应用活体内生物发光技术对人高转移大细胞肺癌细胞株L9981成瘤性和转移性研究

背景与目的应用阳离子脂质体介导的基因转染方法对nm23-H1缺失的人高转移大细胞肺癌细胞株L9981进行荧光素酶基因(Luc)标记,建立稳定高效表达荧光素酶(Luciferase)基因的人高转移大细胞肺癌细胞株L9981-Luc。应用活体生物荧光成像技术,非侵入性地连续检测小鼠(裸鼠和SCID鼠)皮下肿瘤模型发展演进、自发转移的过程。方法将带有荧光素酶基因(Luc)的质粒PGL4.17经阳离子脂质体介导转入人高转移大细胞肺癌细胞株L9981中,筛选出高效稳定表达荧光素酶的细胞株。将转染后的细胞接种于裸鼠和SCID鼠右后腿腹股沟皮下,建立皮下肿瘤模型,利用活体内可见光成像系统观察其在小鼠体内的生长和转移过程。结果转基因人高转移大细胞肺癌细胞株L9981-Luc可在体内、外持续稳定表达荧光素酶,细胞数和发光值成直线相关。成功地建立了表达荧光素酶活性的动物肿瘤皮下自发转移模型。L9981-Luc保留了原有的高转移特性。瘤重和发光强度呈直线相关。结论利用活体内生物发光技术可以非侵袭性地连续示踪肿瘤细胞在活体内的生长和转移过程,为研究肺癌侵袭转移过程及其机理和最佳治疗策略的选择提供了新的手段和工具。     

稳定表达荧光素酶的nm23-H1表达缺失人肺腺癌细胞株的构建及其体内外活性检测

背景与目的在实验动物存活条件下,通过活体成像技术能探测到标记有萤火虫荧光素酶(luc)基因的肿瘤细胞在体内的分布情况。本研究旨在稳定表达nm23-H1 shRNA的人肺腺癌细胞株A549中,建立能稳定表达萤火虫荧光素酶的发光细胞株A549/nm23-H1-shRNA-luc,并检测其体内外发光情况,为下一步相关的体内实验提供实验材料。方法通过浓度梯度法测定A549/nm23-H1-shRNA细胞的潮霉素最佳筛选浓度,将带有萤火虫荧光素酶基因的PGL4.50质粒转入A549/nm23-H1-shRNA细胞中,利用潮霉素筛选单克隆细胞株A549/nm23-H1-shRNA-luc,并采用生物发光技术对单克隆细胞株进行阳性鉴定并挑选发光最强的1个克隆分析其表达荧光素酶的稳定性。为检测A549/nm23-H1-shRNA-luc细胞在体内发光的稳定性,将A549/nm23-H1-shRNA-luc细胞接种于10只裸鼠右后腹股沟皮下之后,并随机分为两组,每组5只裸鼠,运用活体成像系统观察成像情况。结果 A549/nm23-H1-shRNA-luc细胞的潮霉素最佳筛选浓度为300 g/mL。经过潮霉素筛选所建立的A549/nm23-H1-shRNA-luc细胞株能在体外稳定表达荧光素酶,细胞数(x)和生物发光值(y)呈直线相关,回归方程是:y=3,699.9x+992,237,R2=0.975,1。为评估此细胞株在体内生物发光的稳定性,将细胞种植进入10只裸鼠并随机分成两组,结果显示体内生物发光值差异不具有统计学意义(P>0.05)。结论成功建立了能持续、稳定表达荧光素酶的A549/nm23-H1-shRNA-luc细胞株。     

蛋白质组学技术及其在肿瘤转移相关蛋白筛选中的应用

转移是恶性肿瘤的重要生物学行为，肿瘤转移过程的发生是多步骤、多因素、多基因共同参与的复杂病理过程。包括转移相关基因的突变、激活，肿瘤细胞的黏附、迁移、增殖，细胞外基质降解，组织免疫性及肿瘤血管增生因子等的变化并通过细胞基因表达调控机制的调节发生作用，最终由功能性蛋白表达来完成。近年来，蛋白质组学技术的应用和飞速发展，为生命活动的执行者一蛋白质的研究带来了广阔的前景。蛋白质组（proteome）是指细胞或组织在特定时间和空间上表达的基因组编码的全部蛋白质，蛋白质组学（proteomics）是研究细胞内全部蛋白质的组成和动态变化的一门新兴学科。     

应用生物发光活体成像技术进行抗肿瘤研究进展

摘 要：生物发光活体成像技术是基于荧光素酶报告系统进行小动物组织、细胞和分子体内行为研究的新兴生命科学技术,在抗肿瘤研究领域应用极为广泛。全文概述生物发光活体成像技术的原理、综述了生物发光活体成像在抗肿瘤研究方面应用的最新进展以及发展趋势,为应用该技术进行抗肿瘤领域研究提供参考。     

活体动物体内成像技术及其在生物医学中的应用进展

活体动物体内成像是近年来新兴的检测活体动物体内基因表达及细胞活动的光学成像技术，具有操作简便，直观性强的特点。这项技术包括生物发光成像和荧光成像，采用报告基因产生的生物发光、荧光蛋白质或染料产生的荧光作为体内生物光源，与新型冷CCD成像相结合，实时探测活体动物体内生理或病理条件下的细胞和分子事件。本文简要综述了活体动物体内成像技术的原理、应用领域及发展前景。     

红色荧光蛋白和荧光素酶双报告基因转基因小鼠的建立

背景与目的:活体动物体内光学成像(optical in vivo imaging)主要采用生物发光与荧光两种技术。生物发光是用荧光素酶(luciferase,Luc)基因标记细胞或DNA,而荧光技术则采用荧光报告基团(GFP、RFP、Cyt及dyes等)进行标记,利用一套非常灵敏的光学检测仪器,能够直接监控活体生物体内的细胞活动和基因行为,生物发光成像具有高的灵敏度和特异性,同时生物发光信号可用于精确定量,而荧光成像具有方便、便宜、直观、标记靶点多样和易于被大多数研究人员接受的优点。本研究基于慢病毒介导的转基因方法制备红色荧光蛋白(red fluorescent protein,RFP)和Luc双报告基因转基因小鼠(即RL转基因小鼠),将这两种技术融为一体。方法:制备携带RFP和Luc基因(简写RL基因)的慢病毒,然后将携带RL基因的慢病毒注入小鼠单细胞受精卵卵周隙以感染受精卵,胚胎移植进假孕母鼠以获得仔鼠,应用小动物活体成像仪、体视荧光显微镜和PCR等在蛋白和DNA水平上筛选和鉴定,并获得RL转基因小鼠。结果:移植卵周隙注射有慢病毒的胚胎125枚给6只假孕母鼠,其中4只假孕母鼠怀孕,共生仔鼠20只;利用小动物活体成像仪检测RFP和Luc表达,在蛋白水平证实20只F0代中,3只高表达RFP和Luc;DNA水平检测证实,3只RFP和Luc阳性的小鼠基因组中确实整合有外源转基因RL,预示基因型鉴定结果很好验证了小动物活体成像仪筛选和鉴定结果。此外,RL转基因首建鼠基因组中整合的RL转基因可稳定遗传至下一代,并能正常表达。RL转基因小鼠主要脏器均可见红色荧光和Luc信号,但不同脏器间荧光和Luc强度有差异。结论:成功制备RL双报告基因转基因小鼠,为后续研究干细胞在肿瘤发生、发展和转移中的作用和造血重构等提供双报告基因标记的各种移植用供体细胞,并对此供体细胞及其在体内衍生的细胞进行灵敏的非损伤、实时可视化体内跟踪。     

核因子-κB受体及其配体信号通路在肿瘤中的表达及其研究进展

核因子-κB受体（RANK）及其配体（RANKL）在最近十几年得到广泛研究。RANK在正常细胞和肿瘤细胞中均能高频表达。RANKL在肿瘤微环境中经常被检测到,并且在骨的重塑和免疫过程中起着关键作用。研究表明RANK和RANKL共同参与了肿瘤发生发展过程的各个阶段。RANK-RANKL信号通路主要由3个因素调节,它们分别是骨保护素（OPG）、骨保护素配体和一个能够结合RANKL的膜受体（LGR4）。本文以肿瘤转移为重点,探讨RANK-RANKL信号通路在肿瘤侵袭和转移中的意义以及以RANK-RANKL为靶点治疗肿瘤的相关研究进展。     

通过活体动物光学成像系统建立乳腺癌动物模型

目的: 通过活体动物光学成像系统建立稳定表达荧光素酶的乳腺癌裸鼠移植瘤模型.方法: 用脂质体包裹带有neo抗性基因及荧光素酶报告基因的真核表达质粒pGL4.17[luc2/neo],体外转染人乳腺癌细胞株MCF-7,将获得稳定表达荧光素酶的乳腺癌细胞株(MCF-7-luc)进行皮下接种BALB/c裸鼠及尾静脉接种SCID小鼠,建立BALB/c裸鼠皮下移植瘤模型和SCID小鼠尾静脉移植瘤模型,通过活体成像系统监测体内肿瘤的生长及转移情况.结果: 经过筛选得到1个能够用于建立裸鼠皮下移植瘤模型及SCID小鼠尾静脉移植瘤模型的稳定表达荧光素酶的乳腺癌细胞株,并成功建立了乳腺癌裸鼠皮下移植瘤模型及SCID小鼠尾静脉移植瘤模型.结论: 通过活体动物光学成像系统成功获得的稳定表达荧光素酶的乳腺癌皮下移植瘤和尾静脉移植瘤模型,为人乳腺癌的相关研究提供了一个直观、方便、灵敏和可靠的平台.     

利用荧光素酶标记的肿瘤细胞建立活体成像动物模型

目的建立稳定表达荧光素酶的人乳腺癌细胞株并构建适用于小动物活体成像系统观察的裸鼠皮下移植瘤模型。方法采用脂质体将携带荧光素酶基因的质粒转染到人乳腺癌细胞株MCF-7中,G418筛选出稳定表达荧光素酶的单克隆细胞株。扩增后接种于裸鼠,建立裸鼠皮下移植瘤模型,通过活体动物成像系统监测肿瘤的生长过程。结果获得了高水平稳定表达荧光素酶的乳腺癌单克隆细胞株,该单克隆细胞株与母细胞系MCF-7具有相似的生长特性。将稳定表达荧光素酶的克隆接种于裸鼠皮下可成瘤,小动物活体成像系统能准确监测肿瘤细胞在体内的生长过程。结论成功建立了稳定表达荧光素酶的乳腺癌单克隆细胞株。采用活体动物成像系统构建的裸鼠皮下移植瘤模型是拓展肿瘤体内生长、转移及治疗相关研究的理想模型。     

OPCML 对卵巢癌细胞抑制的体内外实验研究

 目的 探讨OPCML在体外、体内对卵巢癌细胞的影响。方法 将OPCML用重组慢病毒转导入人卵巢癌细胞A2780、OCC1和正常小鼠卵巢上皮细胞CD1。通过细胞增殖试验、细胞聚合力试验、细胞周期的分析和体内成瘤试验等来研究OPCML在卵巢癌细胞中的功能。结果 （1）OPCML能被重组慢病毒高效地转导入靶细胞，转导效率几乎迭100％，同时达到稳定的表达，Western blot能检测到OPCML（60kDa）和GFP（27kDa）基因蛋白在靶细胞中的表达；（2）在A2780细胞系，转导入OPCML后的细胞（A2780-OPCML）的增殖明显的比未转基因（A2780）或仅转空载体（A2780-pWPI）者慢（P〈0．01），但在OCC1和CD1细胞系，OPCML对细胞的增殖无明显的影响（P〉0．05）；（3）用流式细胞仪法对细胞周期分析显示，OPCML对A2780的细胞周期有明显的滞留作用（P〈0．05），但对OCC1、CD1细胞则无明显滞留作用；（4）细胞聚合力试验提示OPCML能明显增强细胞的粘附力；（5）表达OPCML的A2780细胞在裸鼠皮下仅有一个（1／4）有肿瘤生长，体积显著小于A2780及A2780-pWPI组（4／4）（P〈0．001），免疫组织化学染色法能够检测到OPCML蛋白在肿瘤组织中的表达。结论 慢病毒载体作为转基因的工具，具有高效转导率和稳定表达的特点；OPCML能够增加细胞的粘附能力，抑制A2780的增殖和体内成瘤，提示OPCML可能是一个新的抑癌基因。     

人肺癌裸小鼠模型活体成像的动态观察

目的:建立稳定表达绿色荧光蛋白的人肺癌细胞系,并探讨小动物活体荧光成像系统在肺癌皮下移植瘤模型中的应用.方法:用慢病毒转染的方法建立表达绿色荧光蛋白的人肺癌细胞系NCI-H460-GFP,接种至裸小鼠体内建立皮下移植瘤模型,通过小动物活体成像系统连续5周观察肿瘤在小鼠皮下的动态生长情况.结果:建立了转染率接近100%的人肺癌NCI-H460-GFP细胞系,在体外及裸小鼠体内均能够长期稳定表达绿色荧光蛋白.活体荧光成像观察发现,1～4周随着肿瘤体积逐渐增大,平均荧光光子数逐渐增加;5周时随着肿瘤出现明显坏死,平均荧光光子数呈现下降趋势.结论:稳定表达绿色荧光蛋白的NCI-H460-GFP细胞系及其动物模型可以为肺癌研究提供理想的实验材料,应用小动物活体成像系统能够客观定量评价肿瘤在动物体内的生长情况.     

整合蛋白与肿瘤转移

整合蛋白与肿瘤转移魏泓（综述）肿瘤转移是一个极为复杂的多步聚过程，整个过程中都涉及到瘤细胞与其它细胞、与内皮细胞及细胞外基质粘连和解粘连的问题。因此，介导瘤细胞粘连作用的细胞表面粘连分子表达及其在转移中的作用已成为目前肿瘤研究中的热点。经过多年研究，...     

CHST13抑制肝癌细胞侵袭能力的研究

目的 通过研究磺基转移酶CHST13在人肝癌高转移细胞株MHCC97-H和人肝癌低转移细胞株MHCC97-L中的差异表达,明确其与肝癌转移的相关性,从而证实肝癌转移诊断及抗肿瘤治疗新靶点.方法 采用实时PCR、Western blot分析磺基转移酶CHST13在人肝癌高、低转移细胞株的差异表达,通过RNA干扰技术干预CHST13基因,检测干扰前后MHCC97-L细胞的体外侵袭力及体内成瘤性.结果 CHST13在人肝癌高、低转移细胞株中表达具有明显差异;下调MHCC97-L细胞中CHST13基因表达后,穿过基底膜的细胞数量[（30±3）个]明显多于未处理组[（14±2）个],体外侵袭力显著增强（t=2.8,P=0.005）;相对于正常细胞[（0.5±0.06）g],干扰后细胞的肿瘤平均重量[（0.9±0.10）g]明显增大,体内成瘤性明显提高（t=2.5,P=0.01）.结论 磺基转移酶CHST13与肝癌细胞的侵袭、成瘤性密切相关,其有望成为肝癌临床治疗的新靶点.     

Livin反义寡核苷酸对人乳腺癌细胞株MCF-7增殖和凋亡影响的研究

目的：探讨Livin mRNA反义寡核苷酸（ASODN）对人乳腺癌MCF-7细胞抑制增殖及诱导凋亡的影响。方法：设计合成特异性的Livin硫代磷酸ASODN及其对照错义寡核苷酸（MSODN），脂质体转染至培养的MCF-7细胞。采用MTT法检测Livin ASODN对MCF-7细胞的增殖抑制作用，RT-PCR检测Livin mRNA的表达水平，电镜、流式细胞仪与吖啶橙／溴化乙锭（AO／EB）细胞染色法检测细胞凋亡水平和形态学改变。结果：Livin ASODN在终浓度为600nmol／L作用MCF-7细胞48h时，能明显地抑制其增殖（IC50=604.4），降低Livin mRNA的表达;电镜、流式细胞仪与A0／EB细胞染色法则表明MCF-7细胞在形态学上出现明显的凋亡改变，细胞凋亡率显著增加，而对照组寡核苷酸未见抑制效应。结论：Livin ASODN能够特异性下调MCF-7细胞中Livin基因表达，在诱导肿瘤细胞凋亡、抑制增殖中发挥重要作用。     

热激蛋白在乳腺癌细胞中的表达及其意义

目的：探讨热激蛋白（heat shock protein，HSP）90、70、27在高转移性乳腺癌细胞株MDA—MB-435s和MDA—MB-231中的表达情况及其意义。方法：MTT法检测HSP90抑制剂geldanamycin（GA）对2株乳腺癌细胞株粘附基质胶能力的影响；侵袭小室重组人工基底膜侵袭实验检测HSP90抑制剂GA对2株细胞的侵袭能力的影响；RT—PCR和Western blot实验检测2株细胞中HSP90、HSP70和HSP27mRNA及其蛋白质水平的表达差异。结果：GA能够明显抑制MDA—MB435s和MDA-MB-231细胞粘附基质胶的能力（P〈0．01）；2株高转移性乳腺癌细胞株的侵袭能力比较无显著性差异（P〉0．05），GA能够明显抑制2株乳腺癌细胞的侵袭能力，与对照组相比，MDA—MB-231细胞侵袭能力下降（P〈0．05），MDA-MB-435s细胞的侵袭能力下降更为明显（P〈0．01）。MDA—MB-435s细胞中HSP90蛋白质和HSP90αmRNA表达水平都明显高于MDA-MB-231细胞（P〈0．01），MDA-MB-435s和MDA—MB-231细胞中HSP90βmRNA表达水平没有显著差异（P〉0．05）；MDA-MB-231细胞中HSP27的mRNA和蛋白质的表达水平均明显高于MDA—MB-435s细胞（P〈0．01）；MDA-MB-435s细胞中HSP70蛋白质的表达水平与MDA-MB-231细胞没有显著性差异（P〉0．05），HSP70mRNA表达水平低于MDA—MB-231细胞（P〈0．05）。结论：HSP表达特性与乳腺癌细胞的粘附、侵袭能力相关；MDA—MB-435s细胞中HSP90较高水平表达，MDA-MB-231细胞中HSP27表达水平较高。     

香加皮三萜类化合物抑制食管癌Eca109细胞裸鼠成瘤及其机制

目的： 研究香加皮三萜类化合物（triterpenes compound extracted from cortex periplocae,TCCP）对荧光素酶（luciferase）标记的人食管鳞癌细胞株Eca109（Eca109-luc细胞）在裸鼠体内成瘤的作用及其机制。 方法： Eca109-luc细胞经皮下接种裸鼠,构建Eca109-luc细胞裸鼠移植瘤模型,观察TCPP治疗后移植瘤体积和质量的变化,应用活体成像系统观察移植瘤生长情况,H-E染色观察移植瘤组织形态学变化,流式细胞仪检测移植瘤细胞的凋亡,Western blotting检测移植瘤组织中survivin的表达。 结果： TCPP在体内能明显抑制裸鼠Eca109-luc移植瘤的生长,移植瘤体积和质量明显减少,抑瘤率为40.7%。TCPP 治疗组小鼠移植瘤组织出现明显炎性细胞浸润及肿瘤细胞坏死,移植瘤细胞的凋亡率明显高于大豆油对照组（P<005）,移植瘤组织中survivin蛋白表达水平明显下降（P<0.05）。 结论： TCCP在体内能抑制人食管癌Eca109细胞的生长,其作用机制可能与下调survivin的表达诱导肿瘤细胞凋亡有关。     

ERK参与裸鼠体内辛伐他汀诱导K 562细胞凋亡的调控作用

目的：探讨辛伐他汀（simvastatin）作用于裸鼠体内K562细胞后Ras-MAPK信号转导通路胞外信号调节激酶（extracellular signal—regulated protein kinase，ERK）分子水平的变化，以说明ERK参与裸鼠体内辛伐他汀诱导K562细胞凋亡的调控作用。方法：体外培养慢性髓细胞白血病（CML）细胞株K562细胞，构建BALB／c-nu／nu裸鼠的K562细胞移植瘤模型。流式细胞术（FCM）检测对照组和两个辛伐他汀处理组的K562细胞周期变化，TUNEL法检测K562细胞晚期凋亡情况。采用RT-PCR检测K562细胞中Ras-MAPK信号通路N-Ras、ERK1mRNA的差异表达。免疫组织化学标记葡聚糖聚合物（labbled dextran polymer，LDP）法检测P-ERK蛋白水平变化。结果：辛伐他汀能够明显抑制裸鼠K562移植瘤组织的增长，随着辛伐他汀剂量的增加，K562细胞移植瘤体积和质量明显减小（P〈0．05，P〈0．01）。每次注射0．05mg的辛伐他汀能够诱导裸鼠体内K562细胞发生明显的G0／G1期停滞，不同剂量的辛伐他汀能够诱导K562细胞发生明显的凋亡，并随剂量的增加，凋亡率逐渐增高（P〈0．01）；不同剂量的辛伐他汀能够引起N-Ras、ERK1mRNA的表达下调（P〈0．01）。与对照组相比，两个处理组的p-ERK蛋白分别出现表达下调（P=0．01，P〈0．01）。结论：辛伐他汀在体内可能依赖Ras—MAPK信号转导通路ERK基因和蛋白水平的表达下调诱导K562细胞凋亡发生。     

短发夹状RNA抑制子宫颈癌CaSki细胞HPV 16 E7基因的研究

目的：研究短发夹状RNA（short hairpin RNA，shRNA）构建的人乳头瘤病毒（human papillomavirus，HPV）16E7siRNA表达载体转染宫颈癌细胞株CaSki细胞后，在体内外对CaSki细胞E7基因的抑制作用。方法：利用脂质体将构建有HPV16E7特异性小干扰RNA（small interfering RNA，siRNA）的表达载体P1、P2、P3转染CaSki细胞，以实时荧光定量RT—PCR及流式细胞仪检测不同时间点E7mRNA和蛋白的变化，并将载体P1转染后的细胞接种到裸鼠皮下，4周后观察裸鼠体内皮下移植瘤体积和质量的差异，并用免疫组化检测瘤体组织中E7蛋白的表达变化。结果：表达载体P1、P2、P3均能抑制Caski细胞E7mRNA和蛋白的表达。其中载体P1抑制作用最强，在抗性克隆形成后1周，对E7mRNA和蛋白的抑制率分别为92．86％、84．21％；在抗性克隆形成后4周，抑制率仍分别为68．95％、62．50％。在接种后4周载体P1组裸鼠体内皮下移植瘤的体积和重量明显小于空载体组和对照组，同时E7蛋白的表达也被有效抑制，抑制率为74．75％。结论：构建有shRNA的E7siRNA表达载体在体内外可明显抑制E7基因的表达。     

糖基因和N-糖链介导入肝癌细胞转移及耐药性的研究

目的通过研究糖基因、N-糖链在人肝癌高、低转移细胞株MHCC97-H和MHCC97-L中的差异表达,明确二者与肝癌转移及其耐药的相关性,确证肝癌转移诊断及抗肿瘤治疗新靶点。方法采用实时荧光定量聚合酶链反应（real-time PCR）分析糖基因,异硫氰酸荧光素（FITC）-凝集素结合分析糖链的特征;通过RNA干扰技术干预差异表达的糖基因,检测干扰前后MHCC97-H细胞的体外侵袭力及其药物敏感性。进一步修饰N-糖基化（衣霉素和糖基肽酶处理）,检On,0N-糖基化修饰前后MHCC97-H细胞的体外侵袭力、体内成瘤性及药物敏感性。结果糖基因、N-糖链在人肝癌高、低转移细胞株中表达差异有统计学意义;通过特异性RNA干扰技术使MHCC97-H细胞中N-乙酰氨基葡萄糖转移酶（MGAT5）表达下调时,该细胞在体外的侵袭能力下降,药物敏感性增强（t=7．312,P〈0．05）。MHCC97．H细胞经N．糖基化修饰后在体外的侵袭能力下降,体内成瘤性受到抑制,药物敏感性增强。结论人肝癌细胞中糖基因、糖蛋白N-糖链的差异表达与肿瘤细胞的转移及其耐药密切相关,可为肿瘤化疗提供新靶点。     

尿激酶氨基末端基因抗乳腺癌细胞转移的实验研究

目的：探讨尿激酶氨基末端（ATF）基因转移对肿瘤转移的抑制作用。方法：构建重组ATF基因真核表达载体pcDNA3-ATF,用脂质体Lipofectin介导,将其导入其证明尿激酶（uPA)和尿激酶受体（uPAR）均有表达的人乳腺癌细胞系MCF－7,用Western blot检测转染细胞ATF基因的表达,体外观察并比较了野生型和转基因MCF－7细胞侵袭人工基底膜能力;裸鼠皮下接种癌细胞,复制自发性肿瘤转移模型,观察成瘤性和转移性。结果uPA／uPAR在MCF－7中有较高水平的表达;转ATF基因后,可检测到ATF的明显表达,体外侵袭穿透人工基底膜的能力明显降低,体内原位成瘤性不受影响,但自主性体肺转移能力有一定程度的下降,结论ATF基因转移后,ATF的表达可能竞争 抑制内源性uPA与uPAR的结合,在一定程度上抑制癌细胞的侵袭和转移。