亚砷酸对人鼻咽癌细胞增殖的抑制作用

目的观察亚砷酸对人鼻咽癌细胞株CNE1的生长抑制作用并初步探讨其机理.方法用不同浓度亚砷酸处理人鼻咽癌细胞株CNE1,MTT法观察不同浓度亚砷酸作用不同时间后对CNE1细胞生长的影响,流式细胞仪分析不同条件作用后CNE1细胞周期动力学改变,免疫组化法检测增殖细胞核抗原(PCNA)阳性细胞.结果亚砷酸明显抑制人鼻咽癌细胞株CNE1细胞的增殖,24、48、72 h的IC50值分别为3.12、0.65、0.12 μg/mL;其作用随亚砷酸浓度增加和作用时间延长而增加;G2/M期逐渐增多;随着亚砷酸浓度增加,PCNA阳性细胞平均灰度值逐渐下降,P<0.05.结论亚砷酸可明显抑制人鼻咽癌细胞株CNE1的生长,调控DNA合成及细胞增殖的PCNA蛋白合成降低可能是亚砷酸的作用机制之一.     

抗端粒酶模板区核酶诱导鼻咽癌细胞凋亡的实验研究

目的 :研究端粒酶RNA模板区特异性核酶对人低分化鼻咽癌CNE 2Z细胞增殖、凋亡的影响。方法 :用电转染的方法将带有绿色荧光蛋白GFP报道系统的端粒酶核酶基因的真核表达质粒PGFPuro teloRZ7 1及空载质粒PPAT GFP导入人低分化鼻咽癌CNE 2Z细胞 ;检测转染细胞的GFP表达情况、细胞增殖指数及凋亡。结果 :CNE 2ZGTR7 1细胞 (转染目的基因质粒PGFPuro teloRZ7 1的CNE 2Z细胞 )和CNE 2ZG细胞 (转染空载质粒PPAT GFP的CNE 2Z细胞 )有GFP表达 ,而未转染的CNE 2Z细胞无GFP表达。流式细胞仪检测显示 ,CNE 2ZGTR7 1细胞增殖指数 [(2 5 10 0±0 14 1) % ]明显低于CNE 2Z细胞 ,即未转染的细胞 [(5 3 663± 16 981) % ]和CNE 2ZG细胞 [(61 5 75± 5 166) % ] ,差异有统计学意义 ,P <0 0 1。CNE 2ZGTR7 1细胞传第 12代后有凋亡出现 ,CNE 2Z及CNE 2ZG细胞无凋亡。结论 :端粒酶核酶基因的导入使CNE 2Z细胞的增殖能力下降并可诱导CNE 2Z细胞凋亡。端粒酶RNA模板区可以作为鼻咽癌的一个治疗靶点 ,端粒酶RNA模板区特异性核酶可望成为有效的端粒酶抑制剂 ,在肿瘤反义核酸治疗的实验研究中发挥作用     

ZD6474对鼻咽癌细胞株CNE2抑制作用及其机制的探讨

目的:研究ZD6474对鼻咽癌细胞株CNE2的抑制作用.方法: 采用MTT 法测定ZD6474的抑制浓度(IC50) ,流式细胞仪检测ZD6474的凋亡率及细胞周期分布.结果: MTT数据显示,CNE2细胞的抑制率与ZD6474浓度成正相关,随ZD6474浓度升高,抑制作用越明显,IC50=2.531 μmol/L;流式细胞术分析显示,ZD6474处理48 h使CNE2细胞凋亡率明显升高[(24.02±5.90)%],且随浓度升高凋亡率升高越明显,P<0.001.细胞周期结果显示,ZD6474使细胞周期S期[(34.96±5.37)%]比例下降,G0/G1期[(56.25±1.45)%]和G2/M期[(17.36±5.73)%]比例升高.结论: ZD6474能明显抑制CNE2细胞的增殖,促进其凋亡并改变其细胞周期的分布.     

莪术油对鼻咽癌CNE22 细胞的凋亡及放疗 增敏机制的影响

 目的　探讨莪术油、莪术油联合γ2射线照射对鼻咽低分化鳞癌细胞株CNE22 的增殖抑制和诱 导凋亡作用;分析莪术油是否具有放疗增敏的作用,并研究其机制。方法　体外培养CNE22 细胞,莪术 油以体外直接加药的方式作用于CNE22 细胞,采用MTT、流式细胞术、电镜等分子生物学手段,检测莪 术油单用或联合γ2射线对CNE22 的诱导凋亡作用、放疗增敏作用。结果　莪术油单独使用,对CNE22 细胞有确切的增殖抑制及诱导凋亡作用,并与常规化疗药物52Fu 有相近的抑制作用( P > 0. 05) 。莪术 油的药物抑制作用呈现浓度依赖性,最低起效浓度为10μg/ ml ,最佳作用时间为48 小时; 5μg/ ml 、100 μg/ ml 、300μg/ ml 的莪术油联合100 cGy 的γ2射线作用2 天后凋亡率由0. 5 %、2. 15 %、10. 2 %显著提高 到8. 6 %、14 %和26 % ,细胞的死亡率均在5 %以下有明显的协同增效作用( P < 0. 01) ;联合作用96h 后 试验组的细胞主要以死亡为主,凋亡较少;500μg/ ml 的莪术油主要导致细胞死亡,有明显的细胞毒性。 流式细胞仪结果显示较高浓度时,莪术油使CNE22 细胞阻滞在G1 期。电子显微镜观察细胞凋亡的超微 结构可以看到凋亡小体。结论　莪术 油可以抑制鼻咽癌细胞CNE22 的增 殖并诱导其凋亡;莪术油和100 cGy 的 γ2射线联合作用有明显的增敏作用; 其作用机制与诱导肿瘤细胞发生凋亡 及影响细胞生长周期有关。     

二烯丙基二硫对人鼻咽癌CNE2细胞周期的阻滞作用

目的 探讨二烯丙基二硫(DADS)对人鼻咽癌CNE2细胞周期的阻滞作用及分子机制.方法 体外培养CNE2细胞,采用MTT比色实验、细胞计数法、细胞形态学观察、流式细胞仪和Western blotting方法分析DADS对CNE2细胞的增殖抑制作用、细胞周期分布的影响及细胞周期相关蛋白p21WAF1的表达.结果 MTT法显示,不同浓度DADS(90、140、240、400 μmol/L)处理CNE2细胞48小时后,生长抑制率分别为3.3%、12.9%、28.3%、56.9%;细胞计数法表明,常规培养CNE2细胞群体倍增时间为24.5小时,DADS的浓度由90 μmol/L增加到400 μmol/L时,其细胞群体倍增时间由27.6小时延长到93.1小时;HE染色结果显示,不同浓度DADS处理CNE2细胞48小时后细胞异型性明显减少,核浆比例明显减少;流式细胞仪分析显示DADS呈浓度依赖性将CNE2细胞阻滞在G0/G1期;Western blotting分析表明,在细胞周期阻滞的同时有p21WAF1蛋白表达上调.结论 DADS对CNE2细胞的抑制增殖作用与G0/G1期阻滞有关,其分子机制可能与调节p21WAF1表达有关.     

重组突变型IκBα cDNA对CNE1鼻咽癌细胞凋亡的诱导作用

目的:探讨突变型IκBα cDNA对CNE1鼻咽癌细胞凋亡的作用。方法:应用逆转录-聚合酶链式反应技术(RT-PCR)首先从CNE2鼻咽癌细胞中扩增突变型IκBα cDNA并将其克隆到pCLXSN逆转录病毒载体。然后,用脂质体介导的方法将含有该突变型IκBα cDNA的重组逆转录病毒载体转移到CNE1鼻咽癌细胞并用AnnexinⅤ-FITC细胞凋亡检测试剂盒和流式细胞术分析转染细胞凋亡情况。结果:通过RT-PCR技术,从CNE2鼻咽癌细胞扩增到IκBα cDNA并成功将其克隆到pCLXSN载体。将该重组逆转录病毒载体转染CNE1细胞约48小时后,AnnexinⅤ阳性细胞数为66.67%,而仅转染空白pCLXSN载体的CNE1细胞,An-nexinⅤ阳性细胞数为4.1%。结论:突变型IκBα cDNA能够诱导CNE1鼻咽癌细胞凋亡的发生。     

重组突变型IкBαcDNA对CNE1鼻咽癌细胞凋亡的诱导作用

目的：探讨突变型IкBα cDNA对CNE1鼻咽癌细胞凋亡的作用.方法：应用逆转录-聚合酶链式反应技术（RT-PCR）首先从CNE2鼻咽癌细胞中扩增突变型IкBα cDNA并将其克隆到pCLXSN逆转录病毒载体.然后,用脂质体介导的方法将含有该突变型IкBα cDNA的重组逆转录病毒载体转移到CNE1鼻咽癌细胞并用Annexin V-FITC细胞凋亡检测试剂盒和流式细胞术分析转染细胞凋亡情况.结果：通过RT-PCR技术,从CNE2鼻咽癌细胞扩增到IкBα cDNA并成功将其克隆到pCLXSN载体.将该重组逆转录病毒载体转染CNE1细胞约48小时后,Annexin V阳性细胞数为66.67%,而仅转染空白pCLXSN载体的CNE1细胞,Annexin V阳性细胞数为4.1%.结论：突变型IкBα cDNA能够诱导CNE1鼻咽癌细胞凋亡的发生.     

奥沙利铂对人低分化鼻咽癌细胞系CNE2体外增殖的影响

背景与目的:奥沙利铂是第三代铂类化合物,与顺铂相比其作用机制有一些重要区别,且毒性较低。鼻咽癌以低分化癌为多见,虽放射治疗是基本手段,但对复法或转移鼻咽癌、化疗仍是重要的手段,因此,本实验通过探讨奥沙利铂体外对人低分化鼻咽癌细胞CNE2的影响研究其在鼻咽癌治疗中的可能价值。方法:将浓度分别为0.03、0.16、0.8、4.0、20.0、100μg/m l的奥沙利铂与CNE2细胞作用24、36、48 h,用MTT法计算细胞生长抑制率,流式细胞仪检测细胞周期改变和凋亡率,透射电镜观察其形态学变化。结果:奥沙利铂能够抑制CNE2细胞的增殖,并且这种作用呈时间和剂量依赖性。100μg/m l奥沙利铂作用48 h,CNE2细胞生长抑制率达(95.6±0.7)%。流式细胞仪分析显示CNE2细胞呈G2/M期阻滞;奥沙利铂浓度为0、0.03、4.0、100μg/m l时CNE2细胞的凋亡率分别为(0.19±0.17)%、(0.37±0.09)%、(5.50±1.08)%、(9.43±0.09)%。20μg/m l药物作用24 h后电镜观察发现CNE2细胞皱缩,染色质聚集于核膜周围,固缩,碎裂成多块;并有凋亡小体形成。结论:奥沙利铂能够抑制人低分化鼻咽癌细胞系CNE2的增殖,能够诱导CNE2细胞G2/M期阻滞,较高浓度的奥沙利铂才可诱导CNE2细胞凋亡。     

洛铂对鼻咽癌抗肿瘤作用的体外实验研究

目的 探讨洛铂对鼻咽癌的体外抗肿瘤作用及其可能的机制,为洛铂用于鼻咽癌的临床治疗提供实验依据。方法 在体外将不同浓度洛铂分别作用于低分化鼻咽癌细胞株CNE2、HONE1和SUNE1,采用CCK-8法检测细胞活性;碘化丙啶（PI）染色分析细胞中DNA的含量,流式细胞仪检测细胞周期情况;采用Annexin V-FITC／PI双染法检测细胞凋亡情况;采用蛋白印迹法（Western blotting）检测细胞周期和细胞凋亡相关蛋白的表达。结果 在体外洛铂作用3种鼻咽癌细胞株48h具有明显的细胞抑制作用,并表现出浓度依赖性。洛铂作用鼻咽癌细胞株CNE2、HONE1、SUNE1的半数抑制浓度（IC₅₀）分别为（4.05±0.49）μmol/L、（4.32±1.17）μmol/L和（2.51±0.15）μmol／L。洛铂作用3种鼻咽癌细胞株48h后,在较低浓度（0.125倍IC₅₀）时将细胞周期阻滞在G₂期,同时伴随G₂期相关蛋白Cyclin B1和phospho-cdc2（Tyr15）表达增高;而在较高浓度（0.5倍IC₅₀）时则诱导细胞呈Caspase依赖性细胞凋亡,并具有浓度依赖性。结论 洛铂对鼻咽癌细胞具有明显的细胞毒作用,且呈浓度依赖性;其机制表现为双重作用,即在较低浓度时阻滞细胞于G₂期和在较高浓度时诱导细胞凋亡,这为洛铂用于鼻咽癌的临床治疗提供可能性。     

西妥昔单抗联合电离辐射对鼻咽癌细胞的作用

目的探讨西妥昔单抗（Cetuximab）联合电离辐射对鼻咽癌细胞的放射敏感度、凋亡及细胞周期的影响。方法人鼻咽癌细胞CNE2经Cetuximab、电离辐射或两者联合处理,采用细胞克隆形成方法检测Cetuximab对CNE2放射敏感度的影响,利用Sigmaplot 10.0软件按单击多靶模型和线性二次模型拟合细胞存活曲线;流式细胞仪检测细胞凋亡及细胞周期情况。结果Cetuximab增强了鼻咽癌细胞CNE2的放射敏感度,放射增敏比为1.157。Cetuximab联合电离辐射明显增强了放射诱导的细胞凋亡（P<0.05）。经Cetuximab处理后的CNE2细胞出现G2/M期阻滞,且Cetuximab联合电离辐射可明显增强CNE2细胞G2/M期阻滞。结论Cetuximab联合电离辐射促进了辐射诱导的鼻咽癌细胞凋亡,细胞周期G₂/M期阻滞,从而增强了鼻咽癌细胞的放射敏感度。     

紫草素衍生物SYUNZ-7的抗肿瘤作用及其机制的初步研究

背景与目的:实验证明天然紫草素类化合物及其衍生物具有不同程度的细胞毒作用和抗肿瘤作用。本实验研究紫草素萘茜类衍生物[2或3,11-双苯硫基-6-异己萘茜]代号为SYUNZ-7的体内外抗肿瘤作用,并探讨其作用机制。方法:应用MTT法检测SYUNZ-7对多种肿瘤细胞的体外抗增殖作用,并计算IC50值;用小鼠移植肿瘤模型和人鼻咽癌裸鼠移植瘤模型进行SYUNZ-7的体内抗瘤实验;流式细胞术检测细胞凋亡和细胞周期的变化;免疫组化法检测SYUNZ-7对血管生成的影响。结果:SYUNZ-7对人肺癌细胞GLC-82、人鼻咽癌细胞CNE2、人口底癌细胞KB、人胃癌细胞MGC-803和人肝癌细胞HepG2的IC50值分别为(2.18±0.04)μg/ml、(4.17±0.09)μg/ml、(5.41±0.10)μg/ml、(6.41±0.14)μg/ml和(9.99±0.21)μg/ml。SYUNZ-7对GLC-82细胞的体外抗增殖作用最强。小鼠艾氏腹水癌EAC(实体型)抗瘤实验结果显示,在1mg/kg、2mg/kg、4mg/kg和8mg/kg的剂量下SYUNZ-7的抑瘤率分别为(40.5±0.1)%、(50.9±2.3)%、(61.3±1.8)%和(65.6±7.4)%(P<0.01)。1mg/kg、2mg/kg和4mg/kg的SYUNZ-7对CNE2细胞裸小鼠移植瘤的抑瘤率分别为24.7%、38.3%和41.2%(P<0.05)。流式细胞术检测结果显示,SYUNZ-7能浓度依赖性和时间依赖性诱导CNE2细胞的凋亡;随着作用时间的延长或处理浓度的增加,SYUNZ-7可以阻滞CNE2细胞由S期向G2/M期转化。免疫组化结果显示:SYUNZ-7能够呈浓度依赖性抑制CNE2细胞裸小鼠移植瘤的血管生成。结论:紫草素萘茜类衍生物SYUNZ-7具有较强的体内外抗瘤作用,其抗瘤机制与诱导细胞凋亡、阻滞细胞周期和抑制血管生成有关。     

三氧化二砷诱导人鼻咽癌细胞凋亡的实验研究

目的 :研究三氧化二砷 (As2 O3 )体外抑制人鼻咽癌细胞株 (CNE1)增殖及诱导凋亡的作用。方法 :以不同浓度的As2 O3 处理CNE1,用四甲基噻唑蓝 (MTT)法测定细胞增殖情况 ,细胞染色方法观察细胞凋亡的形态 ,原位末端标记法 (TUNEL)检测凋亡细胞 ,流式细胞仪检测细胞的DNA含量。结果 :As2 O3 明显抑制人鼻咽癌细胞株CNE1细胞的增殖 ,其抑瘤作用优于顺铂 (DDP)和 5 -氟尿嘧啶 (5 FU)。As2 O3 作用于细胞后 ,可见典型凋亡细胞的形态学改变 :细胞核固缩 ,染色质凝集 ,核碎裂 ,凋亡小体形成等。流式细胞仪DNA线条图上出现典型的亚二倍体“凋亡峰”。结论 :As2 O3 可明显抑制人鼻咽癌细胞株CNE1的生长和促进细胞凋亡的作用     

小分子HIF-1α干扰RNA逆转鼻咽癌细胞耐药的实验

目的探讨小分子HIF-1α干扰RNA对人鼻咽癌耐药细胞株CNE2/DDP耐药性的影响。方法采用药物大剂量冲击和逐渐增加剂量相结合的方法建立人鼻咽癌顺铂耐药细胞株CNE2/DDP,瞬时转染法将HIF-1α小片段RNA导入CNE2/DDP细胞沉默HIF-1α基因,MTS法及流式细胞仪分别检测顺铂对CNE2/DDP细胞增殖、凋亡的影响,Western blot法分析细胞HIF-1α及MDR1表达水平。结果成功建立了人鼻咽癌顺铂耐药细胞株CNE2/DDP,耐药系数达16。当顺铂≥1.0μg/ml时,CNE2组与siHIF-1αsiRNA组细胞抑制率均明显高于CNE2/DDP组与siCtrl-siRNA组(P<0.05);同样,CNE2组与siHIF-1αsiRNA组细胞凋亡率也明显高于CNE2/DDP组与siCtrl-siRNA组(P<0.05);Westernblot显示siHIF-1αsiRNA组HIF-1α及MDR1蛋白的表达低于CNE2/DDP组。结论小分子HIF-1α干扰RNA沉默HIF-1α提高了人鼻咽癌顺铂耐药细胞CNE2/DDP对顺铂的敏感度,逆转了CNE2/DDP对顺铂的耐药性。     

EBV-LMP1对鼻咽癌细胞系CNE1细胞凋亡的影响

背景与目的:已证实EB病毒编码的潜伏膜蛋白1(latentmembraneprotein,LMP1)具有转化致瘤作用,在鼻咽癌的发生发展中起重要作用。LMP1的转化致瘤作用可能与细胞凋亡有关,本实验目的是观察EBV-LMP1对鼻咽癌细胞系CNE1细胞凋亡的影响,探索LMP1在鼻咽癌发生发展中的可能机制。方法:用电转染的方法将带有绿色荧光蛋白GFP报道系统的EB病毒LMP1基因真核表达质粒导入CNE1,用荧光显微镜检测报道基因GFP的表达情况;用免疫组化法及Westernblot法检测目的基因LMP1的表达情况;用流式细胞仪、荧光染色及DNA片段分析等方法检测在有地塞米松磷酸钠或无血清饥饿诱导的情况下LMP1对CNE1细胞凋亡的影响。结果:CNE1G细胞(转染空载质粒PAT-GFP的CNE1细胞)及CNE1GL(转染目的基因质粒PAT-GFP-LMP1的CNE1细胞)有绿色荧光蛋白表达,CNE1细胞(未经转染的CNE1细胞)无绿色荧光蛋白表达;CNE1GL细胞LMP1呈阳性表达,而CNE1及CNE1G细胞均为阴性。CNE1、CNE1G及CNE1GL3组细胞分别用地塞米松磷酸钠或无血清1640培养液处理后均有凋亡出现,且两种诱导方法均能使CNE1GL组细胞的凋亡指数(apoptosisindex,AI)较CNE1及CNE1G组明显增高(P<0.05),而CNE1与CNE1G组的凋亡指数无明显差别。3组细胞常规培养下则无凋亡出现。结论:LMP1基因成功导入CNE1细胞     

人参皂甙-Rh2诱导人肝癌Bel-7404细胞凋亡的作用

目的 研究人参皂甙-Rh2(GS-Rh2)诱导肝癌Bel-7404细胞凋亡的作用。方法 应用流式细胞术检测GS-Rh2对肝癌Bel-7404细胞凋亡的诱导作用以及对细胞周期的影响。结果 流式细胞术证实GS-Rh2具有诱导凋亡作用。细胞凋亡（AR）随GS-Rh2浓度增高和作用时间延长而升高，当GS-Rh2浓度由12.5μg/ml增至50.0μg/ml时，AR由16.2%升高至27.5%，但GS-Rh2浓度由50.0μg/ml进一步增至100.0μg/ml后，AR未见相应升高；GS-Rh2可将细胞周期阻滞于G1期。结论 GS-Rh2能诱导体外培养的Bel-7404细胞凋亡；GS-Rh2诱导Bel-7404细胞凋亡可能与细胞周期阻滞有关。     

泰素联合放射对人鼻咽癌细胞的作用

目的：研究泰素（Taxol)结合放射对人鼻咽癌细胞系（CNE）的联合作用效应。方法：用克隆形成法制作细胞存活曲线，流式细胞分析测定细胞周期分布。Tunel法作细胞凋亡测定。结果：不同浓度的Taxol与CNE细胞作用24h ,其细胞毒性呈剂量依赖性。在放射增敏实验中，100mmol/LTaxol作用24h，对CNE细胞有放射增敏作用，增敏比为1．23。同样剂量的Taxol作用同样时间，可诱导CNE细胞的G2＋M期阻滞。Tunel法测定细胞凋亡，10μmol/L Taxol作用24h，可诱导CNE细胞凋亡，X射线照射2Gy也可诱导CNE细胞凋亡，而10μmol/L Taxol与2Gy射线同时作用，诱导凋亡明显增加。结论：Taxol对CNE细胞有放射增敏作用，除自身对细胞凋亡有诱导作用外，还能增强放射对CNE细胞凋亡的诱导作用。     

Caspase-3在苦参碱诱导鼻咽癌CNE2细胞凋亡中的作用

目的：探讨苦参碱对鼻咽癌CNE2细胞生长和凋亡的影响以及Caspase-3在其中的作用。方法：将不同浓度（0、0.25、1.00、4.00g/L）的苦参碱分别作用于体外培养的CNE2细胞48h;采用MTT法检测细胞的存活与增殖,采用Annexin-Ⅴ和PI双染法测定细胞凋亡,采用Westernblot法检测细胞中Caspase-3蛋白的含量。结果：在苦参碱1.00和4.00g/L浓度作用下,CNE2细胞存活和增殖受到影响,其存活率分别为对照组的65.1%和50%,与对照组相比,差异均具有统计学意义（P均〈0.05）;且CNE2细胞的凋亡频率明显增加,分别达到15.78%和28.44%,与对照组相比,差异均具有统计学意义（P均〈0.05）。苦参碱1.00和4.00g/L浓度组细胞的Caspase-3蛋白水平分别为1.22±0.34和1.69±0.46,均比对照组0.87±0.26明显增高（P均〈0.05）。结论：苦参碱能够引起鼻咽癌CNE2细胞的增殖抑制和凋亡增加,并对Caspase途径有激活作用。     

bcl—xs增加鼻咽癌细胞对顺铂诱导凋亡的敏感性

目的：利用bcl-xs基因降低肿瘤细胞凋亡阈值,促进化疗药物顺铂诱导的鼻咽癌细胞凋亡,探索提高顺铂疗效的新途径。方法：利用脂质体LipofectAmine将含有人bcl-xs基因的重组真核表达质粒pcDNA3xs导入人鼻咽癌低分化上皮细胞株CNE－2Z,G418筛选培养后,经Western blot检测bcl-xs的表达,以不含有bcl-xs基因的pcDNA质粒转染CNE－2Z作为对照细胞（CNE－2Zneo)。顺铂处理2种细胞后,台盼蓝计数求得各自的IC50,流式细胞仪及荧光染色检测凋亡细胞百分比。结果：Western blot检测证实获得稳定表达bcl-xs的细胞（CNE－2Zxs),与对照细胞相比,其对顺铂的IC50值明显降低,经相同剂量顺铂处理后,流式细胞仪及荧光染色检测,结果表明,其凋亡细胞百分比明显高于对照细胞。结论：bcl-xs能显著增加鼻咽癌CNE－2Z细胞对顺铂诱导凋亡的敏感性。     

bcl-x_S增加鼻咽癌细胞对顺铂诱导凋亡的敏感性

目的 :利用bcl xS基因降低肿瘤细胞凋亡阈值 ,促进化疗药物顺铂诱导的鼻咽癌细胞凋亡 ,探索提高顺铂疗效的新途径。方法 :利用脂质体LipofectAmine将含有人bcl xS基因的重组真核表达质粒pcDNA3xS导入人鼻咽癌低分化上皮细胞株CNE 2Z ,G4 18筛选培养后 ,经Westernblot检测bcl xS的表达。以不含有bcl xS基因的pcDNA3质粒转染CNE 2Z作为对照细胞(CNE 2Zneo)。顺铂处理 2种细胞后 ,台盼蓝计数法求得各自的IC50 ,流式细胞仪及荧光染色检测凋亡细胞百分比。结果 :Westernblot检测证实获得稳定表达bcl xS的细胞 (CNE 2ZxS) ,与对照细胞相比 ,其对顺铂的IC50 值明显降低 ,经相同剂量顺铂处理后 ,流式细胞仪及荧光染色检测 ,结果表明 ,其凋亡细胞百分比明显高于对照细胞。结论 :bcl xS能显著增加鼻咽癌CNE 2Z细胞对顺铂诱导凋亡的敏感性     

茶多酚对人鼻咽癌细胞及其裸鼠移植瘤生长的抑制作用

背景与目的:许多研究报告表明,茶多酚(TP)有防癌和抗癌作用,但对鼻咽癌细胞作用的报道很少。我们最近研究证明TP对人鼻咽癌CNE2细胞有抗增殖和诱导凋亡的作用。为进一步了解TP对人鼻咽癌细胞的作用,进行TP对多种鼻咽癌细胞和人鼻咽癌裸鼠移植瘤生长影响的实验研究。方法:以MTT法检测TP对NPC/HK1、CNE1、CNE2、HNE1、HNE2、SUNE1和Fadu7种人鼻咽癌细胞株的生长抑制作用。以人鼻咽癌细胞株(CNE2)裸鼠移植瘤为模型,作体内抑瘤试验。结果:在体外抗癌细胞增殖试验中,TP对NPC/HK1、CNE1、CNE2、HNE1、HNE2、SUNE1和Fadu的IC50分别为55.83、98.43、119.21、127.74、158.07、160.72μg/ml和163.59μg/ml。在TP对人鼻咽癌细胞株(CNE2)裸鼠移植瘤的抑瘤试验的3批实验中,5mg·(kg·d)-1TP作用18天的平均抑瘤率为12.7%,P>0.05;10mg·(kg·d)-1TP作用18天的平均抑瘤率为31.0%,P<0.01;20mg·(kg·d)-1TP作用18天的平均抑瘤率为38.5%,P<0.01。结论:TP对7种人鼻咽癌细胞株均有不同程度的生长抑制作用,对人鼻咽癌CNE2裸鼠移植瘤的生长有一定的抑制作用。