广西南宁市农村育龄人群地中海贫血筛查参数的截断值探讨

目的探讨筛查地中海贫血(地贫)一些重要参数的截断值。方法采用法国MgthicL 18全自动血细胞分析仪、法国Sebia公司全自动电泳仪、Gap-PCR技术和反向斑点杂交技术检测育龄人群728例,对检测结果进行分析。结果以HbA2>3.99%为截断值诊断轻型β地贫的准确度为99.72%,以全自动琼脂糖凝胶电泳出现HbH或HbBart′s区带、Hb Constant Spring(HbCS)区带分别诊断HbH病、HbCS的准确度分别为99.72%、99.45%,以MCV<75.50fl、HbA2<3.50%串联联合检测筛查α地贫1的敏感度、特异度分别为96.68%、89.13%。结论通过Sebia全自动琼脂糖凝胶电泳对β地贫、HbH病、HbCS可以作最后诊断,以MCV及HbA2筛查α地贫1效果理想。     

南宁地区琼脂糖凝胶电泳产前筛查地贫16198例结果分析

目的评价琼脂糖凝胶电泳在产前地中海贫血（地贫）筛查中的价值。方法采用琼脂糖凝胶电泳对16 198例外周血或胎儿脐血进行Hb分析,其中4 242例进行地贫基因检测。结果 16 198例检出β地贫1390例,异常Hb 495例,异常Hb病133例,异常检出率12.46%。与基因检测结果比较,电泳筛查β地贫、HbH病和HbCS的灵敏度和特异度为93.57%和96.25%、100%和69.74%及99.64%和62.52%,以HbA2≤2.45%、2.65%筛查α1、α2地贫的灵敏度和特异度分别为68.44%和64.11%、63.81%和52.79%。电泳筛查胎儿脐血α地贫的灵敏度和特异度为89.94%和98.58%,其中对中间型、重型α地贫筛查灵敏度和特异性均为100%。结论广西地区地贫发生率较高,琼脂糖凝胶电泳筛查β地贫的灵敏度和特异度较好,能准确的筛出胎儿脐血中间型、重型α地贫;在胎儿脐血和外周血中筛查轻型和静止型α地贫的灵敏度和特异度差异较大,且胎儿脐血优于外周血。     

β地贫CD41-42突变杂合子复合缺失型α地贫双重杂合子的基因检测与血液学分析

目的了解β地中海贫血(地贫)CD41-42(-TCTT)杂合子(β41-42杂合子)复合缺失型α地贫双重杂合子在本地区β41-42杂合子个体中的检出情况及其临床血液学表现.方法分别采用单管多重PCR与反向点杂交法检测缺失型α地贫与β地贫基因,常规进行血细胞分析及其它地贫筛查试验.结果 144例β41-42杂合子有8例同时复合缺失型α地贫杂合子,其中7例(4.9%)携带有α地贫1基因(αα/--SEA),1例(0.69%)携带有缺失型HbH基因(-α3.7/--SEA).7例复合α地贫1患者的MCV均都高于另外136例单纯的β41-42杂合子的MCV平均值(63.53fl); 而对携带有HbH基因的样本进行pH8.6与6.5的血红蛋白电泳时都无法找到HbH区带.结论诊断β41-42杂合子复合α地贫双重杂合子的患者时,如只依赖其临床表现和常规的实验室检查结果作为筛查诊断的指标,容易会出现有病患的α或β地贫基因漏诊的情况.     

23809例育龄人群地中海贫血筛查与血液学分析

目的了解育龄人群中地中海贫血（地贫）携带情况及其血液学特点,为地贫出生干预及筛查方法的完善提供依据。方法 23 809例育龄人群进行地贫初筛,对红细胞脆性或（和）平均容积低于正常值者进行血红蛋白电泳分析,根据初筛及电泳结果进行基因诊断。结果 23 809例育龄人群中,地贫初筛阳性5147例,血红蛋白分析筛出可疑α地贫3523例、β地贫1624例。地贫基因检测确诊α地贫2435例,包括合并β地贫103,1877例α地贫-1,462例α地贫-2,96例HbH病;β地贫1492例,包括HbE61例,249对夫妇可能生育中、重型地贫儿。少数地贫者血红蛋白水平正常,部分HbH和HbCS病血红蛋白电泳无特殊区带,β地贫合并α地贫双重杂合子表现为β地贫特点,各类地贫间血红蛋白水平、MCV、血红蛋白电泳结果及RBC脆性比较差异均有统计学意义（P〈0.05）。结论掌握地贫患者血液学特点,选择合理的筛查模式对育龄人群进行常规筛查,对高危者进行基因检测是干预重症地中海贫血患儿出生的有效措施。     

全自动毛细管血红蛋白电泳在地中海贫血筛查中的作用

目的探讨全自动毛细管血红蛋白电泳在地中海贫血筛查中的作用。方法对我院送检1605份患者标本应用法国Sebia毛细管电泳分析系统进行血红蛋白电泳检测地中海贫血,通过自动扫描系统分析,检测血红蛋白（Hb）各组分的含量。结果在送检的1605例标本中,应用全自动血红蛋白电泳检出α地中海贫血表型阳性181例,阳性率为11.21%;β地中海贫血表型阳性224例,阳性率为13.96%;α、β混合地中海贫血6例,阳性率0.37%;其他血红蛋白病17例,阳性率1.06%。结论全自动毛细管血红蛋白电泳电泳区带清晰,扫描定量准确,可以定量检测HbA,HbF,HbA2的含量。可以将地中海贫血初步分类为α地中海贫血或β地中海贫血,有效地筛查出高危患者,为地中海贫血的诊断提供重要依据。     

血红蛋白电泳检测数据的进一步统计分析

目的评价血红蛋白（Hb）电泳在诊断地中海贫血（地贫）中的应用价值。方法选择一年间在我院进行系统产前检查的孕妇3361例,丈夫782例,在我院分娩的初生儿2794例资料,对Hb电泳异常的564例结果与基因诊断结果进行回顾性分析。结果成人血红蛋白电泳HbH组、初生儿HbH组、α地贫1组、α地贫2组与基因诊断相比符合率达100%,轻型α地贫HbA2〈1.7%组全部为α地贫1,成人轻型α地贫HbA2：（1.7-2.1）%组、初生儿α地贫不确定组可以初步诊断为轻型α地贫;轻型β地贫HbA2〉4.6%组可以初步诊断为轻型β地贫。结论Hb电泳是一个介于筛查与确诊的试验,有些情况下可以作出诊断性报告。     

血红蛋白Constant Spring的表型与基因型分析

目的 分析血红蛋白Constant Spring(hemoglobin Constant Spring,HbCS)携带者基因型和表现型的关系,探讨HbCS对血液学指标的影响规律.方法 检测HbCS携带者的血常规和血红蛋白电泳.采用跨越断裂点-PCR、反向点杂交方法确认α-、β-地中海贫血(以下简称地贫)突变.结果 HbCS合并--SEA/αα或HbQS表现为HbH病的特征,与αCSα/-α或HbCS杂合子比较,差异有显著的统计学意义.αCSα/-α与HbCS杂合子对表型的影响较小.HbCS合并β地中海贫血,其血液学表型表现为β地贫的特征.上述各型变异阳性病例中,仅有57.6%的样品血红蛋白电泳检测为阳性结果.结论 HbCS杂合子与其它类型地贫突变合并存在时,不同基因型组合可出现较大差异的表型变化.另外,对此类复合地贫仅用血红蛋白电泳较易漏诊和误诊,对其确诊需要依赖基因型分析.     

血红蛋白电泳在地中海贫血筛查中的作用

目的通过血红蛋白电泳筛查可疑α-地贫或可疑β-地贫,为地中海贫血基因检测提供可靠依据,从而有效预防重型地贫儿的出生.方法利用醋酸纤维素薄膜电泳,通过自动扫描系统分析,确定HbA2的含量.结果在6291例筛查人群中,HbA2＜2.5%的有1413例,占22.46%,通过基因确诊为α-地贫的有1196例,符合率为84.6%;HbA2＞3.5%的有868例,占13.80%,通过基因确诊为β-地贫的有809例,符合率为93.2%;HbA2在2.5%-3.5%之间检出α-地贫93例,占1.48%.结论Hb电泳在地中海贫血的筛查中起到了非常重要的作用,而β-地贫的符合率明显高于α-地贫,原因在于缺铁性贫血或其它血红蛋白合成障碍性疾病HbA2也减低,再加上本院采用的α-地贫基因检测试剂未包括α-地贫2与静止型两类,所以符合率稍低于β-地贫,基因诊断才是地中海贫血的最后确诊方法.     

重庆地区地中海贫血的产前筛查结果报告

目的探讨地中海贫血在产前检查中的发病率,并指导优生优育。方法应用法国Sebia公司HYDRASYS全自动电泳分析系统及自动扫描系统检测地中海贫血。结果 2000例标本筛查出α和β地贫表型阳性122例,其它血红蛋白病2例。α地贫表型阳性76例,阳性率3.8%;β地贫表型阳性46例,阳性率2.3%。结论地中海贫血的发病率高,在产前检查中进行地中海贫血的筛查,为进一步进行基因诊断和遗传咨询提供基础,以防止重度新生儿地贫的出生,对优生优育和提高人口素质具有重要意义。     

地中海贫血筛查实用技术的应用研究

目的通过对血常规的MCV（平均红细胞体积）、红细胞脆性试验、血红蛋白电泳分析三种方法筛查α及β地贫,比较其敏感性及特异性。方法全自动血细胞分析仪检测血常规及一管定量法检测RBC脆性,筛选出疑地贫者322例、正常者100例进行HB电泳分析（用美国Helena公司全自动快速电泳系统）和基因分析（GAP-PCR法检测α-THAL基因;反向点杂交-RDB法检测βTHAL基因）,以基因分析作为金标准。结果MCV,红细胞脆性试验,血红蛋白电泳分析三种方法对地中海贫血诊断的敏感性分别为98.8%、78.5%、98.4%,特异性分别为72.4%、83.8%、90.2%。经χ2检验前两种筛查方法敏感性之间差异有统计学意义（P〈0.01）。结论用血常规MCV筛查地贫较红细胞脆性试验筛查敏感性高,方法简便、经济、适用于条件有限的基层医院开展产前地贫筛查,可作为筛查的首选方法,若有条件配合血红蛋白电泳综合分析可提高其准确性。     

应用HPLC检测血红蛋白Constant Spring

目的探讨应用高效液相色谱技术（HPLC）检测血红蛋白Constant Spring（HbCS）的可行性,并分析其血液学特点。方法检测HbCS携带者的HPLC及血常规;采用Gap—PCR技术和反向斑点杂交试验检测α地贫基因及突变。结果使用HPLC检测258例HbCS患者,不同组与基因检测的诊断符合率为HbH—CS病组100％,αCSα/-α组83．33％,αCSα/-αα组57．4％。不同组HbCS携带者血液学指标有差异,HbH—CS病组表现为H病血液表型,αCSα/-αα血液表型为正常下限或稍低于正常值;αCSα/-α血液表型介于以上二者之间。结论HPLC法可以作为人群筛查血红蛋白ConstantSpring简易、有效、准确的的方法;结合血液学可以大致判断HbCS携带者的基因型。     

691例地中海贫血各基因型检出率与筛查试验分析

目的分析691例地中海贫血(以下简称地贫)各基因型检出率,并简要探讨其与血液学筛查试验的对比分析。方法采用单管多重PCR技术检测3种缺失型α地贫和采用反向杂交(RDB)/PCR技术检测中国人常见的17种β珠蛋白的基因突变。同时对患者进行平均红细胞体积(MCV),红细胞渗透脆性试验,血红蛋白(Hb)电泳等血液学检测,并对其进行对比分析。结果 1.在691例地贫标本中检出301例α地贫,其中轻型占71.1%(--SEA/αα:69.5%;-α3.7/-α3.7:1.0%;-α3.7/-α4.2:0.6%);HbH病占15.9%(--SEA/-α3.7:10.3%;--SEA/-α4.2:3.0%;--SEA/-αT:2.6%);静止型占13%(-α3.7/αα:8.0%-α4.2/αα:5.0%)。在检出370例β地贫中,杂合子占94.8%(CD41-42:36.4%;IVS-Ⅱ-654∶22.2%;-28∶15.4%;CD17∶11.6%βE:3.0%;CD71-72:2.7%;CD43∶1.9%;-29∶0.8%;IVS-I-I:0.5%;CD27-28∶0.3%);双重杂合子占3.6%,纯合子占1.6%。检出αβ复合地贫20例,占总地贫数2.9%。2.在已基因确诊地贫的本组病例中,地贫三项筛查试验(MCV,RBC脆性试验及Hb电泳)在α地贫中的符合率分别为89.7%、90.7%、89.0%;在β地贫中的符合率分别为97.8%、99.2%、98.6%;在β地贫复合α地贫中,只表现为相应的β地贫表型。结论 1.本组病例α地贫以轻型为多,但HbH病及静止型的发生率也很高;β地贫以CD41-42,IVS-Ⅱ-654,-28,CD17为主要突变型;β地贫双重杂合子,纯合子及β地贫复合α地贫的发生率不少,开展遗传咨询和准确进行产前诊断,意义重大。2.地贫三项筛查试验对β地贫的敏感性和特异性较高,对α地贫的敏感性和特异性稍低,对于β地贫复合的轻型和静止型α地贫则不能检出。     

血液学指标在育龄人群地贫筛查中的诊断价值

目的　通过对育龄成人各基因型地贫携带者血液学指标分析 ,了解血液学指标在不同基因型类型地贫筛查中的意义。方法　用日本CIS公司F82 0型血球分析系统、美国Helena公司SPIFE快速自动电泳分析系统及中山医科大红细胞渗透性“一管法”实验分别对经本室分子生物学技术诊断确诊的育龄成人不同基因类型的α地贫、β地贫及 β复合α地贫样品进行红细胞参数 (RBC、Hb、MCV、MCH、MCHC、RDW )、血红蛋白电泳及红细胞脆性分析。结果　各基因型地贫携带者红细胞参数MCV、MCH(除CS突变α静止型地贫、β+ 复合α+ 地贫外 )、红细胞脆性实验 (除静止型α地贫、β+ 复合α+ 地贫外 )与正常对照组具极显著性意义 (P <0 .0 0 1) ,正常对照组HbA2值与中间型α地贫 (P <0 .0 0 1)及标准型α地贫 (P <0 .0 0 2 )有显著性差异 ;各基因类型组间MCV、MCH值具统计学意义 (P <0 .0 5 )。结论　血液学指标是育龄人群地贫携带者筛查的可靠指标 ,同时MCV、MCH可作为临床鉴别诊断各基因型地贫的参考依据。     

联合检测HbA2和HbF对于筛查育龄人群地中海贫血突变携带者的价值

目的:评价HbA2和HbF联合检测对于筛查福建泉州地区育龄人群地中海贫血(简称地贫)的应用价值,并寻找本地区的最佳截断值。方法:11 428例疑似地贫患者同时行毛细管血红蛋白电泳和α、β地贫基因诊断,应用统计学方法分析各型地贫的分布情况及HbA2和HbF筛查各型地贫的性能比较,根据绘制ROC曲线得出HbA2和HbF的最...     

胎血MCV、MCH检测在α地中海贫血诊断中的价值

目的探讨产前脐血MCV、MCH特点及参考范围,比较MCV、MCH诊断α地中海贫血(地贫)的价值。方法对1 563例孕妇经腹行脐带穿刺术,取脐血进行血细胞和地贫基因分析,比较MCV、MCH筛查α地贫的灵敏度和特异性等指标。结果α地贫组、正常组脐血MCV和MCH分别为(106.9±10.9)fl、(121.7±8.5)fl和(33.4±4.7)pg、(41.3±2.8)pg,产前脐血MCV和MCH的参考范围为(105.0～138.4)fl和(35.8～46.8)pg。MCH筛查α地贫的灵敏度、特异度、准确度、阳性预测值和阴性预测值均高于MCV,其筛查中间型、重型α地贫灵敏度为100%。结论产前脐血MCV、MCH的参考范围明显高于新生儿及成人,有必要建立参考范围;产前脐血MCV、MCH检测可为α地贫临床诊断提供依据,MCH筛查α地贫优于MCV。     

2000例全自动琼脂糖凝胶电泳检测血红蛋白异常结果分析

目的分析2000例血红蛋白电泳结果,探讨全自动琼脂糖凝胶电泳在地中海贫血中的应用.方法采用全自动琼脂糖凝胶进行血红蛋白(Hb)电泳,测定异常Hb、Hb A2及Hb-F含量,同时采用Hb-F碱变性试验对同一标本进行Hb-F含量测定.结果检测临床标本2000例,发现异常Hb 90例,其中Hb H26例,Hb Bart′s 56例,HbE2例,其它异常Hb快速带6例.测定HbA2含量的批内CV＜5%,批间CV＜8%.发现HbA2增高者(含量＞4.0%)140例,同时伴有HbF增高者60例.对于HbF碱变性试验测得HbF含量异常高者(含量＞3.1%),琼脂糖凝胶电泳可以分辨出HbF区带,且可进行扫描定量,测出的HbF含量与HbF碱变性试验基本一致.结论全自动琼脂糖凝胶电泳分辨率极高,能够分辨出极微量异常Hb,准确分析出HbA2及HbF异常增高者,为地中海贫血的诊断提供准确可靠的数据.     

β地中海贫血筛查中MCV可靠性的分析

目的通过区域大人群的筛查,确定MCV作为β地中海贫血筛查指标的可靠性。方法以婚育学校新婚班育龄夫妇为研究对象,用全自动血细胞分析仪测定平均红细胞体积（MCV）进行地贫筛查。MCV≤80fl的进行β地贫基因诊断,采用PCR结合反向点杂交（RDB）技术,进行β地贫17个常见β突变点基因检测。结果根据McV的检测值,对进行β地贫基因诊断的5640人进行分组,MCV≤80fl组,β地贫携带率为26．80％;MCV〉80fl组,β地贫携带率为0．21％。结论PCR结合反向斑点杂交法（RDB）检测β地贫基因诊断存在局限性。McV可作为β地贫筛查的可靠指标。     

孪生新生儿的地中海贫血实验分析

目的 探讨广东省的孪生新生儿中地中海贫血（THAL）状况，提高诊断孪生新生儿地中海贫血的实验水平。方法 日本东亚公司SYSMEXNE1500全自动血细胞分析仪检测血常规，美国HELENA公司全自动快速电泳系统（REP）及其pH8．6琼脂凝胶试剂作血红蛋白区带定量。结果 共检测219例孪生新生儿，正常组82例，地中海贫血组137例，分为4组：轻型α-THAL静止型组69例，轻型α-THAL标准型组29例，轻型β-THAL组30例，轻型α-THAL组复合轻型β-THAL组6例，另外还有α-THAL中间型（HbH型）1例，异常HBE杂合子2例。在血常规中RBC、MCV、MCH和RDW-CV四项检测中，轻型α-THAL标准型组和轻型β-THAL组与正常组比较有非常显著差异（P〈0．01）；尤其轻型α-THAL标准型组显示最明显的小细胞低色素性贫血，MCV〈95fL，MCH〈35；在血红蛋白电泳的HbA定量分析中，特别是轻型β-THAL组与正常组比较有非常显著差异（P〈0．01），轻型β-THAL组的HBA值〈16％，正常组HbA值25．0％。孪生新生儿可出现各种不同的THAL状况，在双孪双胎的孪生新生儿中有出现轻型α-THAL组复合轻型β-THAL的、正常新生儿与异常血红蛋白E杂合子的、轻型α-THAL静止型与α-THAL中间型（HbH）等多种状况。结论 孪生新生儿（足月儿）脐血检测血常规和血红蛋白电泳区带定量是诊断新生儿地中海贫血的重要指标，应认真建立新生儿血常规的正常参考值。     

MCH与MCV在新生儿脐带血α-地中海贫血辅助筛查价值的比较

目的①总结出MCH（红细胞平均血红蛋白含量）筛查α-地中海贫血的临界值;②探讨MCH在新生儿脐带血α-地中海贫血（简称α-地贫）筛查中的临床价值。方法采集来我库储存的363例新生儿脐带血,进行血红蛋白电泳检测和家系调查,诊断出α-地贫63例和非地贫300例,将此363例新生儿脐带血进行MCV（红细胞平均体积）、MCH检测（送检时间超过2h）,分别分析MCV和MCH检测α-地贫的灵敏度和特异度等评价指标。结果①MCH筛查地中海贫血的临界值为34pg。②MCV、MCH法筛查地中海贫血的灵敏度、特异度、准确度、阳性预测值、阴性预测值分别为71.4%和77.8%、84.6%和93.0%、82.3%和90.3%、49.5%和70.0%、93.4%和95.6%。结论 MCH比MCV更稳定,在血液标本送检时间超过2h时,应采用MCH法筛查α-地贫。     

α-地贫静止型基因分析及临床意义

采用基因扩增法对产前孕妇检查是否携带有α-地贫基因缺陷。并对已检出的α-地贫静止型与平均红细胞体积（MCV）、红细胞脆性进行统计分析。在1432份受检α-地贫血样中有71例α-地贫静止型被检出。其中MCV〉80fl,同时红细胞脆性试验〉60%40例,MCV〈80fl和（或）红细胞脆性试验〈60%31例。结果显示：MCV、红细胞脆性试验对α-地贫静止型的诊断意义不大。对于一方已确诊携带有--^SEA基因的α-地贫夫妇,另一方必须进行α-地贫（包括α-地贫静止型）的基因检测,以防止HbH病的小儿出生则意义重大。