乙型肝炎病毒X基因与肝细胞癌

当前发现乙型肝炎病毒（HBV）基因组中的X基因及其编码产物X蛋白（hepatitis B virus X protein,HBx）是HBV中惟一具有多种调控功能的病毒蛋白质。这些调控作用包括激活宿主细胞和病毒自身基因的转录、调控凋亡、抑制细胞中受损DNA的外切修复反应以及激活细胞中的信号转导通路如有丝分裂原激酶（MAPK）、JAK、STAT的级联反应等。HBx通过这样的多种调控作用直接或间接地对病毒自身的复制与增殖以及宿主细胞中基因的表达与调控、细胞的凋亡与癌变等过程都产生了广泛的影响。     

HBx对感染细胞信号通路的调控及其与肝癌的发生

乙型肝炎病毒(HBV)X基因及其编码的多功能蛋白HBx是乙型肝炎病毒基因转录所必需的作用因子.同时,HBx通过与宿主功能蛋白直接或间接地相互作用而调节多种蛋白的功能,参与调控多条细胞信号通路转导,激活多种转录因子,在肝细胞抗凋亡和引发肝癌的过程中起重要作用.     

HBx研究现况

由HBVX基因编码的X蛋白(HBx)是一种多功能蛋白,它通过与多种宿主功能蛋白直接或间接地相互作用而调节多种蛋白的功能,具有广泛的反式激活作用,而且可以通过许多复杂的途径,参与细胞凋亡,参与DNA修复调控,促进细胞周期进程,与原发性肝细胞癌的发生有着密切的关系。因此,HBx的生物学功能包括对病毒本身的复制的影响和对宿主细胞的转录、增生、转化、凋亡的调控与致瘤作用。     

HBx蛋白在HBV与HIV超感染过程中的作用

乙型肝炎病毒(hepatitisBvirus,HBV)是一种常见的与人免疫缺陷病毒(humanimmunodeficiencyvirus,HIV)发生超感染的病毒,能激活处于潜伏状态的HIV。HBVx基因编码的X蛋白(HBx)具有多种功能,它通过与多种宿主功能蛋白直接或间接的相互作用调节这些蛋白的功能,具有广泛的反式激活作用。在HBV、HIV超感染过程中,该蛋白起着极为重要的作用。     

重型肝炎相关的人纤维介素基因启动子的克隆及功能分析

目的明确在病毒蛋白HBc和HBx作用下,hfgl2基因5′端非编码区对转录激活起重要作用的转录调控序列。方法运用基因重组的方法,构建一系列5′端缺失而保留共同3′端的hfgl2基因启动子虫荧光素酶报告质粒,将其分别与病毒蛋白HBc和HBx真核表达质粒共转染CHO细胞和HepG2细胞,检测各组细胞的相对荧光素酶活性。结果酶切鉴定以及DNA测序等证实一系列hfgl2基因启动子虫荧光素酶报告基因质粒构建成功,系列启动子缺失试验证实:在hfgl2基因启动子-817位至-467位(相对于转录起始点)之间存在着激活该基因的调控序列。结论在HBV病毒蛋白HBc及HBx作用下,hfgt2基因的启动子区存在一个与其转录表达有关的调控序列,探讨了重型肝炎相关的hfgl2基因高度表达的分子机制,为下一步研究相关的顺式作用元件及反式作用因子奠定了基础。     

乙型肝炎病毒X基因在肝细胞凋亡中的作用

HBV基因组中的x基因能整合至肝细胞基因组,编码产生的HBx蛋白表现出复杂多样的生物学活性。近年来随着对HBX基因结构与功能的深入研究,发现HBx能够对肝细胞的凋亡起双向调控作用,对肝细胞肝癌(HCC)的发生发展具有重要意义。一方面,HBX能抑制肝细胞凋亡,使细胞过度增生,这对HCC的发展起着重要的作用,另一方面,HBx还具有诱导或促进肝细胞凋亡的作用,该作用在HBV相关疾病中的具体作用还不甚清楚。HBV x基因可能在肝细胞凋亡方面发挥着不同的作用,对揭示HCC发病机制有着重要意义。     

HBV整合的致癌性研究

HBV的4个亚基因产物中,HBx具有反式激活、介导细胞凋亡作用,HBs具有反式激活因子的作用。肝细胞癌(HCC)的发生与HBV的整合及整合后染色体重排有关。为探讨HBV整合及HBx、HBs亚基因在HCC发生中的可能作用,我们制备了HBV亚基因探针,并以此对肝细胞癌中HBV整合及亚基因转录进行了研究,以期为阐明HBV感染后HCC发生机制提供一定的实验资料和依据。本研究中,首先以BamHⅠ、BglⅡ酶切扩增回收的HBVDNA ,回收其HBV亚基因HBx、HBc、HBs、PreSDNA片段,以地高辛甙元随机引物法标记成敏感性与特异性俱佳的HBV亚基因探针,再以H…     

乙肝病毒X蛋白突变对其反式激活作用的影响

原发性肝癌(hepatocellular carcinoma,HCC)是世界上最常见的肿瘤之一,慢性乙肝病毒(HBV)感染是HCC发生发展的一个主要危险因素。乙型肝炎病毒X蛋白(HBx)与HCC的形成密切相关,其特有的反式激活功能被认为是HBV与HCC关联的主要因素。HBV相关的肝癌患者组织和血清中普遍存在HBx蛋白的自然突变,HBx蛋白的突变改变了全长HBx蛋白的反式激活活性,使其在调控细胞生长和增殖方面产生了不同的影响。     

乙肝病毒X蛋白突变对其反式激活作用的影响

原发性肝癌（hepatocellular carcinoma，HCC）是世界上最常见的肿瘤之一，慢性乙肝病毒（HBV）感染是HCC发生发展的一个主要危险因素。乙型肝炎病毒X蛋白（HBx）与HCC的形成密切相关，其特有的反式激活功能被认为足HBV与HCC关联的主要因素。HBV相关的肝癌患者组织和血清中普遍存在HBx蛋白的自然突变，HBx蛋白的突变改变了全长HBx蛋白的反式激活活性，使其在调控细胞生长和增殖方面产生了不同的影响。     

乙肝病毒HBx蛋白具有激活胞浆Ras蛋白及胞核转录因子的双重特性

研究表明,HBV的HBx蛋白可凭藉广泛的病毒和细胞调节元件反式激活基因的表达。HBx蛋白能在体内激活Ras蛋白形成Ras-GTP复合物,迅速诱发Ras-Raf-MAP激酶胞浆信号转导的级联反应,导致细胞复制增加及转录因子AP-1和NF-κB的反式活化。另外,HBx蛋白还可直接与转录复合体的核因子相互作用激活转录。 利用激光共焦扫描免疫显微镜及遗传学方法,     

乙型肝炎病毒X基因在肝细胞凋亡中的作用

HBV基因组中的x基因能整合至肝细胞基因组，编码产生的HBx蛋白表现出复杂多样的生物学活性。近年来随着对HBX基因结构与功能的深入研究，发现HBx能够对肝细胞的凋亡起双向调控作用，对肝细胞肝癌（HCC）的发生发展具有重要意义。一方面，HBX能抑制肝细胞凋亡，使细胞过度增生，这对HCC的发展起着重要的作用，另一方面，HBx还具有诱导或促进肝细胞凋亡的作用，该作用在HBV相关疾病中的具体作用还不甚清楚。HBVx基因可能在肝细胞凋亡方面发挥着不同的作用，对揭示HCC发病机制有着重要意义。     

HBV X蛋白引起肝细胞癌异常表观遗传学修饰

肝细胞癌(HCC)是最常见的恶性肿瘤之一,与HBV的慢性感染密切相关。HBV X蛋白(HBx)由HBV x基因编码,研究表明它在HBV相关肝细胞癌的形成中起着重要作用。HBx可以引起宿主基因表观遗传修饰的显著改变,有证据已经表明由HBx引起的表观遗传学事件在HBV相关肝细胞癌的发展中起着重要作用。本综述主要关注HBx在肝细胞癌中引起的表观遗传学变化,包括异常的DNA甲基化、组蛋白修饰和microRNAs表达;对HBx引起HBV共价闭合环状(ccc)DNA的表观遗传学调控也进行了讨论。     

病毒感染与miRNA的免疫调控机制研究进展

小RNA(miRNA)是长度在20~22碱基的一类非编码RNA,在细胞的发生、分化和凋亡等过程中有重要作用。病毒感染宿主之后,可以引发宿主体内miRNA表达谱的一系列变化,其中不乏在机体免疫过程中具有重要作用的miRNA。这一现象提示我们,病毒可以通过调控宿主细胞miRNA表达,进而导致细胞损伤或逃避免疫杀伤形成慢性感染的可能性。此外,部分病毒可以自身产生病毒miRNA,这一类小RNA也被证明在机体与病毒对抗的过程中具有重要意义。本文主要总结了病毒感染机体后,宿主miRNA表达谱的变化、宿主miRNA参与免疫应答的调控、宿主miRNA的抗病毒作用以及病毒产生miRNA对宿主免疫调控的影响,以期为病毒靶向治疗提供新的理论基础。     

HBVx蛋白的生物学功能特点

由ＨＢＶｘ基因编码的ＨＢＶｘ蛋白是一种多功能蛋白,不仅具有广泛的转式激活功能,而且可以通过许多复杂途径参与细胞的凋亡、ＤＮＡ修复的调控,与Ｐ５３的相互作用以及促进细胞周期的进程等,因此ＨＢｘ与病毒本身的复制以及宿主细胞的转录,增生,转化和凋亡有着密切的关系。     

乙肝病毒X蛋白通过激活JAK2/STAT3信号通路调节肾小管上皮细胞凋亡

 目的：观察乙肝病毒X蛋白(HBx)对肾小管上皮细胞凋亡的作用,并探讨其在乙型病毒肝炎相关性肾炎(HBVGN)发病中的分子机制。方法：将构建好的HBx真核表达载体pcDNA3.1(+)-HBx转染至体外培养的人肾近曲小管上皮细胞(HK-2细胞)中。Western blotting法检测转染后目的蛋白的表达及JAK2/STAT3信号通路的活化。细胞免疫荧光检测STAT3及p-STAT3表达水平。CCK-8法检测细胞增殖活性。Hoechst 33342染色观察细胞的形态学改变。透射电镜观察细胞的超微结构及凋亡。Annexin V/PI双染流式细胞术检测细胞凋亡率。结果：转染目的基因HBx后,p-JAK2及p-STAT3表达水平均显著增加;同时,细胞增殖明显受抑。透射电镜、Hoechst 33342染色及Annexin V/PI双染流式细胞术检测发现HBx促进HK-2细胞凋亡。AG490（JAK2/STAT3信号通路阻断剂）孵育后能够部分阻断JAK2/STAT3信号通路,减少HBx所致细胞凋亡。结论：HBx通过激活JAK2/STAT3信号通路导致肾小管上皮细胞凋亡,可能参与了HBV直接损伤肾组织的致病机制。     

E4orf4蛋白诱导肿瘤细胞凋亡的研究与应用

 腺病毒早期基因编码产物在病毒感染宿主细胞后，广泛参与对宿主细胞周期的调控，以利于病毒自身的复制及释放。其中，腺病毒基因早期转录区4第4开放读码框（Adenovirus early region 4 open reading frame 4，E4orf4）编码的E4orf4蛋白，近几年来逐渐引起人们的重视。E4orf4蛋白是由114个氨基酸组成的小分子蛋白，实验证明，通过基因转染在哺乳动物细胞内表达的E4orf4蛋白在细胞质、细胞骨架和细胞核均有聚集。E4orf4蛋白作为一种多功能蛋白，可以下调病毒诱导的细胞信号传导、在转录和转录后水平调节宿主细胞及病毒蛋白的表达并诱导不依赖于p53的细胞凋亡。目前，对E4orf4蛋白诱导细胞凋亡的作用机制的研究，主要有3个方面：①通过结合和激活蛋白磷酸酶2A（protein phosphatase 2 A，PP2A）来引起细胞凋亡；②通过对Src家族激酶的调节激活胞质凋亡信号；③对肿瘤细胞选择性诱导凋亡的作用。本文主要对E4orf4蛋白诱导细胞凋亡作用的研究进展，以及这种诱导作用对肿瘤细胞的特异性进行综述。......     

乙型肝炎病毒X基因的转录激活作用及其机理的研究进展

乙型肝炎病毒X基因的翻译产物可在多种细胞中反式激活乙型肝炎病毒和其他数种病毒以及一些细胞基因的调控序列,促进基因转录。X蛋白的作用与病毒增强子的某些序列有关,可能通过细胞内转录调控因子桥接直接作用于转录起始复合物,或X蛋白本身具有蛋白磷酸激酶活性,共价修饰细胞转录调控因子,进而影响转录起始。X蛋白的反式激活作用有利于病毒基因的大量表达,促进病毒复制,并且可干扰细胞基因的转录表达,影响细胞分化增殖,是导致病毒大量复制和细胞肿瘤转化的重要因素之一。     

组织工程相关生物材料与巨噬细胞相互作用研究进展

宿主的炎症反应是组织对损伤和异物的正常应答,炎症的强度和持久性影响生物材料在体内的生物相容性和稳定性.巨噬细胞是调控宿主免疫和炎症反应的重要细胞.因此它对生物材料的响应性在对认知材料-宿主反应中有重要作用.本文综述了组织工程相关生物材料与巨噬细胞相互作用的研究进展.通过设计材料的物理化学结构和表面特性,可以调控巨噬细胞在材料表面的黏附、激活、融合、凋亡等行为以及材料在动物体内引发的宿主反应,从而提高生物材料的生物相容性.     

癫痫中细胞凋亡发生的多元调节机制

细胞凋亡是受到包括基因在内多因素调控的主动性细胞死亡过程,是在多种内外部信号刺激下细胞内部机制被激活进而导致细胞自我毁灭的过程。在癫痫过程中,NMDA受体激活、细胞内Ca2 超载以及基因表达的异常等各种因素相互作用,导致神经元凋亡,本文综述了癫痫过程中导致神经元凋亡发生的多种因素。     

乙型肝炎病毒X和p53对肝癌细胞生长的影响

目的　探讨乙型肝炎病毒X(HBx)基因与p5 3在损伤情况下的相互作用及对肝癌细胞生长的影响及作用机制。方法　通过构建正义及反义野生型 (wt)p5 3 ,与HBx分别单转染或共转染含wtp5 3 ( + )、HBV( - )的人肝癌细胞株SMMU 772 1细胞 ,在吡柔比星的诱导下 ,用流式细胞仪检测对细胞凋亡的影响 ,及HBx对细胞周期的影响 ,并通过检测含p5 3结合位点p2 1Waf1启动子荧光素酶活性来观察HBx是否通过p5 3影响p2 1Waf1的表达 ,以及绘制细胞生长曲线观察HBx对SMMU 772 1细胞生长的影响。结果　在吡柔比星的诱导下 ,HBx能够促进细胞凋亡 ,转染空载体组及pcDNA3HBx组细胞凋亡率分别为 5 3 2 %和 12 66%。但HBx对外源性p5 3诱导的细胞的凋亡具有抑制作用 ,转染空载体、正义pcDNA3wtp5 3及正义pcDNA3wtp5 3 +pcDNA3HBx组细胞凋亡率分别为 5 3 2 %、11 72 %、4 67%。同时处在G0 ～G1期瞬时表达及稳定转染HBx细胞数较对照组分别减少 4 79% ,10 2 5 %。而且HBx可抑制p2 1Waf1启动子荧光素酶的活性 (P <0 0 5 )及促进细胞生长。结论　细胞在DNA损伤因素的作用下 ,HBx可能通过抑制p5 3导致p2 1Waf1的表达降低 ,引起停滞在G0 ～G1期的细胞减少 ,导致肿瘤细胞仍能继续分裂增殖形成恶性生长