过表达双特异性蛋白磷酸酶1通过调节自噬作用减轻阿霉素诱导的心肌细胞凋亡和心肌纤维化

目的 探讨过表达双特异性蛋白磷酸酶1(dual-specificity protein phosphatase 1,DUSP1)对阿霉素（adriamycin,ADR）诱导的心肌细胞凋亡和心肌纤维化的影响及作用机制。方法 将SD大鼠随机分为对照组、ADR组、ADR+Ad-DUSP1组、ADR+Ad-NC组，每组10只。采用超声心动图检测大鼠心功能参数左心室舒张末内径值（left ventricular end diastolic diameter,LVEDD）、左心室收缩末内径值（left ventricular end systolic diameter,LVESD）、左心室射血分数（left ventricular ejection fraction,LVEF）和左心室短轴缩短率（left ventricular fractional shortening,LVFS）。实时定量聚合酶链反应（quantitative real time polymerase chain reaction,qRT-PCR）法检测大鼠心肌组织中DUSP1 mRNA表达，苏木素-伊红（hematoxyli...     

Wnt/β-catenin抑制剂XAV939对心肌梗死大鼠心肌纤维化的影响

目的探究Wnt/β-catenin信号通路抑制剂XAV939对心肌梗死大鼠心肌纤维化的影响。方法选取60只无特定病原体级3周龄SD大鼠,采用随机数字表法分为假手术组、模型组和抑制剂组,每组20只。除假手术组外各组采用结扎左冠状动脉前降支,制成心肌梗死大鼠模型;抑制剂组从造模后第10天开始腹腔注射Wnt/β-catenin信号通路抑制剂XAV939,连续注射7 d,其余两组注射等量0.9%氯化钠溶液;采用超声心动图检测各组大鼠左心室收缩末期内径(left ventricular end systolic diameter,LVESd)、左心室舒张末期内径(left ventricular end diastolic diameter,LVEDd)、左心室射血分数(left ventricular ejection fraction,LVEF)和左心室短轴缩短率(left ventricular fractional shortening,LVFS);采用图像法检测各组大鼠左心室梗死范围;采用氯胺T法测定羟脯氨酸浓度检测各组大鼠心肌胶原浓度;TUNEL染色分析法分析大鼠心肌细胞凋亡情况;采用蛋白质印记法检测大鼠心肌组织中促心肌纤维化因子转化生长因子-β1(transforming growth factor 1,TGF-β1)和基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase,MMP)-9的表达情况;采用蛋白质印迹法检测大鼠心肌组织Wnt/β-catenin信号通路相关蛋白表达水平。结果 TUNNEL染色结果显示,假手术组、模型组、抑制剂组大鼠心肌细胞凋亡率分别为(10.02±2.36)%、(49.36±9.32)%和(22.01±8.32)%;相比假手术组,模型组大鼠LVESd、LVEDd、羟脯氨酸浓度、胶原浓度、心肌梗死面积、TGF-β1蛋白相对表达、MMP-9蛋白相对表达、β-catenin蛋白相对表达均显著升高,LVEF、LVFS显著降低,差异有统计学意义(P0.05);相比模型组,抑制剂组大鼠LVESd、LVEDd、羟脯氨酸浓度、胶原浓度、心肌梗死面积、TGF-β1蛋白相对表达、MMP-9蛋白相对表达、β-catenin蛋白相对表达均显著降低,LVEF、LVFS显著升高,差异有统计学意义(P0.05)。结论 XAV939通过抑制Wnt/β-catenin信号通路降低大鼠心肌组织中促纤维化因子的表达及胶原的浓度并抑制心肌细胞凋亡,实现防止心肌梗死后心肌纤维化的发生与发展。     

银杏内酯B对大鼠心肌缺血再灌注损伤后细胞凋亡及凋亡相关蛋白表达的影响

目的探讨银杏内酯B对大鼠心肌缺血再灌注损伤后细胞凋亡及相关蛋白表达的影响。方法将100只SD大鼠随机分为假手术组、模型组及银杏内酯B低剂量组(15mg/kg)、中剂量组(30mg/kg)、高剂量组(60mg/kg),每组20只。通过夹闭左冠状动脉前降支制作心肌缺血再灌注大鼠模型。监测各组大鼠心电图波动变化;红四氮唑(TTC)染色法测量心肌梗死体积;苏木精-伊红(HE)染色法观察心肌组织病理变化;末端标记法(TUNEL)观察细胞凋亡状况;免疫蛋白印记法测定凋亡相关蛋白(Bcl-2、Bax、激活型Caspase-3)表达。结果与模型组比较,银杏内酯B各剂量组心电图明显改善,其中银杏内酯B高剂量组基本恢复正常;银杏内酯B中剂量组、高剂量组心肌梗死体积显著降低(P<0.05或P<0.01),心肌组织病变明显改善,心肌细胞凋亡指数(AI)显著降低(P<0.01),Bcl-2蛋白表达显著上调(P<0.05或P<0.01),Bax和激活型Caspase-3蛋白表达显著下调(P<0.05或P<0.01),Bcl-2/Bax比值显著升高(P<0.01)。结论银杏内酯B通过调节凋亡相关蛋白表达从而抑制再灌注性损伤后心肌细胞凋亡。     

葶苈生脉方对充血性心力衰竭大鼠心肌细胞凋亡相关调控基因的影响

目的通过观察不同剂量葶苈生脉方对充血性心力衰竭(CHF)造模大鼠心肌细胞凋亡相关调控基因B细胞淋巴瘤/白血病-2基因(Bcl-2)、促凋亡基因Bax和凋亡蛋白酶Caspase-3表达的影响。方法 60只Wistar大鼠随机分为5组,每组12只。除假手术组外,其余4组手术造成腹主动脉狭窄,假手术组只分离腹主动脉,不结扎。5组均于造模4 w后开始给药。每日1次定量灌胃。5组均连续灌胃8 w。最后1次给药后,取少许心肌组织,运用流式细胞仪检测Bcl-2、Bax和Caspase-3蛋白表达的情况。结果与模型组比较,葶苈生脉方高、低剂量组Bcl-2蛋白表达免疫荧光指数(FI)值明显增加(P<0.05),Bax、Caspase-3蛋白表达FI值和Bax/Bcl-2比值明显降低(P<0.05)。结论葶苈生脉方可通过抑制心肌细胞凋亡,避免减少心肌细胞数量,恢复心肌细胞的功能,达到治疗CHF作用。     

瑞舒伐他汀对慢性心力衰竭大鼠心肌细胞骨保护素和核因子κB受体活化因子配体的影响

目的观察瑞舒伐他汀对慢性心力衰竭(CHF)大鼠中心肌细胞骨保护素/核因子κB受体活化因子配体(OPG/RANKL)表达的影响。方法 70只雄性SD大鼠中,随机选择58只采用腹主动脉缩窄法制备CHF模型,将存活的48只CHF大鼠随机分为未治疗组、低剂量瑞舒伐他汀组(低剂量组)和高剂量瑞舒伐他汀组(高剂量组),各16只,另12只作为假手术组。于造模4周及给药4周后行超声心动图检查后处死,观察心肌组织病理学变化,测定心肌组织OPG、RANKL mRNA表达。结果给药4周后,与未治疗组和低剂量组比较,高剂量组大鼠左心室收缩末内径明显降低,LVEF、左心室短轴缩短率明显升高(P<0.05)。光镜下,高剂量组心肌损伤程度较未治疗组及低剂量组减轻。与假手术组比较,未治疗组、低剂量组、高剂量组大鼠心肌组织OPG、RANKL mRNA表达明显增加(P<0.01),RANKL/OPG值增高(P<0.01);与未治疗组及低剂量组比较,高剂量组心肌组织RANKL mRNA表达下调(P<0.05),RANKL/OPG值降低(P<0.05)。结论 CHF大鼠心肌细胞OPG、RANKL表达增强。高剂量瑞舒伐他汀可能通过下调RANKL表达抑制心室重构,改善心功能,延缓CHF进展。     

姜黄素通过调节NRG-1/ErbB2信号通路影响糖尿病心肌病大鼠的作用机制

目的探讨姜黄素对糖尿病心肌病大鼠心肌保护作用以及对神经调节蛋白-1(neuregulin-1,NRG-1)/Erb B2信号通路的影响。方法将80只Wistar大鼠随机分为正常组(CN组)、模型组(M组)、姜黄素高剂量组(HC组)、姜黄素低剂量组(LC组)和人类重组NRG-1药物组(AD组),检测各组大鼠血清中生化指标以及心肌功能变化情况,蛋白免疫印迹法(western blotting)检测NRG-1/Erb B2信号通路中蛋白表达情况,实时荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)检测Bax、Bcl-2基因表达情况。结果 HC组空腹血糖(fasting blood-glucose,FPG)、三酰甘油(triglycerides,TG)、肌酸激酶同工酶-MB(creatine kinase-MB,CK-MB)、左心室舒张末内径(left ventricular end diastolic dimension,LVEDD)、左心室收缩末内径(left ventricular end systolic dimension,LVESD)及左心室后壁厚度(left ventricular posterior wall thickness,LVPWT)均显著低于M组,差异有统计学意义(P0.05或P0.01);而胰岛素(insulin,INS)、左心室射血分数(left ventricular ejection fraction,LVEF)、左心室短轴缩短率(left ventricular fractional shortening,LVFS)及心率(heart rate,HR)显著高于M组,差异有统计学意义(P0.01)。苏木素-伊红染色和Masson染色显示,M组心肌组织中细胞排列紊乱,心肌纤维肥大、疏松,可见纤维空泡样变化,而AD组、HC组心肌细胞排列整齐,心肌间质未见异常改变。TUNEL检测结果显示,M组凋亡指数(apoptotic index,AI)显著高于CN组,差异有统计学意义(P0.05);而AD组、LC组及HC组AI显著低于M组,差异有统计学意义(P0.05)。Western blotting结果显示,LC组及HC组NRG-1、p-Erb B2蛋白相对表达量均显著高于M组,差异有统计学意义(P0.05);而转化生长因子β1(TGF-β1)蛋白相对表达量显著低于M组,差异有统计学意义(P0.05)。逆转录-聚合酶链反应检测结果显示,HC组Bax基因相对表达量显著高于M组,而Bcl-2基因相对表达量显著低于M组,差异均有统计学意义(P0.05)。结论姜黄素对糖尿病心肌病大鼠模型具有心肌保护以及抑制心肌组织纤维化作用,这一作用机制可能与激活NRG-1/Erb B信号转导通路有关。     

福辛普利对慢性心力衰竭大鼠心肌细胞凋亡及相关基因表达的影响

目的:探讨福辛普利对慢性心力衰竭大鼠心肌细胞凋亡及相关基因表达的影响。方法:采用肾上腹主动脉缩窄法建立大鼠慢性心力衰竭模型,随机分为假手术组、慢性心力衰竭组、福辛普利组,每组10只大鼠。术后假手术组和慢性心力衰竭组给予生理盐水灌胃,福辛普利组给予福辛普利10 mg/(kg·d)灌胃。8周后,观察各组大鼠左心室舒张末压(LVEDP)、左心室内压最大上升及下降速率(±dp/dtmax)和左心室质量指数(LVMI);脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(TUNEL)检测大鼠左心室心肌细胞的凋亡指数(AI);SP免疫组织化学染色法检测左心室心肌组织B细胞白血病/淋巴瘤相关抗原2(Bcl-2)、B细胞白血病/淋巴瘤相关抗原相关X(Bax)蛋白的表达;蛋白免疫印记法(Western blotting)检测半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(Caspase-3)蛋白的表达。结果:慢性心力衰竭组与假手术组相比,大鼠LVEDP、LVMI、心肌细胞凋亡指数、Bax蛋白、Caspase-3蛋白的表达均明显升高(P0.01),±dp/dtmax、Bcl-2蛋白的表达、Bcl-2/Bax比值显著下降(P0.01);与慢性心力衰竭组比较,福辛普利组大鼠LVEDP、LVMI、心肌细胞凋亡指数、Bax蛋白、Caspase-3蛋白的表达均明显降低(P0.01),±dp/dtmax、Bcl-2蛋白的表达、Bcl-2/Bax比值显著升高(P0.01),差异均有统计学意义。结论:慢性心力衰竭过程中发生了心肌细胞凋亡,福辛普利可通过上调Bcl-2的表达及下调Bax及Caspase-3的表达抑制心肌细胞凋亡,改善慢性心力衰竭大鼠心室功能及心肌肥厚。     

健心颗粒干预慢性心力衰竭细胞凋亡的实验研究

目的探讨健心颗粒干预慢性心力衰竭(CHF)细胞凋亡的实验研究。方法以32周老龄自发性高血压大鼠(SHR)的CHF模型作为研究对象,随机分为5组,即空白对照组、低剂量健心颗粒组、中剂量健心颗粒组、高剂量健心颗粒组与卡托普利(开搏通)组。观察应用健心颗粒4周后心肌的Fas、Bax、Bcl-2和Caspase-3蛋白表达;检测血浆血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)、心钠素(ANP)、脑钠素(BNP)水平。结果健心颗粒各剂量组均可以降低Fas、Bax和Caspase-3的蛋白表达,其中低剂量健心颗粒组各蛋白分别为17.39%±1.12%、10.27%±1.27%和16.24%±3.26%;可提高Bcl-2(低剂量健心颗粒组为20.76%±6.38%)蛋白表达;降低血浆的AngⅡ、ANP、BNP水平,低剂量健心颗粒组各指标分别为101.13pg/mL±19.56pg/mL、375.89pg/mL±72.17pg/mL、254.03pg/mL±27.58pg/mL。结论健心颗粒可以通过复杂机制干预心肌细胞凋亡,改善心功能。     

福辛普利对慢性心力衰竭大鼠心肌细胞凋亡及半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3的影响

目的探讨福辛普利对慢性心力衰竭(CHF)大鼠心肌细胞凋亡及半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(Caspase)-3表达水平的影响。方法雄性Wistar大鼠50只随机抽取10只为假手术组,其余大鼠采用肾上腹主动脉缩窄法建立大鼠CHF模型,6 w后将成模大鼠随机分为CHF组、Fos10组、FOS20组(福辛普利10、20 mg·kg~(-1)·d~(-1))。治疗8 w后,观察各组大鼠血流动力学指标和左心室重量指数(LVMI);透射电镜观察左室心肌组织形态的改变;TUNEL法检测大鼠左心室心肌细胞的凋亡指数;SP免疫组织化学染色法检测左心室心肌组织Caspase-3蛋白的表达。结果 CHF组与假手术组相比,大鼠左心室舒张末压(LVEDP)、LVMI、心肌细胞凋亡指数、Caspase-3蛋白的表达均明显升高(P<0.01),左心室内压最大上升和下降速率(±dp/dtmax)显著下降(P<0.01);与CHF组比较,Fos10组和Fos20组大鼠LVEDP、LVMI、心肌细胞凋亡指数、Caspase-3蛋白的表达均明显降低(P<0.01),左心室内压最大上升和下降速率(±dp/dtmax)显著升高(P<0.01),且Fos20组效果明显。电镜下观察:Fos10组和Fos20组心肌损伤程度较CHF组明显减轻。结论福辛普利可通过下调Caspase-3的表达抑制心肌细胞凋亡,改善CHF大鼠心室功能及心肌超微结构。     

芪参益气汤对阿霉素致心力衰竭大鼠心功能及miR133a表达的影响

目的探讨芪参益气汤对阿霉素致心力衰竭(CHF)大鼠心功能及微小核糖核酸133a(miR133a)表达的影响。方法选取清洁级健康雄性Wistar大鼠90只,随机分为对照组、模型组、西药组及中药低、中、高剂量组,各15只。模型组、西药组及中药低、中、高剂量组采用阿霉素尾静脉注射建立CHF模型,对照组大鼠以等量0.9%氯化钠溶液尾静脉注射。模型建立后,模型组和对照组分别予以0.9%氯化钠溶液10mL/kg灌胃给药,每日1次;西药组予以0.25mg/mL卡托普利溶液10mL/kg灌胃给药每日1次;中药低、中、高剂量组分别予以0.8g/mL、1.6g/mL、3.2g/mL芪参益气汤10mL/kg,灌胃给药,每日1次。各组大鼠均给药28d。检测比较各组心脏功能、心肌细胞凋亡指数(AI)、心肌组织B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)蛋白、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶-9(Caspase-9)表达水平及miR133a、Bcl-2mRNA、Caspase-9mRNA表达水平。结果与模型组比较,其他各组大鼠左室舒张末期内径(LVEDD)、左室收缩末期内径(LVESD)较低,心肌AI较低,心肌组织Caspase-9蛋白及Caspase-9mRNA表达水平较低,且除LVEDD指标中药中剂量组与中药低剂量组比较差异无统计学意义之外,其余指标均中药低剂量组>中药中剂量组>中药高剂量组和西药组,差异均有统计学意义(P<0.05)。与模型组比较,其他各组大鼠射血分数(EF)、短轴缩短分数(FS)较高,心肌组织Bcl-2蛋白及miR133a、Bcl-2mRNA表达水平较高,且中药低剂量组<中药中剂量组<中药高剂量组和西药组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论芪参益气汤能明显改善CHF大鼠的心功能,而且剂量越高效果越好,其作用可能与促进miR133a表达,调节miR133a下游Bcl-2、Caspase-9蛋白表达水平,抑制心肌细胞凋亡有关。     

硫化氢通过调控Bcl-2/Caspase-3的表达减轻糖尿病大鼠心肌细胞凋亡和纤维化

目的观察气体信号分子硫化氢(H_2S)通过调控Bcl-2/Caspase-3的表达对糖尿病大鼠心肌细胞凋亡和纤维化的影响。方法 50只成年雄性SD大鼠被随机分成5组(每组10只):正常对照组(Control组)、糖尿病组(模型组)、低浓度保护组(c1组)、高浓度保护组(c2组)、H_2S对照组(H_2S组)。通过腹腔注射链脲佐菌素(STZ)(40 mg/kg)的方法建成糖尿病大鼠实验模型;Control组每天通过腹腔注射同等剂量的生理盐水;硫氢化钠(NaHS)作为H_2S的供体,c1组每天注射30μmol/kg的Na HS溶液,c2组与H_2S组每天注射100μmol/kg的Na HS溶液。建模8 w后处死大鼠,免疫组化法检测心肌Ⅰ型胶原蛋白和Ⅲ型胶原蛋白的表达;通过Masson染色的方法观察心肌组织病理学发生的变化;用TUNEL染色的方法观察各组大鼠心肌细胞凋亡;Western印迹检测大鼠心肌组织Bcl-2和Caspase-3蛋白的表达水平。结果与Control组相比,模型组大鼠心肌细胞排列紊乱,存在明显胶原沉积和心肌纤维化,心肌组织中凋亡细胞数量明显增加,心肌组织中Caspase-3蛋白表达明显升高(P0. 01),Bcl-2蛋白表达水平明显降低(P0. 01);与模型组相比,c1和c2组大鼠心肌纤维有所改善,凋亡细胞数量明显减少,c1组和c2组Caspase-3蛋白明显降低(P0. 05);c1组和c2组Bcl-2蛋白明显升高(P0. 01)。结论 H_2S可改善糖尿病大鼠心肌纤维化,其机制可能与调控凋亡相关蛋白Bcl-2和Caspase-3的表达并减轻细胞凋亡有关。     

黄芪甲苷通过抑制氯化物细胞内通道蛋白4/ADP核糖基化因子6信号通路改善血管紧张素Ⅱ诱导的高血压大鼠模型的心肌损伤

目的 探究黄芪甲苷在血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的高血压大鼠模型中的心肌保护作用及其机制。方法 将60只SD大鼠分随机分为6组,每组10只：对照组,模型组,黄芪甲苷低(10 mg/kg)、中(20 mg/kg)、高剂量(50 mg/kg)组和ADP核糖基化因子6(Arf6)特异性抑制剂(NAV-2729)组。建立AngⅡ诱导高血压心肌损伤大鼠模型后给予不同药物或剂量处理2周后,观察各组大鼠左心室舒张末期内径、心脏射血分数及短轴缩短率、心肌病理损伤、心肌细胞凋亡以及相关凋亡蛋白B细胞淋巴瘤因子-2(Bcl-2)及Bcl-2关联X蛋白(Bax)表达情况。另选30只SD大鼠随机分为3组,每组10只：氯化物细胞内通道蛋白4(CLIC4)过表达联合黄芪甲苷组、腺病毒阴性对照联合黄芪甲苷组及腺病毒阴性对照组。先通过尾静脉注射相应腺病毒,再用AngⅡ诱导高血压模型。2周后观察大鼠左心室舒张末期内径、心脏射血分数及短轴缩短率、心肌病理损伤、心肌细胞凋亡情况。结果 与模型组大鼠比较,中剂量和高剂量的黄芪甲苷能够改善AngⅡ诱导的高血压心肌损伤模型大鼠的心脏功能及心肌结构,促进抗凋亡蛋白Bcl-2表达(0...     

阿托伐他汀早期干预对急性心肌梗死心肌细胞凋亡的影响

目的探讨不同剂量阿托伐他汀提早干预治疗,对兔急性心肌梗死(AMI)细胞凋亡的影响。方法24只新西兰兔随机分为3组:①对照组:不予药物干预;②低剂量组:0.5mg·kg-1·d-1阿托伐他汀;③高剂量组:5mg·kg-1·d-1阿托伐他汀。在药物干预3d后制作AMI模型,检测心肌梗死及其边缘区细胞凋亡率并观察心肌Bax和Bcl-2表达。结果①高剂量组心肌细胞凋亡率明显低于对照组和低剂量组(P<0.05,P<0.01)。②高剂量组Bcl-2表达高于对照组及低剂量组(P<0.01,P<0.05),对照组与低剂量组差异无统计学意义;三组Bax表达均较高,但组间比较,差异无统计学意义。③Pearson线性相关分析显示梗死及其边缘区心肌细胞凋亡率与相应区域Bcl-2表达呈负相关,与心肌组织Bax表达无明显相关关系。结论高剂量阿托伐他汀降低梗死区及其边缘区心肌细胞凋亡率,与低剂量相比显示出更好保护作用。     

原花青素对缺血再灌注大鼠心肌细胞凋亡及凋亡相关基因蛋白表达的影响

目的:观察原花青素对缺血再灌注大鼠心肌细胞凋亡相关基因半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)、B型白细胞/2型淋巴细胞样蛋白(Bcl-2)和凋亡相关基因Bcl-2相关X蛋白(Bax)蛋白表达的影响,探讨原花青素在大鼠缺血再灌注心肌细胞凋亡中发挥的作用及可能的调控机制。方法:40只雄性SD大鼠随机等分为4组,即正常组,模型组,原花青素低剂量组[原花青素50 mg/(kg·d)],原花青素高剂量组[原花青素100 mg/(kg·d)],灌胃给药,每天1次,连续2周。末次给药后结扎冠状动脉左前降支(LAD)30 min再灌注120 min,建立大鼠心肌缺血再灌注模型。测定肌酸激酶同工酶(CK-MB)活性、心肌梗死面积;用Western blot检测各组细胞凋亡相关基因Caspase-3、Bcl-2、Bax蛋白表达;原位末端转移酶标记(TUNEL)法检测心肌细胞凋亡。结果:与正常组比较,模型组大鼠CK-MB活性显著增强、心肌梗死面积增大,心肌细胞凋亡指数升高,Caspase-3、Bax蛋白表达增强,Bcl-2蛋白表达、Bcl-2/Bax降低(P0.05);与模型组比较,原花青素高、低剂量组大鼠CK-MB活性显著减弱、心肌梗死面积减小,细胞凋亡指数显著降低,Caspase-3、Bax蛋白表达显著减弱,Bcl-2蛋白表达、Bcl-2/Bax增加(P0.05)。结论:原花青素可拮抗缺血再灌注大鼠心肌细胞凋亡,其机制可能与Caspase-3、Bax蛋白表达降低,Bcl-2表达升高,Bcl-2/Bax比例增加有关。     

二十碳五烯酸在糖尿病心肌病损伤中的作用及机制

目的 探讨二十碳五烯酸(eicosapentaenoic acid,EPA)对糖尿病心肌病损伤的作用及其机制。 方法 小鼠随机分为正常 (Con) 组、EPA处理 (Con+EPA) 组、糖尿病模型 (DM) 组、糖尿病模型EPA处理 (DM+EPA) 组。腹腔注射链脲佐菌素（streptozotocin, STZ）构建糖尿病小鼠模型,超声检测各组小鼠心脏功能,麦胚凝集素 (wheat germ agglutinin, WGA)检测心肌细胞横截面积,TUNEL化学染色检测细胞凋亡率,Western blot检测小鼠心脏组织cleaved caspase-3、Bax、Bcl-2、动力相关蛋白(dynamin-related protein, Drp)1和磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶（phospho-AMP-activated protein kinase, P-AMPK）的表达水平。 结果 与Con组相比,DM组小鼠左心室收缩末内径（left ventricular end-systolic diameter, LVESD）和左心室舒张末内径（left ventricular end diastolic diameter, LVEDD）值上调,左室射血分数（left ventricular ejection fraction,LVEF）和左室短轴缩短率（left Ventricular Fraction shortening, LVFS）下降,细胞横截面积增大,凋亡率显著增加,凋亡相关蛋白cleaved caspase-3、Bax表达增加、Bcl-2表达降低,同时p-AMPK/AMPK比值升高,Drp1表达增多（P < 0.05）。但是EPA处理DM小鼠可使LVESD、LVEDD值下调,LVEF、LVFS值上升,心肌横截面积减小,凋亡率降低,并使cleaved caspase-3、Bax表达降低、Bcl-2表达增加（P < 0.05）。而且EPA处理DM小鼠后AMPK磷酸化进一步增加,Drp1表达减少。 结论 EPA通过抑制心肌肥大及凋亡改善糖尿病诱导的心功能损伤,其机制可能与AMPK/Drp1信号相关。     

苦瓜总皂苷对心力衰竭大鼠心肌凋亡的影响

目的探讨苦瓜总皂苷对心力衰竭大鼠心功能和心肌凋亡蛋白Caspase-8、Bcl-2表达的影响。方法取清洁级雄性SD大鼠60只,适应性喂养14d后按照随机数字表法分为正常组、模型组及苦瓜总皂苷低剂量、中剂量和高剂量组,每组12只。苦瓜总皂苷低剂量、中剂量和高剂量治疗组分别给予苦瓜总皂苷10mg/(kg·d)、20mg/(kg·d)、40mg/(kg·d)皮下注射,正常组和模型组分别给予0.5mL/(kg·d)生理盐水皮下注射。全程记录大鼠精神活动状态、毛色以及饮食等一般情况,治疗8周后处死大鼠,检测心功能相关指标以及炎性因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)水平,苏木精-伊红染色(HE染色)检测心肌组织病理学改变;免疫组化、实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)、Western印迹检测心肌组织中Caspase-8和Bcl-2相关蛋白。结果正常组大鼠精神良好,饮食正常;模型组有明显精神萎靡,饮食量较低;苦瓜总皂苷低、中、高剂量治疗组较模型组上述症状明显减轻。与正常组比较,模型组平均心室舒张压(LVDP)明显升高(P 0.05),平均左室峰压(LVSP)、心室内压最大上升速率(+dp/dtmax)及平均等容舒张期室内压最大下降速率(-dp/dtmax)明显降低(P 0.05);与模型组比较,苦瓜总皂苷中、高剂量组LVDP明显降低(P 0.05),LVSP、+dp/dtmax和-dp/dtmax明显升高(P 0.05)。与正常组比较,模型组TNF-α、IL-6明显增加(P 0.05);与模型组比较,苦瓜总皂苷低、中、高剂量治疗组TNF-α、IL-6明显降低(P 0.05);HE染色可见正常组大鼠心肌细胞排列整齐,而模型组有明显心肌细胞排列紊乱,苦瓜总皂苷低、中、高剂量组心肌组织较模型组均有不同程度的改善。与正常组比较,模型组大鼠心肌组织Bcl-2蛋白表达明显下降(P 0.05),Caspase-8蛋白表达明显升高(P 0.05);与模型组比较,苦瓜总皂苷中、高剂量组Bcl-2蛋白表达均升高(P 0.05),Caspase-8蛋白表达则明显降低(P 0.05)。结论苦瓜总皂苷可以明显改善慢性心力衰竭大鼠心功能,降低炎性因子TNF-α、IL-6的表达,可能与其下调Caspase-8、上调Bcl-2表达有关。     

芹菜素与老年大鼠缺血心肌细胞凋亡及Bcl-2、Bax、Caspase-3表达的相关性

目的对芹菜素与老年大鼠缺血心肌细胞凋亡及Bcl-2、Bax、半胱天冬酶(Caspase)-3表达相关性进行研究。方法选取选择健康的老年大鼠60只,随机分为正常组、假手术组、心肌缺血再灌注组和不同剂量芹菜素组各10只。制作缺血再灌注模型采用结扎左冠状勤脉前降支,心肌缺血30 min,再灌注2 h。假手术组只穿线不结扎,余各组在缺血前10 min股静脉分别注射生理盐水、聚乙二醇、低剂量、中剂量、高剂量芹菜素,检测缺血心肌细胞凋亡及Bcl-2、Bax、Caspase-3表达。结果正常组和假手术组的凋亡细胞数极少;心肌缺血再灌注组的凋亡细胞数量明显的增多,芹菜素低剂量(1 mg/kg)组:Apil1、芹菜素中剂量(2 mg/kg)组:Apil2、芹菜素高剂量(4 mg/kg)组:Apil4的凋亡的凋亡细胞数下降,其中芹菜素高剂量(4 mg/kg)组:Apil4的凋亡细胞数下降明显。心肌缺血再灌注组的Bcl-2、Bax、Caspase-3、AR与正常组、假手术组、芹菜素高、中、低剂量组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。芹菜素低剂量组Bcl-2、Bax、Caspase-3、AR与正常组、假手术组、心肌缺血再灌注组、芹菜素高剂量组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。芹菜素中剂量组Bcl-2、Bax、Caspase-3、AR与正常组、假手术组、心肌缺血再灌注组、芹菜素高剂量组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。且芹菜素低剂量组的Bax、AR与芹菜素中剂量组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论芹菜素与缺血心肌细胞凋亡及Bcl-2、Bax、Caspase-3表达存在相关性,且芹菜素可以减轻心肌损伤。     

体外心脏震波对大鼠心肌梗死后心肌凋亡的影响

目的研究体外心脏震波治疗(CSWT)对大鼠心肌梗死后(MI)心肌细胞凋亡及凋亡蛋白的影响。方法结扎大鼠左冠状动脉前降支建立大鼠急性心肌梗死模型,随机分为假手术(Sham)组(n=10)、MI组(n=10)及CSWT组(n=10)。CSWT治疗4 w后,取各组心肌样本进行TUNEL检测观察心肌细胞凋亡,Masson染色观察心肌纤维化,Western印迹检测Bax、Bcl-2和Caspase-3蛋白表达。结果与Sham组相比,MI和CSWT组心肌细胞凋亡指数及纤维化程度均增高,Bax和Caspase-3表达显著上调,Bcl-2表达明显下调(P0.05);而CSWT组较MI组,心肌细胞凋亡指数及纤维化程度均降低,Bax和Caspase-3表达下调,Bcl-2则表达上调(P0.05)。结论大鼠心肌梗死后心肌凋亡明显增加,体外心脏震波可抑制大鼠心肌梗死后细胞凋亡,减轻左心室纤维化。     

梓醇对衰老大鼠血管内皮细胞的保护作用研究

目的探讨梓醇对D-半乳糖诱导的衰老大鼠血管内皮细胞的保护作用及对内皮细胞凋亡率及凋亡相关基因Bcl-2、Bax、Caspase-3表达的影响。方法选取3月龄Wistar大鼠32只,随机抽取8只作为正常组,余24只腹腔注射D-半乳糖复制衰老模型。造模成功后随机分为模型组、低剂量组[梓醇5 mg/(kg·d)腹腔内注射]和高剂量组[梓醇10 mg/(kg·d)腹腔内注射]3组,每组8只。12周后处死大鼠。显微镜下观察大鼠主动脉血管内皮细胞的形态学改变; TUNEL法原位标记凋亡的血管内皮细胞,计算细胞凋亡率;免疫组化法检测大鼠主动脉血管内皮细胞Caspase-3蛋白的表达; RT-PCR法检测Bcl-2及Bax的表达,并计算Bcl-2/Bax的比值。结果 D-半乳糖所致衰老大鼠主动脉血管内皮细胞出现明显病理学改变,与模型组比较,梓醇低剂量组及高剂量组均能明显改善大鼠主动脉血管内皮细胞的病理损害。模型组主动脉血管内皮细胞凋亡率明显高于正常组(P 0.01),梓醇低剂量组与高剂量组细胞凋亡率均明显低于模型组(P 0.01)。模型组Bcl-2的表达量明显低于正常组(P 0.01),而高剂量组Bcl-2的表达量明显高于模型组;模型组Bax的表达量明显高于正常组(P 0.01),高剂量组明显低于模型组;模型组Bcl-2/Bax比值明显低于正常组,梓醇低剂量组与高剂量组均能明显提高Bcl-2/Bax比值,与模型组比较差异有统计学意义(P 0.05或P 0.01);模型组Caspase-3蛋白表达明显高于正常组,而低剂量组与高剂量组Caspase-3蛋白表达均明显低于模型组(P 0.01)。结论梓醇能保护D-半乳糖所致衰老大鼠主动脉血管内皮细胞的形态学损害。梓醇的抗衰老作用可能与梓醇能抑制主动脉内皮细胞促凋亡基因Bax及Caspase-3的表达,促进抗凋亡基因Bcl-2的表达,同时上调Bcl-2/Bax比值有关。提示梓醇能抑制D-半乳糖诱导的衰老大鼠的血管内皮细胞凋亡,从而起到保护血管内皮细胞、延缓衰老的作用。梓醇的抗血管衰老作用呈现一定的剂量依赖性。     

丹参多酚酸盐对大鼠心肌缺血再灌注后心肌细胞凋亡的抑制作用及机制研究

目的研究丹参多酚酸盐对大鼠心肌缺血再灌注损伤后心肌细胞凋亡的抑制作用及其机制。方法通过夹闭左冠状动脉前降支复制心肌缺血再灌注大鼠模型,设假手术组、模型组和丹参多酚酸盐各剂量组(分别予10mg/kg、20mg/kg、40mg/kg),每组20只。观察心电图波动情况,2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)染色法检测心肌梗死面积;苏木素-伊红(HE)染色法进行心肌组织病理学检查;缺口末端标记法(TUNEL)观察心肌细胞凋亡,蛋白质免疫印迹(western blotting)法检测其凋亡相关蛋白表达。结果与模型组比较,丹参多酚酸盐各剂量组心电图明显改善。与假手术组比较,模型组大鼠心肌组织梗死面积明显升高(P <0.01);丹参多酚酸盐20mg/kg组、40mg/kg组大鼠心肌组织梗死面积较模型组显著降低(P <0.05或P <0.01)。丹参多酚酸盐各剂量组大鼠心肌组织病变较模型组明显改善。模型组大鼠心肌细胞凋亡指数(AI)较假手术组显著升高(P <0.01);丹参多酚酸盐20mg/kg组、40mg/kg组AI较模型组显著降低(P <0.05或P <0.01)。模型组大鼠心肌组织Bcl-2、Bax蛋白、激活型Caspase-3蛋白较假手术组显著上调表达(P <0.05或P <0.01),Bcl-2/Bax比值较假手术组显著降低(P <0.01)。与模型组比较,丹参多酚酸盐20mg/kg组、40mg/kg组抑凋亡蛋白Bcl-2表达显著上调,促凋亡蛋白Bax表达显著下调(P <0.05或P <0.01),Bcl-2/Bax比值提高(P <0.01),促凋亡蛋白激活型Caspase-3蛋白表达显著下调(P <0.05或P <0.01)。结论丹参多酚酸盐对缺血再灌注后心肌细胞凋亡具有抑制作用,而调节凋亡相关蛋白(Bcl-2、Bax、激活型Caspase-3)表达可能是其重要的分子机制。