大鼠经脑内注射染锰后iNOS表达的变化

目的观察大鼠经脑内注射染锰后诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)表达的变化。方法健康雄性SD大鼠随机分为实验组和对照组,采用脑内注射方法染锰,于损伤后不同时间点取材,用免疫组织化学染色方法检测酪氨酸羟化酶(tyrosine hydroxylase,TH)表达的变化;用免疫组织化学染色和Western blot检测诱导型一氧化氮合酶表达的变化。结果①实验组大鼠染锰后1d,iNOS无明显表达;注射侧黑质与对侧相比,TH免疫反应阳性细胞无明显变化。②实验组大鼠染锰后7d,iNOS免疫反应阳性细胞明显增加;注射侧黑质与对侧相比,TH免疫反应阳性细胞明显减少。③对照组大鼠脑内注射后7d和1d,iNOS均无表达;注射侧黑质与对侧相比,TH免疫反应阳性细胞无明显变化。结论锰中毒可导致多巴胺能神经元的损伤,诱导型一氧化氮合酶可能在其中发挥重要的作用。     

短期锰接触对成年大鼠抗氧化功能的影响

目的评价短期锰接触对机体生长发育造成的毒性影响。方法 36只SD大鼠随机分为3组,第1组为对照组,供用未加锰的新鲜蒸馏水,第2、3组为实验组,分别供用不同浓度(0.5和5.0g/L)的氯化锰,60d后,检测大鼠锰接触后脏器系数(内脏/体比)、血清和脑匀浆的一氧化氮合酶(NOS)、超氧化物岐化酶(SOD)活力,以及中脑黑质区神经胶质细胞纤维酸蛋白(GFAP)免疫反应阳性胶质细胞的改变。结果与对照组相比,锰接触60d后高、低剂量组大鼠的脏器系数无明显改变;大鼠血清和脑匀浆中的NOS比对照组明显升高,而SOD活力则明显降低;在中脑黑质,GFAP免疫反应阳性胶质细胞反应强度、细胞数密度(GV)和反应阳性产物的相对吸光度值(A),高、低剂量组大鼠均比对照组显著升高。结论短期的锰接触对大鼠的各脏器系数影响不大;随着锰接触剂量的增加,血清和脑匀浆中的NOS则明显升高,而SOD活力明显降低;锰接触会对中脑黑质星形胶质细胞产生明显的毒性损害。     

锰中毒性帕金森综合征大鼠脑生化及行为学研究

摘要:目的　探讨锰中毒性帕金森综合征大鼠中枢多巴胺能神经元缺失与行为学改变之间的关系。方法　将40只大鼠随机分成对照组、染锰组,分别腹腔注射生理盐水和MnCl2溶液,第16周进行4项行为学测试。行为学测试后,测试脑锰含量,酪氨酸羟化酶（Tyrosine Hydroxylase,TH）可反映黑质内多巴胺能神经元数量,故对两组大鼠的黑质、纹状体、海马进行酪氨酸羟化酶免疫组织化学染色。结果　染锰组大鼠出现学习记忆力下降、动作迟缓、肌张力增高、平衡功能障碍等行为学改变;染锰组大鼠脑锰含量（4.578±1.281,ug/g）高于对照组（0.610±0.251,ug/g）,t＝-9.611,P＜0.001;与对照组相比,染锰组黑质（0.001±0.004）TH阳性表达量减少,t＝9.988,P＜0.001;染锰组纹状体（0.016±0.007）TH阳性表达量减少,t＝11.089,P＜0.001;染锰组海马（0.008±0.002）TH阳性表达量减少,t＝15.023,P＜0.001。结论　锰中毒性帕金森综合征大鼠中脑-边缘系统和中脑-皮质系统的多巴胺能神经元损害可能是智能减退、运动障碍等高级神经活动异常的生化基础。     

锰对小鼠黑质多巴胺转运体和受体表达影响的研究

目的研究锰对小鼠黑质多巴胺转运体(DAT)和多巴胺受体(DRD1和DRD2)表达的影响,为锰中毒机制的研究提供理论依据。方法昆明小鼠40只,按体重随机分成4组,每组10只。第1~4组分别为对照、低锰、中锰、高锰组,4组小鼠依次腹腔注射0.9%NaCl、12.5、25和50 mg/kg MnCl2,注射容量均为5 ml/kg,染毒2周。ELISA检测黑质内多巴胺(DA)含量,免疫组化法检测酪氨酸羟化酶(TH)表达,Western blotting检测DAT、DRD1和DRD2的蛋白水平。结果染锰2周后,随着染锰剂量的增加,上述指标均逐渐下降并呈现一定的剂量依赖性。与对照组相比,在低、中、高锰组中,DRD2的蛋白水平均明显降低(P0.05;P0.01;P0.01);在中、高锰组中,DA含量和TH阳性表达均显著降低;而DAT和DRD1蛋白水平仅在高锰组中均明显下降(P0.01;P0.05)。结论锰可能通过下调DAT、DRD1和DRD2,造成黑质多巴胺能神经元减少,DA含量降低,导致多巴胺能神经系统损伤。     

锰对仔鼠黑质神经元特异性烯醇化酶的影响

目的 研究孕鼠染锰对其子代脑黑质中神经元特异性烯醇化酶（NSE）的影响。方法 将已受孕大鼠随机分为3组,在妊娠的第1～15d,隔日1次腹腔内注射氯化锰,剂量分别为0、7．5、15mg／kg,然后运用免疫组化法检测其21日龄仔鼠脑黑质和尾壳核的NSE,并用图像分析仪定量分析。结果 实验各组仔鼠脑黑质和尾壳核中NSE阳性神经元的平均吸光度、积分吸光度均明显低于对照组（P＜0．01,P＜0．05）。结论 大鼠孕期染锰,可导致子代脑黑质NSE阳性神终元减少,引起中橛神终发育障碍。     

锰对仔鼠脑尾壳核与黑质谷氨酸脱羧酶的影响

目的 研究大鼠染锰后对其仔鼠脑尾壳核、黑质谷氨酸脱羧酶（GAD）活性的影响。方法将妊娠大鼠随机分为对照组（A组）和染锰组（B、C组），B、C2组染锰剂量分别为38，78mol／L，腹腔注射氯化锰，隔日一次，共8次。待其自然分娩后，取21日龄仔鼠脑组织冰冻切片，用免疫组织化学链霉抗生物素-生物素法（S-P法染色），检测仔鼠脑尾壳核、黑质GAD活性。结果21日龄仔鼠脑黑质、尾壳核GAD活性C组和A组之间比较，差异有统计学意义（P〈0．01），B组和A组，B组和C组之间比较差异，有统计学意义（0．01〈P〈0．05）。结论孕期染锰可引起仔鼠脑尾壳核、黑质GAD活性升高，引起谷氨酸（Glu）含量下降，γ-氨基丁酸（GABA）含量升高，Glu／GABA比值降低，引起学习记忆能力下降。     

锰中毒与原发性帕金森病鉴别诊断的研究进展

锰是人体必需的微量元素,也是一种环境污染的神经毒物。长期接触高浓度锰可发生慢性锰中毒,主要累及中脑黑质神经元。该部位含色素的神经元具有蓄积金属元素的特性,黑质神经元的损伤可导致脑多巴胺(DA)生成降低,使机体出现类似帕金森综合征症状。锰中毒和原发性帕金森病(IPD)的     

慢性铝染毒大鼠中脑多巴胺能神经元的形态学改变

[目的]探讨铝对大鼠中脑多巴胺(DA)能神经元的毒性作用及其与认知功能之间的关系。[方法]让大鼠自然饮用含AlCl3 160 0mg/L的自来水,历时3个月建立慢性铝染毒模型,利用避暗回避实验测定实验前后大鼠的短期学习记忆能力的变化,通过尼氏染色和银染观察大鼠脑内的病理改变,利用免疫组织化学染色及图像分析技术对中脑黑质和腹侧被盖区的DA能神经元进行了系统的分析。[结果]与对照组相比较,染铝大鼠受电击次数显著增加(P <0 .0 1) ,潜伏期缩短(P <0 .0 0 1) ;中脑腹侧被盖区和黑质在5种冠状切面上的DA能神经元数量均下降(P值均<0 .0 5 ) ,部分神经元形态出现异常。[结论]铝对大鼠中脑DA能神经元有明显的毒性作用,而DA能神经元的损伤可能与大鼠的短期学习记忆能力下降有关。     

锰对大鼠子代脑锥体外系发育的影响

母鼠及子鼠饮用含氯化锰（２ｇ／Ｌ或１０ｇ／Ｌ）的水,研究锰对大鼠子代行为和脑锥体外系发育的影响。结果显示：（１）在“ＥｌｅｖａｔｅｄＰｌｕｓＡｒｍｓＭａｚｅ”迷宫测试中,染锰组仔鼠从中央区进入第一臂的潜伏期缩短,但进入开放臂的次数与对照组无差异;在Ｍｏｒｒｉｓ水迷宫肌力测试中,各组动物仔鼠到达平台的时间无差异。（２）高剂量染锰组尾状核和伏隔核的面积、胶质细胞纤维酸蛋白免疫反应强度及反应阳性产物的平均相对密度均较对照组显著升高;（３）高剂量组仔鼠黑质、中脑腹侧被盖区和尾状核的酷氨酸氢氧化酶免疫反应强度及其反应阳性产物的平均相对密度均比对照组明显下降。     

JNK通路介导帕金森病小鼠黑质神经元丢失及人参皂甙Rg1的保护作用

[目的]研究c-Jun氨基端激酶(e-Jun N-terminal protein kinase, JNK)在1-甲基4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(MPTP)所致小鼠帕金森病(Parkinson's disease, PD)模型中对PD黑质多巴胺(Dopamine, DA)能神经元丢失的可能机制以及人参皂甙Rg1的神经保护作用.[方法]采用神经毒素MPTP制备PD小鼠模型.免疫组织化学法与蛋白印迹法观察各组小鼠黑质酪氨酸羟化酶(TH)和磷酸化c-Jun (p-c-jun)表达变化;原位末端标记法(TUNEL)观察黑质细胞凋亡数量变化.[结果]与对照组相比,模型组小鼠黑质致密带TH阳性神经元显著减少约55%(P<0.01),p-c-jun表达水平亦明显升高,黑质神经元TUNEL阳性细胞数量增高;人参皂甙Rg1干预组黑质TH阳性神经元细胞丢失明显减轻31%(P<0.01),p-e-jun表达水平明显下降,黑质神经元TUNEL阳性细胞数量显著减少.[结论]JNK通路可能通过凋亡途径参与模型小鼠黑质多巴胺能神经元丢失过程;人参皂甙Rg1可在一定程度上阻抑黑质区JNK信号通路,减轻MPTP诱导的PD小鼠黑质DA能神经元凋亡;人参皂甙Rg1对帕金森病小鼠具有一定的神经保护作用.     

小鼠出生后接触锰对脑发育的毒性影响

为探讨小鼠出生后接触锰对发育相关指标的毒性的影响，用神经行为试验检测肌力，自发性活动和精神焦虑性，以神经生化TAB法检测全脑过氧化脂质（LPO）含量，邻苯三酚自氧化法检测超氧化物歧化酶（SOD）活性；以细胞免疫化学法（ABC法）检测大脑皮质齿状回胶质细胞纤维酸蛋白（GFAP）免疫反应强度，结果表明：（1）高锰组小鼠身长（头－臀）的增长明显滞后于对照组和低锰组，而低锰组与对照组之间无明显差异；（2）在Morris水迷宫的肌力测试中，染锰组小鼠到达平台的潜伏期明显比对照组延长，且以高锰组更为显著，在旷场试验中，染锰组小鼠在中央和外周爬格子数及抬头探测的次数均明显多于对照组，在Elevated Plus Arms焦虑性试验中，染锰组小鼠从中央区进入第一臂的潜伏期均明显缩短，而进入开放臂次数／入臂总次数的比值则均比对照组显著增高；（3）染锰组小鼠全脑组织LPD含量均比对照组明显升高，而SOD活性则次数的比值则均比对照组显著增高；（3）染锰组小鼠全脑组织LPO含量均对照组明显升高，而SOD活性则明显降低，且均以高锰组更为显著；（4）染锰组小鼠大脑皮质齿状回的GFAP免疫反应强度及其阳性产物的平均相对密度均比对照组明显增强，且以高锰组更为显著，提示小鼠出生后接触锰对其生长发育过程中的体重增长，神经行为，全脑LPO含量与SOD活性，及大脑皮质齿状回GFAP免疫反应均产生了明显的毒性影响。     

锰中毒对新生小鼠脑发育的影响

为研究锰中毒对新生小鼠脑发育的影响 ,经口服和腹腔注射联合途径给新生昆明种小鼠染锰。结果显示 :(1)高锰组小鼠体重增长明显滞后 ,脑重和脑重 体重比值显著降低 ;(2 )在Morris水迷宫的行为检测试验中 ,高锰组小鼠前 5天每天到达潜台的平均时间显著延长 ;而在第 6天的探测试验中 ,其在原潜台象限的游泳时间则明显缩短 ;(3)高锰组小鼠的脑组织蛋白质含量明显降低 ,而乙酰胆碱酯酶活性则升高 ;(4)染锰组 ,特别是高染锰组小鼠海马CA3区的胶质细胞纤维酸蛋白免疫反应强度及其阳性产物的平均相对密度均比对照组明显增高。     

锰对大鼠子代生长发育的影响

观测了经口染锰对大白鼠子代生长发育的影响。结果显示：（１）高剂量组仔鼠的体重显著下降，但脑重／体重比值却明显升高；（２）在Ｍｏｒｒｉｓ水迷宫试验中，高剂量组仔鼠前５天每天到达潜台的潜伏期显著缩短；在第６天无潜台探测试验中，其在原潜台象限的游泳长度明显增长，但游泳的总长度与对照组和低剂量组之间却无差异；（３）染锰组，特别是高剂量组仔鼠海马的胶质细胞纤维酸蛋白免疫反应强度和免疫反应阳性产物的平均相对密度，均比对照组仔鼠显著增高     

甲状腺素和维生素E干预对甲减大鼠认知能力的影响及机制探讨

目的研究甲状腺素(L-T4)、VitE及二者联合治疗对甲状腺功能减退(下称"甲减")大鼠认知能力及血清、海马组织氧化应激水平的影响,进一步探讨甲减认知损伤发生的机制。方法 SD雄性大鼠50只随机分为正常对照组(control组)、甲减组(PTU组)、激素治疗组(PTU+T4组)、VitE治疗组(PTU+VitE组)、激素和VitE联合治疗组(PTU+VitE+T4组),每组10只。8周后Morris水迷宫试验检测大鼠空间学习记忆能力,采用黄嘌呤氧化酶法测定血清、海马组织超氧化物歧化酶(SOD)活力,采用硫代巴比妥酸(TBA)法测定脂质过氧化产物丙二醛(MDA)含量。结果与对照组比较,PTU组逃避潜伏期明显延长,差异有统计学意义(P0.05);空间探索实验成绩下降,但差异无统计学意义;SOD活力降低(P0.001),MDA含量升高(P0.001),差异均有统计学意义。与PTU组比较,PTU+T4组、PTU+VitE组、PTU+VitE+T4组大鼠逃避潜伏期缩短,SOD活力升高,MDA含量降低。结论 VitE、激素替代及二者联合治疗都能够改善甲状腺功能减退大鼠的认知功能,其机制可能是通过减少氧化应激损伤及提高抗氧化酶活力来实现的。     

Effects of different exercise protocols on ethanol-induced spatial memory impairment in adult male rats

Chronic ethanol consumption is often accompanied by numerous cognitive deficits and may lead to long-lasting impairments in spatial learning and memory. The aim of the present study was to evaluate the therapeutic potential of regular treadmill exercise on hippocampal-dependent memory in ethanol-treated rats. Spatial memory was tested in a Morris Water Maze task. Adult male Wistar rats were exposed to ethanol (4 g/kg, 20% v/v for 4 weeks) and effects of three exercise protocols (pre-ethanol, post-ethanol and pre-to-post-ethanol treatment) were examined. Results showed that ethanol exposure resulted in longer escape latencies during the acquisition phase of the Morris Water Maze task. Moreover, all three exercise protocols significantly decreased the latency to locate the hidden platform. During the probe trial, ethanol led to decreased time spent in the target quadrant. In contrast, performance on the probe trial was significantly better in the rats that had done the post- and pre-to-post-ethanol, but not pre-ethanol, exercises. These findings suggest that treadmill running can attenuate the adverse effects of chronic ethanol exposure on spatial memory, and may serve as a non-pharmacological alcohol abuse treatment.     

锰接触对新生大鼠脑发育的时空影响因素研究

目的　探讨锰接触对大鼠生后脑发育过程中时程因素和区域因素 (即时、空因素 )的影响作用。方法　将新生雄性SD大鼠随机分为染锰 1月龄组、2月龄组、3月龄组和各自对照组。染锰组自出生之日起供给 10g L氯化锰的溶液自由饮食 ,对照组供以自来水。 2 1日断奶后 ,取出母鼠 ,仔鼠继续供以上述溶液至处死之日止。各组动物于染锰结束后 ,采用胶质细胞纤维酸蛋白 (GFAP)免疫细胞化学染色与微机图象分析相结合技术 ,检测锰接触大鼠脑部不同时程和不同区域的胶质细胞纤维酸蛋白免疫反应情况及其反应阳性产物的平均相对密度。结果　 (1)染锰 1月龄组仔鼠 ,脑部的躯体感觉皮质和躯体运动皮质的GFAP阳性产物平均相对密度与对照组相比差异无显著性 ;而内侧隔核、斜角带、杏仁复合体、苍白球和无名质等锥体外系结构的GFAP阳性产物平均相对密度与对照组相比均显著升高 (P <0 . 0 0 1)。 (2 )染锰 2月龄组仔鼠 ,脑部的躯体感觉皮质和躯体运动皮质的GFAP阳性产物平均相对密度与对照组和 1月龄组相比 ,差异均无显著性 ;而锥体外系诸结构的GFAP阳性产物平均相对密度除显著高于对照组外 (P <0 .0 0 1) ,亦明显高于 1月龄组 (P<0 .0 1)。 (3)染锰 3月龄组仔鼠 ,脑部躯体感觉皮质、躯体运动皮质和锥体外系诸结构的GFAP阳性?     

Early postnatal iron repletion overcomes lasting effects of gestational iron deficiency in rats

Iron deficiency anemia in early childhood causes developmental delays and, very likely, irreversible alterations in neurological functioning. One primary goal for the present study was to determine whether the effects of late gestational iron deficiency on brain monoamine metabolism, iron content, and behavioral phenotypes could be repaired with iron intervention in early lactation. Young pregnant rats were provided iron-deficient or control diets from mid-gestation (G15). At postnatal d 4 (P4), pups from iron-deficient dams were out-fostered either to other ID dams or control dams while pups of control dams were similarly fostered to other control dams. Dietary treatments continued to adulthood (P65) when brain iron and regional monoamines were evaluated. P4 iron repletion normalized body iron status, brain iron concentrations, monoamine concentrations, and monoamine transporter and receptor densities in most brain regions. Dopamine transporter densities in caudate and substantia nigra were lower in ID rats but were normalized with iron repletion. Serotonin transporter levels in most brain regions and open-field exploration were also normalized with iron repletion. The success of this approach of early postnatal iron intervention following iron deficiency in utero contrasts to a relative lack of success when the intervention is performed at weaning. These data suggest that a window of opportunity exists for reversing the detrimental effects of iron deficiency in utero in rats and provides strong support of intervention approaches in humans with iron deficiency during pregnancy.     

The effects of perinatal protein malnutrition on spatial learning and memory behaviour and brain-derived neurotrophic factor concentration in the brain tissue in young rats

This study aimed to investigate the effects of perinatal protein malnutrition on brain derived-neurotrophic factor (BDNF) concentration in brain tissue and spatial learning and memory performance in young rats. Nine pregnant Wistar rats were assigned into three groups. Rats in one group were fed with a control diet containing 20% protein. Rats in remaining two groups were fed with a diet containing 6% protein from gestation day eight and day 15 respectively till four weeks after birth. At four weeks of age, the rat pups were evaluated for spatial learning ability using Morris Water Maze (MWM) task. At the end of the behaviour tests, rat pups were sacrificed and the brain tissue samples were collected for measurement of total protein and BDNF concentrations. It was found that rat pups fed the low protein diet had lower body weight and slightly lighter brain compared to the control pups. Total protein levels in hippocampus and cerebral cortex were significantly lower in malnourished pups than the controls. The concentration of BDNF in the hippocampus was also significantly lower in rat pups suffered protein malnutrition from early pregnancy than in the controls. MWM tests showed that perinatal protein deprivation, particularly from early pregnancy, significantly impaired learning and memory ability. The results of the present study indicate that perinatal protein malnutrition had adverse influence on spatial navigation and brain BDNF levels in rats. The decreased hippocampal BDNF concentration might partially contribute to the poor learning memory performance in the protein deprived rats.