钨酸钠促进新生猪胰岛细胞体外增殖、分化及分泌功能

 摘要：目的　观察钨酸钠在体外对新生猪胰岛细胞增殖及功能活性的影响。方法　分离和纯化新生猪胰岛细胞后,与钨酸钠共育,隔天进行细胞计数、MTT试验,取最佳浓度300μmol/L钨酸钠与细胞共同培养3天,收集细胞进行葡萄糖刺激试验,并分别用Western blot、 RT-PCR方法检测细胞内胰岛素蛋白(INSULIN)、细胞增殖核抗原（PCNA）和PDX-1 mRNA、GLUT-2 mRNA的表达。 结果300μmol/L钨酸钠处理后胰岛细胞增殖活性及葡萄糖刺激试验中胰岛素分泌明显高于对照组（P < 0. 05）,钨酸钠干预组PCNA蛋白（1.17±0.13 vs 2.24±0.19,P < 0. 05）、INSULIN（0.37±0.08 vs1.62±0.17,P < 0. 01）较对照对照组明显增高,PDX-1（0.11±0.03 vs0.34±0.05,P < 0. 01）、GLUT-2（0.13±0.02 vs 1.06±0.10,P < 0. 01）基因的 mRNA表达明显上调。 结论　低浓度（300μmol/L）钨酸钠具有促进新生猪胰岛细胞增殖分化、增强胰岛细胞功能、促进胰岛素分泌的作用     

自发性2型糖尿病小鼠病程进展与胰腺形态学改变

目的研究自发性2型糖尿病小鼠db/db鼠胰腺随病程进展的组织形态学改变。方法分别选取3、5、8、10、12月龄尾静脉空腹血糖高于10.0mmol/L,且肥胖的db/db自发性糖尿病小鼠,每组5只作为糖尿病组;选取相应年龄段尾静脉空腹血糖低于6.0mmol/L,体重正常的db/+m表型正常小鼠,每组5只作为对照组。于相应月龄腹腔注射麻醉,取胰尾,石蜡包埋切片,用HE染色和Masson染色法观察胰腺的病理组织学改变。结果随病程进展,db/db小鼠体重和血糖显著高于对照组,且血糖逐渐增高,胰腺小叶和腺泡之间结缔组织增生明显,胰岛组织破坏和纤维化程度显著高于对照组,且逐渐加重。结论胰腺的组织形态学变化可能与2型糖尿病病情相关,反映了2型糖尿病病程不同阶段的病机特点。     

实时FQ-PCR检测链脲佐菌素诱导糖尿病小鼠模型胰腺survivin基因的表达

目的：研究链脲佐菌素（STZ）诱导的糖尿病小鼠胰腺survivin基因mRNA表达，了解其在胰岛损伤中的作用。 方法： 小剂量多次注射STZ的方法建立糖尿病小鼠模型，每周测定体重及血糖，并采用实时荧光PCR方法检测胰腺survivin基因mRNA表达水平。 结果： 正常BALB/c小鼠胰腺有survivin基因表达。STZ组体重在4周内无明显改变；血糖在第1周即明显升高；survivin表达水平在3、4周显著升高。对照组体重持续增加，血糖及survivin表达水平各周间无显著差异。 结论： 正常小鼠胰腺有survivin基因表达，STZ注射后survivin表达水平显著升高，可能与胰岛恢复有关。     

糖尿病小鼠皮肤与胰腺微循环功能受损

目的 探讨糖尿病小鼠微循环功能变化.方法 BALB/c小鼠随机分为对照组(n=10)和糖尿病组(n=20).常规STZ制备糖尿病模型,心脏灌流后取材,HE染色观察胰腺组织及胰岛微血管形态学及病理改变.用免疫组织化学染色,观察胰岛及胰岛微血管内皮细胞的形态学及病理改变、胰岛素及胰岛微血管PECAM-1的表达.用MoorLDLS检测皮肤微循环血流灌注水平;用Moor VMS-LDF检测胰腺微循环血流灌注及微血管自律运动功能.结果 糖尿病小鼠胰岛形态不规则,完整性破坏;胰岛微血管内皮细胞PECAM-1表达失去连续性;胰岛中胰岛素染色阳性面积显著低于对照组(P＜0.05).糖尿病组小鼠皮肤微循环总血流灌注显著降低(P＜0.01).糖尿病组小鼠胰腺微血管自律运动频率和振幅均显著低于对照组(P＜0.01,P＜0.001).结论 STZ诱导的BALB/c糖尿病小鼠微循环功能受损.     

吡咯烷二硫代氨基甲酸酯减轻2型糖尿病大鼠胰岛β细胞氧化损伤

 目的 探讨吡咯烷二硫代氨基甲酸酯（PDTC）对2型糖尿病大鼠胰岛β细胞氧化损伤的影响及其机制。方法 用长期高脂饮食加小剂量链脲佐菌素（STZ,27mg/kg体重）建立2型糖尿病大鼠模型。PDTC治疗组大鼠每天腹腔注射PDTC（50mg/kg）1次,1周后取血浆检测血糖。取胰腺组织匀浆测定丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）及谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-PX）的含量;应用免疫组化和Western blot等检测胰腺组织中诱生型一氧化氮合酶（iNOS）的表达及硝基化酪氨酸（NT）的水平;流式细胞术检测胰岛β细胞凋亡百分率。结果 糖尿病大鼠血糖、MDA水平均显著高于对照组（P﹤0.01）;SOD和GSH-PX水平明显低于对照组（P﹤0.01）;胰岛组织中iNOS表达水平（0.37±0.06）和NT生成量（0.24±0.01）均较对照组（0.11±0.01）和（0.12±0.01）明显增多（P<0.01）。PDTC治疗后血糖明显降低,MDA明显减少（P＜0.01）;而SOD、GSH-PX水平明显升高（P＜0.05,P＜0.01）;胰岛组织中iNOS表达及NT生成均明显减少（P＜0.01）;胰岛β细胞凋亡率明显降低（P＜0.05）。结论 PDTC可以降低血糖,减轻大鼠体内氧化应激反应,减少糖尿病大鼠胰岛β细胞的凋亡。     

近端小管RAS功能轴在早期糖尿病小鼠肾脏中的变化

目的：观察自发性糖尿病小鼠模型中，糖尿病肾病早期近端小管肾素-血管紧张素系统（RAS）两条轴[血管紧张素转换酶（ACE）-血管紧张素II(Ang II)-血管紧张素II 1型受体（AT1）经典轴和ACE2-Ang(1-7)-Mas受体（MasR）新轴]的变化特征及对肾脏结构和功能的影响。方法：应用雄性自发性1型糖尿病Akita小鼠（以C57BL/6背景的雄性非糖尿病小鼠为正常对照）和自发性2型糖尿病db/db小鼠（以C57BLKS/J背景的雄性db/m非糖尿病小鼠为正常对照），饲养至16周龄时处死小鼠，测定相应生理指标。收集尿液，检测尿液中Ang II和Ang(1-7)的含量；收取肾脏组织行病理切片染色观察肾脏结构变化；免疫组化法观察肾脏组织血管紧张素原（Agt）、ACE、ACE2和MasR的表达部位及变化；Western blot和RT-qPCR测定近端肾小管的上述蛋白及mRNA的变化。结果：两种糖尿病小鼠16周龄时，肾小球滤过率和尿白蛋白/肌酐比值显著增加（P<0.05）,PAS染色可见近端肾小管细胞体积增加，管腔扩张，肾小管肥大，肾小管损伤分数显著增加（P<0.01）...     

大豆异黄酮对I型糖尿病甲基乙二醛水平及白内障并发症的影响

目的：甲基乙二醛（MG）是糖代谢产生的毒性副产物,本研究旨在探讨大豆异黄酮是否通过降低MG的产生而发挥对I型糖尿病的防治作用。方法：链脲佐菌素诱导I型糖尿病大鼠模型,给予含不同剂量大豆异黄酮的大鼠饲料喂养,按大豆异黄酮不同剂量随机分为3组：大豆异黄酮低剂量组（diabetes+LIS）,大豆异黄酮高剂量组（diabetes+HIS）及模型组（diabetes）。治疗8周后处死大鼠,留取血清测定血糖、糖化血红蛋白、还原型谷胱甘肽（GSH）、胰岛素水平,HPLC法测定血清MG水平,免疫组化法检测胰岛β细胞胰岛素表达情况。结果：与模型组或diabetes+LIS组大鼠比较,HIS组大鼠血清胰岛素水平明显上升［(2.46±0.35)μg/L vs (0.55±0.04)μg/L or (0.39±0.04) μg/L, 均P<0.01］,血糖明显下降［(19.50±1.85)mol/L vs (28.24±3.56) mol/L or (26.94±1.82) mmol/L, 均P<0.05］、糖化血红蛋白减低［（13.14±3.00)% vs (17.16±2.60)% or (17.29±4.12)%, 均P<0.05］,血清MG明显降低 ［(0.77±0.09)nmol/L vs (1.57±0.17)nmol/L or (1.91±0.28)nmol/L,均P<0.05］,而血清GSH 水平明显增加［(13.26±1.61)mmol/L vs (7.35±1.55)mmol/L or (5.54±1.10) mmol/L, 均P<0.01］,diabetes+HIS 组大鼠胰岛β细胞中胰岛素表达水平也明显增加。Diabetes+HIS 组大鼠白内障的发生率明显低于模型组（P<0.05）。模型组与diabetes+LIS组比较,上述指标均无显著差异。结论：大豆异黄酮对I型糖尿病具有治疗作用,并能降低I型糖尿病大鼠白内障的发生率,其机制可能与胰岛素水平增加、MG水平降低及抗氧化作用有关。     

内质网应激激活STING信号通路并降低胰岛β细胞活力

目的：鉴定胰岛β细胞中干扰素基因刺激因子（STING）信号通路相关基因的表达及其与内质网应激的相互作用,研究2个通路间的相互作用对胰岛β细胞活力的影响。方法：通过生物信息学分析来源于人的胰岛单细胞RNA测序数据集,得到STING信号通路相关基因在胰岛β细胞中的表达变化;用免疫荧光法检测并比较野生型小鼠和db/db糖尿病小鼠胰岛β细胞中STING蛋白的表达差异;用STING特异性激动剂5,6-二甲基呫吨酮-4-乙酸（DMXAA）处理3种常用的小鼠胰岛β细胞系（NIT-1、Min6及beta-TC-6）,并通过RT-qPCR和Western blot分别检测其STING信号通路相关蛋白的mRNA和蛋白表达水平变化;用毒胡萝卜素（TG）诱导上述β细胞系内质网应激,通过Western blot检测STING信号通路相关蛋白的表达及磷酸化水平,并通过CCK-8法检测胰岛β细胞活力。结果：人胰岛β细胞中存在STING信号通路主要基因mRNA的表达,但在健康人群和糖尿病患者的表达水平无显著差异。免疫荧光结果表明,野生型小鼠和db/db小鼠胰岛β细胞的STING蛋白均在细胞核周边富集,且在db/db小...     

苯那普利对自发性高血压大鼠肾脏Aquaporin 2表达的影响

目的：观察苯那普利对水孔蛋白2（AQP2）表达的影响。 方法： 雄性自发性高血压大鼠（SHR）16只，8周龄，体重200-300 g，随机分成2组，每组8只，分别给予生理盐水（SHRctrl）、苯那普利（SHRben）灌胃。灌胃8周后断头取血，放免法测定血浆血管升压素（AVP）浓度。取肾脏近髓组织100 mg，RT-PCR法检测大鼠肾脏AQP2 mRNA的表达，另取相应组织以免疫组化法检测AQP2的表达情况。 结果: SHRctrl组和SHRben组大鼠药物干预前血压无明显差异，大鼠苯那普利灌胃8周后，血压明显下降，显著低于SHRctrl组大鼠血压［（112±17）mmHg vs (169±9) mmHg，P<0.05］。SHRben组大鼠肾脏AQP2 mRNA（0.48±0.11 vs 0.72±0.17，P<0.05）、AQP2蛋白表达水平（0.47±0.09 vs 0.62±0.12, P<0.05）、血浆AVP浓度［（61.79±9.19）ng/L vs (87.16±8.20)ng/L, P<0.05］均显著低于SHRctrl组。 结论： 苯那普利抑制SHR肾脏水孔蛋白2的高表达。     

SLE患者PBMC表达B细胞刺激因子及地塞米松对其表达的影响

目的:探讨SLE患者外周血单个核细胞(PBMCs)BLyS基因和蛋白表达及糖皮质激素地塞米松对其表达的影响。 方法:梯度密度离心法分离25例SLE患者［(31.40±14.23)岁］和20名女性健康志愿者［(28.20±10.36)岁］的PBMCs，分为2组, 地塞米松(1 μmol/L)组和培养基组(仅含RPMI-1640培养基)，分别于培养 0 h、6 h、12 h、24 h 和 72 h 离心收集PBMCs，用RT-PCR法检测刺激后0至 24 h 时点细胞BLyS mRNA的表达情况，流式细胞仪(FACs)和直接免疫荧光法（激光共聚焦荧光显微镜）检测 72 h 膜结合型BLyS蛋白的表达。 结果:(1) SLE患者BLyS mRNA和蛋白表达均高于健康对照(0.40±0.18 vs 0.27±0.20, P<0.01;0.37±0.17 vs 0.25±0.17, P<0.01;0.42±0.26 vs 0.29±0.16, P<0.01;0.39±0.23 vs 0.24±0.18, P<0.01)。(2) 地塞米松显著抑制健康对照和SLE患者PBMCs BLyS mRNA表达，12 h 最为明显 (0.19±0.10 vs 0.31±0.16, P<0.01；0.29±0.18 vs 0.46±0.21, P<0.01）。(3) 地塞米松显著抑制健康对照和SLE患者PBMCs膜结合型BLyS蛋白表达(2.73±1.89 vs 3.67±1.64，P<0.01；3.42±1.53 vs 4.52±1.95，P<0.01)。 (4)直接免疫荧光法激光共聚焦荧光显微镜检测PBMCs 膜结合型BLyS蛋白表达显示地塞米松刺激后BLyS表达减弱。 结论:SLE患者PBMCs BLyS表达增强，其表达受地塞米松负影响。     

尼克酰胺-N-甲基转移酶在链脲佐菌素致糖尿病猴胰岛中的高表达及意义

目的： 本文旨在明确尼克酰胺-N-甲基转移酶（NNMT）在链脲佐菌素（STZ）致糖尿病猴胰腺中的表达及其定位，进而分析NNMT在β细胞损伤中的重要作用。方法： 应用基因芯片技术筛选STZ致糖尿病猴胰腺组织差异表达基因，选择NNMT作为研究对象。半定量RT-PCR及Western印迹法分别从mRNA及蛋白水平验证该差异，然后应用免疫组化技术观察该蛋白在胰腺内外分泌细胞中的表达情况。结果： NNMT在正常猴胰腺中仅有微弱表达，但在STZ致糖尿病猴胰腺中其mRNA及蛋白水平均明显上调。免疫组化结果显示该差异表达主要表现在胰岛β细胞分布区。结论： NNMT可以催化对维持细胞功能极为重要的尼克酰胺甲基化，其在糖尿病β细胞内表达上调可能会引起细胞内能量代谢障碍而导致β细胞损伤。     

IL-27 inhibits hyperglycemia and pancreatic islet inflammation induced by streptozotocin in mice

Inflammation driven by immune cells and pro-inflammatory cytokines is implicated in pancreatic β-cell injury, leading to the development of diabetes mellitus. IL-27, a cytokine consisting of IL-27p28 and Epstein-Barr virus-induced gene 3 (EBI3), binds a membrane-bound heterodimeric receptor consisting of the IL-27 receptor α chain (WSX-1) and gp130. IL-27 has anti-inflammatory properties that regulate T-cell polarization and cytokine production. We evaluated blood glucose and islet proinsulin concentrations, inflammatory cell infiltration in islets, and expression of IL-1β mRNA in pancreas in wild-type (WT), EBI3(-/-), and WSX-1(-/-) mice treated with streptozotocin (STZ). Hyperglycemia was augmented in EBI3(-/-) and WSX-1(-/-) mice compared with WT mice. Islet proinsulin levels after STZ treatment were lower in EBI3(-/-) and WSX-1(-/-) mice than in WT mice. The infiltration of islets by F4/80(+)CD11c(-)7/4(-) macrophages, CD4(+) T cells, and CD8(+) T cells was increased in EBI3(-/-) and WSX-1(-/-) mice compared with WT mice. The administration of recombinant IL-27, compared with control, decreased the blood glucose level, immune cell infiltration into islets, and IL-1β mRNA expression in the pancreas and increased islet proinsulin levels in WT and EBI3(-/-) mice. Thus, IL-27 inhibits STZ-induced hyperglycemia and pancreatic islet inflammation in mice and represents a potential novel therapeutic approach for β-cell protection in diabetes.     

白藜芦醇对糖尿病大鼠血管平滑肌细胞凋亡的影响及其机制研究

目的:探索白藜芦醇对糖尿病大鼠血管平滑肌细胞凋亡的影响及其调控机制。方法:实时定量PCR (qRT-PCR)检测血清中单核细胞趋化蛋白鄄1 (MCP1)、巨噬细胞移动抑制因子(MIF)和白细胞介素18(IL-18)的mRNA 水平;HE 染 色和Masson 染色评价心肌纤维化水平;流式细胞术分析细胞凋亡;蛋白印迹检测Cleaved caspase-3、Cleaved caspase-9、B 淋巴 瘤2 蛋白(Bcl-2)、Bcl-2 相关蛋白X(Bax)、PI3K、p-PI3K、AKT、p-AKT 蛋白表达。结果:白藜芦醇可降低STZ 诱导的糖尿病大 鼠血清MCP-1、MIF 和IL-18 的mRNA 水平并改善心肌纤维化加剧。STZ 诱导糖尿病组血管平滑肌细胞凋亡率明显高于对照 组(P<0.05)。与STZ 诱导糖尿病组相比,STZ+白藜芦醇组血管平滑肌细胞凋亡率明显降低(P<0.05)。而且,白藜芦醇可抑 制STZ 诱导的糖尿病大鼠血管平滑肌细胞Cleaved caspase-3、Cleaved caspase-9 和Bax 蛋白表达,提高Bcl-2 表达(P<0.05)。 与对照组相比,STZ 诱导糖尿病组血管平滑肌细胞中p-PI3K/ PI3K 和p-AKT/ AKT 比率明显降低(P<0.05)。STZ+白藜芦醇组 血管平滑肌细胞p-PI3K/ PI3K 和p-AKT/ AKT 比率明显高于STZ 诱导糖尿病组(P<0.05)。结论:白藜芦醇可通过激活PI3K/ AKT 信号通路抑制STZ 诱导的糖尿病大鼠血管平滑肌细胞凋亡。     

海马sortilin在链脲佐菌素诱导的糖尿病认知损伤小鼠中的作用

目的 探讨海马sortilin在链脲佐菌素（STZ）诱导的糖尿病认知损伤小鼠中的作用。方法 24只成年雄性ICR小鼠,随机分为溶媒对照组（NS）和实验组（STZ）。STZ腹腔注射诱导糖尿病认知损伤动物模型,注射后用血糖仪检测血糖改变,注射后第8周采用新旧事物识别实验检测各组小鼠认知功能;免疫组织化学方法检测sortilin免疫阳性产物表达变化;Western blotting和Real-time PCR方法检测各组小鼠海马sortilin和脑源性神经营养因子（BDNF）蛋白及mRNA表达变化。结果 与NS组相比,STZ组小鼠空腹血糖显著增高（P<0.01）;在新旧事物识别实验中新事物辨别指数明显降低（P<0.05）;海马区sortilin的免疫阳性产物（P<0.05）、蛋白（P<0.01）以及mRNA（P<0.05）表达均显著下调;海马区BDNF mRNA（P<0.01）及蛋白（P<0.05）表达均明显降低。结论 STZ诱导的糖尿病小鼠认知损伤可能与海马sortilin的表达下调有关。     

Increased expression of toll‐like receptor 4 and inflammatory cytokines,interleukin‐6 in particular,in islets from a mouse model of obesity and type 2 diabetes

Toll‐like receptor 4 (TLR4) has received much attention in the recent years due to its role in development of insulin resistance in type 2 diabetes mellitus. Its expression is elevated in fat and muscle from insulin‐resistant mice. Several cells of the pancreatic islets, including β‐cells and resident macrophages, express TLR4. Our hypothesis is that expression of TLR4 and downstream signalling molecules in islets increases during progression of type 2 diabetes, thereby contributing to β‐cell damage. We investigated the hypothesis in the db/db mouse. Islets from male db/db (4, 8 and 15 weeks old) and control db/+ (4 and 15 weeks old) mice were examined for mRNA expression of TLR4 and selected cytokines using qPCR. In addition, cytokine secretion from islets was quantified. TLR4 is expressed in islets from lean and obese mice, displaying a 7.4‐fold higher level in 15 weeks old db/db relative to age‐matched control (p < 0.01). During progression of clinical type 2 diabetes manifested by hyperglycaemia, TLR4 expression increases 5.6‐fold in islets from 15 weeks compared with 4 weeks old db/db mice (p < 0.01). Furthermore, both protein and mRNA levels of all cytokines examined increased. In particular, expression of IL‐6 increased with 37 fold. Expression of TLR4 in db/db mouse islets increased in parallel with hyperglycaemia. A similar increase in expression and secretion of TNFα, IL‐1 and IL‐6 was observed. Our results demonstrate that, in addition to its contribution to insulin resistance, TLR4 might also play a role in β‐cell dysfunction in type 2 diabetes.     

Selective lack of the C16:0 fatty acid isoform of sulfatide in pancreas of type II diabetic animal models

Sulfatide (3'-sulfogalactosyl-ceramide) is a glycosphingolipid mainly located in the nervous system, but has also been found in the islets of Langerhans. Previous studies have suggested that sulfatide is involved in insulin processing and secretion. In this study, sulfatide expression and metabolism in pancreas and isolated islets of the type II diabetes models, ob/ob- and db/db mouse, was investigated using TLC-ELISA, metabolic labelling and electron microscopy. As in non-diabetic Lewis rat and human pancreas, sulfatide was located in secretory granules of the beta cells. However, the type II diabetic animal models and their background strains had an altered sulfatide expression, involving the lack of the C16:0 sulfatide fatty acid isoform, compared to non-diabetic Lewis rat, BALB/c mouse and human pancreatic tissue, in which the two dominating pancreatic sulfatide isoforms C16:0 and C24:0 are expressed. Correspondingly, in isolated ob/ob islets, sulfatide synthesis excluded the production of C16:0 sulfatide. Insulin administration to ob/ob mouse, which lowers beta cell activity, resulted in significantly increased sulfatide expression in pancreas (p=0.0003), but still no expression of the C16:0 sulfatide isoform. In vitro, the C16:0 sulfatide was shown to be the isomer involved in the preservation of insulin crystals. Thus, it is hypothesized that the selection of sulfatide isomers in pancreas might be a genetic factor contributing to disease development in type II diabetic animal models.     

苦参碱对oxLDL 诱导的血管平滑肌细胞炎症反应及增殖凋亡的影响及分子机制研究

目的:探讨苦参碱对氧化型低密度脂蛋白(oxLDL)诱导的血管平滑肌细胞炎症反应及增殖凋亡的影响及分子机制。方法:oxLDL 处理人主动脉血管平滑肌细胞建立动脉粥样硬化模型。CCK-8 实验分析细胞活力和增殖。实时定量PCR(qRT-PCR)检测炎症因子白细胞介素1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、IL-10 和IL-13 的mRNA 水平。流式细胞术分析细胞凋亡。蛋白印迹检测增殖标记蛋白细胞增殖核抗原-67(Ki-67)和增殖细胞核抗原(PCNA),细胞凋亡标记蛋白B 细胞淋巴瘤-2(Bcl-2) 和Bcl-2 相关蛋白X(Bax),信号转导及转录激活子3(STAT3)和信号转导及转录激活子5(STAT5)的表达。结果:与对照组相比,造模组促炎因子IL-1β和TNF-α的mRNA 水平大大提高,抗炎因子IL-10 和IL-13 mRNA 水平则显著降低(P<0.01)。与造模组相比,模型加药组促炎因子IL-1β和TNF-α的mRNA 水平显著降低,抗炎因子IL-10 和IL-13 的mRNA 水平明显升高(P<0.05)。造模组细胞增殖倍数和细胞凋亡率明显高于对照组,模型加药组细胞增殖倍数和细胞凋亡率明显低于造模组(P<0.05)。与对照组相比,造模组Ki-67、PCNA 和Bax 的表达显著升高,Bcl-2 显著降低(P<0.01)。与造模组相比,模型加药组Ki-67、PCNA 和Bax 的表达明显减少,Bcl-2 表达明显增多(P<0.05)。造模组p-STAT3 和p-STAT5 相对蛋白表达量显著高于对照组(P<0.01)。模型加药组p-STAT3 和p-STAT5 相对蛋白表达量明显低于造模组(P<0.05)。与造模组相比,模型加药组和模型+Ruxolitinib 组Ki-67、PCNA 和Bax 的表达明显减少,Bcl-2 表达明显增多(P<0.05);模型加药+Ruxolitinib 组Ki-67、PCNA 和Bax 的表达显著减少,Bcl-2 表达显著增多(P <0.01)。与造模组相比,模型加药组和模型+Ruxolitinib 组及模型加药+Ruxolitinib 组IL-1β和TNF-α的mRNA 水平都明显降低,IL-10 和IL-13 的mRNA 水平都明显升高(P<0.05)。结论:苦参碱可通过抑制JAK/ STAT3 通路的活化起到抗炎和抑制血管平滑肌细胞增殖和凋亡的作用。     

链脲佐菌素小鼠糖尿病胰岛结构改变的定量病理学测试及分析

目的:定量揭示链脲佐菌素（Streptozotocin, STZ）诱发的小鼠糖尿病胰岛结构改变的特点,为分析胰岛功能改变补充定量病理学基础。方法:腹腔注射STZ,诱发Balb/c小鼠糖尿病;过量CO2处死小鼠并取胰腺,常规病理制样、胰岛素免疫组化染色、图像测试及定量分析。结果:造模第8周,糖尿病组（DM组）小鼠血糖显著高于正常对照组（NC组）小鼠,DM组小鼠血糖均值为19.3 mmol/L;相比NC组小鼠,DM组小鼠胰岛数目、β细胞数目及面积显著减少（P<0.05）,计算得出β细胞数量丧失约62.7％,胰岛β细胞面积丧失约27.0%,胰岛素阳性单位（PU值）表达减少约53.8％。DM组小鼠胰岛β细胞面积密度（AAβ,PI）、面数密度（NAβ,PI）、数量百分比（βPer）均显著降低（P<0.05）,其中PU值、AAβ,PI、βPer与血糖升高呈负相关,皮尔森相关系数（R值）分别为-0.653、-0.736和-0.899（显著性均<0.05）;建立造模时间（t）与胰岛β细胞数量百分比改变的函数:[βPer(%)=79.68-9.74t+0.38t2+0.06t3-4.66×10-3t4+2.86×10-5t5+1.68×10-5t6]。结论:通过定量病理学技术测量糖尿病小鼠模型胰岛和β细胞形态学改变的相关指标,能够帮助准确评估胰岛的损伤情况,并建立血糖变化和所测量数值的相关数学模型,用以预测血糖升高导致胰岛损伤的具体情况。 【关键词】糖尿病;胰岛;定量病理学;阳性单位;链脲佐菌素     

Systemic Administration of Multipotent Mesenchymal Stromal Cells Reverts Hyperglycemia and Prevents Nephropathy in Type 1 Diabetic Mice

Multipotent mesenchymal stromal cells (MSCs), often labeled mesenchymal stem cells, contribute to tissue regeneration in injured bone and cartilage, as well as in the infarcted heart, brain, and kidney. We hypothesize that MSCs might also contribute to pancreas and kidney regeneration in diabetic individuals. Therefore, in streptozotocin (STZ)-induced type 1 diabetes C57BL/6 mice, we tested whether a single intravenous dose of MSCs led to recovery of pancreatic and renal function and structure. When hyperglycemia, glycosuria, massive beta-pancreatic islets destruction, and mild albuminuria were evident (but still without renal histopathologic changes), mice were randomly separated in 2 groups: 1 received 0.5 × 10⁶ MSCs that have been ex vivo expanded (and characterized according to their mesenchymal differentiation potential), and the other group received the vehicle. Within a week, only MSC-treated diabetic mice exhibited significant reduction in their blood glucose levels, reaching nearly euglycemic values a month later. Reversion of hyperglycemia and glycosuria remained for 2 months at least. An increase in morphologically normal beta-pancreatic islets was observed only in MSC-treated diabetic mice. Furthermore, in those animals albuminuria was reduced and glomeruli were histologically normal. On the other side, untreated diabetic mice presented glomerular hyalinosis and mesangial expansion. Thus, MSC administration resulted in beta-pancreatic islets regeneration and prevented renal damage in diabetic animals. Our preclinical results suggest bone marrow-derived MSC transplantation as a cell therapy strategy to treat type 1 diabetes and prevent diabetic nephropathy, its main complication.