NY-ESO-1致敏树突状细胞诱导的CTL对肝癌细胞株的特异性杀伤作用

目的:探讨肿瘤睾丸抗原NY-ESO-1(New York-esophageal-1)致敏树突状细胞体外诱导特异性CTL对肝癌细胞株的杀伤作用.方法:重组质粒pGEX-ESO1经原核诱导表达并纯化GST-ESO1融合蛋白肽.重组人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(rhGM-CSF)和白细胞介素4(rhIL-4)诱导培养人外周血来源的树突状细胞(dendritic cells, DCs),经GST-ESO1融合蛋白肽致敏后诱导特异性CTL增殖.以此CTL为效应细胞,分别以NY-ESO-1阳性表达的肝癌细胞株HepG2和不表达NY-ESO-1的肝癌细胞株H2P为靶细胞,MTT法检测CTL对肝癌细胞株的杀伤作用.结果:重组质粒pGEX-ESO1经IPTG诱导,在大肠杆菌中表达相对分子质量约36 000的GST-ESO1融合蛋白肽,纯化后的质量浓度为50 μg/ml;经rhGM-CSF和rhIL-4联合诱导成功培养人外周血DCs,其表型分子HLA-DR为91.4%、CD86为70.5%、CD83为71.2%、CD80为55.3%.NY-ESO-1致敏的DCs能明显诱导CTL增殖,此CTL对肝癌细胞株HepG2的杀伤率显著高于GST刺激组、未致敏DC组和无DC刺激组(均P<0.05),效靶比为50 ∶1时杀伤效应达到最高峰[(53.23±3.78)%,P<0.01];相同条件下CTL对H2P细胞无特异性杀伤作用.结论: NY-ESO-1抗原致敏的DCs在体外可诱导同种CTL产生和增殖,后者对NY-ESO-1阳性肝癌细胞株具有特异性杀伤效应,该方法为肝癌免疫治疗提供了一条新思路.     

肝癌细胞抗原致敏树突状细胞诱导的体外抗肿瘤作用

目的　探讨原发性肝癌患者外周血树突状细胞 (DC)经自体肝癌细胞抗原致敏后诱导的体外抗肿瘤作用。方法　对肝癌患者外周血采用密度梯度离心法分离 ,获得DC前体细胞 ,用重组人粒细胞 巨噬细胞集落刺激因子 (rhGM CSF)和重组人白细胞介素 4(rhIL 4)联合培养 ,诱导扩增DC。制备自体肝癌细胞抗原 ,体外脉冲DC ,检测DC诱导自体T细胞增殖能力及细胞毒性T细胞 (CTL )在体外对自体肝癌细胞的杀伤活性 ,并检测肿瘤抗原致敏DC分泌的IL 12水平。结果　经自体肝癌细胞抗原致敏的DC能分泌IL 12和诱导较强的自体T细胞增殖 ,且能诱导特异性CTL ,该CTL对自体肝癌细胞具有很强的杀伤活性 ,杀伤率显著高于DC、未经肝癌细胞抗原致敏的DC激活的CTL及T淋巴细胞的杀伤率 ,而对CT 2 6细胞、BEL 740 2细胞无明显的杀伤作用。结论　肝癌患者外周血DC经自体肝癌细胞抗原致敏后能诱导高效而特异的抗肝癌免疫 ,其机制可能与增强T细胞应答和诱导机体产生肿瘤特异CTL从而发挥特异性的抗肿瘤作用有关。     

IL-18基因增强肿瘤抗原致敏DC诱导的CTL特异性杀伤肝癌细胞

目的:探讨腺病毒介导的白细胞介素18(IL18）基因转染能否使肿瘤抗原冲击的树突状细胞(dentritic cell,DC) 在体外诱导出更强的抗肝癌免疫反应。方法：携IL18 的重组腺病毒载体感染经肝癌细胞株HepG2冻融抗原致敏的DC(AdIL18HepG2/DC), FACS分析AdIL18HepG2/DC表面分子的表达, ELISA法检测IL18的分泌水平, 3HTdR掺入法检测T淋巴细胞增殖能力, MTT法检测细胞毒性T 淋巴细胞杀伤效应。结果： AdIL18HepG2/DC较未转染DC能高水平地表达CD1a、CD11c、CD80、CD86以及HLADR;较未经IL18转染的DC分泌较高水平的IL18。AdIL18HepG2/DC 能非常有效地刺激自体T 细胞增殖(CPM 值为228 018±1 079),其刺激强度显著强于AdIL18DC、HepG2/DC、AdlzcZ/DC及DC（均P＜0.05）。当靶细胞为HepG2时,AdIL18HepG2/DC诱导的CTL杀伤活性显著高于其他各组（均P＜0.05）,并且其杀伤能力与效应细胞数量成正比。结论： IL18 基因转染且肝癌抗原致敏的DC可以显著增强DC的特异性抗肝癌效应。     

负载肝癌抗原的树突状细胞瘤苗诱导的抗肿瘤作用

目的 探讨原发性肝癌患者外周血树突状细胞（DC）体外经自体肝癌细胞抗原致敏后诱导的抗肿瘤作用。方法肝癌患者外周血经梯度密度离心法分离，获得DC前体细胞，用重组人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子（rhGM—CSP）和重组人白细胞介素-4（rhIL-4）联合培养，诱导扩增DC。制备自体肝癌细胞抗原，体外脉冲DC，检测DC诱导自体T细胞增殖能力及细胞毒性T细胞（CTL）在体外对自体肝癌细胞的杀伤活性，并检测肿瘤抗原致敏DC分泌的IL-12水平。结果经自体肝癌细胞抗原致敏的DC能分泌IL-12和诱导较强的自体T细胞增殖，且能诱导特异性CTL，该CTL对自体肝癌细胞具有很强的杀伤活性，杀伤率明显高于DC、未经肝癌细胞抗原致敏的DC激活的CTL及T淋巴细胞的杀伤率，而对3LLLEWIS肺癌细胞、H22肝癌细胞则无明显的．杀伤作用。结论肝癌患者外周血DC经自体肝癌细胞抗原致敏后能诱导高效而特异的抗肝癌免疫，其机制可能与增强T细胞应答和诱导机体产生肿瘤特异CTL而发挥特异性的抗肿瘤作用有关。     

流感疫苗促进髓系白血病骨髓细胞来源树突状细胞的功能

目的: 研究流感疫苗对髓系白血病骨髓源性树突状细胞（dendritic cells,DCs）功能的影响及其机制。方法：分离髓系白血病患者\[急性髓细胞白血病(acute myeloid leukemia, AML)19例, 慢性髓细胞白血病（chronic myeloid leukemia,CML) 8例\]骨髓单个核细胞（mononuclear cell,MNC）,用GMCSF和IL4诱导7 d,获得未成熟白血病DCs,然后加入全病毒灭活流感疫苗（whole inactivated influenza vaccine, WIV）、裂解病毒流感疫苗（split influenza vaccine,SIV）或TNFα继续培养24 h。R显带法分析DCs染色体核型,流式细胞仪检测DCs表型,ELISA法测定DCs培养上清IL12的水平,CCK8法检测DCs诱导的CTL对自体白血病细胞的细胞毒作用。结果：19例AML患者中的15例及8例CML患者的MNC全部成功诱导出DCs。与TNFα刺激的白血病DCs相比,流感疫苗刺激的白血病DCs表面分子（CD80、CD83、CD86、HLADR）表达明显上调（P<005）,培养上清中IL12的分泌水平明显增加（P<0.05）,其诱导的CTL可显著杀伤自体白血病细胞（P<0.05）;WIV刺激的DCs在表型、IL12分泌水平及细胞毒作用方面均较SIV刺激的DCs显著增高（P<0.05）。结论： 流感疫苗促进髓系白血病源DCs表型成熟及IL12的分泌,增强其诱导的CTL对自体白血病细胞的杀伤作用。     

紫杉醇联合顺铂诱导的凋亡卵巢癌细胞的免疫原性

目的: 探讨紫杉醇联合顺铂诱导凋亡的卵巢癌细胞被DCs交叉提呈后能否促进免疫应答。方法：常规贴壁法刺激正常人外周血单核细胞分化诱导为DCs,6 d后将DCs和紫杉醇联合顺铂体外诱导的凋亡人卵巢癌细胞HO8910共同培养（凋亡组）,并以冻融细胞共培养DCs组(冻融组)或单独DCs组(空白组)作对照,以激光共聚焦扫描和流式细胞仪检测不同培养组DCs的分化和成熟程度。分别将各组成熟DCs与同一来源的磁珠分选的CD8+T细胞共培养, 3HTdR掺入法检测其增殖能力;LDH释放反应检测CTL对肿瘤细胞的杀伤能力;同时应用ELISPOT图像分析仪检测致敏后CD8+T细胞INFγ的分泌能力。结果：(1)紫杉醇联合顺铂诱导的凋亡卵巢癌细胞可被DCs有效吞噬,并促进DCs的成熟及其抗原提呈作用;(2) 3HTdR检测显示凋亡肿瘤细胞能诱导CD8+T细胞增殖（P<0.05）;(3)LDH释放实验与ELISPOT图像分析均证明凋亡肿瘤细胞诱导的CTL杀伤活性显著强于冻融组和空白组细胞（P<0.01）。结论：紫杉醇联合顺铂诱导的凋亡卵巢癌细胞具有较强的免疫原性,可促进DCs分化和成熟,进一步促进CD8+T细胞增殖、分泌与杀伤功能。     

穿膜肽介导的NY-ESO-1155-163诱导CTL对黑素瘤A-375细胞的杀伤活性

目的：探讨穿膜肽（cell penetrating peptide, CPP）Tat49-57携带NY-ESO-1155-163抗原肽致敏DC后诱导获得抗原特异性细胞毒性T淋巴细胞（cytotoxic lymphocyte, CTL),并体外检测其对黑素瘤细胞株A-375的杀伤效果。 方法：采集健康志愿者外周血50 ml,用淋巴细胞分离液分离外周血单个核细胞,经细胞因子诱导,获得DC和T淋巴细胞。实验组用Tat49-57-NY-ESO-1155-163致敏DC,待DC成熟后与T淋巴细胞混合诱导产生CTL,并设PBS组和NY-ESO-1155-163组作为对照。流式细胞术检测致敏前后DC的表型,乳酸脱氢酶（LDH）释放法检测抗原肽疫苗致敏DC后诱导的CTL对黑素瘤细胞株A-375的体外杀伤活性,同时与对人肺癌A549细胞株、人白血病K562细胞的杀伤作用进行比较。结果：Tat显著提升NY-ESO-1155-163进入DC的穿膜能力。与NY-ESO-1155-163致敏的DC相比,Tat49-57-NY-ESO-1155-163致敏后DC的CD80/CD86\[(54.9 ±3.3 )% vs (43.8±5.7)%,P<0.05\]和CD40\[(42.1±1.9)% vs (23.7±2.8)%,P<0.05\]的表达率显著升高。Tat49-57-NY-ESO-1155-163刺激DC后诱导培养的T细胞亚群主要以MHC-Ⅰ类分子介导的CD3+CD8+细胞为主。Tat49-57-NY-ESO-1155-163组CTL对A-375细胞的杀伤能力显著高于NY-ESO-1155-163组,且随着效靶比的增加,杀伤活性逐渐增强（P<0.05）。A-375细胞高表达NY-ESO-1,Tat49-57-NY-ESO-1155-163组CTL对A-375细胞具有特异性杀伤作用,杀伤作用显著强于A549和K562细胞（均P<0.05）。结论：Tat49-57可以增强NY-ESO-1155-163抗原多肽的免疫原性,Tat49-57-NY-ESO-1155-163多肽致敏DC能有效诱导CTL抗黑素瘤细胞A-375的特异性免疫应答。     

GPC3基因转染的树突状细胞对人肝癌HepG2细胞杀伤作用的观察

目的:以GPC3基因转染人外周血单个核细胞来源的树突状细胞(DCs),诱导CTL产生特异性抗肝癌免疫.方法:从HLA-A2正常健康成人外周血分离单个核细胞,经GM-CSF和IL-4诱导产生DCs;通过脂质体转染法将携带人GPC3基因的质粒pEF-hGPC3转染DCs,蛋白质印迹法检测磷脂酰肌醇蛋白聚糖-3表达,流式细胞仪检测DCs表型的变化;MTT法检测DC诱导CTL对人肝癌细胞HepG2的特异性杀伤.结果:经细胞因子诱导产生了具有典型形态学的DCs,经肿瘤坏死因子-α(TNF-α)刺激成熟后可高表达CD80、CD86及CD83,而转染GPC3基因对协同刺激因子在DCs中的表达的影响并不显著.转染GPC3基因后,DCs可促进CTL特异性杀伤HepG2细胞,在不同效靶比的杀伤率:100∶1为(38.90±0.95)%,50∶1为(30.83±1.24)%,10∶1为(20.84±0.65)%,明显高于空载体组和对照组,P＜0.05.结论:GPC3基因转染人外周血单个核细胞来源的DCs可诱导和促进CTL特异性杀伤肝癌细胞HepG2作用,为治疗肝癌提供了新的免疫靶点.     

修饰的肿瘤抗原肽CEA-610D疫苗的体外抗肿瘤作用

目的: 评价修饰的CEA610D抗原肽疫苗体外抗肿瘤免疫的有效性,为其临床应用提供依据。方法： 多肽固相合成法合成HLAA2 CEA修饰肽(CEA610D)、HLAA2天然肽CEA605613（天然肽）和HLAA2无关肽MAGE3（无关肽）,采用同种异体混合淋巴细胞与肽共孵育的方法,诱导肽特异性细胞毒性T淋巴细胞(CTL),利用MTT法检测CTL的增殖和杀伤活性;流式细胞术观察细胞表型;RTPCR检测细胞穿孔素的表达;ELISA法检测CTL上清中IFNγ的水平。结果：CEA610D疫苗产生肽特异性CTL的能力最强（P<0.05）,其CD8+T细胞数也高于天然肽组和无关肽组;在效靶比为40〖DK〗∶1时,CEA610D和天然肽所诱导的CTL对CEA+HLAA2限制性人结肠癌细胞T84的杀伤活性可达(56.7±3.73)%和(51.2±1.86)%,而3种肽特异性CTL细胞对CEA+HLAA2人结肠癌lovo细胞杀伤活性维持在本底水平;CEA610D组的CTL所释放的杀伤相关介质穿孔素和上清中IFNγ的水平也显著高于其余两组（P<0.01）。结论：与天然肽相比,CEA610D疫苗可打破自身表位的免疫耐受,在体外抗肿瘤免疫中更具优势。     

WT1致敏树突状细胞激活CTLs对HL60细胞作用的研究

目的研究分别负载WT1多肽抗原及HL60细胞冻融抗原的树突状细胞(DCs)产生的特异性细胞毒性T淋巴细胞(CTLs)对HL60细胞的杀伤效应。方法联合应用rhGM-CSF、rhIL-4、rhTNF-α及rh-sCD40L等细胞因子,诱导扩增自健康人外周血获取的单核细胞,培养出DCs,分别用WT1多肽抗原及冻融抗原冲击致敏,激活淋巴细胞。实验分4组WT1多肽致敏DCs为实验组A,HL60细胞冻融抗原致敏DCs为实验组B,未致敏DCs组为对照组A,单核细胞组为对照组B,LDH释放法检测CTLs对HL60细胞的杀伤作用。结果培养出具有典型特征的DCs,表达CD40达96%,CD80达77%,CD1α达69%,CD86达97%,体外能诱导强烈的同种异体混合淋巴结胞增殖反应。在效靶比为20∶1时,WT1多肽致敏DCs组时HL60细胞杀伤率为89.1%,冻融抗原负载DCs组为90.6%,未致敏DCs组为32.8%,单核细胞组为26.1%。以下多肽或冻融抗原负载DCs与对照组相比显示更强的杀伤效应,P<0.01。结论WT1多肽抗原及HL60细胞冻融抗原冲击致敏DCs均能有效诱导T细胞抗白血病作用,为临床研制DCs疫苗提供实验依据。     

5-Aza-CdR诱导肿瘤细胞NY-ESO-1抗原的表达

目的：探讨甲基化抑制剂5-氮杂-2′-脱氧胞苷（5-Aza-2′-deoxycytidine, 5-Aza-CdR）对肿瘤细胞中NY-ESO-1抗原表达的诱导作用。方法：常规培养人胃癌细胞株SGC-7901、人肝癌细胞株H2P和MHCC97-H、人结肠癌细胞株HT-29和LoVo及人脑胶质瘤细胞株U251,RT-PCR和免疫细胞化学法检测5-Aza-CdR作用前后肿瘤细胞中NY-ESO-1 mRNA和蛋白的表达。结果：RT-PCR与免疫细胞化学检测仅见胃癌SGC-7901细胞阳性表达NY-ESO-1,其余5株肿瘤细胞不表达NY-ESO-1。NY-ESO-1阴性的肝癌细胞株H2P、结肠癌细胞株LoVo及脑胶质瘤细胞株U251经5-Aza-CdR（终浓度分别为1、5和10 μmol/L）处理6 d后,细胞形态和生长速度均无明显改变,而NY-ESO-1 mRNA和蛋白均被诱导为阳性表达,并随5-Aza-CdR浓度增加而阳性表达逐渐增强。结论：5-Aza-CdR能诱导肝癌、结肠癌、脑胶质瘤等肿瘤细胞中NY-ESO-1抗原的表达,为肿瘤免疫治疗提供了一条新思路。     

Antibody response against NY-ESO-1 in CHP-NY-ESO-1 vaccinated patients

NY-ESO-1 specific humoral responses are frequently observed in patients with various types of NY-ESO-1 antigen expressing tumors. In a large proportion of NY-ESO-1 antibody-positive patients of NY-ESO-1-specific CD8 T-cells can also be detected suggesting that monitoring of the NY-ESO-1 specific humoral immune response may be a relevant and more practical surrogate for estimating the overall immune response against NY-ESO-1 in clinical vaccine studies. We have immunized 9 cancer patients with full length NY-ESO-1 protein formulated with cholesterol-bearing hydrophobized pullulan (CHP-NY-ESO-1) and investigated the humoral immune responses against NY-ESO-1. Seven patients were NY-ESO-1 antibody-negative and 2 patients were positive prior to vaccination. Vaccination with CHP-NY-ESO-1 resulted in the induction or increase of NY-ESO-1 antibody responses in all 9 patients immunized. Epitope analysis revealed 5 regions in the NY-ESO-1 protein molecule that were recognized by antibodies induced after vaccination. The 5 regions were also recognized by antibodies present in nonvaccinated, NY-ESO-1 antibody-positive cancer patients. A peptide spanning amino acids 91-108 was recognized in 6 out of 9 vaccinated patients and in 8 out of 9 nonvaccinated, sero-positive patients, being the most dominant antigenic epitope in NY-ESO-1 for antibody recognition in cancer patients. In conclusion, we showed that CHP-NY-ESO-1 protein vaccination had a potent activity for inducing humoral immune responses against NY-ESO-1 antigen in cancer patients. The antigenic epitopes recognized by antibodies in the vaccinated patients were similar to those recognized in cancer patients with spontaneous humoral immunity against NY-ESO-1.     

NY-ESO-1与MAGE-A1在乳腺癌组织中的表达及意义

目的探讨NY-ESO-1与MAGE-A1在乳腺癌组织中的表达及意义。方法  健康对照者乳腺组织20例,不同病理类型及分级的病例90例,标本进行免疫组织化学SP法染色;采用Tanaka改良定量记分法测阳性率。结果  NY-ESO-1与MAGE-A1在正常乳腺组织中不表达;乳腺癌组织中NY-ESO-1与MAGE-A1阳性表达率分别为37.78%和23.33%;阳性表达与临床病理各参数不具有相关性(P>0.05)。结论  NY-ESO-1和MAGE-A1在乳腺癌组织中呈高特异性表达,对乳腺癌的早期诊断有一定的临床意义。     

NY-ESO-1 expression and its serum immunoreactivity in esophageal cancer

Purpose NY-ESO-1, a member of the cancer/testis antigen (CTA) family, elicits humoral and cellular immune responses in patients with advanced cancer. Unresectable or metastatic esophageal carcinoma patients do not benefit from the present multimodality treatment regimens in terms of survival. The objectives of this study were to analyze the antibody response to NY-ESO-1 antigen in patients with esophageal cancer and to determine the potential of NY-ESO-1 for use in tumor-specific immunotherapy.Methods Serum from 69 patients with esophageal cancer was investigated for antibody production against NY-ESO-1 by Western blot analysis. Also analyzed by immunohistochemistry were 56 tissue samples from these patients for NY-ESO-1 protein expression.Results NY-ESO-1 protein expression was found in 18 of 56 (32%) esophageal carcinomas. Serum immunoreactivity specific for NY-ESO-1 was found in 9 patients (13%) of whom 8 were in the advanced stage (stages III and IV). There was no relationship between clinicopathologic features and serum immunoreactivity for NY-ESO-1. NY-ESO-1 protein expression was detected in three of five antibody-positive patients whose tissue was available for analysis. Survival analysis showed no significant difference between antibody-positive and antibody-negative patient groups.Conclusions A humoral immune response to NY-ESO-1 antigen was established in patients with advanced esophageal cancer. NY-ESO-1 is a good candidate for vaccine-based immunotherapy for advanced esophageal carcinoma.     

NY-ESO-1蛋白在喉鳞状细胞癌中表达的意义

 目的　检测NY-ESO-1蛋白在喉鳞癌中的表达情况,探讨其作为喉癌免疫治疗靶标的实验依据及其与喉癌生物学行为的关系。方法　免疫组织化学PV-9000两步法检测69例喉鳞癌患者原发灶及其常规病理报告为阳性的121个颈淋巴结中NY-ESO-1的表达,同时采用Western blotting方法检测其在喉鳞癌标本的癌中心区、癌周0.5、1.0 cm及9例全喉切除术患者的喉正常黏膜组织（对照）中的表达。结果　69例喉鳞癌组织中,NY-ESO-1蛋白表达阳性率为43.48 %（30／69）,在癌中心区、癌周0.5、1.0 cm中的表达逐渐下降（P＜0.05）,NY-ESO-1在对照组喉正常黏膜组织中无表达。NY-ESO-1蛋白在不同T分级、病理分级和不同颈淋巴结转移喉癌中的表达率差异无统计学意义（P＞0.05）,颈转移淋巴结中NY-ESO-1的表达下调。结论　NY-ESO-1在喉鳞癌患者中特异性高表达,可能以某种方式参与了喉癌的发生、发展,是否能将其作为喉癌免疫治疗靶标有待深入研究。     

Identification of new NY-ESO-1 epitopes recognized by CD4+ T cells and presented by HLA-DQ B1 03011

NY-ESO-1 is one of the most immunogenic cancer antigens eliciting strong humoral and cellular immune responses in patients with NY-ESO-1-expressing malignancies. Since CD4+ T cells play a critical role in generating and maintaining antigen-specific cellular and humoral immune responses, we searched for new NY-ESO-1 epitopes presented by MHC class II molecules. CD4+ T cells of patients with NY-ESO-1-expressing cancer were presensitized with 18-mer overlapping synthetic peptides spanning the entire sequence of NY-ESO-1. Two partly overlapping NY-ESO-1 epitopes p49-66 and p55-72 were identified as targets for NY-ESO-1-specific CD4+ T cells. Peptide-specific CD4+ T-cell clones were generated by repetitive stimulation with NY-ESO-1 p49-66 and p55-72. Further experiments confirmed distinct specificities for the CD4+ T-cell clones indicating that at least 2 different CD4+ T-cell epitopes are located in the region p49-72 of the NY-ESO-1 sequence. Using a set of partially histocompatible EBV-B cell lines and MHC class II-specific antibodies, we found that both CD4+ T-cell epitopes were presented in the context of HLA-DQ B1 03011(DQ7). Natural processing and presentation of these epitopes was demonstrated by recognition of an HLA-DQ B1 03011- and NY-ESO-1-expressing lymphoma cell line and by recognition of dendritic cells (DC) exogenously loaded with NY-ESO-1 protein or infected with recombinant NY-ESO-1 adenoviral constructs. The specific production of IFN-gamma and TNF-alpha suggests that the NY-ESO-1-specific CD4+ T-cell clones belong to the Th1 subtype. The characterization of the new HLA-DQ B1 03011-restricted NY-ESO-1 peptides broadens the repertoire of epitopes that can be used to monitor NY-ESO-1-specific spontaneous and vaccine-induced T-cell responses in cancer patients.     

T cells targeting NY-ESO-1 and Melan-A are prognostic in melanoma

Antigen-specific T cells predict survival in patients with distant melanoma metastasis.     

癌-睾丸抗原NY-ESO-1在食管鳞状细胞癌中的表达及其意义

目的 检测NY-ESO-1蛋白在食管鳞癌中的表达,分析其与肿瘤临床病理参数的关系以及NY-ESO-1蛋白在晚期食管鳞癌免疫治疗中的意义.方法 选取113例中晚期食管鳞癌标本构建组织芯片,应用免疫组化EnVision二步法,检测NY-ESO-1蛋白的表达,SPSS统计软件分析所得数据.结果 109例有效标本中,有32例NY-ESO-1阳性(29.4%),阳性部位在细胞浆,10例正常食管黏膜中无-例表达NY-ESO-1蛋白.NY-ESO-1蛋白的表达主要集中在肿瘤细胞分化较好的Ⅰ级和Ⅱ级食管鳞癌,阳性率有显著性差异(P＜0.01),与肿瘤的大小,浸润深度及有无淋巴结转移无关(P＞0.05).结论 NY-ESO-1是目前已知的免疫原性最强肿瘤抗原,可诱导自发的体液免疫和细胞免疫反应,其在晚期食管鳞癌中的表达提示NY-ESO-1可作为食管癌的免疫治疗的靶点.     

食管鳞癌中癌-睾丸抗原NY-ESO-1及MAGE-1的表达

目的研究NY-ESO-1及MAGE-1蛋白在食管鳞癌中的表达，分析其与肿瘤临床病理参数的关系，为食管癌的免疫治疗提供理论依据。方法构建组织芯片并结合免疫组化的方法，检测NY-ESO-1及MAGE-1蛋白在113例食管鳞癌及10例正常食管黏膜中的表达。结果10例正常食管黏膜均不表达NY-ESO-1及MAGE-1蛋白，而其在食管鳞癌组织芯片109例有效标本中的阳性率分别为29.4%和37.4%（32/109，41/109），阳性部位均位于细胞质。其中，59例至少表达1种CT抗原，占总数的54.1%（59/109），13例同时表达2种CT抗原，占11.9%（13/109）；NY-ESO-1及MAGE-1蛋白的表达主要集中在肿瘤细胞分化较好的I级和II级食管鳞癌，阳性率有显著性差异（P〈0.01），与肿瘤的大小，浸润深度及有无淋巴结转移无关（P〉0.05）。结论NY-ESO-1及MAGE-1可作为食管癌免疫治疗的靶标之一，含有CT抗原的疫苗可用于食管癌患者的免疫治疗。