卵巢癌细胞株COC1／DDP多药耐药逆转对中性鞘糖脂表达的调控作用

对探讨逆转卵巢癌细胞株的多药耐药性（MDR）对细胞表面中性鞘糖脂（N-GSLs）表达的调控作用,以三苯氧胺（TAM）和维拉帕米（VRP）为逆转剂,用MTT法分析了TAM、VPP的逆转效应,采用改良的Hakamori方法提取,纯化了耐药亚株COC1/DDP MDP逆转前后及亲本株COC1细胞的N-GSLs,高效薄层层析（HPTLC）分析了N-GSLs的表达。结果显示,COC1/DDP和COC1的N-GSLs表达有显著差异,COC1/DDP的CMH表达较COC1强,经TAM、VRP作用后,COC1/DDP的耐药性发生逆转,CMH表达降低。说明卵巢癌的多药耐药性与中性鞘糖脂CMH相关,CMH可能为卵巢癌MDR相关鞘糖脂抗原。     

卵巢癌细胞系顺铂化疗敏感株与耐药株中ZNF217的表达

目的 探讨锌指蛋白(ZNF)217在卵巢癌细胞系顺铂敏感株与耐药株中表达的差异.方法 选择6株卵巢癌细胞,其中A2780、SKOV-3和COC1为顺铂敏感株,A2780-DDP-R、SKOV-3-DDP-R和COC1-DDP-R为顺铂耐药株.ATP法检测细胞的相对发光单位(RLLD,计算顺铂对细胞的半效抑制浓度(IC50)和各耐药株的耐药指数(RI).免疫荧光细胞化学法观察ZNF217在细胞内的定位,RT-PCR和Western blotting法检测ZNF217 mRNA和蛋白的表达水平.结果 顺铂对A2780和A2780-DDP-R的IC50分别为18.1±2.3mg/L和47.9±3.8mg/L(P<0.01),对SKOV-3和SKOV-3-DDP-R为9.6±1.5mg/L和40.1±5.3mg/L(P<0.01),对{R3C1和COC1-DDP-R为4.8±0.9mg/L和15.3±2.8mg/L(P<0.01);A2780-DDP-R、SKOV-3-DDP-R、COC1-DDP-R对顺铂的R1分别为2.6、4.2和3.2.激光共聚焦显微镜可见,ZNF217蛋白在敏感株中主要分布于细胞质,在耐药株则主要分布于细胞核.耐药株中ZNF217 mRNA和蛋白表达均明显高于敏感株.结论 ZNF217的高表达和核转位可能与卵巢癌对顺铂耐药有关.     

黄荆子乙酸乙酯提取物增强顺铂诱导卵巢癌细胞株COC1凋亡的作用

目的观察黄荆子乙酸乙酯提取物（the acetoacetate extract of Vitexnegundoseed,Evn-50）和顺铂（cisplatin,DDP）在体外对人卵巢癌细胞株COC1凋亡的影响,探讨Evn-50提高COC1细胞株对顺铂化疗敏感性的机制。方法Evn-50,DDP以及两药联合分别处理人卵巢癌COC1细胞株,台盼蓝染色计数法检测药物对细胞生长的抑制率,并用流式细胞术、AO/CB荧光双染色法测Evn-50,DDP以及两药联合对细胞凋亡的影响。结果细胞抑制率在联用组中随Evn-50剂量的增加而增加,且明显高于同剂量单用组（P〈0.01）;细胞凋亡率在联用组中随Evn-50剂量的增加而增加,且高于同剂量单用组（P〈0.01）,流式细胞仪分析结果显示Evn-50呈浓度依赖性将COC1细胞阻滞在G2/M期,而DDP将COC1细胞阻滞在G1/S期。结论Evn-50有增强顺铂诱导卵巢癌细胞株COC1凋亡的作用,其机制可能与二者对卵巢癌细胞株COC1周期阻滞点不同有关。     

葡萄籽原花青素对卵巢癌裸鼠耐药移植瘤的抑制作用观察

目的探讨葡萄籽提取物原花青素(GSPE)对人卵巢癌顺铂耐药细胞COC1/DDP裸鼠皮下移植瘤的抑制作用及其机制。方法 30只COC1/DDP裸鼠建立皮下移植瘤模型,随机分为GSPE高浓度组、GSPE低浓度组、对照组(每组10只),分别以200mg/kgGSPE、100mg/kgGSPE及生理盐水灌胃[10ml/(kg·d)]。3周后处死裸鼠,测量各组移植瘤体积,流式细胞术(FCM)分析细胞凋亡率,RT-PCR、Western blotting检测肿瘤细胞Livin和caspase-3的mRNA、蛋白表达情况。结果 GSPE高、低浓度组皮下移植瘤体积(分别为351.23±15.52、432.51±18.36mm3)明显小于对照组(594.49±16.33mm3,P0.05)。FCM检测显示GSPE高、低浓度组肿瘤细胞凋亡率分别为66.25%、29.31%,明显高于对照组(1.03%,P0.01)。与对照组相比,GSPE能明显降低Livin的mRNA、蛋白表达水平(P0.01或P0.05),增加caspase-3的mRNA、蛋白表达水平(P0.01或P0.05)。结论 GSPE可能是通过降低Livin的表达、增强caspase-3的表达而显著抑制COC1/DDP细胞移植瘤的生长,促进COC1/DDP细胞的凋亡。     

腺病毒介导的RNA干扰ERCC1基因表达对逆转卵巢癌顺铂耐药的效果

 目的 探讨腺病毒介导的RNA干扰ERCC1基因表达逆转卵巢癌顺铂耐药的效果。方法 采用直接感染法、台盼蓝活细胞计数、MTT、Hoechst染色法及流式细胞仪检测等方法,绘制顺铂耐药卵巢癌细胞株SKOV3/DDP细胞生长曲线及倍增时间,检测SKOV3/DDP细胞感染重组病毒前后其顺铂的IC₅₀值、细胞凋亡形态及细胞各周期的分布。结果 (1)顺铂浓度与SKOV3/DDP细胞抑制率呈线性正相关,相关系数r=0.9862(P<0.05),顺铂IC₅₀为(13.93±0.37)μg/ml,耐药指数为1.79。(2)重组腺病毒感染后干扰ERCC1基因表达,SKOV3/DDP细胞对顺铂的敏感性分别增加了11.1%、16.7%、26.4%、33.5%,呈剂量依懒性(r=0.9716,P<0.05),耐药指数降至1.19。(3)重组腺病毒联合顺铂作用后,SKOV3/DDP细胞株G₁期细胞比例增大,S期细胞比例增大,细胞凋亡率增高(P<0.05)。结论 干扰ERCC1基因表达可以通过诱导耐药肿瘤细胞SKOV3/DDP凋亡、调节细胞周期分布等途径逆转卵巢癌细胞的顺铂耐药。     

三氧化二砷逆转乳腺癌细胞株MCF-7/ADM多药耐药的研究

目的探讨三氧化二砷（As2O3）体外逆转人乳腺癌细胞多药耐药性的作用及机制。方法采用MTT法检测As2O3的细胞毒作用和处理前后耐药细胞对化疗药物的敏感性,用流式细胞仪检测细胞内阿霉素浓度,通过RT-RCR检测MDR1基因的表达。结果 As2O3在0.25mg/L以下剂量时对MCF-7和MCF-7/ADM耐药细胞株的抑制率均小于15%,半数抑制率（IC50）分别为1.01m/L和1.28mg/L,无细胞毒剂量0.2mg/L的As2O3能部分逆转MCF-7/ADM细胞对阿霉素的耐药性。同时无细胞毒剂量0.2mg/L的As2O3能使MCF-7/ADM细胞内阿霉素浓度明显增加,MDR1表达下降。结论 As2O3具有体外部分逆转人乳腺癌细胞多药耐药性的作用,可能与增加细胞内药物积累、下调MDR1表达有关。     

整合素β-1对绒毛膜癌细胞耐药的影响

目的:探讨耐药绒毛膜癌细胞粘附分子β-1整合素的表达以及其对细胞凋亡的影响,并寻找逆转耐药的途径.方法:采用人绒毛膜癌细胞株JER及耐足叶乙甙细胞株JEG,免疫组化方法检测绒癌细胞和耐药细胞β-1整合素的表达;MTT法、TUNEL法检测其对细胞凋亡的影响.结果:敏感细胞JER、耐药细胞JEG中均有β-1整合素的表达,但耐药细胞的β-1整合素表达总体水平高于敏感细胞(P<0.01);在敏感细胞及耐药细胞中加入纤维粘连蛋白FN其凋亡率与未结合FN的细胞相比有明显差异(P<0.01);在敏感细胞及耐药细胞中加入抗β-1整合素抗体阻断细胞与β-1整合素的结合,同时加入纤维粘连蛋白FN,其凋亡率与只加入FN时相比差异有显著性(P<0.01).结论:耐药绒癌细胞β-1整合素表达增加,成为耐药表型;其机制主要通过抑制细胞凋亡产生耐药;阻断其作用可以逆转肿瘤耐药.     

γ射线对白血病细胞B7分子、HLA抗原及抗原递呈能力的调节

协同刺激分子B7-1(CD80)、B7-2(CD86)及人类白细胞抗原(HLA)的缺乏是许多肿瘤逃逸免疫作用的重要机制之一.有效抗原递呈是诱导抗原特异免疫应答的始动环节及先决条件.在抗原递呈细胞(APC)向T细胞递呈抗原及激活T细胞的过程中,组织相容性复合物(MHC)分子及CD80、CD86、细胞内黏附分子-1(ICAM-1)、血管细胞黏附分子(VCAM-1)等协同刺激分子起着关键作用[1].白血病细胞表面共刺激分子、HLA分子的调节研究对了解白血病逃避免疫作用和设计白血病免疫治疗方案有重要的意义.     

整合素β-1对绒毛膜癌细胞耐药的影响

目的：探讨耐药绒毛膜癌细胞粘附分子β-1整合素的表达以及其对细胞凋亡的影响,并寻找逆转耐药的途径。方法：采用人绒毛膜癌细胞株JER及耐足叶乙甙细胞株JEG,免疫组化方法检测绒癌细胞和耐药细胞β-1整合素的表达;MTT法、TUNEL法检测其对细胞凋亡的影响。结果：敏感细胞JER、耐药细胞JEG中均有β-1整合素的表达,但耐药细胞的β-1整合素表达总体水平高于敏感细胞（P〈0．01）;在敏感细胞及耐药细胞中加入纤维粘连蛋白FN其凋亡率与未结合FN的细胞相比有明显差异（P〈0．01）;在敏感细胞及耐药细胞中加入抗β-1整合素抗体阻断细胞与β-1整合素的结合,同时加入纤维粘连蛋白FN,其凋亡率与只加入FN时相比差异有显著性（P〈0．01）。结论：耐药绒癌细胞β-1整合素表达增加,成为耐药表型;其机制主要通过抑制细胞凋亡产生耐药;阻断其作用可以逆转肿瘤耐药。     

顺铂体外诱导的人肝癌耐药细胞株(QGY/DDP)的建立

目的 建立顺铂(DDP)诱导的人肝癌耐药细胞株(QGY/DDP),研究其生物学特性和耐药机制.方法 采用间歇诱导法,逐步递增DDP浓度,获得耐药细胞株QGY/DDP;MTT法测定药物敏感性;细胞计数法计算倍增时间,流式细胞术检测细胞周期;原子吸收光谱法测定细胞内铂离子蓄积量,流式细胞仪测定P-糖蛋白(P-gp)和谷胱甘肽S-转移酶-π(GST-π)的表达水平.结果 成功建立了顺铂诱导的人肝癌耐药细胞株QGY/DDP,耐药指数为10.81,与5-氟尿嘧啶、长春新碱等抗癌药有明显的交叉耐药;与QGY细胞相比,QGY/DDP细胞增殖减慢、倍增时间延长,G0/G1期细胞增多、S期与G2/M期细胞减少,细胞内Pt含量降低,GST-π的表达升高,而P-gp无明显变化.结论 QGY/DDP细胞具有耐药表型及耐药细胞的生物学特性;其耐药机制与细胞内Pt含量降低和GST-π过表达有关,而与P-gp无关.     

补体受体1型的结构功能及sCR1基因克隆表达的策略

补体受体1型（Complement receptor type 1,CR1）具有外源性及内源性活性,既可灭活组装于非自身细胞膜上的C3/C5转化酶,也可灭活自身细胞膜上形成的C3/C5转化酶。CR1是唯一既对经典,替代及植物凝集素（MBL）3个补体激活途径的,对C3/C5转化酶拥有衰变加速活性,又有辅助1因子裂解C3b和C4b作用的补体调节蛋白。对补体分子的过度活化具有抑制和调节作用,在防治补体介导的缺血再灌注损伤以及异种器官移植超急性排斥反应等疾病具有广阔的应用前景。本文主要综述CR1的结构功能及生物学活性,sCR1基因的克隆与表达及在创伤、缺血再灌注损伤中的应用研究现状。     

闭合性喉气管断裂伤的诊断与治疗

目的 提高对闭合性喉气管断裂伤的诊治水平.方法 报告38例闭合性喉气管断裂伤病例的临床资料,其中急性外伤16例,陈旧性外伤22例.对临床易发生的问题进行分析.结果 38例中16例急性喉外伤在24～48小时之间行手术治疗,22例陈旧性喉外伤因其它原因在32～129天后行手术治疗.35例手术成功拔管,3例因喉气管狭窄手术失败不能拔管,均为陈旧期手术患者.结论 对于急性闭合性喉气管断裂伤应根据其病情轻重程度进行早期处理,尽快恢复喉和气管通气功能,预防后遗症及并发症的发生,提高治愈率.     

快餐消费者的消费行为心理及对营养的认知调查

 目的 调查分析快餐消费者对快餐的营养认知、消费行为和消费心理情况,引导消费者正确处理快餐与日常正餐的关系。方法 采用随机抽样的方法,选择北京地区中、西式快餐各3个品牌,每个品牌选择4家分店,采用入店访问式现场调查方法,数据处理采用频数分析法。结果 共调查1722名,问卷合格率98.6%,选择中西式快餐的人群多为20～39岁者(68%),大多数消费者因为“口味喜欢”(66.4%)而选择快餐,且优选“优惠套餐”(48.2%),为了“省事方便”(64.3%)。消费快餐的频率多数是每月就餐1～2次(35.1%),多数优选“西式快餐店的中式食品”(60.3%),对中西式快餐店中的健康宣传语 “偶尔看看”(55.9%),但多数认为起到了“警示和营养宣教的作用”(64.1%)。大多数消费者认为,媒体对西式快餐的报道未影响他们对西式快餐的正常消费(44.9%);但中式快餐的负面报道却影响了消费者的正常消费(43.9%),理由多数是“影响健康”(37.9%)。快餐消费人群中体型正常者居多,但40岁以上者超重百分比大于20～39岁者。结论 中西式快餐消费人群为20～39岁者,消费频率不高,多数因为“口味喜欢”而选择中式或西式快餐,基本不存在对中式或西式快餐食品安全误解的问题,对快餐店的营养健康宣传语持赞同态度,但如何处理快餐与正常餐的搭配问题,存在误区。     

MRI of the foot and ankle: prevalence and distribution of occult and palpable ganglia

The purpose of this study was to evaluate the prevalence and anatomic distribution of occult and palpable ganglia of the foot and ankle as seen by MRI. Within a 7-year period MRI of the ankle was performed on 2813 patients, and MRI of the foot on 2277 patients using a 1.5T magnet. In all, 167 ganglia in 155 patients were detected. MR images of these patients were reviewed retrospectively by two observers with regard to prevalence, imaging characteristics, and exact anatomic location of ganglia. Clinical findings and (when available) surgical reports were also reviewed. One hundred fifty-seven ganglia in 145 patients were present on MR images of the ankle, and 10 ganglia in 10 patients on MR images of the foot, resulting in a prevalence of 5.6% (157/2813) in the ankle, and a prevalence of 0.4% (10/2277) in the foot. The most common location was the tarsal sinus or tarsal canal (57/167 ganglia [34.1%]). However, only four of these (7%) were palpable as a soft-tissue mass. The second most common location was around the Lisfranc joint (23/167 [13.8%]), of which 11/23 [47.8%] were clinically palpable. Palpable ganglia were statistically larger in size than occult ganglia measured in any of three diameters (P = 0.01-0.002). In addition, ganglia of the foot and ankle represented 42% of all clinically suspected soft-tissue masses. Ganglia in the foot and ankle are an infrequent finding on routine MRI of the foot and ankle. When they occur, these ganglia are most frequently located in the tarsal sinus and tarsal canal, where they are occult to clinical palpation. If ganglia are clinically palpable, they are most commonly located around the Lisfranc joint. In addition, palpable ganglia are larger than occult ganglia.     

骨内腱鞘囊肿的发病机制及临床和影像学表现研究

目的：探讨骨内腱鞘囊肿的发病机制、临床特点及影像学表现,提高对本病的认识及术前诊断与鉴别诊断能力。方法：回顾性分析经手术病理证实的28例骨内腱鞘囊肿的临床及影像学资料;28例均行x线平片、CT检查,其中16例行MRI检查。结果：28例均为单发病变,共28个病灶,其中股骨头6个,胫骨近端6个,距骨滑车6个．胫骨远端3个,腕月骨3个．股骨远端、髋臼、肱骨近端和腕舟骨各1个。病灶均位于骨内邻近关节面,病灶大小介于0．8cm×1．2cm～2．5cm×2．9cm之间。单房型25例．多房型3例。28个病灶X线平片和CT表现为圆形、类圆形或不规则形囊样低密度区,边缘清晰,均有薄层完整硬化边．相邻关节间隙无明显改变。16个病灶MRIT,wI表现为低到中等信号,TzwI表现为高信号。多房型病灶内有粗细不等的骨性间隔,MRI表现为长T-短T。信号。穿透型15例,表现为病灶通过邻关节面裂隙与关节腔相通或病灶与关节旁软组织腱鞘囊肿相连;特发型13例,表现为骨内单一病灶,骨外结构正常。结论：骨内腱鞘囊肿有其特殊发病部位,影像学表现典型,结合发病年龄和临床症状,可以作出正确的术前诊断。     

Imaging and management of head and neck paragangliomas

Paragangliomas of the head and neck are highly vascular lesions originating from paraganglionic tissue located at the carotid bifurcation (carotid body tumors), along the vagus nerve (vagal paragangliomas), and in the jugular fossa and tympanic cavity (jugulotympanic paragangliomas). Diagnostic imaging can be considered in two clinical situations: (1) patients who present with clinical symptoms suggestive of a paraganglioma, and (2) individuals from families with hereditary paragangliomas. It is not only necessary to detect and characterize the lesion, but also to study the presence of multiplicity. For these purposes, MR imaging, and especially 3D TOF MRA, is the modality of choice. CT scanning is especially useful to show destruction of the temporal bone. Angiography in combination with embolization will mainly be used prior to surgical resection, but can also be used for diagnostic purposes when the diagnosis is not yet clear. Many parameters play a role in the decision to treat of which multifocality and impairment of cranial nerves are the most important. The primary therapeutic option for paragangliomas is complete excision of tumor with preservation of vital neurovascular structures. Resection however, should be balanced against a more conservative wait and scan policy or palliative treatments such as radiotherapy.     

Possibilities and limitations of radiology--CT and MRT in cases of tumors of the uterus and ovary

The author describes the present possibilities of computed tomography (CT) and of magnetic resonance (MR) tomography. MR is superior to CT in the visualisation of carcinomas of the cervix and endometrium, especially in the initial stages, whereas in the diagnosis of the spread of tumours (especially the advanced ones) CT yields results similar to those of MR. In carcinoma of the ovary, however, MR has so far not proved to be definitely superior to CT despite the multiplanar visualisation possibilities it offers. It is in fact inferior to CT especially in clarifying the extent of extrapelvic spread. In posttherapeutic diagnostics MR explores new avenues in respect of delineation between scar and recurrence, as initial investigations have shown.     

气管支气管破裂的诊断和处理

目的 评价早、晚期气管、支气管断裂的诊断、治疗特点与动脉血气改变。方法 分析34例气管、支气管破裂的病裂,包括气管重建2例、修补2例及保守治疗3例,支气管重建19例,全肺切除6例。术前和术后2周进行动脉血气分析。结果 29例经手术治疗后痊愈,4例保守治愈,1例拒绝手术。结论 诊断依据胸部外伤史、胸部X线检查和纤维支气管镜检查,治疗采取气管、支气管重建术。重建术后出现支气管吻合口狭窄者经再次手术治疗效果仍满意。动脉血气分析显示,术后2周多数患者PaO2和SaO2可恢复到正常水平。