     

Gax基因转染对A549细胞增殖及原癌基因表达的影响

背景与目的在中国肺癌居各种恶性肿瘤之首位,寻求肺癌的基因疗法已成为人们努力的方向。本研究拟探讨生长终止特异性同源盒基因(growtharrest-specifichomeobox,Gax)对A549细胞系增殖及其原癌基因c-fos、c-junmRNA表达的影响。方法以腺病毒介导Gax基因(adenoviraltransductionoftheGaxgene,Ad-Gax)转染A549细胞,RT-PCR和免疫细胞化学法测定转染前后细胞中GaxmRNA和蛋白表达;RT-PCR测定转染前后细胞中c-fos、c-junmRNA表达变化;MTT法检测Gax基因转染对A549细胞生长的抑制作用,计算24、48、72h细胞抑制率。结果RT-PCR和免疫细胞化学证实Gax基因转染A549细胞后Gax能稳定表达,未转染组未发现Gax表达;RT-PCR证实转染组A549细胞中c-fos、c-junmRNA比未转染组显著降低(t=7.755,P<0.01;t=5.938,P<0.01);MTT法检测显示转染组A549细胞在24、48、72h的抑制率分别是(47.35±5.36)%、(54.96±1.78)%、(65.39±5.11)%,随时间逐渐升高与未转染组同时间比较有显著性差异(χ2=7.152、9.431、12.847,P<0.01)。结论Gax基因转染能抑制A549细胞的增殖,其分子机制可能与Gax下调c-fos、c-jun的表达有关。     

原癌基因c-fos在宫颈癌中的表达研究

子宫颈癌是常见的妇科恶性肿瘤,从分子水平研究其病因学起来越受到关注。原癌基因c-fos编码一种核磷蛋白,能与c－jnn原癌基因产物结合形成复合物,调节基因转录。本实验对40例宫颈癌中C－fos蛋白的表达与肿瘤组织分化程度、临床分期及预后进行了研究,并与正常宫颈（2例）、慢性宫颈炎（2例）进行对照。结果表明：C－fos在宫颈癌中阳性表达率为70％（28／40）,在正常宫颈与慢性宫颈炎中不表达（0／4）。c－fos与肿瘤组织分化程度、临床分期无关,与预后有关。提示c－fos蛋白有可能成为判断宫颈癌预后的指标之一。     

亚硒酸钠和维甲酸联合对HL-60细胞c-myc和c-fos基因表达的影响

 以HL-60细胞为实验对象，利用Slot-blot技术，观察了亚硒酸钠和维甲酸（RA）联合对其原癌基因c-myc和c-fos表达的影响。结果表明：硒和RA在第一和第二天都可使c-myc基因表达下降，以后逐渐上升到对照组或稍高水平。联合可使c-myc表达显著下降，强于两单独作用。硒和pA在第三至第四天均可使c-fos表达明显升高，第四天5.8ｕmol/L Na₂SeO₃ 和0.1ｕmol/LRA以及联合组c-fos表达水平分别为对照组的2.8，3.7和5.4倍。     

c-fos反义脱氧寡核苷酸阻断VIP诱导的VEGF在小细胞肺癌细胞中表达

背景与目的血管活性肠肽（VIP）对多种肿瘤细胞的生长具有促进作用，但其作用机制尚有许多未解之处。本研究旨在通过抑制c-fos基因表达，探讨其表达产物是否参与VIP对小细胞肺癌（SCLC）细胞中血管内皮生长因子（VEGF）mRNA表达的调节作用。方法应用RT—PCR技术检测VIP作用下SCLC细胞系H446中c-fos及VEGF基因表达水平，以c-fos反义脱氧寡核苷酸（ASO）封闭c-fos基因表达，检测不同c-fos表达水平条件下VIP对VEGF表达的调节作用。结果VIP增强了c-fos及VEGF在H446细胞中的表达。c-fos mRNA的表达在VIP作用2h和4h时达到高峰，显著高于VIP作用0h时（P〈0．01）。在VIP作用8h和16h时，VEGFmRNA的表达水平达到高峰，显著高于VIP作用0h时（P〈0．01）。c-fos ASO能明显反转VIP诱导的VEGF的表达上调（P〈0．01）。结论VIP可能通过增强转录因子c-fos的表达，进而促进VEGFmRNA在肺癌细胞中的表达和分泌，促进肺癌新生血管的生成，参与肿瘤的生长。     

c-fos、bcl-2基因表达与肠型、弥漫型胃癌的关系

目的：探讨c-fos、bcl-2基因蛋白表达与肠型、弥漫型胃癌的发生的关系，为胃癌分型、早期诊断提供分子病理学依据。方法：用免疫组织化学方法，检测54例胃癌切除标本c-fos、bcl-2基因蛋白的表达，所有结果均用EXCEL录入计算机、SAS统计软件包分析。结果；在肠型胃癌中c-fos、bcl-2基因蛋白表达高于弥漫型胃癌（P＜0.01）；c-fos、bcl-2基因表达淋巴结转移组高于非转移组（c-fos为63.64%、54.55%；bcl-2为50.00%，27.27％），但无统计学意义；c-fos、bcl-2在癌旁组织、异型增生组织和高分化腺癌中呈强阳性表达。结论：c-fos、bcl-2在肠型和弥漫型胃癌中的不同表达表明两型胃癌的发生机制有所不同，可为胃癌分型提供分子病理学依据；c-fos、bcl-2基因蛋白表达变化发生在肿瘤细胞形态变化之前，可作为胃癌早期诊断的分子病理学指标。     

红毛五加多糖对体外人胃癌细胞基因及细胞因子表达的影响

目的 探讨红毛五加多糖对胃癌的防治作用机制。方法 采用流式细胞仪检测其对癌基因及细胞因子蛋白表达的影响。结果 抑癌基因bax和细胞因子TGFβ1蛋白表达增加,而原癌基因bcl-2蛋白表达降低。结论 该多糖可能是通过抑制原癌基因,激活抑癌基因和细胞因子,从而诱导胃癌细胞凋亡。     

肿瘤学中的分子遗传学和细胞遗传学技术

随着致癌机制模型的建立,从正常上皮细胞演变为癌组织,随基因改变,最终导致表型的改变.目前已知的两种基因改变形式:原癌基因的激活和肿瘤抑制基因的失活,基因的激活是原癌基因的改变或者功能失控而引起的基因扩增、过表达和突变的结果.     

凝血酶诱发人支气管上皮细胞恶性转化的信号转导

[目的]探讨凝血酶恶性转化人支气管上皮细胞时丝裂原激活蛋白激酶（p^44/42MAPK）信号通路活化状态。[方法]逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）检测凝血酶受体在BEP2D细胞的表达水平及凝血酶刺激后原癌基因c-fos、c-myc转录表达情况。用免疫印迹法（Western blot）检测不同浓度凝血酶刺激后不同时间p^44/42MAPK磷酸化状态。[结果]凝血酶受体PAR1、PAR3、PAR4在BEP2D细胞均有表达。凝血酶刺激后出现p^44/42MAPK激活。相应地,c—fos、c-myc基因转录上调。[结论]凝血酶与其受体结合后可激活p^44/42MAPK信号转导通路,原癌基因转录扩增导致BEP2D细胞基因组不稳定性增加,细胞出现癌变。     

SeO2对原癌基因c-fos调控区P250的影响

背景与目的:已有研究表明,二氧化硒(SeO2)可诱导肺癌细胞株中c-fos蛋白高表达.本研究旨在通过研究SeO2对原癌基因c-fos调控区域P250的影响,探讨其调控机理.方法:构建c-fos启动区氯霉素乙酰化转移酶(chloramphenicol acetyl-transferase,CAT),然后转染HeLa癌细胞株,用不同浓度SeO2处理后观察细胞中CAT的活性.结果:不同浓度(3μmol/L、10μmol/L、30μmol/L)SeO2对转染了c-fosCATP250的HeLa癌细胞株作用后,其CAT的活性均增高,其积分光密度值分别为0737±0085、6047±0738、3167±0183,与对照组(0490±0046)相比,10μmol/L和30μmol/L浓度组的积分光密度值变化有统计学意义(P<005).结论:SeO2可通过影响c-fos调控区域P250而发挥调控肿瘤细胞凋亡的生物学效应,SeO2可能具有潜在的抗肿瘤作用.     

原癌基因HER2转录调控的研究进展

原癌基因HER2在许多肿瘤中过表达,与肿瘤发生、发展密切相关.抑制HER2过表达已成为肿瘤治疗的新靶点.肿瘤细胞HER2过表达主要由其基因转录水平的异常增高引起,通过抑制HER2基因启动子活性实现肿瘤细胞HER2的低表达能够有效抑制肿瘤细胞的生长.因此深入阐明HER2转录调控机制,可能为靶向HER2的肿瘤治疗策略提供新思路.     

FN对LAK细胞活性的增强作用及机理

已发现SAC-IIB_2淋巴瘤细胞株中原癌基因c-fos呈过度表达.针对小鼠c-fos cDNA第2-7编码序列,设计合成了18聚反义、正义和无义的寡脱氧核苷酸.结果发现,反义c-fos寡脱氧核苷酸能促使SAC-IIB_2的细胞形态向成熟阶段分化并抑制其增殖速率,同时降低其对裸鼠的致瘤性及Fos蛋白的表达,但对SAC-IIB_2的细胞动力学没有明显的影响.而正义和无义的c-fos寡脱氧核苷酸没有相应的作用.提示反义c-fos寡脱氧核苷酸能特异地抑制小鼠淋巴瘤SAC-IIB_2细胞的恶性表型.     

垂体肿瘤转化基因与肿瘤

垂体肿瘤转化基因(PTTG)为新近发现的原癌基因,在大多数肿瘤组织、细胞内高度表达.该基因具有反转录和诱导细胞转化功能.研究证明PTTG是一种强有力的肿瘤转化基因,可通过多种机制参与肿瘤的发生、发展,并受多种因子的调控.现综述其与肿瘤关系的研究进展.     

Pokemon蛋白在非小细胞肺癌中的表达及临床意义

背景与目的 原癌基因Pokemon是ARF特异性转录抑制剂,通过ARF-P53途径调节细胞生长和分化.Pokemon是多种肿瘤抑制基因和原癌基因的上游基因,因此有望成为重要的肿瘤监视靶点.本研究旨在探讨Pokemon基因在非小细胞肺癌(NSCLC)中表达的临床意义及其对预后的影响.方法 应用SP免疫组化方法检测Pokemon蛋白在92例NSCLC肿瘤组织及20例癌旁组织中的表达,分析其与NSCLC临床病理学特征及预后的关系.结果 Pokemon在癌旁组织中不表达,92例肺癌组织中66例呈阳性表达(占71.7%).Pokemon表达与肺癌患者TNM分期有密切关系(P=0.011).Pokemon阴性表达者生存率显著高于Pokemon阳性表达者(P=0.0015).Pokemon表达是影响患者预后的独立因素.结论 NSCLC中存在Pokemon的表达,它有望作为NSCLC新的诊断标志.Pokemon高表达可能预示NSCLC患者预后较差.     

甘草提取物体外选择性诱导几种人肿瘤细胞凋亡

目的：从体外诱导人肿瘤细胞凋亡的角度研究传统中药甘草的抗癌作用。方法：采用Hoechst33342染色观察染色体凝聚和流式细胞仪检测凋亡峰两种方法检测细胞凋亡。分别以Fluo-3和Rh123为荧光探针,用流式细胞仪测定胞内游离钙和线粒体膜电位（ΔΨm)变化。用免疫组化方法检测原癌基因c-fos,c-jun与c-myc表达量的变化。结果：甘草选择性诱导胃癌MGC－803、肝癌HepG2、肺癌NSCLC与宫颈癌Hela等几种人肿瘤细胞凋亡。甘草处理的MGC－803、HepG2和NSCLC细胞均观察到胞内游离钙升高和ΔΨm的下降。有趣的是,甘草不能诱导胃癌BGC－823细胞凋亡,但其胞内钙和ΔΨm凋亡细胞株具有同样变化规律。原癌基因c-fos,c-jun与c-myc的蛋白产物在甘草处理的MGC－803细胞中明显上调。结论：甘草抗癌活性与诱导肿瘤细胞凋亡有关,胞内钙升高、ΔΨm下降和c-fos,c-jun与c-myc蛋白表达上调参与甘草诱导肿瘤细胞凋亡的调控。     

原癌基因和细胞生长分化

癌症是基因的疾病,癌基因是正常基因的病理形式。癌基因的发现经历一系列历史偶然性。本来认为原癌基因是病毒癌基因同源的正常细胞基因,但有些原癌基因与病毒无关。确切地说,原癌基因是控制细胞增殖分化的正常看家基因,呈现细胞类型和发育时期的单一性表达,能编码关键性调节蛋白,为细胞基本功能所必需。原癌基因在演化上很保守,暗示对机体生存有重要意义。原癌基因经过突变、重排和扩增等变化后,激活成为有致癌转化潜能的细胞癌基因。进而言之,控制细胞生长分化的调节基因实际是潜在的原癌基因。     

重组人白介素2-卡介苗对荷瘤小鼠腹腔巨噬细胞体外杀伤活性的影响 *

目的：研究ＨＥＲ２／ｎｅｕ原癌基因胞外区片段（ＥＣＤ）ＤＮＡ直接肌肉注射在小鼠体内表达,体液免疫状况,利用小鼠流产模型观察其体内效应。方法：克隆并构建了人及大鼠ＨＥＲ２／ｎｅｕ原癌基因胞外区片段真核表达载体ｐＣＤＮＡ３－Ｘ,采用肌肉直接注射的方法免疫小鼠,分析目的基因在小鼠体内的表达及其诱导的兔疫应答。结果：在质粒ＤＮＡ直接注射部位可检测到目的基因的表达,并诱导了针对ＨＥＲ２／ｎｅｕ的抗体反应;同时诱发小鼠流产,使免疫鼠产仔数减少,可观察到流产结节形成。结论：通过基因免疫,可诱导针对ＨＥＲ２／ｎｅｕ原癌基因产物的有效免疫应答。