兔珠蛋白mRNA的简易提取方法

建立了一种提取兔珠蛋白mRNA的简易方法,省去了提取核糖体的步骤,提取的mRNA制品在酸性脲素琼脂糖凝胶电泳上显示9S带(珠蛋白mRNA),其体外转译产物中含珠蛋白。     

骨髓的体外净化并自身移植5例报告

我们用单克隆抗体(McAb)和兔补体体外净化骨髓中残留白血病细胞后对5例普通型急性淋巴细胞性白血病(CALL)患者进行了自身骨髓移植(ABMT)。抽出的骨髓细胞经McAb55加兔补体两次处理后,CALL抗原(CALLA)阳性细胞清除率可达2～3个对数级,骨髓有核细胞及CFU-GM回收率分别为48.7％～96.9％和39.5％～95.7％。外周血白细胞于移植后11～16d开始回升,14～29d升至1×10~9/L以上。23～53d出洁净室。例3于移植后4个月白血病复发, 8.2个月死亡。另4例无病活存分别为19~+、18~+、12~+和6~+个月,远期疗效正在定期随访中。     

网织红细胞计数质控物的研制

本室采取给兔注射苯肼,人为使兔贫血,获得富含网织红细胞(reticulocyte,Ret)的兔血。经7mmol/L中性红活体染色后,用0.5％戊二醛固定细胞,试制Ret计数质控物。质控物制片后,用14mmol/L中性红复染,常规Ret计数质控。本文质控物标定值为:RBC(x±2S)=(2.65±0.15)×10~(12)/L,CV=2.8％;Ret(x±2S)=(169.80±42.40×10~9/L,CV=12.5％。经6个月稳定性观察结果显示,此质控物4℃保存半年,稳定性好,适用于常规计数Ret的室内室间质量评价。     

一种简易冷冻保存细胞方法

本实验介绍一种简易分段冷冻保存细胞的方法,即将0.5～1×10~7细胞悬浮于4℃细胞冷冻液(10%DMSO,30%小牛血清,60%RPMI-1640)1ml,并置于冷冻管中。将此管置于-8℃～-12℃甲醇冰浴(甲醇:冰块=1∶1v/v),5～10min后用2～3cm厚棉垫将此管包裹,置于国产生物液氮容器颈部-70℃处4h,最后投入液氮中。细胞复苏时,将此冷冻管置于37℃水浴中,一俟细胞悬液溶化,立即加入RPMI-1640培养液中并离心沉淀,将沉淀细胞悬浮含10%小牛血清RPMI-1640培养液中待用。用此冷冻人骨髓细胞,CFU-C回收率常高于60%。     

抗结核杆菌单克隆抗体的产生和部分特性的研究

5株单克隆抗体(Mcab)培养液的抗体滴度为1∶10~(2.5～3.5),腹水和血清的抗体滴度1∶10~(5.5～7.5),用标准血清鉴定证实,此抗体为小鼠免疫球蛋白的亚类,分别为IgG_(2b)、IgG_1、IgG_(2a)(2株),1株未定。染色体计数为108～116。用结核菌抗原吸收后再进行检测。其Mcab活性部分基本上可被相关抗原吸收,显示出其特异性。用ELISA法检测6种分枝杆菌PPD抗原,筛选出抗体滴度较高,具有特异性TB-15_(c3)杂     

重离子诱发的细胞恶性转化

本文报告了~(14)N和~4He离子束所致离体早代金黄地鼠胚胎细胞(GHE)的杀伤作用和转化作用.并与~(60)Coγ射线进行了比较.以胰酶消化的第13～14天GHE为靶细胞,在含有10%胎牛血清的Eagle's MEM培养基内37℃、5%CO_2条件下培养.重离子源由回旋加速器产生.样品处的离子能量和LET值分别是:3.1MeV/amu和530 keV/μm(~(14)N)、4.2 MeV/amu和36keV/μm(~4He)、1.7 MeV/amu和77kcV/μm(加铝吸收板的~4He).剂量的变化范围是:0.7～1.0Gy/min(~(14)N)、1.0～2.6Gy/min(~4He).~(60)Coγ射线的     

眼睑基底细胞和鳞状细胞癌的放疗

1958～1978年间多伦多Margaret 皇家医院用100～250KVX 线或~(60)Coγ线其放疗了1166例有病理诊断的眼睑癌。其中,基底细胞癌1062例,鳞癌104例;多数肿瘤直径小于2cm,51例肿瘤直径于5cm 或肿瘤累及软骨、骨和肌肉等;418例为     

细胞移植术治疗兔下肢缺血模型的影像学评价

目的:利用血管内皮生长因子(VEGF_(165))基因转染体外诱导的血管内皮祖细胞(EPCs)治疗慢性下肢缺血兔模型,探讨CTA、DSA及多普勒超声检查对缺血下肢侧支循环形成评价的敏感性,并比较各种检查方法的差异性。方法:①制作高脂血兔,梯度离心法分离兔骨髓单个核细胞(MNCs),用内皮细胞专业培养基(EGM-2)诱导培养EPCs,脂质体介导转染携带增强型绿色荧光蛋白EGFP标记的VEGF_(165)质粒转染EPCs,流式细胞仪检测整体转染率。②制作兔单侧下肢缺血模型,随机分为A、B、C组,分别移植注射未转染EPCs(EPCs组)、VEGF_(165)转染的EPCs(EPC/VEGF组)、EGM-2培养基(EGM-2组),多种方法检测移植效果。结果:①自兔骨髓诱导出的梭形贴壁细胞为EPCs。②流式细胞仪检测其总体转染率约22.5%。③DSA、CTA、多普勒超声及免疫组化显示移植基因修饰后的EPCs组比未转染EPCs组能更好地促进缺血肢体新生血管形成,改善缺血肢体血运。DSA较CTA对新生血管显示更清晰,各处理组内对2种检查结果进行比较,结果均具有统计学意义(P0.05)。结论:CTA、DSA及多普勒超声均能客观评价缺血下肢侧支循环建立情况,DSA对新生血管的显示上优于CTA,但DSA为有创检查,技术要求高,CTA为无创性检查,对缺血下肢评价时宜首选CTA检查,超声多普勒用于对治疗效果的长期随访。     

高压氧对实验性减压病兔肺间质细胞增生的影响

目的 探讨高压氧(HBO)对实验性减压病兔肺间质细胞增生的影响.方法 将38只实验兔放入加压舱中,于5 min内用压缩空气加压至0.6 MPa,停留60 min,然后于3～5 min内减至常压.HBO-1次组出舱后1 h接受HBO治疗1次,HBO-4次组出舱后1 h至3 d每天接受HBO治疗1次(0.25 MPa),共4次;减压病对照组:出舱1 h至3 d,每天暴露舱内常压空气1次,共4次;常氧高压氮组:出舱1 h至3 d,每天暴露常氧高压氮1次(0.25 MPa),共4次;健康对照组:暴露于常压空气中常规饲养3 d,无特殊处理.结果(1)减压病兔组肺间质细胞增生标记指数明显高于空白对照组(P<0.01);(2)HBO-1次组肺间质细胞增生标记指数高于HBO-4次组(P<0.05);(3)减压病兔HBO-1次和HBO-4次组肺间质细胞增生标记指数低于减压病对照组及常氧高压氮组(P<0.05).结论(1)快速减压可造成急性肺损伤,表现为肺间质细胞增生;(2)HBO对减压病兔的肺间质细胞增生有抑制作用,从而促进急性肺损伤后的修复,且多次HBO治疗疗效优于单次治疗.     

^31P—极化转移技术用于测定VX,梭曼,沙林及其降解产物

本文研究了以~1H核为极化转移源,用无畸变脉冲序列测定VX、梭曼、沙林及其降解产物中~(31)P-NMR谱的条件,发现在JNM-GX-400型超导傅里叶变换NMR仪上,~1H反转角θ为0.18π时~(31)P-NMR谱的信噪比最佳.据此建立了~(31)P-极化转移(~(31)P-DEPT)法.体外实验表明,该法用于测定血液和尿液中微量的神经性毒剂的降解产物具有简便和专一性强的特点.