HLA—B27的分型方法

本文综述了ＨＬＡ－Ｂ２７的分开型方法以及各种方法的优缺点。至今建立的ＨＬＡ－Ｂ２７分型方法有补体依赖性微量淋巴细胞毒法、流式细胞术法、玫瑰花法、等电聚焦法、酶陪免疫法和聚合酶链反应（ＰＣＲ）法。这些方法虽各有其特点，但ＰＣＲ法分型ＨＬＡ－Ｂ２７亚型将是未来的发展方向。     

应用流式细胞仪和PCR技术研究HLA—B27分型

ＨＬＡ－Ｂ２７与许多疾病相关，临床上已开始将Ｂ２７分用于某些疾病的辅助诊断。本文综述了近年来国外应用流式细胞仪和ＰＣＲ技术进行ＨＬＣ－Ｂ２７分型的研究进展。这两交传统的血清学方法有许多优越性，是未来进行ＨＬＡ－Ｂ２７分型研究的发展方向。     

HLA-B27基因检定技术

用聚合酶链反应和血清学方法检测ＨＬＡ－Ｂ２７，并进行比较。方法：采用ＰＣＲ技术７８例可疑为强直性脊椎炎患者样本的ＨＬＡ－Ｂ２７基因，并与血清学比较。结果：３６例具有Ｂ２７基因者中２４例同时作血清学试验，５例血清学难以判定结果，并与ＰＣＲ结果不一致。     

应用微量SSP法进行器官移植供受者HLA-Ⅱ类基因分型

目的：探讨应用于临床器官移植的组织配型新技术。方法：采用快速ＤＮＡ抽提技术，建立微量ＰＣＲ－ＳＳＰ－ＨＬＡ－ＤＲＢ／ＤＱＢ基因分型方法，并与单克隆抗体一步法分型结果进行对比研究。结果：应用２种方法对７３份标本进行ＨＬＡ－Ⅱ类抗原／基因分型，结果完全相符，但微量ＰＣＲ－ＳＳＰ法不但快速，需血量少，而且分辨率高。结论：微量ＰＣＲ－ＳＳＰ法具有快速，准确，省血等优点，适合在临床器官移植配型中推广应用。     

洛阳地区汉族HLA-DRB1等位基因的PCR-SSO分型

洛阳地区汉族ＨＬＡ－ＤＲＢ１等位基因的ＰＣＲ－ＳＳＯ分型张明军陈仁馨赵红人类白细胞抗原（ＨＬＡ）系统具有高度多态性，不同人种、不同民族和地区人群ＨＬＡ－ＤＲＢ１等位基因频率分布会有差异。对此差异的研究可为ＨＬＡ与疾病相关性、移植免疫及人类学研究提供有...     

采用 PCR-SSP法检测HLA-B27基因

目的：建立顺序特异引物聚合酶链反应（ＰＣＲ－ＳＳＰ）方法检测ＨＩＡ－Ｂ２７基因并与血清学方法比较。方法：设计合成Ｂ２７特异物３个和内源性阳性对照２个,建立ＰＣＲ－ＳＳＰ方法,用于Ｂ２７基因分型。血清学分型为一步法单克隆抗估方法。临床样本１００份,不源于可疑强直性脊柱炎患者。快速酚氯仿法提取模板ＤＮＡ。结果：１００例临床样本ＰＣＲ－ＳＳＰ行Ｂ２７基因分型均获成功。总耗时４ｈ。其中Ｂ２７阴性５８例,阳     

广东汉族人类风湿关节炎易感性与HLA—DRB1基因相 …

探讨ＨＬＡ－ＤＲＢ１基因与类风湿关节炎相关性。方法 采用ＰＣＲ－ＳＳＰ方法对４７例广东汉族人ＲＡ患者进行ＨＬＡ－ＤＲＢ１基因分型，并与相应人群健康者１０２例结果比较。结果 ＨＬＡ－ＤＲ１基因在ＲＡ组显著增高，ＤＲ１６在ＲＡ组也高于正常；而ＥＲ９基因在ＲＡ组显著减少。     

用PCR-SSP分析HLA-B位点血清学分型困难标本

对血清学ＨＬＡ－Ｂ位点分型困难标本用ＰＣＲ－ＳＳＰ方法分析,并寻找血清分型效果不佳原因。方法：用本室建立的ＰＣＲ－ＳＳＰ方法对１００株标准细胞及９１份血清学分型困难标本分别作ＨＬＡ－Ｂ位点分析,前者为作ＰＣＲ－ＳＳＰ方法的参考对照品。结果：１０００株标准细胞分析结果与已知结果一致;９１例疑问标本均顺利地区ＰＣＲ－ＳＳＰ分型,结果共有７０种等位基因格局,其中３６种与血学 同,占５２％,ＰＣＲ－ＳＳＰ     

用顺序特异引物聚合酶链反应技术对HLA-B基因分型

目的采用顺序特异引物聚合酶链反应技术（ＰＣＲ－ＳＳＰ）建立汉族人群ＨＬＡ－Ｂ基因分型方法。方法肾移植供受者临床样本ＤＮＡ３１９份，Ｂ基因标准系列ＤＮＡ６２份。设计合成Ｂ座位５２个特异性引物和１对阳性对照引物，组成４１个ＰＣＲ反应，建立ＰＣＲ－ＳＳＰ方法。一步法完成对Ｂ座位的基因分型。结果经双盲验证，并与血清学方法比较。结果所有临床样本和标准ＤＮＡ，ＰＣＲ－ＳＳＰ基因分型均获得成功。可准确分辨ＨＬＡ－Ｂ座位等位基因４１个，实际检出汉族人群Ｂ抗原特异性３２个。无假阳性和假阴性，４０份样本的重复率１００％，总耗时５小时。分型结果经双盲验证完全符合。与血清学分型结果比较显示：７８份血清学空白中１７例存在第二个基因，２６份血清学分型结果错误。总误差率１３．５％。结论用ＰＣＲ－ＳＳＰ技术行ＨＬＡ－Ｂ基因分型，分辨率高、特异性强、重复性好、相对简捷快速，分型结果较血清学方法更加精确可靠，适合于临床应用。     

HLA-B27基因在强直性脊椎炎中的临床应用

目的：为评价ＨＬＡ－Ｂ２７基因在强直性脊椎炎的临床诊断价值。方法：采用ＰＣＲ－ＳＳＰ地１４１例风湿性病人ＨＬＡ－Ｂ２７工与血沉、影像学Ｘ光片报告开面指标进行比较。结果：强直性脊椎炎病人组ＨＬＡ－Ｂ２７是性率６８．８％与风湿必 人组ＨＬＡ－Ｂ２７基因阳性率１１．４％,比较,Ｐ〈０．００５,有非常显著性划;强直性脊椎炎病人Ｂ２７基因阳性率６８．８％,与血沉结果升高率８７．５％比较,Ｐ〉０．０５,无显著     

一种新的HLA—II类基因分型方法——PCR／SSP技术的建立

ＰＣＲ／ＳＳＰ是一种新的基因多态性分析技术，可用于ＨＬＡ复合体及其他具有多态性特点２的基因分型。我室于１９９３年建立这种方法，并对正常人、重症肌无力患者、全身性红斑狼疮患者、骨髓移植供／受者进行了ＨＬＡ－ＤＲＢ１、－ＤＱＢ１基因型别分析。与其它ＨＬＡ基因分型方法相比，ＰＣＲ／ＳＳＰ具有简便、快速、准确及重量性好等特点。本文介绍ＰＣＲ／ＳＳＰ技术的原理、方法、特点以及常见问题的处理。     

上海地区多发性硬化症与HLAⅡ类基因和抗原处理相？…

探讨上海人群中ＨＬＡⅡ类基因和抗原处理相关基因与多发性硬化症的相关性。方法,用ＰＣＲ－ＲＦＬＰ和ＰＣＲ－ＳＳＯ技术对２１名上海地区无血缘关系的ＭＳ患者和８９名正常人作ＨＬＡⅡ类（ＨＬＡ－ＤＲＢ１,－ＤＱＡ１和－ＤＱＢ１）和抗原处理相关基因（ＴＡＰ１,ＴＡＰ２和ＬＭＰ２）分型。结果患者组ＤＲＢ１＊０４０５、Ｔ 克＊０５０２（Ｐ＝０．００２５）等位基因ＤＲＢ１＊０４０５－ＤＱＡ１＊０３０１－ＤＱＢ１＊     

HLA多态性在广东汉族人群分布的特殊性

目的探讨人类白细胞抗原（ｈｕｍａｎｌｅｕｃｏｃｙｔｅａｎｔｉｇｅｎＨＬＡ）在广东汉族群体中的遗传特征。方法采用免疫磁珠单抗血清学技术进行ＨＬＡ－Ａ、Ｂ分型和聚合酶联反应－序列特异性引物（ｓｅｑｕｅｎｃｅｓｐｅｃｉｆｉｃｐｒｉｍｅｒｓＰＣＲ－ＳＳＰ）进行ＨＬＡ－ＤＲ、ＤＱ分型,调查了４０６名广东汉族健康献血员。结果识别ＨＬＡ－Ａ、Ｂ、ＤＲ和ＤＱ座位１０６个特异性,４１４２条单倍型,发现ＨＬＡ－Ａ３３－Ｂ５８－ＤＲ１７－ＤＱ２和ＨＬＡ－Ａ２－Ｂ４６－ＤＲ９－ＤＱ９在广东汉族中呈现高频率。结论ＨＬＡ－Ａ３３－Ｂ５８－ＤＲ１７－ＤＱ２和ＨＬＡ－Ａ２－Ｂ４６－ＤＲ９－ＤＱ９,这两条单倍型在广东汉族人群中的分布频率与相关文献其他民族和人群相比为显著连锁不平衡单倍型。     

强直性脊椎炎与HLA—B27等位基因研究

为探索强直性脊椎炎与ＨＬＡ－Ｂ２７关联机理，建立非同位素地高辛杆标记的ＰＣＲ／ＳＳＯ方法对中国上海地区６８例ＨＬＡ－Ｂ２７一的强直性脊椎炎病人和７例ＨＬＡ－Ｂ２７了性正常对照进行了ＨＬＡ－Ｂ２７等位基因的检测，结果显示在病人和正常对照级中Ｂ＊２７０４都是最常见的等位基因，各占７６．８％和７１．４％，Ｂ＊２７０５亦是常见的等位基因，分别占２０．３％和２８．６％，两组间比较差异无显著性；在病人组还检出     

一种新的HLA─Ⅱ类基因分型方法——PCR／SSP技术的建立

ＰＣＲ／ＳＳＰ（Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓｐｅｃｉｆｉｃｐｒｉｍｅｒ，序列特异性引物）是一种新的基因多态性分析技术，可用于ＨＬＡ复合体及其他具有多态性特点的基因分型。我室于１９９３年建立这种方法，并对正常人、重症肌无力患者、全身性红斑狼疮患者、骨髓移植供／受者进行了ＨＬＡ－ＤＲＢ１、－ＤＱＢ１基因型别分析。与其它ＨＬＡ基因分型方法相比，ＰＣＲ／ＳＳＰ具有简便、快速、准确及重复性好等特点。本文介绍ＰＣＲ／ＳＳＰ技术的原理、方法、特点以及常见问题的处理。     

HLA-A位点PCR-SSP基因分型和血清学分型的比较

目的：建立优化ＨＬＡ－Ａ位点ＰＣＲ－ＳＰ分型方法。方法：采用普通扩增仪和Ｅｐｐｅｎｄｏｒｆ管对细胞系ＤＮＡ和３７个健康正常人进行基因分型,血清学检测采用标准淋巴细胞毒试验方法。结果：发现引物浓度和浓度比、ＤＮＡ的纯度及酶的选用,是影响ＨＬＡ－Ａ位点ＰＣＲ－ＳＳＰ分型准确性的重要因素。该方法对３７个标本的基因分型结果与血清学结果相符合。结论：ＰＣＲ－ＳＳＰ方法具有简便准确的优点,可以作为ＨＬＡ－Ａ位     

江浙沪地区HLA-DQB1基因对重症肌无力的遗传易感性研究

探讨中国汉人ＭＧ易感性与ＨＬＡ－ＤＱＢ１基因多态性的相关。方法：运用ＰＣＲ－ＲＦＬＰ法进行ＨＬＡ－ＤＱＢ１基因分型。结果：ＭＧ病例组与对照组比较都有ＤＱＢ＊０３０３频率的明显增高,ＤＱＢ＊０６０１和ＤＱＢ１＊０．６０２频率的明显降低,差异都有显著性。结论：ＤＱＢ１＊０３０３参与中国汉人ＭＧ的易感性,而ＤＱＢ１＊０６０１和ＤＱＢ１＊０６０２是保护基因。     

HLA—A,B血清学分型与DNA分型的比较

目的：比较１３６例样本ＨＬＡ－Ａ，Ｂ血清学分型与ＤＮＡ分型结果。方法：应用聚合酶链反应－序列特异性引物（ＰＣＲＳＳＰ）技术，设计３８对引物，检测常见的ＨＬＡ－Ａ，Ｂ基因。结果：１３６例样本中有６０例血清学分型与ＤＮＡ分型结构不符合（４４．１％）；ＨＬＡ－Ａ特异性血清学分型错误率在纯合子中分别占２３．３％与９．４％（共１１．２％），在ＨＬＡ－Ｂ中分别占４７．４％与１８．４％（共２０．６％）；ＨＬＡ－Ａ特异性血清学分型假阴性６．６％，假阳性２．５％，错误指认特异性２．１％，ＨＬＡ－Ｂ错异性则分别为６．７％，３．６％，１０．３％。结论：ＩＬＡ－Ａ纯合子血清学分型错误率明显高于杂合子（Ｐ〈０．０５）；ＨＬＡ－Ｂ纯合子血清学分型错误率也明显高于杂合子（Ｐ〈０．００５）；ＨＬＡ－Ｂ特异性血清学分型错误率显著高于ＨＬＡ－Ａ特     

HLA－B51与中国北方汉族中的白塞氏病相关联

对１２０例白塞氏病患者和１００名无关健康人进行了ＨＬＡ－Ａ、－Ｂ、－Ｃ、－ＤＲ和－ＤＱ抗原分型检测，并使用Ｌｙｍｐｈｏ－Ｂ－Ｋｗｉｋ分离出Ｂ－淋巴细胞进行ＨＬＡ－ＤＱ和－ＤＲ分型，用琼脂糖电泳，免疫固定等技术测定了Ｂｆ和Ｃ４同种异型。其中，５５．８３％（６７／１２０）患者中检出ＨＬＡ－Ｂ５１，而对照组仅１２％。Ｘ２和ＲＲ分别为４５．５４和９．２７（Ｐ＜０．０００５）．完全型组ＨＬＡ－Ｂ５１更为常见（６２．７９％）；除患者组的Ｃ４ＡＱ０明显高于对照组外，其它的ＨＬＡ抗原、Ｂｆ和Ｃ４同种异型无明显的组间差异。结果提示：某些内在因素，诸如免疫遗传背景（存在有与ＨＬＡ－Ｂ５１密切相关的ＢＤ易感基因）在其病因及发病机理中可能起着重要作用。     

口腔粘膜上皮细胞基因组DNA的制备及其在HLAⅡ类基…

本文介绍一种用特制的尼龙刷采集口腔粘膜上皮细胞用以制备基因组ＤＮＡ的方法。初步试验结果显示用此方法每次可获得６～１０μｇ基因组ＤＮＡ，完全能满足全套ＨＬＡⅡ类基因（ＤＲＢ１、ＤＱＡ１、ＤＱＢ１、ＤＰＡ１和ＤＰＢ１）分型的需要。ＨＬＡ－ＤＱＡ１基因分型（ＰＣＲ－ＲＦＬＰ方法）实例结果表明，以此方法获得的ＤＮＡ用于基因分型的效果与从外周血制备的ＤＮＡ相同。与常规方法相比，本方法具有简便、快速和经济的优