片仔癀对脑梗死大鼠ZO-1、MMP-9蛋白及mRNA表达的影响

目的 观察片仔癀对局灶性脑梗死大鼠ZO-1、MMP-9蛋白及mRNA表达的影响.方法 采用改良Zea-Longa方法制备MCAO模型,SD大鼠35只随机等分为假手术组、模型组、片仔癀大剂量组、片仔癀中剂量组、片仔癀小剂量组、脑得生组及尼莫地平组.造模后给药观察至第7天取材.行Western blot及荧光定量PCR检测.结果 模型组ZO-1蛋白及mRNA表达较假手术组显著降低(P<0.01),片仔癀大剂量组、尼莫地平组及脑得生组ZO-1表达较模型组显著升高(P<0.05),片仔癀大剂量组较片仔癀小剂量组有统计学意义(P<0.05).模型组MMP-9表达较假手术组显著升高(P<0.01),片仔癀大剂量组、尼莫地平组及脑得生组MMP-9表达较模型组显著降低(P<0.05);片仔癀大剂量组较片仔癀小剂量组差异显著(P<0.05).结论 ZO-1、MMP-9参与了脑梗死后神经损伤,片仔癀可以上调脑梗死后ZO-1,下调MMP-9蛋白及mRNA水平表达,具有脑保护的作用.     

片仔癀对局灶性脑梗死大鼠BDNF和IL-6蛋白表达的影响

目的观察片仔癀对局灶性脑梗死大鼠模型脑源性神经营养因子(BDNF)和白细胞介素-6(IL-6)蛋白表达的影响。方法采用改良的Longa法制备大脑中动脉栓塞(MCAO)模型,SD大鼠随机分为7组:假手术组、模型组、脑得生组、尼莫地平组及片仔癀大、中、小剂量组。通过免疫组化方法检测脑组织BDNF和IL-6的蛋白表达,HE染色观察脑组织的病理损伤情况。结果在梗死中心区,模型组的BDNF和IL-6蛋白表达显著低于假手术组(P<0.01),片仔癀各剂量组的BDNF和IL-6蛋白表达均高于模型组(P<0.05或P<0.01);在梗死周围区,模型组BDNF和IL-6蛋白表达均较假手术组显著升高,片仔癀各剂量组BDNF的蛋白表达均高于模型组(P<0.01),而IL-6蛋白表达均低于模型组(P<0.05)。片仔癀大、中剂量组的脑组织病理形态较模型组有明显改善。结论片仔癀可以上调局灶性脑梗死后大鼠BDNF的蛋白表达水平和下调IL-6蛋白表达,减轻脑缺血导致的神经功能损伤。     

三七总皂甙对脑出血后大鼠脑水肿及水通道蛋白-4表达的影响

目的观察三七总皂甙对脑出血大鼠脑水肿形成及水通道蛋白-4(AQP4)表达的影响。方法Wistar大鼠198只随机分为A、B、C 3个部分,分别检测脑含水量、AQP4蛋白和AQP4 mRNA,每部分又随机分为假手术组,模型组,治疗组,采用干湿重法、免疫组织化学染色、逆转录聚合酶链反应技术分别测定脑含水量、AQP4蛋白和AQP4 mRNA的表达。结果治疗组和模型组12 h之后脑含水量增加(P<0.05),1天时脑含水量明显增加(P<0.01),3天时脑含水量达到高峰并持续到5天,在相同的时间点,治疗组脑含水量比模型组明显少(P<0.05);模型组和治疗组12 h之后AQP4蛋白和AQP4 mRNA表达水平增加(P<0.05),1天时明显升高(P<0.01),3天达到高峰持续至5天,以后逐渐下降,与模型组比较,治疗组大鼠在各时间点AQP4蛋白、AQP4 mRNA均在低水平表达(P<0.05),1-5天表达水平明显下降(P<0.01)。结论三七总皂甙可能通过抑制AQP4的表达减轻脑出血后脑水肿的形成。     

活血通络方对脑缺血再灌注损伤大鼠的神经保护作用研究

目的:探讨活血通络方对脑缺血再灌注大鼠损伤的神经保护作用及其机制。方法:将50只雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、阳性对照组、活血通络方低剂量组、活血通络方高剂量组,每组10只。假手术组和模型组给予生理盐水10 mg/(kg·d)灌胃;阳性对照组给予尼莫地平混悬液9.375 mg/(kg·d)灌胃;活血通络方低剂量组、高剂量组分别给予活血通络方水体液6.25 g/(kg·d)、25 g/(kg·d)灌胃。连续灌胃2周后,评估大鼠神经功能,蛋白免疫印迹法测定紧密连接蛋白-1(ZO-1)和闭合蛋白表达水平,免疫组化法检测基质金属蛋白酶-2(MMP-2)和水通道蛋白4(AQP4)含量。结果:与假手术组比较,模型组及各用药组神经功能评分均明显升高(P<0.05);与模型组比较,各用药组神经功能评分均明显降低(P<0.05);与活血通络方低剂量组比较,阳性对照组和活血通络方高剂量组神经功能评分均明显降低(P<0.05)。与假手术组相比,模型组及各用药组ZO-1蛋白和闭合蛋白表达均明显降低,MMP-2和AQP4水平明显升高(P<0.05);与模型组相比,各用药组ZO-1...     

β-七叶皂甙钠对大鼠缺血性脑水肿及水通道蛋白4表达的影响

目的研究β-七叶皂甙钠对大鼠脑梗死后脑水肿及水通道蛋白4（AQP4）表达的影响。方法取SD雄性大鼠150只,体质量240～300g。随机分为β-七叶皂甙钠治疗组60只,对照组60只,假手术组30只。各组大鼠又按缺血时间不同（6h和1、3、5、7d）分为5个亚组,其中治疗组和对照组每亚组各12只,假手术组每亚组6只。用线栓法制作大鼠大脑中动脉缺血模型,向治疗组大鼠腹腔注射β-七叶皂甙钠（5mg·kg-1.d-1）,对照组及假手术组在相应时间点注射等量等渗盐水。于造模后6h和1、3、5、7d断头取脑。采用干湿重法观察脑水肿的动态变化,通过HE染色观察脑梗死区的病理学变化,应用免疫组化方法检测脑组织AQP4的表达。结果①脑梗死后6h,病变侧大脑半球脑含水量开始增多,至3d时达高峰,以后逐渐下降,7d时仍高于假手术组。治疗组及对照组脑含水量组内不同时间点比较差异均有统计学意义（F=30.704,F=36.703,均P〈0.01）;各时间点治疗组及对照组梗死侧大脑半球脑含水量均明显高于假手术组（均P〈0.01）,治疗组均低于对照组（P〈0.05～0.01）。②脑梗死后6h,梗死侧AQP4表达水平即增高,3d时达高峰,以后逐渐下降,7d时仍高于假手术组;治疗组和对照组各组内各时间点比较差异均有统计学意义（F=20.878,F=28.489,均P〈0.01）。治疗组及对照组各时间点AQP4的表达均高于假手术组（均P〈0.01）,治疗组AQP4的表达均明显低于对照组（P〈0.05～0.01）。AQP4表达水平与脑含水量呈正相关（r=0.972,P〈0.001）。结论β-七叶皂甙钠能明显减轻脑梗死后脑水肿及降低AQP4的表达,β-七叶皂甙钠可能通过抑制AQP4的表达而减轻脑水肿。     

恒清方对脑缺血再灌注损伤的保护作用研究

目的探讨恒清方对脑缺血再灌注损伤的保护作用及其机制。方法将48只雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、恒清方低剂量组、恒清方中剂量组、恒清方高剂量组和尼莫地平组,各8只。造模前1周灌胃给药(低剂量、中剂量、高剂量恒清方或尼莫地平),假手术组与模型组给予等体积生理盐水。末次给药30 min后,建立大鼠大脑中动脉局灶性栓塞(MCAO)模型,造模1.5 h再灌注24 h后,评估大鼠神经功能,测定脑指数、脑含水量、脑梗死面积,采用酶联免疫吸附法测定(ELISA)检测脑组织超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)及血清白介素-6(IL-6)、白介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子(TNF)水平。结果恒清方可降低大鼠神经功能评分、脑指数、脑含水量(P0.05或P0.01),减小脑梗死面积(P0.05或P0.01),提高脑组织SOD活性(P0.05或P0.01),降低MDA、NO水平(P0.05或P0.01),降低血清IL-6、TNF、IL-1β水平(P0.05或P0.01),且量效关系呈正相关,高剂量恒清方作用优于尼莫地平(P0.05)。结论恒清方可改善大鼠脑缺血再灌注损伤,且量效关系呈正相关,其机制可能与抑制炎症反应和抗氧化作用有关。     

大鼠脑缺血再灌注后脑组织水通道蛋白4的表达及丹参川芎嗪干预作用的研究

目的探讨水通道蛋白4(AQP4)在大鼠脑缺血再灌注后的表达及丹参川芎嗪的干预作用。方法选择健康大鼠100只,随机分为假手术组,模型组,低剂量药物干预组(低剂量组),高剂量药物干预组(高剂量组),每组25只。各组大鼠又按术后时间(6、24 h和3、5、7 d)分为5个亚组,每亚组5只。分别对大鼠进行Longa评分,干湿重法测定脑组织含水量;免疫组织化学法检测脑组织AQP4的表达。结果术后大鼠行为异常,3 d最明显,7 d恢复至术前水平。在同时间点,与假手术组比较,低剂量组、高剂量组和模型组大鼠脑组织含水量、AQP4表达明显升高(P<0.01);与模型组比较,低剂量组、高剂量组脑含水量、AQP4表达明显降低(P<0 01),高剂量组明显低于低剂量组(P<0.01)。而模型组、低剂量组、高剂量组各时间点比较,差异有统计学意义(P<0.01)。AQP4表达水平与脑含水量呈正相关(,=0.871,P<0.01)。结论脑缺血再灌注后,脑组织AQP4的表达变化与脑水肿的动态变化存在时间上的一致性;丹参川芎嗪可以改善大鼠神经缺损症状,减轻脑水肿,降低AQP4表达水平。     

电针对缺血再灌注大鼠脑水肿及水通道蛋白-4的影响

目的 探讨针刺治疗缺血再灌注脑水肿可能作用机制.方法 70只SD大鼠随机分为假手术组(10只)、模型组(30只)、针刺组(30只).模型组、针刺组采用线栓法制备大鼠大脑中动脉(MCA)缺血再灌模型.针刺组选取穴人中、内关、三阴交进行电针刺激.电流0.3 mA,频率15 Hz,疏密波,留针30 min.干湿重法检测大鼠脑组织含水量,免疫组织化学方法 检测大鼠水通道蛋白-4(AQP4)的表达.结果 脑组织含水量模型组较假手术组明显增多(P<0.01),针刺组较模型组有所降低(P<0.01或P<0.05).但仍高于假手术组(p<0.01或P<0.05).脑组织AQP4模型组均较假手术组增强(P<0.01);针刺组大鼠AQP4较模型组有所降低(P<0.01或P<0.05),但仍高于假手术组(P<0.01).结论 针刺治疗缺血性脑水肿的作用机制可能与其抑制脑内AQP4表达有关.     

亚麻醉浓度的七氟烷对局灶性脑缺血再灌注大鼠血脑屏障通透性的影响

目的 探讨亚麻醉浓度的七氟烷对局灶性脑缺血再灌注损伤(CIRI)大鼠血脑屏障(BBB)通透性的影响机制。方法 按照随机数字表法将40只SPF级SD雄性大鼠随机分为假手术组、模型组、实验组、对照组各10只。模型组、实验组、对照组采用线栓法制备大鼠局灶性CIRI模型，假手术组只进行穿线，不结扎；实验组每日给以1.2%七氟烷吸入治疗3 h,对照组每日给以1.08 mg/ml尼莫地平灌胃给药。2,3,5-三苯基氯化四氮唑(TTC)染色检测脑梗死面积，脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记(TUNEL)染色检测脑组织的神经元凋亡率，伊文思蓝(EB)染色检测BBB通透性，Western印迹检测各组脑组织中闭合蛋白(Occludin)、紧密连接蛋白(Claudin)-5、闭锁连接蛋白(ZO)-1蛋白表达。结果 与假手术组相比，模型组、实验组、对照组脑组织的梗死面积、细胞的凋亡率、EB渗出量明显升高(均P<0.05),脑组织中Occludin、Claudin-5、ZO-1蛋白的表达明显下降(均P<0.05);与模型组相比，实验组、对照组脑组织的梗死面积、细胞的凋亡率、EB的渗出量明显下...     

通腑醒神胶囊对MCAO大鼠脑AQP-4mRNA表达的影响

目的研究通腑法通腑醒神胶囊(TFXSJN)对大鼠大脑中动脉阻塞(MCAO)模型脑组织AQP-4 mRNA表达的影响。方法采用线栓法制作大鼠MCAO模型,2h后拔线造成缺血再灌注损伤。观察拔线后12h、1d、2d、3d及7d不同时间点大鼠神经行为评分、脑组织AQP4 mRNA的表达水平,以及各组大鼠在1d、3d及7d时脑梗死体积及脑含水量变化。结果TFXSJN治疗后能明显减轻大鼠在1d、2d、3d及7d时的神经功能评分,脑含水量3d时及3d、7d的脑梗死体积,与模型组相比有统计学意义(P<0.05或P<0.01);TFXSJN组及模型组大鼠脑组织右侧AQP-4 mRNA的表达在12h时已经明显升高,与左侧假手术及正常组相比均具有统计学意义(P<0.05)。结论AQP-4 mRNA表达的上调可能与缺血性脑水肿的形成密切相关,而TFXSJN通腑法能够调节缺血再灌注损伤后AQP4 mRNA表达的失衡状态,减轻缺血后脑水肿和脑梗死体积,减轻缺血性神经损伤,而调节AQP-4 mRNA基因的异常表达可能是TFXSJN通腑法治疗缺血性中风的分子机制之一。