结肠癌细胞系SW480肿瘤干细胞相关亚群初步分离、鉴定

背景与目的: 肿瘤干细胞学说的提出为认识肿瘤提供了新的思路,越米越多种肿瘤的干细胞得到了分离鉴定;本实验旨在检测结直肠癌细胞系SW480中侧群细胞(Side population,SP)亚群,通过无血清培养基初步分离SW480肿瘤干细胞相关业群.方法: 采用流式细胞术检测结直肠癌细胞系SW480中的SP细胞含量,添加表皮生长因子20 μg/L、碱性成纤维生长因子10 μg/L的无血清培养基(SFM)培养SW480,初步分离,富集肿瘤干细胞样亚群,有限稀释实验,诱导分化,传代更新,含血清/无血清培养基交替培养证实肿瘤干细胞相关亚群.结果: SW480细胞系中SP细胞含量为1.2%;SW480细胞中0.54%～0.62%的细胞能在无血清培养基中存活、增殖并形成悬浮肿瘤细胞球;在SFM中加入血清可促使肿瘤干细胞相关细胞分化;肿瘤干细胞相关细胞可以连续传代,并可交替培养于含10%小牛血清培养基(SSM)和SFM中.结论: 结直肠癌细胞系SW480中含SP细胞,SW480中的肿瘤干细胞相关亚群可通过无血清培养基初步富集.     

乳腺癌化疗耐药中肿瘤干细胞的作用及其机制

目的:了解肿瘤干细胞在乳腺癌化疗耐药中的作用及其相关机制的研究进展。方法:应用检索Pubmed及CNKI数据库检索系统,以肿瘤、干细胞、乳腺癌、化疗和耐药等为关键词,检索1999-01-2011-05的相关文献,纳入标准:肿瘤干细胞与乳腺癌化疗耐药。根据纳入标准分析42篇文献。结果:肿瘤干细胞是导致乳腺癌化疗耐药和治疗失败的主要细胞,其耐药的机制包括ATP结合盒转运子的过度表达、细胞解毒酶的过度活化、细胞存活和凋亡相关信号转导通路的异常激活、肿瘤壁龛对肿瘤干细胞的保护作用以及大部分肿瘤干细胞处于静止期。通过对这些耐药机制的干预,可以逆转肿瘤干细胞的耐药性。结论:肿瘤干细胞是导致乳腺癌化疗耐药的关键细胞,对其耐药机制的研究有助于展开针对肿瘤干细胞的靶向治疗,改善患者的预后。     

肿瘤干细胞研究进展

目的:了解近年来肿瘤千细胞的研究进展.方法:应用检索Pubmed数据库检索系统,以"肿瘤"、"干细胞"、"肿瘤干细胞"为关键词,检索1979-01-2008-12的相关文献,共检索到英文文献2 760条.纳入标准:1)肿瘤干细胞的表面标志、耐药机制、信号传导通路;2)肿瘤干细胞来源;3)肿瘤干细胞与肿瘤临床诊治的联系.根据纳入标准,最后精选33篇文献进行分析综述.结果:肿瘤干细胞能够自我更新和分化,具有特异的表面分子标志,对放化疗不敏感.肿瘤干细胞存在Wnt、Notch、Hedgehog、Bmi-1等调节细胞自我更新信号通路异常.肿瘤干细胞是维持肿瘤生长、复发和转移的根源,已经成为抗肿瘤研究的靶细胞.结论:肿瘤干细胞研究进展迅速,深入研究肿瘤干细胞的特性,对恶性肿瘤的诊断,治疗和预后评估具有重要意义.肿瘤干细胞理论将改变目前肿瘤的诊治模式.     

人小细胞肺癌细胞株H446侧群细胞的生物学特征

背景与目的:肿瘤干细胞学说的提出为肿瘤治疗提供了新的靶点和方向,但肿瘤干细胞的分离纯化一直是个难题。本研究拟从人小细胞肺癌细胞株H446中分离并鉴定出具有干细胞特性的侧群(SP)细胞,研究其生物学特征,为肿瘤干细胞的分离纯化奠定基础。方法:采用荧光激活细胞分选(FACS)技术分选得到H446细胞中SP细胞和非侧群(NSP)细胞,并检测纯度。观察形成悬浮肿瘤细胞球的能力,采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)及荧光定量PCR检测这两种细胞亚群中CD133、ABCG2、NucleosteminmRNA水平。MTT法比较SP细胞、NSP细胞及未分选细胞体外增殖能力及耐药性差异,流式细胞仪检测体外分化能力,裸鼠成瘤实验检测体内成瘤能力。结果:荧光显微镜下H446细胞中Hoechst33342阴性细胞约为(5.1±0.2)%。流式细胞分选结果显示,H446中SP细胞比例为(6.3±0.1)%。SP细胞在无血清培养基中形成悬浮肿瘤细胞球的能力强于NSP细胞。CD133、ABCG2在SP细胞中的表达是NSP细胞的(21.60±0.26)倍、(7.10±0.14)倍,差异有统计学意义(P<0.01);Nucleostemi...     

CD133/prominin-1与胃肠道肿瘤的研究进展

目的:探讨CD133/prominin-1在胃肠道肿瘤患者中的表达情况及其在肿瘤诊断治疗中的意义。方法:应用PubMed及CHKI期刊全文数据库检索系统,以胃癌、结肠癌、直肠癌、胃肠道肿瘤和CD133等为关键词,检索1989-01-2009-10的相关文献,共检索到英文文献1 071条,中文文献79条。纳入标准:1)CD133/prominin-1的基本资料介绍。2)CD133/prominin-1在正常胃肠道中的表达研究。3)CD133/promi-nin-1在胃肠道肿瘤患者体内表达、与临床病理和预后关系的研究。4)CD133/promi-nin-1与胃肠道肿瘤干细胞的关系及在肿瘤诊治中的应用研究。根据纳入的标准,精选了55篇文献,最后纳入了33篇文献进行分析综述。结果:CD133/prominin-1是一个含有5个跨膜区域的单链糖蛋白,主要在干细胞、祖细胞和肿瘤干细胞表达,一直被作为分离和鉴定这些细胞的标志。胃肠道中的正常组织和肿瘤组织中均有CD133的表达,胃肠道肿瘤中的CD133表达与肿瘤干细胞、临床病理和预后有关。结论:了解CD133在胃肠道肿瘤中的表达,可以加深我们对胃肠道肿瘤发生发展机制的认识,...     

宫颈癌相关干细胞的研究进展

目的:总结目前宫颈癌相关干细胞的研究进展.方法:应用Medline和CNKI期刊全文数据库检索系统,以“宫颈肿瘤、干细胞、干细胞通路”为主题词,检索2000-01-2012-05相关文献,纳入标准:1)正常宫颈干细胞;2)宫颈癌相关肿瘤干细胞,包括肿瘤干细胞和肿瘤相关间质干细胞;3)干细胞通路与宫颈癌治疗抵抗.根据纳入标准符合分析的文章有31篇.结果:1)正常宫颈干细胞为宫颈基底层下的储备细胞.2)宫颈肿瘤干细胞具有明确的分子表型标志,如醛脱氢酶(+);亦有研究认为,侧群细胞即宫颈癌干细胞,表达多药耐药蛋白ABCG2/BCRP1;宫颈癌细胞系和新鲜肿瘤组织中分离筛选出的宫颈癌干细胞呈肿瘤球样悬浮增殖,富于表达自我更新相关基因如Nanog、Oct-4和Sox-2等,且致瘤性明显增强.间充质干细胞是一种机体内部间质内广泛存在的非造血系成体干细胞,有多向分化能力,在肿瘤组织中是否存在及相互作用目前研究较少.宫颈癌组织中能分离出具有多向分化潜能的间充质干细胞,其核型正常,可分化为骨骼、软骨和脂肪细胞等;而上皮间质转化基因的激活能诱导出肿瘤干细胞表型.3)宫颈癌的发生、进展过程中能发现干细胞相关通路的活化及参与,如Hedgehog通路、TGF-β通路等,通过靶向调节信号通路的关键分子,能明显抑制肿瘤细胞的增殖,降低其自我更新能力,从而达到提高治疗敏感性的目的.结论:通过对宫颈癌相关干细胞及其信号通路的研究,有望为宫颈癌治疗提供新的理论依据和临床靶点,从而为根治肿瘤提供可能.     

肺腺癌细胞株SPC-A1中侧群细胞的分离与肿瘤干细胞样特征的鉴定

背景与目的近来已有充分的研究表明在实体肿瘤中存在肿瘤干细胞,肿瘤干细胞的发现改变了我们对肿瘤发生机制及化疗耐药的观点。本文拟从人肺腺癌细胞株中分离并鉴定具有干细胞特征的肿瘤干细胞样细胞。方法采用无血清培养结合流式细胞术分离人肺腺癌细胞株中的边群细胞(SP,side population),通过增殖能力、克隆形成、裸鼠成瘤及表型分析鉴定其干细胞特性。结果肺腺癌细胞株中存在SP细胞,经无血清培养后,SP细胞的比例显著提高,SP细胞具有高增殖活性、高克隆形成率及强致瘤性,具有肿瘤干细胞的特性。结论人肺腺癌细胞株中存在具有肿瘤干细胞性质的SP细胞,无血清培养可以富集肺腺癌细胞株中的SP细胞。     

胃癌细胞表面标志CD44表达生物学意义的研究进展

目的:总结CD44分子与胃癌临床病理特征及预后的关系,探讨CD44基因在胃癌发生发展中的作用.方法:应用PubMed及CNKI全文数据库检索系统,以“CD44、胃癌和肿瘤干细胞”等为关键词,检索2003-01-2012-07的相关文献,共检索到45篇文献,其中英文41篇,中文4篇.文献纳入标准:1)CD44分子的生物学特性;2)CD44与肿瘤干细胞的关系;3)CD44与胃癌发生、临床病理特征及患者预后的关系.根据纳入标准,符合分析的文献33篇.结果:CD44+细胞具有自我更新、多向分化、克隆球形成及体内成瘤等肿瘤干细胞/肿瘤起始细胞特性.CD44分子在胃癌组织的表达量显著高于癌旁正常组织,其表达水平越高,癌肿浸润越深,转移概率越大,患者预后越差,并与胃癌的组织类型具有相关性.结论:CD44能够介导胃癌的发生,促进癌细胞的侵袭和转移,其阳性表达影响患者预后,可能会为胃癌的早期诊断和靶向治疗提供新的科学依据.     

树突状细胞肿瘤疫苗抗肿瘤研究进展

目的:探讨不同树突状细胞(DC)肿瘤疫苗的抗肿瘤机制及应用价值.方法:应用NCBI的PubMed文献数据库系统,以“树突状细胞、疫苗、肿瘤”为关键词检索2001-01-01-2011-12-31文献1 589篇,纳入标准:1)DC抗肿瘤的机制;2)肿瘤抗原肽负载的DC肿瘤疫苗;3)肿瘤全细胞抗原负载的DC肿瘤疫苗;4)肿瘤细胞来源的基因修饰的DC肿瘤疫苗;5)DC-CIK联合修饰疫苗.根据纳入标准符合分析的共30篇文献纳入分析.结果:DC是目前已知人体内功能最强抗原提呈作用的专职抗原呈递细胞,与肿瘤发展有着密切的关系,以DC为基础制备的不同类型肿瘤疫苗提高了抗肿瘤免疫反应,但存在不同的缺点.结论:DC肿瘤疫苗展示了良好的应用前景,对临床免疫治疗将有着积极的作用,但仍有待于进一步深入研究.     

侧群细胞与肺癌肿瘤干细胞

侧群(side population,SP)细胞是一小群能够将染料Hoechst 33342排出从而在流式细胞图上呈现Hoechst 33342低染的细胞,研究者已在多种肿瘤组织和细胞系中检测出了SP细胞并验证这些SP细胞具有强干细胞活性。现有试验结果证实多种肺癌组织和肺癌肿瘤细胞系中也存在具有类干细胞特性的SP细胞,这些SP细胞的鉴别与分离对于肺癌肿瘤干细胞的研究有何意义?本文将整合现有研究资料就这一问题进行阶段性综述。