不同亚型乙型病毒性肝炎患者T细胞亚群调查研究

目的 研究不同亚型乙型肝炎患者外周血T淋巴细胞亚群变化及其临床意义。方法选择40例慢性活动性乙型肝炎、30例病毒携带者、30例乙型肝炎肝硬化、20例急性乙型肝炎患者和30例健康对照者，采用流式细胞仪检测各组外周血T淋巴细胞亚群的改变。结果与正常对照组比较，慢性活动性肝炎、肝炎肝硬变患者外周血CD4^＋、CD4^＋/CD8^＋比值均有显著性下降（P〈0.01），以肝炎肝硬变下降最显著，慢性病毒携带者肝炎、急性乙型肝炎外周血T细胞亚群数量和比值变化不明显（P〉0．05）。HBV DNA病毒载量与患者外周血CD4 T细胞数量无相关性（P〉0．05）。结论慢性活动性乙型肝炎和肝硬化患者的细胞免疫功能降低，其下降程度与病毒复制水平无相关性。     

乙型肝炎患者外周血T淋巴细胞亚群变化与病毒复制的关系

目的 研究乙型肝炎患者外周血T淋巴细胞亚群变化与病毒复制的关系.方法 乙型肝炎患者65例按外周血病毒量分为HBV DNA阴性组15例、低病毒量组20例和高病毒量组30例.另选本科室健康工作人员10人作为对照组.应用流式细胞仪检测T淋巴细胞亚群,荧光定量PCR法测定HBV DNA.结果 HBV DNA阴性组、低病毒量组、高病毒量组3组 CD4+和CD4+/CD8+依次下降,而CD8+依次升高.高病毒量组CD3+、CD4+、CD4+/CD8+低于其他3组,CD8+高于其他3组,差异均有统计学意义(P<0.05).HBV DNA阴性组,低病毒量组CD3+、CD4+、CD8+及CD4+/CD8+数值与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05).结论 T淋巴细胞数量和功能降低引起HBV活跃复制,而HBV活跃复制反过来又加重T淋巴细胞免疫功能紊乱.     

乙型肝炎病毒感染患者外周血白细胞介素-18表达水平与乙型肝炎病毒感染的相关性探讨

目的探讨乙型肝炎病毒(HBV)感染患者外周血白细胞介素(IL)-18表达水平与HBV感染的相关性。方法选取2018年5月至2019年5月我院收治的HBV患者190例,其中包含HBV携带者33例,急性乙型肝炎组30例,慢性乙型肝炎轻度组42例,慢性乙型肝炎中度组26例,慢性乙型肝炎重度组16例,重度急性肝炎组14例,重度慢性肝炎组29例,并选取同期我院接受健康体检的健康人23名作为健康对照组。分析所有入组人员IL-18水平,分析不同HBV载量患者IL-18表达情况,探讨HBV感染患者外周血IL-18表达水平与HBV感染的相关性。结果与健康对照组比较,急性乙型肝炎组与慢性乙型肝炎轻度组患者IL-18水平明显降低(P<0.05),病毒携带组患者IL-18水平无明显变化(P>0.05),慢性乙型肝炎中度组、重度组、重度急性肝炎组以及重度慢性肝炎组患者IL-18水平明显升高(P<0.05),随HBV感染所导致的肝脏炎症坏死程度加重IL-18水平呈现明显升高趋势;本次研究接受组织病理检测患者43例,其中HBV携带者23例,慢性乙型肝炎轻度组20例,G4分级IL-18水平高于G3、G2、G1以及G0患者(P<0.05),G3分级IL-18水平高于G2、G1以及G0患者(P<0.05),G2分级IL-18水平高于G1以及G0患者(P<0.05);HBV高载量患者IL-18水平低于中载量、低载量组(P<0.05),HBV中载量患者IL-18水平低于低载量患者(P<0.05);经相关性分析显示,外周血IL-18与HBV载量存在负相关性,差异有统计学意义(r=-0.862,P<0.05)。结论外周血IL-18水平与患者HBV载量呈负相关性,可以通过对患者IL-18水平进行分析的方式,了解患者疾病进展情况以及预后情况。     

乙型肝炎患者255例HBV-DNA载量与T淋巴细胞亚群的相关性研究

<正>本研究对255例乙型肝炎患者进行分组,用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)法检测乙型肝炎病毒(HBV)-DNA载量,用流式细胞术检测外周血淋巴细胞亚群CD3+、CD3+CD4+、CD3+CD8+及CD3+CD4+/CD3+CD8+,对结果进行分析,旨在得出乙型肝炎患者T淋巴细胞亚群变化与HBV-DNA载量之间的关系,为临床对乙型肝炎的诊断及抗病毒治疗效果评价、预后判断等方面提供可靠依据[1]。1材料与方法1.1材料1.1.1标本:255例HBV血液标本均来自2011年10月至2013年1月来我院就诊的HBV感染患者,其中男137例,     

乙型肝炎患者外周血T淋巴细胞亚群变化与病毒复制的关系

目的研究乙型肝炎患者外周血T淋巴细胞亚群变化与病毒复制的关系。方法乙型肝炎患者65例按外周血病毒量分为HBV-DNA阴性组15例、低病毒量组20例和高病毒量组30例。另选本科室健康工作人员10人作为对照组。应用流式细胞仪检测T淋巴细胞亚群,荧光定量PCR法测定HBV-DNA。结果 HBV-DNA阴性组、低病毒量组、高病毒量组3组CD4＋和CD4＋/CD8＋依次下降,而CD8＋依次升高。高病毒量组CD3＋、CD4＋、CD4＋/CD8＋低于其他3组,CD8＋高于其他3组,差异均有统计学意义（P〈0.05）。HBV-DNA阴性组,低病毒量组CD3＋、CD4＋、CD8＋及CD4＋/CD8＋数值与对照组比较差异无统计学意义（P〉0.05）。结论 T淋巴细胞数量和功能降低引起HBV活跃复制,而HBV活跃复制反过来又加重T淋巴细胞免疫功能紊乱。     

慢性乙型肝炎患者不同免疫状态下外周血T细胞表面程序性死亡受体1的表达

目的 检测慢性乙型肝炎(CHB)患者不同免疫状态下外周血CD4+、CD8+T细胞表面程序性死亡受体1(PD-1)表达,探讨其与血清HBV DNA载量、ALT之间的关系.方法 收集CHB患者免疫耐受期(A组,24例)、免疫活化期(B组,64例)、HBeAg阴性(C组,23例)和11例健康对照者(D组)外周血,采用流式细胞术检测CD4+、CD8+T细胞表面PD-1表达,以实时荧光定量PCR检测血清HBV DNA,同时检测ALT.结果 B、C组CD4+、CD8+细胞表面PD-1表达显著高于A、D组(P＜0.05).C组CD8+T细胞表面PD-1表达显著高于B组(P＜0.05).相关性分析发现,不同免疫状态下CHB患者CD4+、CD8+T细胞表面PD-1表达水平与HBV DNA载量及ALT均无相关性.结论 CHB患者外周血T细胞表面PD-1表达与机体免疫状态有关.肝脏炎症损伤是影响PD-1表达的重要因素,HBV DNA载量不是主要影响原因.     

苦参素治疗慢性乙型肝炎T细胞亚群变化及临床观察

目的 :观察苦参素 (天晴复欣 )治疗慢性乙型肝炎对T细胞亚群的影响及临床效果。方法 :苦参素治疗慢性乙型肝炎83例 ,与凯西莱治疗慢性乙型肝炎41例比较。结果 :苦参素组CD4 、CD4 /CD8 治疗后明显提高 ,CD8 降低 (P<0 01) ,优于凯西莱组(P<0 01) ;苦参素组HBeAg、HBV -DNA转阴率分别为41 0 %、45 8 % ,凯西莱组为7 3 %、12 2 % (P<0 01)。结论 :苦参素能增强机体免疫功能 ,抑制乙肝病毒复制。     

慢性乙型肝炎病毒感染者外周血T细胞亚群变化与其血清HBV DNA的水平分析

目的:观察慢性乙型肝炎病毒(HBV)感染者细胞免疫功能的变化,探讨病毒复制程度与细胞免疫功能的关系。方法:应用流式细胞仪直接免疫荧光法检测136例乙肝病毒感染者、60例正常对照者外周血T淋巴细胞亚群百分率,用荧光定量聚合酶链式反应(PCR)法检测乙型肝炎感染者血清HBV DNA。结果:84例慢性HBV携带者(ASC)、52例慢性乙型肝炎(CHB)患者与健康对照组相比,CD3+ T淋巴细胞百分比、CD4+T淋巴细胞百分比和CD4+/CD8+ T淋巴细胞比值均显著降低(P<0.001),CD8+ T淋巴细胞百分比均显著升高(P<0.001)。慢性乙型肝炎患者与慢性HBV携带者相比,CD3+ T淋巴细胞百分比差异无统计学意义(P>0.05)、CD4+ T淋巴细胞百分比明显降低(P<0.05)、CD8+ T淋巴细胞百分比明显升高(P=0.01)、CD4+/CD8+ T淋巴细胞比值明显降低(P<0.05)。随着病情发展,从健康对照组、慢性HBV携带者到慢性乙型肝炎,CD4+T淋巴细胞百分比、CD4+/CD8+比值呈逐渐下降趋势,CD8+ T细胞百分比呈逐渐升高的趋势。慢性HBV携带者HBV DNA阳性组与HBV DNA阴性组相比,CD3+ T淋巴细胞差异均无统计学意义(P>0.05),CD4+ T淋巴细胞百分比明显下降(P<0.001),CD4+/CD8+ T淋巴细胞比值明显下降(P<0.001),CD8+ T淋巴细胞百分比明显升高(P<0.01)。结论:HBV感染可导致感染者细胞免疫功能的改变,HBA DNA复制增加进一步加重乙肝病毒感染者T细胞亚群的紊乱,CD4+/CD8+ T淋巴细胞比值的动态变化可及时提示临床HBV感染者细胞免疫功能的变化并加强临床的监测。     

健脾益气方对慢性乙型肝炎病毒携带者T细胞免疫功能的影响

目的 观察健脾益气方对慢性乙型肝炎病毒（HBV）携带者T细胞免疫功能的影响.方法 将60例HBV DNA阳性慢性HBV携带者（ASC）随机分成健脾益气方治疗组（A组）、常规治疗组（B组）各30例,用流式细胞仪检测外周血T淋巴细胞亚群水平,并与健康体检者（健康对照组,n=18）进行比较;ASC治疗24周后再次检测外周血T淋巴细胞亚群.结果 慢性乙型肝炎病毒携带者外周血T淋巴细胞CD4＋、CD8＋计数与对照组差异有统计学意义（P＜0.01）;健脾益气方治疗组治疗前后T淋巴细胞CD4＋、CD8＋计数及CD4＋/CD8＋比值差异有统计学意义（P＜0.05或P＜0.01）,与常规治疗组治疗24周后T淋巴细胞计数差异有统计学意义P＜0.05）.结论 慢性HBV携带者体内存在T淋巴细胞亚群失衡,健脾益气方能够改善慢性乙型肝炎病毒携带者的T细胞免疫功能.     

乙肝患者HBV-DNA载量与外周血T细胞CD127及肝功能的相关性研究

目的通过检测乙型肝炎(乙肝)患者乙肝病毒脱氧核糖核酸(HBV-DNA)载量,探讨其与外周血T淋巴细胞表面CD127的表达水平及肝功能的相关性。方法将慢性乙肝病毒(HBV)感染患者64例按疾病类型分为慢性乙肝组43例和乙肝性肝硬化21例,另选择健康体检者20例作为对照组,采用流式细胞术检测乙肝患者及健康者外周血T细胞表面CD127的表达水平,实时荧光定量PCR法检测乙肝患者HBV-DNA并进行分析,同时采用全自动生化分析仪检测丙氨酸氨基转移酶(ALT)、总胆红素(TBIL)水平,并对各组检测值进行比较和相关性分析。结果乙肝组CD4+CD127+表达率与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。乙肝组CD8+CD127+表达率、ALT和TBIL值及血清HBV-DNA定量显著高于对照组,且乙肝性肝硬化组ALT值显著低于慢性乙肝组,差异均有统计学意义(P<0.05和P<0.01)。HBV病毒载量的对数值与外周血T淋巴细胞表面CD127的表达呈负相关(r=-0.391,P<0.01),但HBV-DNA载量与肝功能无明显相关性。结论乙肝患者HBV-DNA与外周血T淋巴细胞表面CD127的表达水平明显相关,但与肝功能无明显相关性。     

慢性HBV感染者外周血T细胞亚群与病毒载量、HBeAg的相关性分析

目的：分析慢性HBV感染者外周血T细胞亚群与病毒载量、HBeAg的相关性。方法以40例慢性乙型肝炎（ CHB）、35例慢性重型乙型肝炎（ CSHB）、30例肝硬化（ LC）及32例正常对照者为研究对象,采用流式细胞仪和荧光定量PCR法分别检测各组外周血T细胞亚群、HBV DNA载量。结果 CHB组仅CD^4＋亚群明显降低,与对照组比较,差异有统计学意义（ P ＜0．05）;CSHB及LC组CD^3＋、CD^4＋亚群、CD^4＋/CD^8＋比值呈逐渐降低趋势,CD^8＋亚群呈逐渐增高趋势,与对照组比较差异有统计学意义（ P ＜0．05）。 HBV DNA载量与CD^4＋亚群、CD^4＋/CD^8＋比值呈负相关（ r ＝-0．638,-0．778, P ＜0．05）,与CD^8＋亚群呈正相关（ r ＝0．647, P ＜0．05）,与CD^3＋无关。与HBeAg阳性患者比较,HBeAg阴性患者外周血CD^＋3＋、CD^4＋和CD^8＋亚群显著降低（ P ＜0．05）。结论慢性HBV感染者随着疾病加重细胞免疫功能进行性降低,与病毒复制水平密切相关,这是导致疾病慢性化的原因之一。外周血T细胞亚群变化趋势可为判断疾病转归及预后提供可靠指标。     

The current status and future directions of hepatitis B antiviral drug discovery

Introduction: The current standard care of chronic hepatitis B fails to induce a durable off-drug control of hepatitis B virus (HBV) replication in the majority of treated patients. The primary reasons are its inability to eliminate the covalently closed circular (ccc) DNA, the nuclear form of HBV genome, and restoration of the dysfunctional host antiviral immune response against the virus. Accordingly, discovery and development of therapeutics to completely stop HBV replication, eliminate or functionally inactivate cccDNA as well as activate a functional antiviral immune response against HBV are the primary efforts for finding a cure for chronic hepatitis B.

Area covered: Herein, the authors highlight the current efforts of HBV drug discovery and offer their opinions for the future directions of this research.

Expert opinion: The authors believe that through a consecutive or overlapping three-stage antiviral and immunotherapy program to: (i) completely stop HBV replication and cccDNA amplification; (ii) reduce viral antigen load and induce HBV surface antigen (HBsAg) seroclearance through eradication or inactivation of cccDNA and RNA interference-mediated degradation of viral mRNA and (iii) activate a functional antiviral immune response against HBV through therapeutic immunization or immunotherapy, a functional cure of chronic HBV infection can be achieved in the majority of chronic HBV carriers.     

Hepatitis B virus antigens impair NK cell function

An inadequate immune response of the host is thought to be a critical factor causing chronic hepatitis B virus (CHB) infection. Natural killer (NK) cells, as one of the key players in the eradication and control of viral infections, were functionally impaired in CHB patients, which might contribute to viral persistence. Here, we reported that HBV antigens HBsAg and HBeAg directly inhibited NK cell function. HBsAg and/or HBeAg blocked NK cell activation, cytokine production and cytotoxic granule release in human NK cell-line NK-92 cells, which might be related to the downregulation of activating receptors and upregulation of inhibitory receptor. Furthermore, the underlying mechanisms likely involved the suppression of STAT1, NF-κB and p38 MAPK pathways. These findings implicated that HBV antigen–mediated inhibition of NK cells might be an efficient strategy for HBV evasion, targeting the early antiviral responses mediated by NK cells and resulting in the establishment of chronic virus infection. Therefore, this study revealed the relationship between viral antigens and human immune function, especially a potential important interaction between HBV and innate immune responses.     

Emerging drugs for the treatment of hepatitis B

Introduction: Nucleos(t)ide analogs and interferon-based compounds are currently approved for the treatment of chronic hepatitis B (CHB). Although these treatments are effective in suppressing viral replication, it is unable to completely eradicate the virus from the host. Therefore, CHB patients are at a life-long risk of developing complications, including hepatocellular carcinoma.

Areas covered: Drugs targeting novel sites of the hepatitis B virus (HBV) replication cycle and the host immune response in development are discussed. As current available drugs only target a small segment of the HBV life cycle, the development of new agents targeting different sites is an important step in eradicating HBV. The host immunological response is also vital in viral clearance. Newer agents in development include immunomodulatory agents and therapeutic vaccines.

Expert opinion: For any chance of eradication, a combination of drugs targeting both the host factors and different sites of the viral life cycle will be required. Two key components to achieving this goal include the removal of covalently closed circular DNA (cccDNA) together with restoration of the immune control against HBV.     

Therapeutic strategies for a functional cure of chronic hepatitis B virus infection

Treatment of chronic hepatitis B virus (HBV) infection with the viral DNA polymerase inhibitors or pegylated alpha-interferon has led to a significant retardation in HBV-related disease progression and reduction in mortality related to chronic hepatitis B associated liver decompensation and hepatocellular carcinoma. However, chronic HBV infection remains not cured. The reasons for the failure to eradicate HBV infection by long-term antiviral therapy are not completely understood. However, clinical studies suggest that the intrinsic stability of the nuclear form of viral genome, the covalently closed circular (ccc) DNA, sustained low level viral replication under antiviral therapy and homeostatic proliferation of hepatocytes are the critical virological and pathophysiological factors that affect the persistence and therapeutic outcomes of HBV infection. More importantly, despite potent suppression of HBV replication in livers of the treated patients, the dysfunction of HBV-specific antiviral immunity persists. The inability of the immune system to recognize cells harboring HBV infection and to cure or eliminate cells actively producing virus is the biggest challenge to finding a cure. Unraveling the complex virus–host interactions that lead to persistent infection should facilitate the rational design of antivirals and immunotherapeutics to cure chronic HBV infection.KEY WORDS: Hepatitis B virus, cccDNA, Antiviral agents     

141例慢性重度乙型肝炎患者凝血功能与HBV标志物模式HBV-DNA载量相关性研究

目的:研究慢性重度乙型肝炎患者HBV标志物模式(HBV-M)、病毒载量(HBV-DNA)与凝血功能的关系。方法:测定141例慢性重度乙型肝炎患者血清凝血功能、HBV-M及HBV-DNA载量,运用SPSS17.0统计软件对结果进行统计学分析。结果:141例慢性重度乙型肝炎患者中,HBV-DNA阳性率为85.8%,依HBV-M及HBV-DNA载量分组的各组凝血功能四项指标与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05),并且慢性重度乙型病毒性肝炎患者的凝血功能与HBV-M及HBV-DNA载量变化具有相关性,凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血酶时间(APTT)、凝血酶时间(TT)与HBV-M和HBV-DNA呈正相关性;纤维蛋白原(FIB)与HBV-M和HBV-DNA呈负相关性。结论:慢性重度乙型肝炎患者的凝血功能变化与其HBV-M及HBV-DNA载量有关,该三项指标的变化对此类患者的治疗及治疗效果的判定有重要意义。     

替比夫定治疗前后乙型病毒性肝炎后肝硬化患者T淋巴细胞嗜银蛋白含量变化的研究

目的：通过对替比夫定治疗前后乙型病毒性肝炎后肝硬化患者肝脏功能评分、T淋巴细胞核仁形成区嗜银蛋白（AsNORs）的测定,探讨替比夫定治疗后乙型病毒性肝炎后肝硬化患者的肝功能状况及机体免疫功能的改变。方法：对50例乙型病毒性肝炎后肝硬化患者用替比夫定治疗前及治疗后6个月分别检测肝功能、AgNORs,从而比较使用替比夫定治疗前及治疗6个月后患者AgNORs含量以及Child—Push评分的改变。结果：在使用替比夫定治疗6个月后乙型病毒性肝炎后肝硬化患者肝脏Child—Pugh分级计分显著降低（P〈0．05）,而AgNORs显著升高（P〈0．05）。结论：替比夫定可明显抑制乙型肝炎病毒复制,改善乙型病毒性肝炎后肝硬化患者肝功能,缓解病情,患者在使用替比夫定治疗6个月后T淋巴细胞免疫活性得到明显改善。     

乙型肝炎患者外周血淋巴细胞表达的变化

目的 分析乙型肝炎患者外周血淋巴细胞亚群的表达.方法 对112例乙型肝炎患者采用荧光定暈PCR技术和流式细胞术分别检测血中HBV DNA及外周血淋巴细胞亚群CD3~+T细胞、CD4~+T细胞、CD8~+T细胞、CD3~-/CD16~+CD56~+(NK细胞)、CD3~- CD19~+(B细胞)表达百分比,进行各淋巴细胞亚群百分比统计学分析.结果 与急性乙型肝炎(AHB)组比较,慢性乙型肝炎(CHB)组、肝炎肝硬化(LC)组CD3~+T细胞、CD4~+T细胞、CD8~+T细胞、CD4~+/CD8~+比值均有显著性下降,LC组下降最显著(P<0.01).而LC组B细胞百分比较CHB、AHB组高(P<0.01).NK细胞百分比较CHB、AHB组均存在降低趋势(P<0.01).结论 乙型肝炎患者体内存在T细胞亚群失衡和细胞免疫功能紊乱;外周血T细胞亚群随病情进展而减少.