灯盏乙素通过调控circ-ACVR2A表达对结肠癌增殖、凋亡和侵袭的影响

目的 观察灯盏乙素对结肠癌HT-29细胞株增殖、凋亡、转移影响与circ-ACVR2A表达的相关性.方法 将结肠癌HT-29细胞株分为阴性对照组,灯盏乙素10、20、40 μmol·L-1组,采用CCK-8法检测细胞增殖情况,AnnexinV-FITC/propidium iodide(PI)流式细胞仪检测细胞凋亡情况...     

盐酸伊立替康脂质体的制备及体外抗肿瘤活性

采用硫酸铵梯度法制得了平均粒径为(45.3±12.6) nm、包封率为(93.8±0.7)％的盐酸伊立替康脂质体.制品在pH7.4磷酸盐缓冲液中约120 h释放完全,提示其具有缓释作用.体外细胞毒性试验显示,制品在较高浓度(25 μg/ml以上)对人结肠癌细胞株HT-29的抑制作用稍优于游离药物,IC50分别为28.1和33.0 μg/ml.细胞凋亡试验表明,30 μg/ml的脂质体和游离药物均能诱导HT-29细胞的凋亡,与游离药物相比,脂质体具有更强的凋亡诱导效果.     

芝麻素协同吉西他滨对人肺腺癌A-549细胞株的作用

目的观察芝麻素及联合吉西他滨对人肺腺癌A-549细胞株的作用。方法体外培养A-549细胞株。MTT法检测细胞增殖,Hoechst33258荧光染色法观察细胞形态学变化,流式细胞术检测细胞内Ca2+浓度变化,免疫细胞化学法观察caspase-3、caspase-8和caspase-9的表达。结果 20⁸0μg·mL-1芝麻素对A-549细胞均有一定的增殖抑制作用(P<0.01),而随着浓度增加,至70μg·mL-1时,增殖抑制作用逐渐减弱,IC50浓度为40μg·mL-1。0.00180μg·mL-1芝麻素对A-549细胞均有一定的增殖抑制作用(P<0.01),而随着浓度增加,至70μg·mL-1时,增殖抑制作用逐渐减弱,IC50浓度为40μg·mL-1。0.001²0μg·mL-1吉西他滨对A-549细胞的生长均具有抑制作用(P<0.01),且呈现浓度依赖性,IC50浓度为1.0μg·mL-1;40μg·mL-1芝麻素+1.0μg·mL-1吉西他滨组的增殖抑制作用更为显著(P<0.01)。40μg·mL-1芝麻素组、1.0μg·mL-1吉西他滨组和芝麻素+吉西他滨组作用A-549细胞48 h后在荧光染色荧光显微镜下观察发现受抑制细胞核浓缩,细胞核染色质高度凝聚、边缘化,与对照组相比细胞内Ca2+浓度水平增高,caspase-3、caspase-8和caspase-9表达均显著增加(P<0.05),联用组均显著高于两药单用组(P<0.01)。结论芝麻素联合吉西他滨可协同抑制A-549细胞,其机制可能与提高细胞浆内Ca2+浓度进而诱导细胞凋亡,激活caspase通路有关。     

氧化苦参碱联合氟尿嘧啶对结肠癌LoVo细胞的影响

目的:观察氧化苦参碱(oxymatrine,OM)与氟尿嘧啶(fluorouracil,5-FU)联合应用对结肠癌LoVo细胞的影响及其作用机制。方法:MTT法测定单用OM或5-FU及两者联用对LoVo细胞的毒性作用的影响,并计算合并指数;流式细胞仪检测OM与5-FU联用对LoVo细胞凋亡的影响。结果:5-FU联用IC_(10)浓度的OM时对LoVo细胞的抑制作用比单用5-FU时增效2.67倍,OM联用IC10浓度的5-FU时比单用OM时增效2.01倍,两药的合并指数为0.87;5-FU和OM联用后,细胞凋亡率比单用时分别增加了2.08及1.82倍。结论:氧化苦参碱与氟尿嘧啶体外联用有协同抗结肠癌LoVo细胞的作用。     

CpGODN结合CD28/CD80单抗活化T细胞对结肠癌细胞的杀伤作用

目的研究联合应用CpGODN和CD28/CD80单抗共刺激健康人外周血T淋巴细胞(PBLs)在体外对结肠癌细胞株HT-29的杀伤作用,为结直肠癌的过继免疫治疗可能性提供参考。方法PBLs的分离与体外培养;CD28/CD80共刺激活化PBLs;用含共刺激活化PBMC或/和CpGODN的100ml/L胎牛血清的RPMI1640培养基培养细胞,测生长曲线。MTT法检测活化细胞的体外淋巴细胞毒作用,并用电镜观察效应细胞杀伤的结肠癌细胞超微结构及用流式细胞仪检测结肠癌细胞的相关凋亡情况。结果CpGODN本身对HT-29细胞有一定的杀伤作用(P<0.05),CD28/CD80共刺激活化PBLs在体外对结肠癌细胞株HT-29杀伤作用明显(P<0.01),CpGODN与CD28/CD80共刺激活化PBLs合用,对HT-29的杀伤作用显著大于CpGODN单独对HT-29细胞杀伤作用(抑制率92.31%vs68.00%,P<0.01),亦大于单独应用CD28/CD80共刺激活化PBMC对HT-29细胞的杀伤作用(P<0.05),CpGODN增加了HT-29细胞对共刺激活化PBMC的敏感性。电镜结果显示,效应细胞作用24h肿瘤细胞就部分发生坏死,部分肿瘤细胞可见凋亡。流式细胞仪检测效应细胞HT-29细胞72h明显凋亡。结论联合应用CpGODN可以提高单抗协同诱导的效应细胞对结肠癌细胞株HT-29杀伤作用,而坏死细胞进一步增多说明效应细胞是通过诱导肿瘤细胞坏死及细胞凋亡两条途径来实现抑制杀伤作用从而说明活化的淋巴细胞杀伤结肠癌细胞是通过坏死及凋亡实现的。     

瘦素对5-氟尿嘧啶损伤结肠癌细胞的影响

目的探讨不同浓度的瘦素对5-氟尿嘧啶(5-FU)损伤结肠癌细胞的影响。方法同时用5-FU及不同浓度的瘦素进行体外干预结肠癌HT-29细胞株。MTT法检测5-FU50%细胞生长抑制率(IC50)的变化。流式细胞仪、原位末端转移酶标记法(TUNEL)进行周期及凋亡分析。以RT-PCR方法检测caspase-9,caspase-3mRNA的表达。结果瘦素抑制5-FU对HT-29的杀伤作用。抑制5-FU诱导的细胞周期阻滞及细胞凋亡。RT-PCR表明加入瘦素后caspase-9,caspase-3mRNA的表达均下降,且呈剂量依赖性。结论瘦素通过下调caspase-9,caspase-3的表达促进结肠癌细胞产生凋亡抵抗,抑制5-FU的损伤作用。     

鞘氨醇激酶1抑制剂和5-FU联合应用对体外胃癌细胞增殖与凋亡的影响

目的观察鞘氨醇激酶1(SphK1)抑制剂二甲基鞘氨醇(DMS)与化疗药物5-氟尿嘧啶(5-FU)联合应用对体外胃癌细胞SGC7901增殖与凋亡的影响。方法体外培养人胃癌细胞株SGC7901,分别单用不同浓度5-FU(1、5、25μg/ml)或5-FU与DMS(1μmol/L)联合应用。MTT比色法检测各组细胞生长抑制率,光镜下观察细胞形态变化,流式细胞术检测各组细胞凋亡率。通过SAS软件进行反应曲面分析,分析两药之间的关系。结果不同浓度的5-FU单用组及联用DMS组的抑制率差异有统计学意义(P<0.05),联用组抑制率均高于单用组,两者具有协同作用。单用DMS组及5-FU组的胃癌细胞凋亡率较空白对照组明显增高,联用组凋亡率较单用组明显增加(P<0.05)。结论 DMS可抑制SGC7901细胞的增殖;DMS和5-FU联用显示了较好的协同作用,提示抑制SphK1活性能够提高胃癌细胞对于化疗药物的敏感性。     

TRAIL联合阿霉素的体外抗肿瘤活性

目的探讨肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体 (TRAIL)与阿霉素联合应用的体外抗肿瘤活性。方法将TRAIL与阿霉素单独及联合应用于体外培养的骨肉瘤OS 732细胞 ,观察其对肿瘤细胞的促凋亡作用。结果 5 0 μg·L-1的TRAIL与 5mg·L-1阿霉素合用于OS 732细胞 2 4h后 ,采用MTT(四甲基偶氮唑盐 )法测细胞抑制率为 85 4 7% ,明显高于单用TRAIL(5 0 μg·L-1)时的9 6 8%及单用阿霉素 (5mg·L-1)时的 18 4 1% (P <0 0 1)。倒置相差显微镜、荧光显微镜及电镜下的细胞超微结构观察均显示 ,合用比单用有更大的肿瘤杀伤效应。结论TRAIL与阿霉素联合应用可明显促进肿瘤细胞的凋亡     

槲寄生凝集素对人结肠癌HT-29细胞增殖及凋亡的影响

目的：研究槲寄生凝集素对人结肠癌HT-29细胞增殖和凋亡的影响。方法：采用MTT法观察槲寄生凝集素对体外培养的人结肠癌HT-29细胞增殖的影响,运用基因组DNA电泳观察凋亡特征性“梯状”条带及原位末端标记法检测槲寄生凝集素诱导HT-29细胞凋亡。结果：槲寄生凝集素对体外培养的人结肠癌HT-29细胞抑制作用表现出时间和剂量依赖性。基因组DNA琼脂糖凝胶电泳显示槲寄生凝集素作用于HT-29细胞后出现凋亡细胞特有的DNA阶梯状条带。原位末端标记法检测显示槲寄生凝集素可明显诱导HT-29细胞的凋亡。结论：槲寄生凝集素可抑制人结肠癌HT-29细胞生长并诱导其凋亡。     

萝卜硫素对结肠癌HT-29细胞增殖、血管形成及miR-34a/Notch1信号通路的影响

摘要：目的:探讨萝卜硫素对结肠癌HT-29细胞增殖、血管形成及miR-34a/Notch1信号通路的影响。方法:设结肠癌HT-29细胞组、氟尿嘧啶组(20.0μg·ml-1)、萝卜硫素低(100.0μg·ml-1)、高(1 000.0μg·ml-1)剂量组,置于37℃、5%CO2的环境中培养72 h,培养结束后,细胞计数试剂盒-8测定法测定细胞增殖能力,Giemsa溶液染色细胞计算集落总数,BD Matrigel基质培养测定结肠癌HT-29细胞相对总血管长度、相对总血管数目,流式细胞仪测定凋亡率,RT-PCR法及Western blot测定miR-34a、Notch1 mRNA及Notch1蛋白水平。结果:与结肠癌HT-29细胞组比较,氟尿嘧啶组、萝卜硫素低、高剂量组存活率、单克隆形成数目、相对总血管长度、相对总血管数目、miR-34a mRNA、Notch1 mRNA及蛋白显著降低（P<0.05）,凋亡率显著升高（P<0.05）;随着萝卜硫素剂量的增加,萝卜硫素各剂量组存活率、单克隆形成数目、相对总血管长度、相对总血管数目、miR-34a mRNA、Notch1 mRNA及蛋白显著降低（P<0.05）,凋亡率显著升高（P<0.05）;与氟尿嘧啶组比较,萝卜硫素各剂量组存活率、单克隆形成数目、相对总血管长度、相对总血管数目、miR-34a mRNA、Notch1 mRNA及蛋白显著升高（P<0.05）,凋亡率显著降低（P<0.05）。结论:萝卜硫素能抑制结肠癌HT-29细胞增殖、血管形成,并能促进HT-29细胞凋亡,其机制与萝卜硫素抑制miR-34a、Notch1基因和蛋白的表达有关。