聚合酶链反应在小儿支原体肺炎诊断中的应用价值

为探讨ＰＣＲ在小儿支原体肺炎诊断中的实际应用价值，对４７例临床疑诊支原体肺炎的病儿做了咽拭子ＰＣＲ－ＭＰ测定，同时做了血冷凝集试验（ＣＡＴ）。结果：ＰＣＲ－ＭＰ阳性２１例，真阳性１５例，假阴性１例，敏感度为９３．８％。假阳性６例，占检测标本的１２．８％，占检测报告阳性总数的２８．６％，ＣＡＴ阳性１２例。确诊支原体肺炎１６例，其中１５例经ＰＣＲ早期确诊。结论：ＰＣＲ－ＭＰ测定有利于支原体肺炎的早期诊     

胎盘生殖道支原体感染与妊娠结局关系的研究

自1967年Ｋｕｎｄｓｉｎ[1]首先提出妇女的生殖道支原体感染可使妊娠过程恶化后,支原体感染的研究已成为国际产科领域的热点之一。生殖道6种病原体支原体中,人型支原体(Ｍｎ)、解脲支原体(Ｕｕ)已公认可致宫内感染,从而导致流产、死胎、胎膜早破、早产等不良妊娠结局,但生殖支原体(Ｍｇ)、肺炎支原体(Ｍｐｎ)、发酵支原体(Ｍｆ)是否同样存在宫内感染,国内尚未见公开报道。本文用套式ＰＣＲ法(ｎＰＣＲ)对229例产妇的胎盘进行Ｕｕ、Ｍｇ、Ｍｐｎ、Ｍｆ检测,部分阳性病例进行ＤＮＡ序列测定,以期从分子水平探讨支原体对妊娠结局的影响。资料与…     

PCR技术检测输卵管异位妊娠石蜡包埋组织支原体感染

目的：建立一种简便有效的石蜡包埋组织脱蜡及ＤＮＡ提取方法,探讨支原体感染与输卵管异位妊娠的发生是否有关。方法：应用套式聚合酶链反应技术,对５２例输卵管异位妊娠石蜡包埋组织（病例组）以及２０例输卵管结扎切除的石蜡包埋组织（对照组）进行ＰＣＲ检测。结果：病理组解脲支原体（ＵＵ）与生殖支原体阳性率分别为３８．５％及５．８％,阳性率为４４．３％;对照组Ｕ恙Ｍｇ阳性率分别为１５％及０％,阳性率１５％。两组支     

IST支原体培养与PCR解脲支原体检测方法的比较

目的：比较分析ＰＣＲ解脲支原体检测法与ＩＳＴ支原体培养法的结果及两种方法的优缺点。方法：同时采集８８例临床上诊断为非淋菌性尿道炎（ＮＧＵ）、阴道炎患者分泌物标本两份,分别用ＩＳＴ支原体培养法和ＰＣＲ解脲支原体（Ｕｕ）检测法进行对照实验和分析。结果：ＩＳＴ支原体培养法Ｕｕ阳性２５例（２８．９４％）,人型支原体（Ｍｈ）１例（１．１４％）,Ｕｕ＋Ｍｈ５例（５．６８％）。ＰＣＲ检测Ｕｕ阳性３０例（３４．０４％）,其中男性５例ＰＣＲ检测Ｕｕ为阳性,而ＩＳＴ支原体培养法为阴性;女性３例ＰＣＲ检测Ｕｕ阴性,培养法为阳性。两种方法的Ｕｕ阳性率经统计学ｘ２检验（Ｐ＞０．０５）无显著性差别。结论：ＩＳＴ支原体培养法与ＰＣＲ检测Ｕｕ法均能适用于临床Ｕｕ的检测。ＩＳＴ支原体培养法操作简便,不需要特殊仪器;能进行支原体的种类鉴别;有参考病理阈值并可同时做药敏实验,特别适合基层医院的支原体检测工作。     

逆转录-半套式-聚合酶链反应在乙脑早期诊断中的应用

目的：为了探讨ＲＴ－ＰＣＲ用于乙脑临床诊断的可行性。方法：根据乙脑病毒Ｅ蛋白基因区设计了３条引物，采用逆转录－半套式－聚合酶链反应（ＲＴ－ｓｅｍｉｎｅｓｔｅｄ－ＰＣＲ）方法，从实验室到临床应用上，对该方法的敏感性和特异性、临床检测的可靠性进行了探索，并与ＩｇＭＥＬＩＳＡ捕捉法进行了比较。结果：本方法所用引物的敏感性高，特异性强。在此基础上，检测了４７例临床上确诊为乙脑患者的标本（特异性ＩｇＭ阳性），４３例ＲＴ－ｓｅｍ－ｉｎｅｓｔｅｄ－ＰＣＲ结果为阳性，与ＩｇＭ检测的符合率为９１％。在２０例特异性ＩｇＭ阴性、临床上怀疑为乙脑的患者中，１２例ＲＴ－ｓｅｍｉｎｅｓｔｅｄ－ＰＣＲ结果为阳性，阳性率为６０％。结论：上述结果提示，ＲＴ－ｓｅｍｉｎｅｓｔｅｄ－ＰＣＲ用于乙脑患者的临床诊断是可行的，若与ＩｇＭＥＬＩＳＡ捕捉法相结合可进一步提高阳性率。另外，对１６例核酸检测阳性的患者进行了追踪检查，结果有１４例患者恢复期标本的ＲＮＡ检测仍为阳性，提示该病毒并未随着症状的消失而立即消失。     

生殖支原体套式PCR检测研究

生殖支原体是从人体分离到的第１２种支原体，业已证明：Ｍｇ与泌尿生殖道，呼吸道以及关节腔的炎症相关。由于Ｍｇ体外培养困难，至今尚无灵敏，特异，快速的检测方法。本文报道分别以Ｍｇ粘附蛋白和１６ＳｒＲＮＡ基因为靶基因建立的二种套式ＰＣＲ检测技术。     

乳头瘤病毒16型E6,P53,RB,PCNA在宫颈癌中的表达状态及相关性

应用核酸原位杂交和免疫组织化学技术，检测人子宫颈癌中人乳头瘤病毒（ＨＰＶ）１６型Ｅ６ＯＲＦ与抑癌基因产物Ｐ５３，ＲＢ和增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）。在４４例宫颈癌石蜡切片中，原位杂交检测出ＨＰＶ１６Ｅ６ＯＲＦ阳性２７例（６１．３６％），其中免疫组化检测出Ｐ５３、ＲＢ、ＰＣＮＡ阳性分别为８例（２９．６３％），１４例（５２．８５％）、２０例（７４．０７％），而在１７例ＨＰＶ１６Ｅ６阴性标本中Ｐ５３、ＲＢ、ＰＣＮＡ阳性分别为７例（４１．１７％），９例（５２．９４％）、１２例（７０．５８％）。而在５例正常宫颈组织中未测出ＨＰＶ１６Ｅ６ＯＲＦ，ＰＣＮＡ只在宫颈组织上皮基底层细胞中表达。统计学分析表明，ＨＰＶ１６Ｅ６与宫颈癌密切相关（Ｐ＜０．０５），ＰＣＮＡ在宫颈癌与正常宫颈组织中有显著性差异（Ｐ＜０．０５）。未能发现宫颈癌组织中ＨＰＶ１６Ｅ６ＯＲＦ与Ｐ５３蛋白相关性（Ｐ＞０．０５）。     

HLA-B27 PCR辅助诊断幼年强直性脊椎炎

目的：辅助诊断幼年强直性脊椎炎。方法：用ＰＣＲ技术对２４例临床表现为类风湿关节炎少关节型患儿的ＤＮＡ进行ＨＬＡ－Ｂ２７基因分析。结果：２４份标本中７例ＰＣＲ检测Ｂ２７基因阳性,占分析的２９．２％（７／２４）。７例Ｂ２７基因阳性病例中男５例,女２例,平均年龄１０．４岁。结论：Ｂ２７检测可作为诊断或鉴别诊断幼年强直性脊椎炎的重要指标,利于疾病病鉴别和预后估计。     

反复呼吸道感染儿肺炎支原体PCR检测及免疫功能研究

本文对１５２例对复呼吸道感和肺炎支原体ＰＣＲ及免疫功能进行检测。结果咽拭子肺炎支原体ＰＣＲ阳性２５例，阳性率１６．５％。     

用套式PCR对泌尿生殖道生殖支原体感染现状的检测

了解泌尿生殖道生殖支原体的感染状况，方法：采用套式ＰＣＲ对临床正常者４６例和泌尿生殖道炎症患者１４２例，进行生殖支原体的检测。结果；１临床正常男女性泌尿生殖２道生殖支原体的检出率为４．３％。２．泌尿生殖道炎症患者的检出率为４０．８％，其中合并ＮＧ，ＣＴ或ＵＵ率占２３．２％，单纯生殖支原体感染率占１７．６％。     

上海地区肾综合征出血热尸检肾组织病毒检测

目的：研究上海地区肾综合征出血热（ＨＦＲＳ）尸检病例肾脏组织中病毒ＲＮＡ及抗原的分布及定位，方法：用核酸原位分子杂交方法和细胞免疫组化方法，检测了１７例ＨＦＲＳ尸检肾组织中病毒，结果：１７例肾组织中１５例可检测到病毒ＲＮＡ及抗原，病毒ＲＮＡ主要位于肾组织血管壁，毛细血管内皮细胞脉冲有小球毛细血管内皮细胞，病毒抗原主要分布于肾间质管内皮细胞和血管壁中，部分位于肾曲管上皮细胞，以病毒包涵体样颗粒出现。     

男性生殖系感染者精液解脲支原体感染的检测研究

目的：探讨男性生殖系感染者精液解脲支原体（ＩＵＩ）感染的检测研究。方法：取精液标本检测，以源于解脲支原体尿素酶基因序列为引物，应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术对解脲支原体ＤＮＡ进行扩增。结果：所试几种非解脲支原体培养物均阴性。解脲支原体阳性出现１条４１８ｂｐ的ＤＮＡ扩增带。３８２４例男性生殖道感染者，ＵＵ阳性检出率２９．１％。其中急性淋菌性生死道炎感染率为４８．１％，淋菌后生殖道炎感染率为３０．２％     

胎儿丢失、输卵管妊娠、盆腔炎性疾病者NUC感染研究

为了解无锡地区胎儿丢失，输卵管妊娠，盆腔炎性疾病者ＮＵＣ感染状况，我们应用ＮＧ－ＰＣＲ法，ＵＵ－ｎＰＣＲ和ＣＴ－ｎＰＣＲ法对以上三种疾病者以及对照组的宫颈脱落ＮＵＣ特异性ＤＮＡ进行了检测。结果发现：胎儿丢失，输卵管妊娠，盆腔炎性疾病者ＮＧ，ＵＵ，ＣＴ均有着较高的阳性检出率，相对危险性分析提示本文研究的三种疾病与ＮＵＣ感染相关！并发现胎儿丢失者以高ＮＵＣ总阳性率（５７．０％）和低合并感染构成比（９．     

应用PCR技术诊断新生儿隐匿型先天性弓形虫病

本文报告用ＰＣＲ的体外基因扩增技术对１１６例弓形虫抗体检测阳性产妇的新生儿脐带血作ＰＣＲ检查，结果ＰＣＲ阳性２９例，阳性率为２５％；同时用ＥＬＩＳＡ法检测脐血中弓形虫特异性抗体ＩｇＧ和ＩｇＭ，阳性率分别为２７．６％和１６．３％，提示应用ＰＣＲ技术检测脐血中弓形虫ＤＮＡ结合ＥＬＩＳＡ进行筛选，可早期诊断新生儿隐匿型先天性弓形虫病，以利于及时治疗，减少减轻隐匿型先天性弓形虫病的后发症，降低其危害。     

人型支原体套式PCR检测研究

本文报告灵敏、特异、快速的人型支原体套式ＰＣＲ检测技术，１２种标本中，Ｍｈ特异阳性，其他均阴性。在３８８例临床标本检测中，盆腔炎症阳性率６６％，早产合并肺炎７４．４％，输卵管妊娠占５７．７％。     

原位PCR和原位杂交技术在HPV基因诊断中的应用

目的：探讨原位杂交法与间接法原位ＰＣＲ法在检测尖锐湿疣组织中人乳头状瘤病毒（ＨＰＶ）感染中的应用及意义。方法：对２０例福尔马林固定的、石蜡包埋、怀疑ＨＰＶ６Ｂ／１１型感染的外阴湿疣组织进行了比较研究。结果：用原位杂交方法检测的２０例中有１３例ＨＰＶ阳性（阳性率６５％）；用间接法原位ＰＣＲ检测的２０例中有１８例ＨＰＶ阳性（阳性率９０％）。结论：用间接法原位ＰＣＲ检测外阴湿疣组织中的ＨＰＶ感染具有灵敏     

聚合酶链反应与结核抗体联合在结核性胸膜炎诊断上？…

目的 评价聚合酶链反应（ＰＣＲ）和结核抗体（ＡＴＡ）联合检测在结核性胸膜炎诊断上的意义。方法 联合应用ＰＣＲ技术和ＡＴＡ检测方法对６１例结核性胸腔积液患者及３４例非结核性胸腔积液患者胸水标本进行检测。结果 ＰＣＲ的敏感性为７０．５％、ＡＴＡ为５５．７％，ＰＣＲ与ＡＴＡ联合应用敏感性可提高为８６．８％。结论 ＰＣＲ与ＡＴＡ联合检测可进一步提高对结核性胸腔积液的诊断。     

45例人前列腺癌雄激素受体基因B~H外显子的突变研究

目的和方法：为探讨雄激素受体（ＡＲ）与前列腺癌（ＰＣ）发生发展及内分泌治疗不敏感的关系，我们首先建立了用ＰＣ的穿刺和石蜡切片组织检测ＡＲ基因突变的ＰＣＲ－ＳＳＣＰ（双链构象多态性）－双链ＤＮＡ循环测序法。并用上述方法检测了４５例国人前列腺癌组织ＡＲ基因Ｂ￣Ｈ我显子的突变。结果：在６例２的癌组织中证实有７个ＳＳＣ溘 变位片段（其中一患者有两个外显子异常）。这６例 ４例为低分化腺癌，其中２例已有远处转     

DNA复制错误阳性大肠癌的临床病理特点

目的探讨ＤＮＡ复制错误（ＲＥＲ）与大肠癌发生发展的关系。方法采用银染ＰＣＲ单链构象多态性（ｓｉｎｇｌｅｓｔｒａｎｄｃｏｎｆｏｒｍａｔｉｏｎｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍ，ＳＳＣＰ）和ＰＣＲ－变性聚丙烯酰胺凝胶（ＰＡＧ）技术检测６０例大肠癌及其相应正常组织的第２、５、１７号染色体的４个位点的微小卫星ＤＮＡ不稳定性（ｍｉｃｒｏｓａｔｅｌｉｔｅｉｎｓｔａｂｉｔｙ，ＭＳＩ），有至少２个位点的ＭＳＩ则诊断为ＲＥＲ阳性。结果６０例大肠癌中，１９例为ＲＥＲ阳性（３１７％）。结合家族史，根据Ａｍｓｔｅｒｄａｎ标准，６０例病例中有４例被诊断为遗传性非息肉病性大肠癌（ｈｅｒｅｄｉｔａｒｙｎｏｎｐｏｌｙｓｉｓｃｏｌｏｒｅｃｔａｌｃａｎｃｅｒ，ＨＮＰＣＣ）。ＲＥＲ阳性率在ＨＮＰＣＣ中为３／４例与散发性大肠癌的２８５％比差异有显著性（Ｐ＜００５）。ＲＥＲ阳性大肠癌与ＲＥＲ阴性大肠癌比较大多为分化不良型腺癌（Ｐ＜００１），多位于右半结肠（Ｐ＜００５），有家族史（Ｐ＜００５），ＤｕｃｋｅｓＡ、Ｂ期较ＤｕｃｋｅｓＣ、Ｄ期患者所占比例高（Ｐ＜０．０５）。结论ＲＥＲ阳性大肠癌与ＲＥＲ阴性大肠癌有不同的生物学特性。     

多种方法检测HBV血清标志物结果分析

ＰＣＲ技术直接检测血清中的ＨＢＶ－ＤＮＡ［１］，并与反向间接血凝法（Ｒ－ＩＨＡ）、乳胶凝集法（ＬＡＴ）和酶联免疫吸附法（ＥＬＩＳＡ）检测乙型肝炎血清标志物进行对比观察，以探讨ＰＣＲ技术在乙型肝炎病原诊断中的应用及ＨＢｖ－ＤＮＡ与乙肝五项标志物（ＨＢＶ－ｍ）之间的关系。材料与方法检测对象：１４６例肝炎患者，其中急性肝炎９１例，慢性肝炎４１例，肝炎后肝硬化１１例，重症肝炎３例，均符合１９９０年上海全国病毒性肝炎会议制订的诊断标准。方法：１４６例均用ＰＣＲ技术俭测血清中ＨＢＶ－ＤＮＡ，用Ｒ－ＩＨＡ检测…